HPLC-ELSD法同时测定熊胆粉中4个胆汁酸成分含量

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)同时测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量。方法 采用Waters XSelect^?HSS T3色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，柱温40℃，流速1.0 mL/min,ELSD漂移管温度80℃，氮气流量2.0 L/min。结果 牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的线性范围分别为1.012～5.060、0.808～4.040、0.068～0.340、0.176～0.880μg，相关系数r分别为0.999 5、0.999 7、0.999 6和0.999 8；平均加样回收率(n=6)分别为98.8%、99.7%、98.9%和98.7%。精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%(n=6)。熊胆粉样品中牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的平均含量分别为(34.82±0.18)%、(27.95±0.19)%、(1.23±0.02)%和(3.77±0.06)%。结论 本方法简便、灵...     

柱前衍生RP-HPLC测定熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的:建立一种高灵敏的熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸含量的测定方法。方法:以吡啶-苯甲酰氯为柱前衍生化试剂,以RP-HPLC(UV)测定牛磺熊去氧胆酸衍生产物的含量。结果:冰浴下衍生化反应,密封,室温存放24h。色谱条件C18色谱柱,检测波长235nm;流动相:甲醇-水-四氢呋喃(90∶6∶4)为流动相;线性范围:2.8×10-6～3.6×10-6mg/L,最低检测限14ng,用于熊胆粉实际样品的分析,结果满意。结论:方法灵敏、准确,为熊胆粉中牛磺熊去氧胆酸的分析提供了一种方法。     

基于1H-NMR结合LC-MS技术分析熊胆粉及常见胆类中药中的胆酸类成分

目的 建立基于核磁共振氢谱技术（¹H-NMR）结合液质联用技术（LC-MS）的分析方法,阐明熊胆粉中胆酸类成分组成,找出熊胆粉与其他常见胆类中药中的差异性成分。方法 利用¹H-NMR非靶标分析熊胆粉及其他常见胆类中药的化学成分组,通过信号归属表征熊胆粉中胆酸类成分组成,以¹H-NMR图谱分段积分后峰面积为变量进行多元统计分析。利用LC-MS对熊胆粉及其他常见胆类中药中10个胆酸类成分（胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨熊去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、牛磺胆酸、甘氨胆酸）进行含量测定,并以含量为变量进行多元统计分析。结果 基于¹H-NMR图谱及多元统计分析发现胆酸类成分为胆类中药的主要成分,也是熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性成分。结合文献及对照品比对,从熊胆粉中初步鉴定出7个胆酸类成分。进一步结合LC-MS含量测定结果和多元统计分析验证熊胆粉与其他常见胆类中药的主要差异性胆酸类成分为熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸。结论 熊胆粉与其他常见胆类中药的胆酸类成分存在显著差异。与其他胆类中药相比,熊胆粉中熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及其牛磺型结合胆酸含量较高。¹H-NMR技术具有对化学成分组全面、快速分析的优势,可与LC-MS检测相互补充,共同应用于中药复杂体系成分分析和代谢组学的深入研究。     

HPLC检测蛇胆和人工蛇胆中结合胆汁酸的含量

目的：测定人工蛇胆中牛磺胆酸和牛碘去氧胆酸的含量。方法：采用HPLC法，色谱柱Spherisorb C18柱，甲醇－0.02mol/L磷酸缓冲液（60：40）为流动相，检测波长210nm。结果：牛磺胆酸和牛磺去氧胆酸分别为0.28672-2.8672mg/mL和0.26842-2.6842mg/m范围内有良好的线性关系。平均回收率分别为97．65％和95．815，RSD分别为0．79％和3．27％。结论：本方法简便，准确。     

HPLC测定熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的：建立熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的测定方法。方法;采用ＨＰＬＣ测定熊胆滴眼剂中牛磺熊去氧胆酸的含量,以中性氧化铝吸附黄芩甙除干扰,达到了很好的分离效果。结果：平均回收率９７．２６％,ＲＳＤ１．４９％。结论：本和法简便、快速、准确、重复性好。     

HPLC法测定胆清片中牛磺熊去氧胆酸的含量

胆清片是由熊胆粉、金钱草、茵陈、板兰根、郁金、甘草六味中药组成 ,用于急慢性胆囊炎、胆石症的治疗。为控制产品质量 ,针对君药熊胆粉中的牛磺熊去氧胆酸进行测定。实验表明ＨＬＰＣ法结果令人满意 ,灵敏度高 ,重现性好。1　实验部分1.1　仪器、试剂及样品　　Ｗａｔｅｒｓ 5 12 - 2 487液相色谱仪 ;酸度计ＰＨＳ - 3Ｃ ;牛磺熊去氧胆酸对照品 (中国药品生物制品检定所提供 ,含量 89.6 8% )1.2　色谱条件　　色谱柱ＯＤＳ18柱 (4.6ｍｍ× 15 0ｍｍ ,5 μｍ) ;流动相 :甲醇—磷酸二氢钠溶液 (0 .0 3ｍｏｌ/Ｌ) (6 0∶2 8) ｐＨ值为4.0 ;流…     

HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的:HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量;方法:采用Kromasil C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),以甲醇-水(0.1%甲酸)(60∶40)为流动相;紫外检测波长为210nm;ELSD漂移管温度105℃,雾化气体(空气)流速2.7L·min-1;结果:牛磺熊去氧胆酸在1.44～5.76μg线形关系良好,紫外检测方式回收率为97%(n=5),RSD2.3%,UV检测方式回收率为101%(n=5),RSD1.5%;结论:与HPLC/UV相比,HPLC/ELSD测定熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸成分的含量结果更准确。     

注射用熊胆粉质量标准研究

目的:建立注射用熊胆粉质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对制剂中熊胆进行定性鉴别:用HPLC法测 定制剂中牛磺熊去氧胆酸含量。结果:薄层色谱中斑点清晰,易于识别:HPLC法精密度、重现性良好,牛磺熊去氧胆酸在 2．5～16μg内均较好的线性关系,加样回收率为99．75％,RSD为0．82％。结论:该法可有效控制注射用熊胆粉质量。     

熊胆粉不同极性部位HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的 建立熊胆Fel Ursi粉不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价熊胆粉的质量评价提供参考。方法 将熊胆粉分别用醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇、乙腈依次提取,浓缩干燥,用甲醇溶解,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果 10批熊胆粉醋酸乙酯部位共有模式共标记6个共有峰,三氯甲烷部位共有模式共标记8个共有峰,丙酮部位共有模式共标记8个共有峰,乙腈部位共有模式共标记10个共有峰,乙醇部位共有模式共标记16个共有峰,5种溶剂提取物均指认了4个共有指纹峰（牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸）。综合聚类分析和主成分分析（principal component analysis,PCA）结果,发现相同产地的熊胆粉,受不同厂家加工方法不同的影响,也存在一定的质量差异。通过正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares- discriminant analysis,OPLS-DA）,发现牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、乙醇部位10号峰、乙腈部位1、2号峰可能是熊胆粉质量差异的主要标志性成分。结论 所建立的HPLC指纹图谱可以反映熊胆粉的化学成分分布,为熊胆粉的整体质量评价提供参考,并为熊胆粉谱效关系研究提供一定依据。     

HPLC法测定消痔软膏中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的:建立HPLC法测定消痔软膏中牛磺熊去氧胆酸的含量。方法:采用Shimadzu-C18柱,甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠(磷酸调节pH值4.5)(60∶40)为流动相,210 nm为检测波长。结果:测得线性范围2.26～11.3μg(r=0.9999),平均回收率为100.06%,RSD为0.698%(n=5)。结论:本法简便,准确,专属性强。     

HPLC法测定猪胆粉中的牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸

目的建立HPLC-UV法同时测定猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸的含有量。方法猪胆粉甲醇提取液采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分析;流动相乙腈-0.03 mol/L磷酸二氢钠,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长200 nm。结果牛磺猪去氧胆酸和甘氨猪去氧胆酸分别在0.087 7~4.384 9μg(r=1.000 0)、0.257 8~8.594 6μg(r=1.000 0)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率在95.0%~105.0%之间,RSD均小于3.0%。结论该方法简单、可靠,适用于猪胆粉的质量控制。     

刘寄奴、稀莶草联合牛磺熊去氧胆酸治疗病毒性淤胆型肝炎

目的观察刘寄奴配伍稀莶草联合牛磺熊去氧胆酸对病毒性淤胆型肝炎的临床疗效。方法60例病例随机分成2组,对照组采用口服牛磺熊去氧胆酸（体质量〈50Kg者,2粒／d,体质量≥50Kg者,3粒／d）治疗;治疗组加用刘寄奴配伍稀莶草,疗程3周,观察2组治疗前、后临床疗效和肝功能生化指标改善情况。结果疗程结束后治疗组肝功能生化指标下降显著,与对照组相比有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）;2组总体临床疗效比较,治疗组有效率高于对照组（P〈0．05）。结论中药刘寄奴配伍稀莶草具有清热解毒,活血化瘀的作用,联合牛磺熊去氧胆酸对病毒性淤胆型肝炎疗效良好,可能与其能够明显改善肝脏微循环有关。     

清胆化石汤配合保胆取石术治疗胆结石临床观察

目的探讨、评估清胆化石汤配合保胆取石术治疗胆囊结石的临床疗效。方法选取2014年7月到2016年1月医院收取的87例初患的胆囊结石患者,对其进行微创保胆取石术,术后五天随机分为两组,实验组(n_1=43)服用清胆化石汤,对照组(n_2=44)服用牛磺熊去氧胆酸,观察术后并发症,胆囊恢复情况以及复发率。结果术后半年与一年,实验组与对照组的腹胀,右上腹不适与胆绞痛的发生率均显著比术前低(P<0.05),实验组与对照组相比,腹胀,右上腹不适,腹泻,胆绞痛的发生率与胆囊结石复发率没有显著差别(P>0.05),但实验组胆囊排空指数比对照组高,同时胆囊壁厚比对照组低(P<0.05)。结论胆化石汤在预防胆囊结石复发方面和牛磺熊去氧胆酸疗效相当。在恢复、增强胆囊功能方面,清胆化石汤效果甚至优于牛磺熊去氧胆酸。     

动物胆汁酸在眼病中的应用进展

动物胆汁治疗眼科疾病由来已久，胆汁酸是胆汁的主要活性成分之一，其中牛磺熊去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸等胆汁酸由于其良好的亲水性和较少的细胞毒性在眼病中的研究较为广泛。本文综述了胆汁酸在眼科疾病中的应用，发现在实验室阶段，胆汁酸可通过抗炎、抗细胞凋亡、抑制内质网应激、保护光感受器等作用来治疗部分眼病，如葡萄膜炎、白内障、年龄相关性黄斑变性、视网膜色素变性、糖尿病视网膜病变等，并探索了临床应用的潜在可行性。     

双解注射液中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量的薄层扫描测定

双解注射液中熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量的薄层扫描测定杜守颖,吴清,曹春林(北京中医药大学100029)双解注射液由熊去氧胆酸粉、山羊角、黄苹、连翘、青蒿5味中药组成。临床上拟用于治疗风湿肺热为主。经主要药效学研究认为具有抗炎、解热、镇静、法痰、抗菌和免疫增强作用。其主药为熊去氧胆酸粉(含熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸),具有解痉、利胆、清热、解毒、抑菌、祛痰等作用。故确定熊去氧胆酸(UDCA)和鹅去氧胆酸(Coc,A)含量为质....     

牛黄中游离胆汁酸的薄层色谱定量

用薄层扫描法测定了牛黄中胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸的含量。样品用甲醇提取,在国产高效硅胶板上用异辛烷-乙酸丁酯-冰乙酸(4:2:1)为展开剂展开,可同时测定样品中已知的所有游离胆汁酸的含量。     

熊胆粉及其活性成分治疗神经系统疾病作用机制研究进展

熊胆粉活性成分熊去氧胆酸(ursodesxycholic acid, UDCA)、牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)在不同的神经系统疾病动物模型中具有神经保护作用。其中UDCA、TUDCA可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase, ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinasa, JNK)、p38 MAPK的磷酸化发挥抗神经炎症的作用;UDCA通过激活单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin, mTOR)和抑癌基因诱导的假定激酶蛋白1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)/RBR E3泛素蛋白连接酶(RBR E3 ubiquitin-protein ligase, ...     

薄层扫描法测定益肝康胶囊中熊去氧胆酸的含量

益肝康胶囊是由熊胆、黄芩、大黄等中药组成。熊胆中约含20％的牛磺熊去氧胆酸,是熊胆的主要成分,是表现其药理趋向性的活性成分,被水解生成牛磺酸与熊去氧胆酸,熊去氧胆酸是熊胆的特殊成分,为有效地控制产品质量,对制剂中熊去氧胆酸进行含量测定,分析方法与结果如下。     

基于UPLC-MS对牛黄解毒片中胆酸类成分定量测定及化学模式识别研究

目的 建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、7-酮基胆石酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸21种胆酸类成分含量的方法,并对不同批次的NJT进行质量评价。方法 采用Thermo Bremen Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以含0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,柱温为40℃;质谱采用加热型电喷雾离子源(HESI),在负离子平行反应监测模式下进行含量测定,采用SIGMA 14.0软件对定量结果进行化学计量学分析。结果 21种胆酸成分在线性范围内呈良好的线性关系(r2≥0.998 9)...     

胆南星中胆酸类成分含量测定及发酵前后含量比较

目的:建立胆南星样品中猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量测定方法,比较胆南星发酵前后这几种胆酸类成分的含量变化,为胆南星发酵原理、工艺规范化研究提供参考。方法:Waters C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃;流动相为乙腈-0.5%冰乙酸溶液(60∶40);检测器:奥泰2000蒸发光散射检测器;流速:1.0 mL·min~(-1);漂移管温度:105℃,气体流速:3.0 mL·min~(-1)。结果:猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸均在定量范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为99.63%、100.04%、101.4%。结论:本方法操作简单,测定结果准确,胆南星发酵后猪胆酸、猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸含量增加,可作为胆南星发酵程度及胆汁加入量的判定指标。