一种为含不规则抗体患者快速配血方法的建立

目的建立一种为含不规则抗体的患者自动化、快速、准确的配血方法。方法血站检验科常规做ABO正定型及Rh血型检测的生理盐水加入红细胞保养液,做完血型检测后将稀释板冷藏保存,从医院送检的含不规则抗体的标本中选取有代表性的标本,使用U型板、凝聚胺试剂和自动加样器智能化加样,在上述稀释板中进行交叉配血,同时使用手工试管法进行平行实验,记录并对比上述两种方法筛查总过程使用的时间,筛查出的供者标本数。结果快速微板自动配血法、试管法均能筛查出相合血源,微孔板筛查所需要的总时间较短,试剂用量也较少。结论利用常规血型检测剩下的稀释板和自动加样器,编写智能化的加样程序对接信息系统,可为含不规则抗体的患者进行快速配血,对于及时挽救患者生命具有重要意义。     

自动血型检测系统在常规血型检测中的应用

ABO正反定型和Rh(D)定型是采供血机构的常规检查项目之一,传统手工法检查繁琐且易造成人为差错。随着全自动加样系统和微板法血型检测技术在血站的应用日益普及,使得传统的手工检测血型方法更新换代为自动检测成为可能。笔者对本站采用Freedom EVO全自动加样器、Poseidon数字血型仪和梯形微板整合的一套自动血型检测系统进行ABO正反定型和Rh(D)血型筛查的应用情况进行总结,现报告如下。     

全自动加样器同时作ABO及RhD微板正定型的参数选择

微板法检测ABO、RhD血型改变了传统的手工操作,具有快速、自动化程度高等优点[1-3],但同时又存在部分缺点:加样器稀释每个标本血球浓度差异大以及弱凝集使Cut off设定值出现血型误判;预稀释板仅作为稀释血球使用,造成微板浪费以及检测时间延长;上机读板蓝色(抗-A)、脂血、溶血对620nm波长的干扰等问题。我们通过调整加样参数,重新筛选红细胞、抗血清浓度以及体积,采用平底板在血型微板观察仪上观察结果,取得较好效果,现报告如下。1材料与方法1.1检测对象本中心2006年5月—2007年5月的献血者样本62 700份。1.2仪器与试剂RSP全自动加样系…     

微量板法与试管法检测ABO血型抗体效价的比较

目的比较微量板法与试管法检测ABO血型Ig M抗体效价的差异。方法使用微柱凝集法对129例健康供者和91例造血干细胞移植患者进行ABO血型正反定型鉴定,根据反定型结果,同1标本同时经试管法与微量板法进行ABO血型Ig M抗体效价测定并进行比较。结果 220例被研究者中,162例标本需要进行抗体效价检测。抗-A/抗-B效价在不同病例群体中,2种方法检测的一致性差异不具有统计学意义(P0.05);2种方法检测造血干细胞移植患者ABO血型抗体效价、健康供者抗-A效价的差异不具有统计学意义(P0.05);微量板法测得的健康供者抗-B效价明显低于试管法(17.78±3.02 vs 19.05±2.95,P0.05)。结论全自动微量板法微量板法可广泛用于造血干细胞移植患者ABO血型Ig M抗体效价的检测,而用于健康供者抗-B效价检测时抗体效价低于试管法,必要时需要增加试管法。     

稀有血型结肠癌患者紧急抢救输血病例分析1例

目的探讨1例稀有血型结肠癌患者紧急抢救输血时因不规则抗体存在导致交叉配血困难而采用特殊情况紧急抢救输血推荐方案的可行性。方法标本首次血型检测采用全自动血型仪检测血型(微孔板法),并用试管法复查患者血型;微柱凝胶抗球蛋白法、盐水法、聚凝胺法、试管抗人球蛋白法做抗体筛查和交叉配血。结果患者血型为A型,Rh表型为ccDEE型,血清中含有抗-C和抗-e不规则抗体;经过Rh表型筛选,从O型供者中找到Rh表型为ccDEE悬浮红细胞1 U,从浙江省血液中心的A型供者中筛查到Rh表型为ccDEE悬浮红细胞3 U,输注后12 h检测血红蛋白61 g/L,提示输注有效。有效地缓解了患者的贫血症状,无输血不良反应。结论对于因不规则抗体存在导致配血困难而又需紧急输血抢救的肿瘤患者,在ABO血型同型无法满足供应时,可筛选O型Rh表型一致且交叉配血试验阴性的供者红细胞输注。     

异基因造血干细胞移植后并发自身免疫性溶血性贫血患者产生类抗体血清学检测方法及输血策略

目的探讨异基因造血干细胞移植（AHSCT）后免疫介导的自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者交叉配血不合的原因,血浆中不规则抗体筛选试验阳性时,不规则抗体鉴定的血清学检测方法的选择,处理措施及输血策略。 方法一例AHSCT后的3岁男性患儿因重度贫血为改善贫血症状需输注红细胞入住四川省人民医院。通过盐水试管法确定了患儿ABO、Rh血型后进行交叉配血试验发现患儿与多个同型供者血液不相合,考虑到患儿贫血严重,于是采用直接抗球蛋白试验来判断红细胞是否被致敏;通过盐水介质试管法、微柱抗球蛋白法和聚凝胺法进行ABO血型系统以外的不规则抗体筛选试验以确定血浆中有无不规则抗体;根据不规则抗体筛选试验结果选择聚凝胺法来确定抗体的特异性;通过盐水介质试管法、经典抗球蛋白法和聚凝胺法进行交叉配血实验,结合抗体鉴定的结果,综合分析选择合适的供者红细胞输注。 结果本例患儿ABO血型为AB型,Rh分型为CCDee,ABO血型已转变为供者血型。直接抗球蛋白试验强阳性,红细胞被抗体致敏。血浆中检出了不规则抗体,红细胞上放散下来的致敏抗体与血清中检出的不规则抗体均为类抗-Ce自身抗体。选择了避开类抗-Ce抗体的Ce抗原阴性的AB型红细胞输注后血色素升高,3 d后复查血常规Hb为79 g/L,输血有效。 结论任何类型的AHSCT后都有可能发展成AIHA,也就是血浆中可能存在某种自身抗体（类抗体）而破坏自身红细胞,若能够明确患者血清中存在的类抗体,即可避开这种抗体而筛选红细胞无相应抗原的供者,也就避免发生溶血性输血反应以安全输血。     

采用STAR加样仪进行RH.(D)抗原快速微板法检测

随着全自动加样设备的广泛使用,越来越多的基于微板反应的检测方法,如ELISA试验、微板凝集试验、微板速率法试验等已逐步由仪器加样取代手工操作[1,2].全自动加样设备在加样速度、准确性、重复性及精密度方面均优于手工操作,完全避免了因人为因素而造成的加样时差及各种偶然误差.我们采用全自动STAR加样仪结合扫描酶标仪,建立了基于96孔标准U型微板凝集试验的快速RH.(D)抗原检测方法.该方法完全克服了常规纸板法灵敏度差和试管法操作繁琐的缺点,特别适合大批量血样标本的快速RH血型筛选,介绍如下.     

采用STAR加样仪进行RHo（D）抗原快速微板法检测

随着全自动加样设备的广泛使用，越来越多的基于微板反应的检测方法，如ELISA试验、微板凝集试验、微板速率法试验等已逐步由仪器加样取代手工操作。全自动加样设备在加样速度、准确性、重复性及精密度方面均优于手工操作，完全避免了因人为因素而造成的加样时差及各种偶然误差。我们采用全自动STAR加样仪结合扫描酶标仪，建立了基于96孔标准U型微板凝集试验的快速RHo(D)抗原检测方法。该方法完全克服了常规纸板法灵敏度差和试管法操作繁琐的缺点，特别适合大批量血样标本的快速RH血型筛选，介绍如下。     

采用STAR加样仪进行RH_o(D)抗原快速微板法检测

随着全自动加样设备的广泛使用 ,越来越多的基于微板反应的检测方法 ,如 ELISA试验、微板凝集试验、微板速率法试验等已逐步由仪器加样取代手工操作 [1 ,2 ]。全自动加样设备在加样速度、准确性、重复性及精密度方面均优于手工操作 ,完全避免了因人为因素而造成的加样时差及各种偶然误差。我们采用全自动 STAR加样仪结合扫描酶标仪 ,建立了基于 96孔标准 U型微板凝集试验的快速 RHo( D)抗原检测方法。该方法完全克服了常规纸板法灵敏度差和试管法操作繁琐的缺点 ,特别适合大批量血样标本的快速 RH血型筛选 ,介绍如下。1　材料和方法1 …     

快速自动微板血源筛查法在疑难配血中的应用

目的建立一种为需要进行疑难配血的患者自动化、快速、准确的血源筛查方法。方法从医院送检的疑难配血标本中选取2个具有代表性的标本,一个标本同时含有IgG类抗-C和抗-e,另一个标本含有IgG类抗-D,使用U型板、凝聚胺溶液和自动加样器联合应用的方法在528个供血者全血标本中为上述两个标本筛查相合血源,同时使用手工试管法进行平行实验,记录并对比上述两种方法筛查总过程使用的时间,筛查出的供者标本数。结果快速微板自动血源筛查法、试管法均能筛查出相合血源,微孔板筛查所需要的总时间较短,试剂用量也较少。结论快速微板自动血源筛查法在疑难配血中筛查相合血源,具有快速、准确的效果。     

Metis-200与Xantus+Poseidon数字血型仪检测效果比较

目的比较Metis-200(深圳爱康)自动血型分析仪与Xantus双机械臂加样器联合Poseidon数字血型仪检测ABO及Rh D血型的效果。方法同时采用两种自动血型仪对本站无偿献血样本24 866份进行平行血型检测、脂血干扰试验、溶血干扰试验和对比分析。结果两种血型分析仪对ABO血型判读准确率均为100%。通过确认,Metis-200和Xantus双机械臂加样器联合Poseidon数字血型仪检出ABO亚型分别为7例、5例(P>0.05);检出不规则抗体分别为16例、9例(P>0.05)。76份不同脂血程度血样在两种仪器上抗干扰试验一次判读正确率均为100%。溶血干扰试验在Hb≤27 g/L时,对UV型微板法结果判读无明显影响,当Hb>27 g/L时对凝集端有影响,对非凝集端无影响;而当Hb≤20 g/L时,对梯形微板法试验结果无明显影响;在Hb>20 g/L时对梯形微板法凝集端无影响,对非凝集端有影响。结论 Metis-200自动血型分析仪较Xantus双机械臂加样器联合Poseidon数字血型仪检测ABO及Rh D血型判读更加准确,速度更快,效率更高,极大地提高了血型批量检测的能力。     

全自动样本处理仪在血型检测中的应用

目的建立血型正定型试验的快速自动血样分配方法,用于血站系统大批量ABO血型正定型、RhD定型试验。方法采用全自动酶联加样系统,完善仪器加样程序的编辑,使其自动完成对待检样本的稀释、血样分配及加入试剂的全过程。结果共检测48300份样本,纠正ABO初筛错误13例,查出A亚型2例,检出RhD阴性146例。用原倍试剂,试管法复检,符合率100%,其中弱D阳性样本5例。结论全自动样本处理仪操作简单、快捷,可减少工作强度,提高工作质量,仪器自动取血样条码能有效防止因工作量大而造成的错报、漏报结果。     

全自动血型检测系统在无偿献血者血液检测中的应用

目的评价全自动血型检测系统检测无偿献血者血型的准确性和可靠性。方法将全自动血型检测系统与试管法、U形微板法进行ABO正、反定型、不规则抗体、Rh(D)检测比较。结果全自动血型检测系统与试管法的符合率为100%。全自动血型检测系统比U形微板法多检出亚型2例,抗体减弱1例,不规则抗体3例,Rh(D)阴性2例。结论全自动血型检测系统检测血型有较高的可靠性和准确性,节约了试剂成本,提高了检测效率,可在血站推广使用。     

一种新型试剂红细胞保养液的制备和应用

目的　研制用于微量板法等血清学试验的一种通用的试剂红细胞保养液。方法　采用试管法、微量板法、纸片法等作红细胞血型血清学试验 ,观察所研制的新保养液配制的试剂红细胞在试验中应用效果和保存期间的变化。结果　该保养液可于 4℃保存试剂红细胞 3个月 ,它在ABO反定型试验中敏感性高、特异性强、无抗原抗体免疫反应导致的溶血和弱凝集现象。结论　该保养液所配制的红细胞贮存时间长 ,可用于微量板等方法的ABO反定型等试验 ,适合手工和自动化仪器检测     

微孔板法自动检测技术筛查 Rh 血型

目的：建立微孔板法快速筛查献血者Rh阴性血型的方法。方法（1）用A T-PL U S2全自动加样系统,在96孔微孔板上按编制好的程序进行加样;（2）通过离心、孵育、悬浮、静止等过程,完成微孔板凝集试验,利用自动扫描技术判读结果,凝集孔 A值超过阳性下限判定为Rh血型D抗原阳性,非凝集孔 A值未超过阴性上限判定为Rh血型D抗原阴性;（3）通过优化选择最适抗-D血清浓度、受检红细胞浓度及孵育、悬浮、判读等最佳条件。结果抗-D血清1∶4稀释为最适工作浓度;受检红细胞最适浓度为4％;孵育条件为8 min ,400 r/min ,3 accel ;悬浮最适条件：2 min ,1000 r/min ,2accel ;阳性下限 A值为0．75,阴性上限 A值为0．35。结论实现了大批量筛选Rh血型的自动化及标准化。     

全自动仪器复检无偿献血者血型参数选择

目的探讨利用加样器进行血型自动化检测。方法采用对实验参数进行选择优化,然后经过离心、孵育、振荡后静置判断。结果试管Z轴最低高度1600 mm;微板上加抗-A、抗-B时Z轴位置高度965 mm。微板每孔加235μl生理盐水,红细胞为5μl,抗-A和抗-B加样量均为25μl。生理盐水的吸取液速度调整为110μl/s,分配速度调整为400μl/s。从12410人份中共检出RhD阴性25份,1份弱D;纠正ABO初筛错定3例,2例正反定不符。结论本实验参数优化合理,实现了血型自动化检测。     

罕见复合抗体抗-A_1Le~b的鉴定及其特征分析——附1例报告

目的探讨罕见复合抗体抗-A1Leb的鉴定方法并分析其特征。方法首先用试管法鉴定患者的ABO及Lewis血型,并做抗体筛选及鉴定;再将患者血清和多个随机献血者红细胞反应,初步判断抗体的特性;最后将患者血清与已知ABO亚型及Lewis血型的献血者红细胞反应,鉴定抗体的特异性。结果患者血型为A1,Le(a-b-);其血清与所有O型红细胞及Leb抗原阴性的红细胞均不反应,仅与Le(b+)的A1型红细胞反应,鉴定为抗-A1Leb。结论当遇到仅与部分A或B型红细胞反应而不与任何O型红细胞反应的不规则抗体时,应考虑该抗体可能是针对Lewis血型系统复合抗原的抗体。     

血液病患者异基因造血干细胞移植后Rh血型转变研究

目的 检测血液病患者造血干细胞移植（HSCT）前供、受者及移植后患者的Rh血型抗原C、c、E、e,探究受者Rh血型抗原转变为供者Rh血型抗原C、c、E、e转变时间与过程。方法 收集HSCT前供、受者以及移植后患者的抗凝全血标本,用微柱凝胶卡检测ABO血型、Rh血型,统计分析并比较ABO、Rh血型抗原转变与时间。结果 排除红细胞输注的影响,58例HSCT患者Rh血型抗原C、c、E、e完全转变为供者的Rh血型抗原所需时间为（57.81±8.99）d,患者的年龄和血液病种类影响Rh血型抗原转换时间,性别、移植方式和供受者ABO血型相合性对Rh抗原转变时间无影响。移植后第3周部分患者开始出现少量供者红细胞,第4周开始检测到混和嵌合状态,第7～10周Rh血型抗原完全转变。此外,比较25例供、受者ABO血型和Rh血型均不相同的HSCT患者的Rh血型抗原转变时间和ABO血型转变时间,Rh血型抗原转变时间较ABO更短,差异具有统计学意义。结论 定期检测HSCT患者移植后Rh血型抗原可以作为辅助判断移植效果的指标之一,对HSCT患者移植后输注Rh血型相容性的红细胞具有指导意义。     

一例抗-Ce、抗-M致交叉配血困难的分析

目的为1例ABO血型正反定型不一致、抗体筛查阳性、重度贫血患者筛选交叉配血合适的红细胞制品,改善其贫血症状。方法采用血型血清学方法进行ABO血型、RH血型及MNS血型鉴定试验,直接抗人球蛋白试验,不规则抗体筛查与抗体鉴定试验,抗体效价测定试验,吸收放散试验及交叉配血等试验。结果患者血型为B型,血清中检出抗-Ce、抗-M;从368位无偿献血者中为患者筛选到C、e、M抗原均为阴性者5人(7.0 U悬浮红细胞),经交叉配血相合,患者输注悬浮红细胞后,无不良反应。结论患者体内有2种以上联合血型抗体时将增加筛配血液制品的难度和风险,为保障临床用血安全,采供血机构应建立特殊红细胞血型抗原表型无偿献血者资料库,对献血者开展定期关爱、随访、联络和保留工作,对临床紧急抢救患者生命,安全有效地输血有重要意义。     

血型卡在血型鉴定中的局限性

ABO血型系统的抗原除经典的A、B、O外，还有许多抗原性较弱的亚型和变异型，如A2、A3、Ax、Aend、AM等,相对应的B亚型有B3、Bx、Bm,B（A）、Bel等。西方人的B亚型少于A亚型，而我国则为B亚型频率高于A亚型，AM、AX更是极少见。ABO血型鉴定的方法主要有血型卡法、试管法、玻片法、微量板法等，血型卡以其简便、易判读、便于大量标本分析而被广泛应用。但血型卡在ABO亚型的鉴别时却有一定的局限性，有的结果可造成漏检。而正确鉴定红细胞血型是确保输血安全的先决条件，在临床输血及采供血机构工作中．对ABO血型系统中的亚型鉴定主要还是依据血清学方法。