尼可地尔超极化心脏停搏心肌保护剂量－效应关系的实验研究

目的 :对不同浓度尼可地尔心肌麻痹液超极化心脏停搏心肌保护的剂量 -效应关系进行研究 ,选择最适心肌保护剂量。　方法 :实验分 6组 ,即对照组 (去极化心脏停搏组 )、5种不同浓度 (2 5、5 0、10 0、12 5和 15 0 μm ol/L)尼可地尔超极化心脏停搏组。 4℃心肌麻痹液 (40 ml/kg)诱停离体鼠心 ,每隔 30 min重复灌注心肌麻痹液 (2 0 m l/kg) ,(15± 1)℃心脏停搏 12 0 m in后再灌注 ,离体心工作 30 min。记录心脏机械停搏时间、再灌注后心脏复跳情况、心功能恢复 (左室发展压、主动脉流量及左室压力微分 )、冠状循环灌注平均流量、心肌丙二醛 (MDA )含量、心肌超微结构的改变。　结果 :尼可地尔心肌麻痹液心肌保护呈类似抛物线形的剂量 -效应关系。尼可地尔浓度为 10 0μmol/L时 ,L VDP的恢复率最佳 ,心肌保护效果最好。　结论 :尼可地尔超极化心脏停搏心肌保护的最适心肌保护剂量为 10 0μm ol/ L。     

吡那地尔超极化停搏对缺氧未成熟心肌保护的研究

目的探讨吡那地尔（Pinacidil）介导的超极化停搏对缺氧（紫绀型）未成熟心肌的保护作用。方法建立未成熟兔心肌慢性缺氧模型，18只缺氧幼兔随机分为超极化停搏液组（P组）、去极化停搏液组（S组），应用Langendorff非再循环离体心脏灌流技术，观察2组心脏机械停搏时间、复跳时间，心肌收缩力和冠脉流量恢复率，测量心肌匀浆上清丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶（CK）含量，透射电镜下观察心肌细胞超微结构的变化。结果P组心肌收缩力和冠脉流量恢复率高于S组（P〈0．05），而心肌LDH、CK含量较低（P〈0．05），且再灌注后心肌超微结构改变较S组轻微，线粒体损伤小，心肌细胞超微结构得到较好保护；复灌旱期P组有3例出现一过性室性心律失常，S组未发生严重室性心律紊乱。结论吡那地尔介导的超极化停搏对缺氧未成熟心肌的保护效果优于去极化停搏；复灌后早期一过性心律失常发生率较去极化停搏高，但可自动转复为正常心律．     

正常钾浓度停搏兔对尼可地尔未成熟心肌缺血再灌注损伤？…

目的：搪塞正常钾浓度尼可地尔灌液致心脏停搏作用及其对未成熟心肌缺血－再灌注损伤的保护作用。方法“采用幼兔（３周龄￣４周龄）离体工作心模型,分别以Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ液,冷血停搏液及尼可地尔停搏液经主动脉灌注使心脏停搏,在缺血前及缺血后主电活动情况、心功能、心肌肌浆网Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活 及心肌超微结构变化。结果：（１）尼可地尔灌注液可致未成熟心肌电－机械活动静止,复灌后有满意复跳。（２）Ⅲ组     

正常钾浓度停搏兔对尼可地尔未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的： 探讨正常钾浓度尼可地尔灌注液致心脏停搏作用及其对未成熟心肌缺血－再灌注损伤的保护作用． 方法：采用幼兔（３周龄～４周龄）离体工作心模型,分别以Ｓｔ．Ｔｈｏｍ ａｓ Ⅱ液、冷血停搏液及尼可地尔停搏液（依次为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组）经主动脉灌注使心脏停搏,在缺血前及缺血后记录心电活动情况、心功能、心肌肌浆网Ｃａ２＋ －ＡＴＰａｓｅ 活性及心肌超微结构变化． 结果： ①尼可地尔灌注液（１．６ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ）可致未成熟心肌电－机械活动静止,复灌后有满意复跳． ②Ⅲ组心功能恢复率明显优于Ⅰ,Ⅱ组（Ｐ＜ ０．０５）． ③Ⅲ组心肌酶ＣＰＫ活性明显小于Ⅰ组（Ｐ＜ ０．０５）． ④Ⅱ,Ⅲ组心肌肌浆网Ｃａ２＋ －ＡＴＰａｓｅ活性明显高于Ⅰ组（Ｐ＜ ０．０１）． ⑤电镜下心肌超微结构显示Ⅲ组优于Ⅰ,Ⅱ组． 结论： 尼可地尔（１．６ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ）灌注液可致未成熟心肌电－机械活动静止,其心肌保护作用明显优于传统的Ｓｔ． Ｔｈｏｍ ａｓ Ⅱ冷停搏液,与冷血停搏法相比有更好的趋势．     

超极化停搏对心肌细胞膜蛋白生物物理特性的影响

目的 观察超极化停搏对体外循环（CPB）中缺血再灌注心肌细胞膜蛋白生物物理特性变化的影响。方法 建立猫CPB模型，随机分成3组：对照组（n=25）仅作单纯并行CPB；去极化停搏组（n：30）阻断主动脉（ACC）60min．恢复心脏血液再灌注60min，心脏停搏液使用高钾St．Thomas液；超极化停搏组（n=25）心脏停搏液使用含吡那地尔的低钾St．Thomas液，余处理与去极化停搏组相同。应用电子顺磁共振波谱测定心肌细胞膜蛋白巯基强／弱固定相峰高比值（hs／hw）和膜蛋白旋转相关时间（k）的动态变化，同时直接测定心肌组织中氧自由基水平。结果 对照组hs／hw和τe以及心肌组织中氧自由基水平在CPB前后无明显变化；去极化停搏组hs／hw和τe在ACC 30min明显升高，并于再灌注期间进一步上升（P〈0．01），同时伴有心肌中氧自由基水平的升高（P〈0．05）；超极化停搏组再灌注期间hs／hw和τe虽较对照组有所升高。但均明显低于去极化停搏组（P〈0．05）。直线回归分析显示hs／hw和τe均与心肌组织中氧自由基含量呈显著正相关．相关系数分别为0．692和0．677（P〈0．05）。结论 超极化停搏能减少心肌再灌注期间氧自由基的产生，有利于CPB中缺血再灌注心肌细胞膜蛋白生物物理特性维持正常。减轻心肌的缺血再灌注损伤。     

超极化停搏对大鼠离体缺血再灌注心脏功能和心肌细胞凋亡的影响

目的研究ATP敏感性钾通道（KATP）开放剂心脏超极化停搏对大鼠缺血再灌注时离体心脏功能及心肌细胞凋亡的影响。方法SD大鼠108只，随机分为对照组（CON组）、去极化停搏组（D组）、超极化停搏组（H组）、5-羟葵酸（选择性线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂）＋超极化停搏组（5-HD＋H组）、HMR-1098（选择性膜ATP敏感性钾通道阻滞剂）＋超极化停搏组（HMK-1098＋H组）、5-羟葵酸＋HMK-1098＋超极化停搏组（5-HD＋HMR-1098＋H组）。每组18只。每组再分为缺血前、缺血40min、再灌注60min3个亚组（n=6）。取心脏建立Langendorff灌注模型，平衡15min。除对照组心脏不停搏持续灌注外，其余各组分别灌注各自的停搏液，心脏停搏缺血40min，再灌注60min。持续测定心功能指标[心率（HK）、左心室发展压（LVDP）、左心室舒张末压（LVEDP）、冠脉流量（CF）]，计算率压双乘积（DP）；各组于缺血前、缺血40min、再灌注60min时分别取心肌组织，运用原位末端TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数。结果与各停搏组比较，CON组心功能指标最好，心肌细胞凋亡指数最少（P〈O．01）；与其余停搏组比较，超极化停搏组能明显提高再灌注期间LVDP及DP，降低LVEDP,减少心肌细胞凋亡率（P〈O．01）。5-羟葵酸及HMR-1098能拮抗超极化停搏对缺血再灌注损伤的保护作用。结论超极化停搏对心肌缺血再灌注损伤的保护作用与保护心功能及抑制心肌细胞凋亡有关。这也是通过共同开放两类ATP敏感性钾通道实现的。     

持续逆行灌注冷血停搏液对心肌保护作用的临床研究

观察持续逆行灌注冷血停搏液对心肌的保护作用，在心脏停搏后以５５－７０ｃｍ高度的落差经冠状静脉窦逆行持续灌注低钾冷血停搏液，流量在４０－６０ｍｌ／ｍｉｎ。持续逆灌组血中ＣＰＫ及ＣＰＫ－ＭＢ的含量在心脏停搏及复灌期间皆明显低于间断灌注组，术后心律失常发生率低，复灌后输出量明显高于术前测值。持续逆行灌注冷停搏液具有更好的心脏保护作用。     

超极化停搏对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观察超极化停搏对体外循环(extracorporeal circulation,ECC)中缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,评价其对心肌的保护作用。方法将75只健康家猫随机均分为3组。应用猫ECC模型。并行循环组:ECC建立后不阻断上、下腔静脉和主动脉,仅并行循环150 min;去极化停搏组:主动脉阻断(ACC)60 min,再灌注60min,心脏停搏液使用去极化高钾St.Thomas液;超极化停搏组:心脏停搏液使用含吡那地尔的低钾St.Thomas液,余处理与去极化停搏组相同。应用Annexin-V/PI联合染色、流式细胞仪检测心肌细胞膜磷脂酰丝氨酸的外翻,比较超极化停搏处理组及去极化停搏组ECC过程中心肌细胞坏死和凋亡的数量。结果去极化停搏组于ACC 60min及再灌注60 min时坏死心肌细胞率分别为(2.727±0.436)%及(5.622±1.389)%;而超极化停搏组分别为(1.514±0.333)%和(3.052±0.403)%。两组ACC 60 min时,均未检出凋亡心肌细胞,但在再灌注60 min时,去极化停搏组和超极化停搏组凋亡细胞率分别达(2.253±0.581)%和(0.875±0.232)%。超极化停搏处理组缺血再灌注期间坏死及凋亡的心肌细胞明显减少。结论超极化停搏不仅能减少ECC缺血再灌注导致的细胞坏死,而且能够抑制再灌注期间发生的细胞凋亡。     

Na^＋通道阻滞极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的保护作用

目的研究含Na^＋通道阻滞剂河豚毒素（TTX）极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的心肌保护作用.方法20只Wistar大鼠随机均分入StThomas去极化停搏组（对照组,Ⅰ组）和TTX极化停搏组（Ⅱ组）.建立离体心脏灌注模型,灌注10 min后,分别用St.Thomas和TTX极化停搏液2 ml经主动脉插管注入,使心脏停搏.随后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,10℃保存7 h后重新灌注心脏30 min.观察两组心脏保存前后在左心室收缩末压力和压力变化速率恢复率、心肌酶漏出、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变.结果再灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于Ⅰ组（P＜0.01）,肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶漏出量低于Ⅰ组（P＜0.05）,ATP含量维持在较高水平（P＜0.01）,心肌超微结构得到较好保护.结论在离体大鼠心脏低温保存过程中TTX极化停搏液心肌保护作用优于STH液.     

广枣－钾停搏液对心肌保护作用的研究

采用犬体外循环模型，观察广枣－钾停搏液在低温下对心脏缺血９０ｍｉｎ，再灌注４５ｍｉｎ的保护作用。实验结果显示：广枣－钾停搏液组心功能恢复率较单纯托马氏停搏液组为高；心肌水、钙含王及氧自由基含量明显降低。电镜观察心肌超微结构亦显示前者的保护作用明显优于后者。广枣与托马氏液合用，能加强对心脏的保护作用。本文对广枣护心的作用机制作了讨论。