血液透析患者血液中丙型及乙型肝炎病毒的检测

为了解血液透析患者血液中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的感染情况，对２２例维持性血液透析患者应用逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附实验，检测了血清中ＨＣＶＲＮＡ及其抗体水平；同时采用斑点杂交及固相放射免疫法检测了血清中ＨＢＶＤＮＡ及其血清标志物。结果显示，２７％的血液透析患者血清ＨＣＶ抗体阳性，其中３３％的患者血清存在ＨＣＶＲＮＡ。在血清ＨＣＶ抗体阴性的１６例患者中，也有１例（６％）血清ＨＣＶＲＮＡ阳性。在２２例血液透析患者中，３例（１４％）血清ＨＢＶＤＮＡ阳性（ＨＢｅＡｇ也均阳性）。其余１９例ＨＢＶＤＮＡ阴性患者（ＨＢｅＡｇ均阴性），有１２例（６３％）血清抗－ＨＢｃ阳性。在７例血清ＨＣＶＲＮＡ或（和）抗－ＨＣＶ阳性者，５例有既往或现在ＨＢＶ感染的证据，但未见ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ同时存在者。提示在相当数量的血液透析患者体内存在肝炎病毒血症，应加强对血液透析患者肝炎病毒感染的监测及预防工作     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

66例慢性非甲非乙型肝炎患者的丙型肝炎病毒感染研究

以ＨＣＶ－Ｔ３序列为引物，结合ＲＴ－ＰＣＲ和寡聚核甘酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，检测６６例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者的血浆ＨＣＶ－ＲＮＡ，阳性４２例（６３．６％）。同样病例以相当于ＨＣＶＣ区基因编码和ＮＳ３区编码的人工合成肽抗原检测抗ＨＣＶ，阳性４９例（７４．２％）。这６６例慢性ＮＡＮＢＨ病例，抗ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ双阳性者３８例（５７．６％）；抗ＨＣＶ阴性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者４例（６．１％）；抗ＨＣＶ阳性而ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者１１例（１６．７％）。其中诊断为散发型ＮＡＮＢＨ者３５例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者１７例（４８．６％），为输血后ＮＡＮＢＨ者３１例，检出ＨＣＶ－ＲＮＡ者２５例（８０．７％）。     

原位杂交检测肝组织丁型肝炎病毒RNA

以地高辛素为标志物，ＰＣＲ法制备探针，原位杂交检测石蜡包埋肝组织内丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ，５８例标本分为：丁肝组２３例，乙肝组２６例，对照组９例，组织切片用蛋白酶消化，多聚甲醛固定，杂交，抗体孵育，显色，连续切片作ＨＤＡｇ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ的免疫组化，ＨＢＶＤＮＡ原位杂交及ＰＣＲ法检测肝组织ＨＤＶＲＮＡ等项相关研究，ＨＤＶＲＮＡ阳性细胞呈弥漫，散在或小叶周边等三种形成分布于肝组织内，受     

多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA

为了更准确、简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究。发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平。检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）、ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝炎１３例（Ｂ组）、ＨＢｓＡｇ阴性和乙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＢｃ）阳性正常对照组３０例（Ｃ组）及ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（－）肝硬化患者１２例（Ｄ组），分别有４５．５％、３０．８％、１３．３％和１００％患者血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性。ＨＢＶＤＮＡ在一些抗－ＨＢｓ（＋）肝病患者和所谓健康人的血清中也存在。Ａ、Ｂ两组检出有ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染患者分别占８１．８％和５３．８％。提示套式和免疫套式ＰＣＲ是简便、快速而又高度敏感的检测方法；ＨＢＶ感染可能是引起ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝病的重要原因，且ＨＢｓＡｇ阴性肝病病因大多与病毒感染有关；应该重新认识自然感染者血清中抗－ＨＢｓ的临床意义。     

HGV-RNA阳性与阴性慢性乙型肝炎患者的对比研究

目的 研究慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的意义。方法 ＲＴ＿ＰＣＲ法对１４６例ＣＨＢ患者血清进行了ＨＧＶ－ＲＮＡ检测,并将ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性患者进行临床与病理学对比。结果 ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性２３例（１５．７５％）。ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性２肝功能等生化指标水平,肝脏病理损害程度、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率均无显著性差异。５例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性、１６例ＨＧＶ－ＲＮＡ阴性ＣＨＢ患     

不同HCV感染者各区段抗HCV抗体的反应性及HCV-RNA检测结果分析

利用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同区段抗原的单片段酶免疫（ＥＩＡ）试剂及反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,对不同ＨＣＶ感染者血清不同区段抗ＨＣＶ抗体及丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）进行检测。结果显示,慢性肝炎患者各抗体检出率及Ｓ／Ｃｏ（Ｓ为样品光密度值,Ｃｏ为临界值）值均高,肝癌患者各抗体检出率及ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率均较低;ＡＬＴ正常而抗ＨＣＶ阳性者各区段抗体阳性率低于急、慢性肝炎患者,而其ＨＣＶ－ＲＮＡ的阳性率高于其他各组;抗－ＮＳ３和抗－Ｃ抗体在各组的检出率和反应性均强。表明抗－Ｃ和抗－ＮＳ３抗体的检测对ＨＣＶ感染最有诊断价值,同时用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测血清ＨＣＶ－ＲＮＡ有助于ＨＣＶ感染的早期诊断     

中老年乙型肝炎病毒DNA的动态变化

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）动态检测了中老年乙型肝炎病人不同时期的血清标志。结果表明，ＨＢｅＡｇ阳性的血清其ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均阳性，两者呈平行关系，１～４ｗ后有２０％病人血清ＨＢＶＤＮＡ转阴，同时伴有部分病人ＨＢｅＡｇ消失或ＨＢｅＡｂ出现，其他ＨＢＶ血清学标志物阳性的病人血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率明显低于ＨＢｅＡｇ阳性血清，且ＨＢＶＤＮＡ暂转阴率高于ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ转阴的时间也短（１～４ｗ）。动态检测ＨＢＶＤＮＡ可以动态观察ＨＢＶＤＡＮ的复制，对指导临床治疗具有很大的意义。     

HBV感染者血清HBeAg/IC和HBV DNA间的关系

资料与方法：ＨＢＶ感染者１１７例,正常对照２０例,研究对象排除其它肝炎病毒感染,半年内未经抗病毒及免疫治疗。采用ＥＬＩＳＡ及Ｎａｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法分别检测ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ／免疫复合物（ＩＣ）和ＨＢＶ ＤＮＡ。 结果：１１７例ＨＢＶ感染者血清中共检出ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性２３例,ＨＢＶＤＮＡ阳性 ５５例, ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性者中 ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９１．３％（２１／２３例）,而ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性的９４例中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性３４例,阳性率为３６．２％,两组差异有非常显著性,ｘ２＝８．１５…     

血液透析患者乙、丙型肝炎感染的状况

目的研究血液透析患者乙、丙型肝炎感染状况及感染途径。方法对４９例维持性血液透析患者用套式逆转录聚合酶链反应方法（ＲＴＰＣＲ）检测了乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶＤＮＡ）及丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ），用第二代酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测丙型肝炎抗体、乙型肝炎标志物（ＨＢＶＭ）。结果透析患者乙型肝炎感染率５３．１％，丙型肝炎感染率６９．４％。输血组乙、丙型肝炎感染率大于未输血组；透析程２４个月以上者丙型肝炎感染率大于透析１２个月以内者（Ｐ＜００５）。ｌｏｇｉｓｔｉｃ多元回归分析显示，透析年限的增加是丙型肝炎感染的主要因素，提示透析程的危险度大于输血危险度。２０份血站提供的血制品有３份ＨＣＶＲＮＡ阳性，２０份复用透析器经消毒处理后检测出２份ＨＣＶＲＮＡ阳性，９例工作人员ＨＣＶＲＮＡ及ＨＢＶＤＮＡ均阴性。结论加强透析室的管理及工作人员的防护，减少输血及透析器的复用，对减少透析中乙、丙型肝炎感染至关重要     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

慢性丙肝RIBA与RIA-2检测抗HCV的价值

目的探讨重组免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）在慢性ＨＣＶ感染中的应用价值．方法１９９３年１月～１９９５年３月采用含ＨＣＶ不同编码区三种重组抗原（Ｃ２２，Ｃ３３ｃ，Ｃ１００３）的ＲＩＢＡ，对８５例慢性非甲非乙型肝炎（ＮＡＮＢＨ）患者血清进行检测并将其结果与第二代放免法（ＲＩＡ２）检测抗ＨＣＶ及逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ结果进行比较分析．结果慢性ＮＡＮＢＨ患者血清ＲＩＢＡ阳性（７８８％，６７／８５）结果与ＨＣＶＲＮＡ阳性（７５３％，６４／８５）结果之间有良好相关性和高的符合率；ＲＩＢＡ可检出ＲＩＡ２阴性的ＨＣＶ感染者；单项抗体阳性时仅见一定比例的单项抗Ｃ２２或抗Ｃ３３ｃ阳性血清可检出ＨＣＶＲＮＡ，而单一抗Ｃ１００３阳性者ＨＣＶＲＮＡ均阴性．结论ＲＩＢＡ可提高慢性ＨＣＶ感染的诊断率，ＲＩＢＡ阳性为ＨＣＶ感染及病毒血症存在的标志，可作为ＲＩＡ２检测抗ＨＣＶ的确证实验．     

逆转录－套式－聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞癌的关系

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链；用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ。结果发现：５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性；１例三者均阴性；１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性的癌组织和癌旁组织均检出了ＨＣＶＲＮＡ负链，但血清中未检出负链。在２２例ＨＣＣ中１３例血清、８例癌组织和１５例癌旁组织中检出ＨＢＶＤＮＡ。５例有ＨＣＶＲＮＡ和／或抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者血清、和／或癌组织、和／或癌旁组织中均伴随ＨＢＶＤＮＡ和／或ＨＢ－ＶＭ阳性。提示ＨＣＶ可在癌旁肝细胞或肝癌细胞中感染并复制；ＨＢＶ感染与肝癌发生的关系比ＨＣＶ感染更密切。     

聚合酶链反应评价原位杂交检测慢性HBV感染者肝内HBVDNA的结果

用地高辛素探针原位杂交检测慢性ＨＢＶ感染者肝内ＨＢＶＤＮＡ，聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清ＨＢＶＤＮＡ评价病毒复制状态。发现肝内ＨＢＶＤＮＡ阳性肝细胞，在１４例肝组织病变不活动的ＨＢｅＡｇ阳性慢性无症状ＨＢＶ携带者（ＡｓＣ）呈弥漫性分布；而在ＨＢｅＡｇ阳性或阴性活动性肝病病人均聚合分布于肝细胞坏死区。上述慢性感染者９８％血清ＨＢＶＤＮＡ阳性。说明ＨＢＶ复制与肝组织病变有关但非肝损伤直接原因。１６例ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＣ中，９例肝内仅见局灶性ＨＢＶＤＮＡ阳性肝细胞，其中４例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性，说明部分ＨＢｅＡｇ阴性ＡｓＣ也存在极低水平病毒复制。     

丙型肝炎病毒抗体检测的诊断价值

用国产第二代丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）检测试剂盒检测了２９６例临床血清标本以及２８例供血者血清标本。并用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了这些标本的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ检测对ＨＣＶ感染的诊断价值。同时探讨其在供血员筛选中的应用价值。结果在临床标本中，抗－ＨＣＶ阳性者有８１．１％ＨＣＶＲＮＡ阳性。抗－ＨＣＶ阴性者有２１．７％ＨＣＶＲＮＡ阳性。但是２８例抗－ＨＣＶ阴性的供血者ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。提示：抗－ＨＣＶ阳性对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高。临床怀疑为ＨＣＶ感染而进行检测的血清标本即使抗－ＨＣＶ阴性，也不能除外ＨＣＶ感染。用抗－ＨＣＶ筛选供血者可能使供血中ＨＣＶＲＮＡ阳性率大大降低。     

庚型肝炎病毒（GBV—C／HGV）与HBV和HCV联合或重叠感染的初步研究

目的 研究庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）与ＨＢＶ和ＨＣＶ联合或重叠感染的情况，方法 采用ＥＬＩＳＡ的方法检测血液制剂和血源乙肝疫苗原料血浆中的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ；并用５′非编码区的引物，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ。结果 ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性血浆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性率为１８．８％（１５／８０）；ＨＢｓＡｇ阳性而抗ＨＣＶ阴性血浆的ＧＢＶ－     

输血后乙型和丙型肝炎病毒感染的前瞻性调查

目的 了解输血所致ＨＢＶ和ＨＣＶ感染现状及ＨＢｓＡｇ抗ＨＣＶ和ＡＬＴ筛检供血的效果。方法 对１３８例输血者输血前，后１，３，６，９个月血清标本及其供血检测ＨＢｓＡｇ，抗ＨＢｓ，抗ＨＢｃ，抗ＨＣＶ和ＡＬＴ，并对部分血清标本用ＰＣＲ及巢式ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果和结论 输血后ＨＢＶ和ＨＣＶ感染率分别为１．４％（２／１３８）和３４．８％（４８／１３８），输血后乙型和丙型肝炎发生     

血清学标志阴性的病毒性肝炎病原学研究

目的 了解血清学杜的病毒性肝炎病原学。方法 应用ＢＨＶ、ＨＣＶ、戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）和庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）核酸ＰＣＲ检测１０４例血清学标志阴性的病毒性肝炎病人,并用直接测序法对部分ＨＣＶ ＲＮＡ和ＨＥＶ ＲＮＡ逆转录ＰＣＲ产物进行了核苷酸序列测定。结果 １０４例血清学标志阴性的病毒性肝炎病人中,ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ、ＨＥＶ ＲＮＡ和ＨＧＶ ＲＮＡ阳性率分别为２９．８％、３．８％、２２     

不同HCV感染者各区段抗HCV体的反应性及HCV—RNA检测结果分析

利用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同区段抗原的单片段酶免疫（ＥＩＡ）试剂及反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，对不同ＨＣＶ感染者血清不同区段抗ＨＣＶ抗体及丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）进行检测。结果显示，慢性为患者各抗体检出率及Ｓ／Ｃｏ（Ｓ为样品光密度值，Ｃｏ为临界值）值均高，肝癌患者各抗体检出率及ＨＣ生率均较低；ＡＬＴ正常而抗ＨＣＶ阳性者各区段抗体阳性率低于急、慢性肝炎患者，而其ＨＣ 性率