土茯苓抗人巨细胞病毒的体外实验研究

目的:探讨土茯苓体外抗HCMV的效果和安全性。方法:用细胞病变法和MTT法,检测土茯苓体外抗人巨细胞病毒的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦、复方中药金叶败毒进行比较。结果:更昔洛韦、金叶败毒、土茯苓的最大无毒浓度分别为10μg/ml、3000μg/ml、30000μg/ml,最小有效浓度分别为10μg/ml、300μg/ml、300μg/ml,治疗指数分别为1、10、100。结论:土茯苓细胞毒性略低于金叶败毒,大大低于更昔洛韦;抗HCMV效果与金叶败毒相同,略低于更昔洛韦;治疗指数最高,有可能成为治疗HCMV活动性感染的药物。     

复方中药二黄丹安方抗巨细胞病毒的体外实验研究

目的:观察复方中药二黄丹安方抗巨细胞病毒作用。方法:用细胞病变法和噻唑蓝法体外研究二黄丹安方抗巨细胞病毒的最大无毒浓度、最小有效浓度和治疗指数,并与更昔洛韦进行比较。结果:二黄丹安方和更昔洛韦的最大无毒浓度分别为3 000μg/ml和100μg/ml,最小有效浓度为30μg/ml和10μg/ml,治疗指数分别为100和10。结论:二黄丹安方具有体外抗巨细胞病毒作用;其抗病毒作用略低于更昔洛韦,细胞毒性远低于更昔洛韦,治疗指数高于更昔洛韦,有望成为预防巨细胞病毒宫内感染的药物。     

金叶败毒制剂对小鼠巨细胞病毒感染细胞热休克蛋白70表达影响的体外实验研究

目的:体外研究中药金叶败毒制剂对小鼠巨细胞病毒感染细胞热休克蛋白70(HSP 70)表达的影响,为研究金叶败毒(JYBD)抗小鼠巨细胞病毒(MCMV)的分子机制开辟新途径。方法:体外培养小鼠胚肺细胞,加入病毒吸附2 h,弃病毒液,加入最大无毒浓度(TD0)的金叶败毒,分别作用2、4、8、12、24、72、120 h,收获细胞,另设正常细胞对照组、病毒感染组、更昔洛韦组;免疫组织化学方法检测热休克蛋白70表达情况。结果:金叶败毒组:4 h HSP 70表达增强,8~12 h继续升高,16~24 h降低,72 h变为逐渐上升,120 h达最高点。与正常细胞对照组比较,各时相HSP 70表达强度差异均具有显著性(P<0.05);与病毒感染组比较,4、8、12、16、24 h 5个时相HSP 70表达强度差异均具有显著性(P<0.05)。更昔洛韦组:与金叶败毒组作用类似,可增强病毒感染细胞内HSP 70表达。结论:金叶败毒能增强病毒感染细胞HSP 70表达。     

中药金叶败毒改善豚鼠巨细胞病毒所致细胞线粒体膜电位损伤的体外研究

目的:通过检测线粒体膜电位的变化,探讨巨细胞病毒对线粒体膜电位的影响以及药物对线粒体膜电位的保护作用。方法:制备细胞飞片,用共聚焦显微镜检测正常对照组、病毒组、金叶败毒组和更昔洛韦组的细胞线粒体膜电位。结果:正常对照组各时相线粒体膜电位无明显变化。病毒组12h线粒体膜电位增高,48h线粒体膜电位开始降低,72h膜电位明显降低,部分细胞脱落。金叶败毒组和更昔洛韦组与正常细胞组相比差异无显著性,与病毒对照组比较24h、48h和72h3个时相差异具有显著性。结论:豚鼠巨细胞病毒感染可以导致线粒体膜电位降低,诱导细胞凋亡;金叶败毒和更昔洛韦对豚鼠巨细胞病毒所诱导的线粒体膜电位损伤有保护作用。     

金叶败毒颗粒抑制人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的实验研究

目的:通过研究金叶败毒颗粒对人巨细胞病毒vMIA蛋白表达及作用的调节,探讨金叶败毒颗粒体外对HCMV感染的预防、阻断和治疗效应及其机制。方法:采用细胞形态观察测定病毒的感染性。应用免疫荧光检测vMIA蛋白在病毒感染过程中表达的规律,在病毒感染不同阶段(病毒吸附前、吸附时和吸附后)应用金叶败毒颗粒,观察药物对HCMV vMIA蛋白表达水平的影响。转染pcDNA UL37xl质粒,经G418筛选,Western blot鉴定vMIA的表达。应用流式细胞术检测药物对TNFα+CHX攻击后细胞凋亡指数的影响。结果:HCMV感染后4 h vMIA开始表达,在病毒感染48h表达最显著。金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达,其作用较更昔洛韦弱。金叶败毒颗粒可以恢复被vMIA抑制的TNFα诱导的凋亡,但更昔洛韦无此功效。结论:金叶败毒颗粒可显著抑制HCMV vMIA蛋白的表达及其作用,这可能是金叶败毒颗粒抗HCMV效应的主要作用机制之一。     

骨髓移植受者巨细胞病毒感染的研究

目的探讨巨细胞病毒在骨髓移植受者中的感染状况.方法应用酶联免疫吸附反应方法、免疫组化方法及多聚酶链反应术后同步测定30例骨髓移植受者的抗巨细胞病毒抗体、巨细胞病毒抗原和巨细胞病毒核酸,共271例次.结果骨髓移植受者的抗CMVIgG和抗CMVIgM阳性率分别为100%和1.8%;CMV-Ag阳性细胞数平均为5.1±3.9/5×10     

细胞病变法与MTT法在药物毒性实验中的应用

目的 了解细胞病变法与MTT法在中药金叶败毒、更昔洛韦（GCV）毒性实验中的应用效果。方法 体外培养小鼠胚肺细胞，将细胞接种96孔板，细胞长成单层后，分别用细胞维持液将金叶败毒、GCV稀释成6个不同浓度，设正常细胞对照，置培养箱培养72h，用细胞病变法与MTT法分析金叶败毒、GCV对小鼠胚肺细胞的最大无毒浓度（TD0）。结果用两种方法测得的两种药物的TD0是一致的。结论 用细胞病变法和MTT法来检测药物TD0，提高了实验的准确性。     

中药体外防治甲型H1N1流感病毒实验研究

目的研究中药防治流感的体外效果。方法采用鸡红细胞凝集实验以及MTT法观察三种常见的代表性预防流感的方药("扶正"预防类-玉屏风制剂;祛邪预防类-银翘散制剂;外用芳香辟秽类制剂-冰香散)对流感病毒A/FM/1/47(H1N1)鼠肺适应株的预防作用。结果冰香散在最小无毒浓度15.6μg/ml时对流感病毒A/FM/1/47(H1N1)鼠肺适应株有良好的预防作用。银翘散和玉屏风散仅在毒性浓度下对流感有预防作用,无毒浓度下均不能抑制病毒。阳性对照药利巴韦林在0.25～2 mg/ml浓度内均有较好的抑制流感病毒作用。冰香散提前加药,冰香散对病毒的半数抑制浓度(IC50)为5.89μg/ml,治疗指数(TI)为3.28;冰香散与病毒同时加药,冰香散挥发油对流感病毒的直接抑制作用的IC50为9.56μg/ml,TI为2.02。而先加流感病毒吸附后再加冰香散,则未能对流感病毒有抑制作用,其治疗指数TI小于0.05。结论冰香散体外对甲型流感病毒FM1有预防作用。玉屏风散制剂和银翘散制剂仅在毒性浓度下对流感有预防作用,无毒浓度下均不能抑制病毒。其防治流感病毒的作用可能通过体内免疫机制而实现。     

鱼腥草有效成分抗巨细胞病毒的实验研究

目的:研究鱼腥草抗病毒有效部位槲皮素体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的作用及其作用机制。方法:用鱼腥草抗病毒有效部位槲皮素配成不同浓度的溶液,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞毒性,槲皮素不同浓度溶液分别作用于被HCMV感染的细胞,通过观察细胞病变效应(CPE),MTT法检测细胞存活率来探讨槲皮素对HCMV感染的细胞治疗作用、对CMV在细胞内增殖的抑制作用及预防作用,从而对其抗病毒机制进行研究。结果:槲皮素的半数中毒浓度(TC50)为4.75mg/ml,对HCMV在细胞内增殖的治疗作用及预防作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.30mg/ml和0.25mg/ml,治疗指数(TI)为15.83。结论:槲皮素能明显抑制人巨细胞病毒感染引起的细胞病变效应,CPE抑制率随着药物浓度的增加而增高。     

儿茶儿茶素抑制流感病毒增殖作用的研究

目的研究儿茶儿茶素的抗流感病毒作用。方法应用鸡胚培养法和血凝抑制试验分析不同浓度的儿茶提取物对病毒增殖的影响。结果儿茶儿茶素最大无毒剂量为12.5 mg/ml,在3.12512.5 mg/ml浓度范围内对甲型和乙型流感病毒的增殖具有抑制作用,12.5 mg/ml能完全抑制病毒的增殖。结论提示该儿茶儿茶素具有抑制甲型和乙型流感病毒增殖的作用。     

龙胆抗病毒有效部位(RG2-1)体外抗呼吸道合胞病毒作用机制的初步研究

目的研究龙胆抗病毒有效部位(RG2-1)体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及其作用机制。方法经水提醇沉得到RG2-1,MTT法检测细胞毒性,以利巴韦林为阳性对照药物,通过细胞病变效应(CPE)观察RG2-1对RSV感染细胞的封闭作用、直接灭活作用、对RSV在细胞内增殖的抑制作用以及预防作用,从而对其抗病毒机制进行初步研究。结果RG2-1的半数中毒浓度(TC50)为11.07mg/ml,药物直接灭活作用、对RSV在细胞内增殖的抑制作用以及预防作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.43、0.42和0.48mg/ml,治疗指数(TI)为25.75、26.36和23.06。结论RG2-1在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,CPE抑制率随着药物浓度的增加而增高;RG2-1能通过多种途径发挥抗RSV的作用。     

TAM和MPA联合用药对卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV-3/DDP生长的影响

目的:探讨三苯氧胺(tamoxifen,TAM)和甲孕酮(medroxyprogesterone,MPA)联合用药对顺铂耐药的卵巢癌细胞株SKOV-3／DDP生长影响的机制。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、电子显微镜及流式细胞仪测定用药前后SKOV-3／DDP细胞生长、形态学、周期及凋亡率的变化。结果:低浓度的TAM和MPA联合用药组对SKOV-3／DDP细胞生长无影响。高浓度用药组可抑制卵巢癌细胞生长,电子显微镜可观察到细胞凋亡的形态学变化,1×10-6~1×10-4mol／L的TAM和MPA联合用药组在抑制细胞增殖的同时尚可诱导细胞凋亡,其细胞凋亡率分别为4.06％、11.77％、19.3％,两两比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论:TAM和MPA联合用药既对顺铂耐药的卵巢癌细胞有杀灭作用,又因其较小的副作用及肯定的临床意义有可能成为卵巢癌有效的化疗辅助用药。     

波斯迪卫生栓的体内外杀精作用和抗生育作用的实验研究

本文目的是观察波斯迪原料药和卫生栓体内外杀精作用与抗生育作用。体外杀精作用结果表明原料药20sec内最低杀精浓度在人、家兔和大鼠分别为1.25mg/ml,2.5mg/ml和1.25mg/ml。卫生栓则分别为5mg/ml,10mg/ml和5mg/ml。体内杀精作用结果表明0.5g和1g原料药和卫生栓在家兔交配后10min和8min内阴道均未发现有活动精子。家兔抗生育试验结果表明0.25g、0.5g和1g原料药避孕率均为100％(P<0.001)。卫生栓0.25g避孕率为60％(P>0.05),但0.5g和1g均为100％(P<0.001)。本文结果指出由中草药组成的波斯迪卫生栓体内外均有杀精作用和抗生育作用。     

败酱草抗病毒有效部位体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

目的 了解败酱草抗病毒有效部位(AP3)体外抑制呼吸道合胞病毒的作用。方法 采用中药煎煮法、乙醇提取法和大孔吸附树脂层析法分离得到抗病毒AP3。采用细胞病变抑制试验,以病毒唑为阳性对照药,观察不同浓度AP3在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用,计算药物半数有效浓度(EC_(50))和药物治疗指数(TI)。结果 AP3半数中毒浓度(TC_(50))为11.45mg/ml;抑制呼吸道合胞病毒的EC_(50)为0.0986 mg/ml,TI为116.12;AP3对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在量效反应关系;AP3于感染后0、2、4 h加药,有抑制呼吸道合胞病毒活性。结论 败酱草抗病毒AP3在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用。     

木瓜粉对体外缺氧损伤神经细胞抗氧化能力及凋亡的影响

目的 :　观察木瓜粉 (BN)对缺氧损伤神经细胞抗氧化能力及凋亡的影响。方法 :　采用无血清体外细胞培养方法 ,培养鼠胚大脑神经细胞 ,将细胞分为 4组 ,缺氧 0、0 .1、0 .5mg BN/ml组和非缺氧 0 mg BN/ ml组。将缺氧实验的神经细胞置于缺氧环境造成缺氧损伤 ,再培养第 4d(D4)收集细胞 ,测定生化指标 ,同时进行电镜病理检查。结果 :　缺氧 0 .1 mg BN/ ml组神经细胞特异性烯醇化酶 (NSE)活性和四甲基偶氮唑盐 (MTT)高于缺氧 0 mg BN/ ml组 ,差别有显著性 (P<0 .0 5) ;缺氧 0 .1 mg BN/ ml和 0 .5 mg BN/ ml组神经细胞超氧化物歧化酶 (SOD) (78.65±0 .83,85.55± 2 .93 NU/ mg prot)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px) (43.36± 8.1 0 ,53.31± 6.1 0U/ mg prot)活性均显著高于缺氧 0 mg BN/ ml组 (SOD 69.1 5± 9.30 NU/ mg prot;GSH- Px 2 1 .1 3± 5.65 U/ mg prot;P<0 .0 5) ,缺氧 0 .1 mg BN/ ml和 0 .5 mg BN/ ml组神经细胞丙二醛(MDA)含量 (1 .48± 0 .32 ,1 .75± 0 .2 5 nmol/ mg prot)显著低于缺氧 0 mg BN/ ml组 (2 .64± 0 .39nmol/ mg prot) ,差别有显著性 (P<0 .0 5) ;缺氧 0 .1 mg BN/ ml和 0 .5 mg BN/ ml组的神经细胞凋亡富集系数 (EF,0 .72± 0 .0 9;0 .63± 0 .0 5)低于缺氧 0 mg BN/ ml?     

HPLC法测定金银花口服液中氯原酸含量

以反相高效液相色谱法测定金银花口服液中氯原酸的含量 ;色谱条件为 :Diamonsil柱 (2 0 0× 4 6mm ,5 μm) ;流动相 :乙腈— 0 .4 %磷酸溶液 (10 :90 ) ;检测波长 :32 7nm ;测定结果 :平均回收率 99 87% ,RSD =0 3%。     

早产儿脐血中血小板生成调控因子的测定及意义

目的:探讨血小板生成调控因子对早产儿血小板计数的影响。方法:我们测定了33例早产儿脐血血小板计数,并用放射免疫法(ELISA)检测了早产儿脐血中血小板生成调控因子,包括血小板生成素(TPO)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素3(IL-3)、白细胞介素1β(IL-1β)的水平,并与33例正常新生儿比较。结果:与正常新生儿比较,早产儿脐血血小板计数显著低于足月组(早产儿对足月儿:167.4±55.6×109/L对366.7±49.1×109/L,P<0.01;);早产儿脐血TPO、IL-6、IL-1β水平均显著性高于足月组,分别为(早产儿对足月儿,TPO:118.9±78.4pg/ml对63.9±42.8pg/ml,P=0.04;IL-6∶55.5±49.3pg/ml对2.2±2.4pg/ml,P=0.001;IL-1β∶4.4±3.7pg/ml对1.6±2.7pg/ml,P=0.04);而两组血浆IL-3水平无显著性差异(早产儿对足月儿:25.1±10.5mg/ml对22.7±13.4pg/ml,P>0.05)。结论:早产儿娩出时同样存在血小板-细胞因子的反馈调节机制,血小板计数降低反馈性引起脐血中TPO、IL-6、IL-1β水平升高。     

南昌市某医院住院病人血铝水平调查

对 94例住院病人进行问卷调查 ,并测定已调查病人的血清铝值 ,结果表明 :不同性别、年龄之间血清铝值无显著性差异 ;不同饮茶习惯之间无显著差异。血清铝水平均数分别为 :呼吸系统与消化系统疾病组2 35 1× 10 -2 μg/ml,高血压病组 3 4 0 0× 10 -2 μg/ml,肾疾病 3 75 0× 10 -2 μg/ml,糖尿病组 3 90 0× 10 -2 μg/ml。按 2 70 0× 10 -2 μg/ml的高铝血症诊断标准 ,提示高血压、糖尿病、肾病患者的血清铝值较高。检验显示呼吸系统、消化系统疾病患者血清铝值与高血压、糖尿病、肾脏疾病患者的血清铝值有显著性差异。     

莲房原花青素对氧自由基和脂质过氧化的作用

目的 :　观察莲房原花青素 ( LSPC)对活性氧自由基 O·-2 、· OH和肝脂质过氧化损伤的作用。方法 :　 ( 1 )应用化学发光法检测 LSPC对 O·-2 和· OH的清除作用 ;( 2 )体外大鼠红细胞、肝线粒体温育引起肝脂质过氧化物 ( LPO)含量变化 ;( 3)体外大鼠肝匀浆温育 ,Fe2 +、H2 O2 诱导引起 LPO含量变化 ;( 4 )小鼠连续口服不同剂量 LSPC 7d后 ,一次性灌胃 5 % CCl4油溶液 1 0 ml/kg bw,2 4 h后检测肝和血浆中超氧化物歧化酶 ( SOD)活性、谷胱甘肽 S-转移酶 ( GST)活性以及脂质过氧化物 ( LPO)含量。结果 :　 LSPC能有效地清除活性氧自由基 O·-2 和· OH,其 IC50 值分别为 1 69.0 mg/L和 1 0 5 .3mg/L;不同剂量 LSPC能明显抑制体外大鼠红细胞、肝线粒体、肝组织LPO产生 ;口服中、低剂量 LSPC能显著降低 CCl4中毒小鼠体内 LPO含量 ,提高 SOD、GST活性。结论 :　适量 LSPC具有抗活性氧自由基和脂质过氧化的作用 ,可能具有护肝功能。