L1 C末端共同序列多肽诱导单克隆抗体应用于宫颈脱落细胞HPV的检出

目的 确定由人乳头瘤病毒( human papillomavirus,HPV)主要外壳蛋白(L1)C-末端保守序列多肽诱导的单克隆抗体对宫颈脱落细胞内的 HPV感染 是否具有可应用于临床的检测能力。方法 收集妇科门诊宫颈脱落细胞标本,一式两份,其中一份标本用于HPV感染的医院检验科基于市售HPV分型检测试剂盒检测,另一份以本课题组制备的HPV L1 C-末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体作为探针用免疫组化(Immunological Histological Chemistry, IHC)方法检测标本中的 HPV L1,比较HPV L1 C-末端共同序列诱导单克隆抗体对宫颈脱落中 HPV 的检出结果和临床检测结果的差异。结果 收集到的 384 例妇科门诊宫颈脱落细胞标本中, HPV分型检测试剂盒检测出HPV阳性感染例数为63例,阳性率为16.41%(63/384);用免疫组化检测方法检测了其中380例标本,共检出阳性标本120例,阳性检出率为31.58%(120/380),与HPV分型检测试剂盒检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 初步证明了HPV L1 C- 末端保守序列多肽诱导的小鼠单克隆抗体对宫颈脱落细胞内 HPV 的感染具有良好的检出能力,并且检测能力明显要高于现临床所用的市售 HPV 分型检测试剂盒的检测能力(P<0.05)。该单克隆抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的 HPV 检测试剂盒方面具有一定的潜力。     

人乳头瘤病毒、超薄液基细胞学检测与宫颈病变的相关性研究

目的研究宫颈人乳头瘤病毒(HPV-DNA)感染现状及联合超薄液基细胞学(TCT)检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法选取2014年10月~2015年12月期间在我院接受宫颈癌筛查的患者2239例,行人乳头瘤病毒(HPV-DNA)检测,对HPV阳性者行超薄液基细胞学检测(TCT),对HPV、TCT均阳性者行阴道镜下病理活检,并以病理结果为诊断宫颈病变的金标准。结果 2239例妇女HPV检测阳性率为9.74%(218/2239),其中高危型HPV占8.98%(201/2239),低危型占0.76%(17/2239)。对HPV阳性患者行宫颈超薄液基细胞学(TCT)检测,HPV阳性者TCT检测阳性率为40.37%(88/218)。对HPV、TCT均阳性的患者行阴道镜下定位宫颈活组织检查,阳性率为72.72%(64/88)。结论不同年龄段HPV感染阳性率不同,HPV检测在宫颈病变筛查中的敏感性高,HPV联合TCT筛查明显提高了宫颈病变的阳性率,对降低宫颈癌的发生具有重要意义。     

50例人乳头瘤病毒脱落细胞学检测与活检病理及免疫组化染色结果对照分析

人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的性传播疾病，近年来明显增加，宫颈癌的发病率明显增加，及早发现HPV感染可以降低宫颈癌的发病率。本文对脱落细胞学检测出HPV感染进行活检病理及免疫组化染色结果对照，分析如下：……     

液基细胞学联合人乳头瘤病毒在宫颈病变筛查中的作用

目的：探讨（Thin Prep cytologic Test,TCT）联合人乳头瘤病毒（Human papilloma virus HPV）检测在宫颈病变筛查中的价值。方法：采用TCT联合HPV检测的方法,对阿克苏地区人民医院门诊及住院的4000名患者行宫颈病变筛查,阳性者行阴道镜宫颈活检。结果：4000例中,HPV阳性检出率为27.00%,TCT阳性检出率为8.00%,HPV＋TCT阳性与宫颈活检阳性病理结果的符合率为90.00%。结论：TCT联合HPV检查在宫颈病变筛查中具有重要价值。     

液基细胞学和高危人乳头瘤状病毒DNA检测对宫颈病变筛查的价值

目的分析研究液基细胞学(TCT)和高危人乳头瘤状病毒DNA(HR-HPV DNA)检测对宫颈病变筛查的价值。方法对延安大学附属医院妇科门诊2876例宫颈病变患者行TCT检测,TCT检测结果异常的患者,进一步行HR-HPV DNA检测和病理学活检。结果 183例患者TCT检查结果异常,其中不典型鳞状细胞和腺细胞病变(ASC-US)104例(56.83%),低度鳞状上皮内病变(LSIL)48例(26.23%),高度鳞状上皮内病变(HSIL)21例(11.48%),鳞状上皮细胞癌(SCC)10例(5.46%)。123例进行了HR-HPV DNA检测,87例阳性(53.05%);其中ASC-US 29例(27.88%)、LSIL32例(66.67%)、HSIL17例(80.95%)、SCC9例(90.00%)。结论 TCT检查是一种准确、简便的宫颈病变的细胞学检查方法,结合HR-HPV DNA检测更不失为一种先进的宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的筛查方法。     

薄层液基细胞学检测技术和人乳头瘤病毒DNA检查在宫颈癌前病变及宫颈癌诊断中的应用价值

目的 分析薄层液基细胞学检测技术（TCT）+人乳头瘤病毒（HPV）-DNA检查在年龄>60岁宫颈癌前病变及宫颈癌诊断中的应用价值。方法 选取兰考第一医院2018年1月至2020年10月接收的年龄>60岁宫颈癌筛查者135例作为研究对象,均行TCT、HPV-DNA检查,以病理学活检作为金标准。比较TCT、HPV-DNA以及联合检查准确度、特异度、敏感度。结果 135例年龄>60岁宫颈癌筛查者经病理学活检诊断显示,42例阳性[19例意义不明不典型鳞状细胞（ASCUS）、12例低度鳞状上皮内病变（LSIL）、8例高度鳞状上皮内病变（HSIL）、3例鳞状细胞癌（SCC）],阴性93例（53例正常、40例炎性反应症状）;TCT检查特异度为91.4%(85/93),HPV-DNA检查特异度为92.5%(86/93),TCT联合HPV-DNA检查特异度为91.4%(85/93),3种检查方式特异度比较,差异无统计学意义（P>0.05）;TCT联合HPV-DNA检查准确度93.3%(126/135)、敏感度97.6%(41/42)高于TCT检查80.7%(109/135)、57...     

人乳头瘤病毒与宫颈病变

自20世纪70年代末,ZurYnanse首先提出人乳头瘤病毒(HPV)可能与宫颈癌的发病相关后,国内外的学者就HPV感染与宫颈癌的关系进行大量的研究,获取了许多证据,目前一致认为,HPV是导致宫颈癌发生最主要的因素[1,2],可以说宫颈癌是目前人类所有癌症中唯一原因明确的癌症,是一种感染性疾病.同时众多研究表明宫颈癌有可能成为第一个可以预防的恶性肿瘤.     

人乳头瘤病毒分型联合液及细胞学检测在宫颈病变患者筛查中的应用

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型联合细胞学检测在宫颈病变患者筛查中的应用。方法:收集疑似患者,将收集到的疑似宫颈病变患者450例,分别进行细胞学和HPV基因芯片分型检测,了解各亚型HPV感染率以及其与细胞学结果的相关性,并对HPV感染人群年龄问题加以研究分析。结果:450例宫颈疾病患者中,NLIM感染HR-HPV仅为10.5%,ASCUS感染HR-HPV为48.4%,LSIL感染HRHPV为75.5%,HSIL感染HR-HPV高达85.7%,HR-HPV感染率随宫颈病变级别升高呈增加趋势。其中感染HR-HPV者113例(25.1%)、感染LR-HPV者13例(2.9%),双重感染者有10例(2.2%)。差异有统计学意义。各年龄组HPV感染率相当,差异无统计学意义。结论:HPV分型检测宜联合细胞对宫颈癌病变筛查有着重要意义,将能够更准确的对病变进行筛查,及时发现病变进行治疗。     

人乳头瘤病毒检测联合液基薄层细胞学检测在宫颈病变筛查中的应用

目的：分析人乳头瘤病毒检测联合液基薄层细胞学检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法：选取2022年5—9月于如皋市搬经镇卫生院接受宫颈病变筛查的受检者50例作为研究对象,均接受液基薄层细胞学检测、人乳头瘤病毒检测,并以活检作为“金标准”,比较人乳头瘤病毒检测、液基薄层细胞学检测及联合检测的诊断效能。结果：液基薄层细胞学检测、人乳头瘤病毒检测、联合检测、活检的炎症、CIN Ⅰ级、CIN Ⅱ级、CIN Ⅲ级、宫颈癌检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合检查灵敏度、准确度高于液基薄层细胞学检测与人乳头瘤病毒检测,差异有统计学意义(P<0.05);三种检查方式特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：人乳头瘤病毒检测联合液基薄层细胞学检测筛查宫颈病变的灵敏度与准确度高于单一检测,能为疾病早期治疗提供依据。     

人乳头瘤病毒与宫颈肿瘤关系的研究进展

宫颈病变是女性最常见的疾患之一，其患病率以每年2％～3％的速度上升。近年来，年轻宫颈疾病患者有明显上升趋势。研究发现，人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈疾病关系密切，感染了某些类型的HPV很有可能最终导致宫颈癌变，故日益受到众多学者的重视，现对HPV与宫颈疾病的研究进展作一综述。     

HR-HPV检测与细胞学联合检查在宫颈病变筛查中的应用

目的 评价高危型人乳头状瘤病毒(HPV)DNA检测联合宫颈细胞学检查对宫颈病变筛查的效果.方法 2008年8月～2010年4月,对该院宫颈疾病诊治中心就诊的4144名妇女进行宫颈癌前病变筛查,采用第2代杂交捕获试验(HC-2)检测(HR-HPV检测)联合细胞学检查,同时对其880例细胞学阳性患者进行阴道镜检查,并以宫颈活检的组织病理学结果为确诊标准.比较2种方法在宫颈病变筛查中的意义.结果 4144例研究病例中,细胞学异常(≥ASCUS)占21.24%(880/4144),高危型HPV检测阳性率为32.41%(1343/4144).880例细胞学异常者HR-HPV阳性率为47.84%,其中ASC 34.47%(202/586),LSIL 69.32%(113/163),HSIL89.08%(106/119),SCC100%.880例经病理学诊断为慢性炎症237例、CINI382例、CINI196例、CINIII111例和宫颈浸润癌54例,其HR-HPV阳性率分别为15.19%(36/237)、41.88%(160/382)、80.21%(77/96)、97.30%(108/111)和98.15%;880例细胞学异常中病理学≥CINI者占73.07%(643/880),421例HR-HPV阳性中,病理学≥CINI占91.69%(386/421).对宫颈低度以上病变,细胞学(≥LSIL)、HR-HPV、HR-HPV+细胞学(≥LSIL)3种方法的敏感度分别为45.26%、61.90%、77.14%;特异度分别为98.73%、85.23%、77.14%;不同检查方法差异有显著性(P＜0.05);阴性预测值分别为39.93%、4401%及%44.37%;经统计差异无显著性(P＞0.05).对宫颈高度病变,细胞学(≥LSIL)、HR-HPV、HR-HPV+细胞学(≥LSIL)的敏感性分别为81.23%、93.10%及97.70%;不同方法间差异有显著性(P＜0.05);特异性分别为76.27%、68.50%及64.80%:阴性预测值分别为91.13%、92.35%和99.15%;不同方法间差异无显著性(P＞0.05).结论 高危型HPV-DNA检测在宫颈病变的筛查中具有较高的敏感度和阴性预测值,高危型HPV-DNA检测联合细胞学检查进一步提高其敏感度和阴性预测值,是防治宫颈癌的关键.但特异度未能提高,阴道镜下多点活检术可提高宫颈病变诊断的准确性.     

液基细胞学结合高危型HPV检测在宫颈病变筛查中的应用

目的 探讨超薄液基细胞学(LCT)结合高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测在宫颈病变筛查中的作用.方法 回顾性分析4264例行LCT检查的患者,其中621例结果为意义不明的不典型鳞形细胞(ASCUS)及以上患者同时行HR-HPVDNA检测和阴道镜检查并活检,分析2种方法对诊断宫颈病变的临床意义.结果 将细胞学结果与组织学结果作对比分析,细胞学异常的621例样本中ASCUS 388例,低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)147例,高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)75例,鳞状上皮细胞癌(SSC)11例.细胞学与病理诊断符合率分别为LSIL 72.41%(147/203),HSIL 92.60%(75/81),SCC 100%(11/11).621例ASCUS异常患者中HPV感染率43.32%(269/621),HPV在不同宫颈病变中的阳性率分别是:宫颈癌100.00%(11/11),宫颈上皮瘤样增生(CIN)Ⅲ 84.85%(28/33),CIN Ⅱ 70.83%(34/48),CIN Ⅰ 84.073(172/203),正常或炎症7.32%(24/326),高危型HPV感染阳性率随宫颈病变程度加重而明显升高.LCT检查的敏感性为81.04%,特异性为91.64%;HR-HPV检测的敏感性为90.47%,特异性为93.14%.结论 液基细胞学(LCT)结合高危型人乳头状瘤病毒(HPV)检测提高了宫颈病变诊断的敏感度和特异度,是防治宫颈癌的关键.     

宫颈脱落细胞HPVL1蛋白及HPV DNA载量对宫颈病变的预测价值

目的 探讨宫颈脱落细胞HPVL1蛋白、人乳头瘤病毒(HPV) DNA载量对宫颈病变的预测作用.方法 选取宫颈病变患者362例,宫颈刷采集宫颈脱落细胞,采用免疫化学方法检测HPVL1蛋白,HC2技术检测HPV DNA载量,根据宫颈组织病理学结果将患者分为慢性宫颈炎(190例)、宫颈上皮内瘤变Ⅰ期(CIN Ⅰ,45例)、宫颈上皮内瘤变Ⅱ期(CINⅡ,43例)、宫颈上皮内瘤变Ⅲ期(CINⅢ,46例)和宫颈癌(38例);根据宫颈细胞学检查结果将脱落细胞分为未见异常细胞(NILM,122例),未明确性非典型鳞状上皮细胞(ASCUS,75例),可疑非典型鳞状上皮病变细胞(ASCH,52例),低度鳞状上皮内病变(LSIL,61例)和高度鳞状上皮内病变(HSIL,52例),比较不同宫颈病变HPVL1蛋白、HPV DNA载量的差异.结果 130例宫颈脱落细胞HPVL1蛋白阳性,阳性率为35.91％(130/362),其中HPVL1蛋白阳性率由大至小分别为:慢性宫颈炎＞CIN Ⅰ期＞CINⅡ期＞CINⅢ期＞宫颈癌,NILM＞ ASCUS＞ ASCH＞ LSIL＞ HSIL,不同宫颈病变组织病理学或细胞学类型比较差异具有统计学意义(P＜0.05),272例HPV DNA阳性,阳性率为75.14％,低度HPV DNA载量以慢性宫颈炎或NILM最多,高度HPV DNA载量以宫颈癌或HSIL最多,明显高于其他宫颈组织病理学或细胞学类型(P＜0.05).结论 HPVL1蛋白在宫颈脱落细胞的表达随着宫颈病变程度加重而下调,HPV DNA载量随宫颈病变程度加重而上调,二者检测在宫颈病变程度的预测中具有重要的价值.     

HPV L1在不同宫颈病变组织中的表达规律探讨

目的 探讨影响HPV L1蛋白在肿瘤组织内表达的因素,寻找HPV L1蛋白在不同宫颈病变中的表达规律。方法 收集不同宫颈病变组织,检测标本内HPV16和HPV18基因分型及基因组物理状态;用ELISA、蛋白质印迹和免疫组织化学方法检测标本内HPV L1的表达情况。结果 共收集到48例标本,其中42例HPV16阳性,3例HPV18阳性。HPV16阳性标本中,25例病毒基因组为游离型,7例为混合型,10例为整合型;HPV18阳性标本全部为整合型。ELISA及蛋白质印迹检测显示,随着病变程度的加重,HPV L1的表达量有逐渐降低的趋势。免疫组织化学显示,组织内的HPV L1阳性反应有多种形式,依病变组织内病毒基因组物理状态、病变组织分化程度以及病变进程的不同而不同。结论 HPV L1在宫颈病变组织内的表达有一定的结构基础,其表达量与病毒基因组在病变组织和细胞内的物理状态、肿瘤组织的分化程度、病毒基因组插入宿主基因组基因序列的状态有着非常密切的关系。     

人乳头瘤病毒基因分型及其与子宫颈细胞学异常相关性研究

目的了解人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及其型别,探讨HPV及其不同型别感染与年龄和子宫颈病变的相关性,评价聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法检测HPV的方法学性能和临床诊断性能。方法采用PCR-反向点杂交法对2009年6月至2010年9月在该院就诊或健康检查的2 994例女性子宫颈脱落细胞标本进行HPV DNA及其基因分型检测,其中131例进行HPV DNA序列测定,1 511例同步进行HPV基因分型和液基薄层细胞(TCT)检测。结果 2 994例受检女性HPV感染率为25.1%,排名前5位的HPV型别分别为HPV52(15.6%)、16(14.1%)、58(12.0%)、56(6.6%)和33(5.2%)。25岁以下女性HPV16、58感染率最高;HPV52感染率在55岁以上女性最高,25岁以下女性次之;高危型HPV在非典型鳞状细胞(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)及高度鳞状上皮内病变(HSIL)中感染率分别为44.2%、91.7%和93.3%;HPV58、16、56和31与子宫颈病变程度相关(回归系数分别为0.493、1.744、―0.819和1.566),HPV52则无明显相关性;分别以测序法和TCT结果大于或等于LSIL作为金标准,PCR-反向点杂交法检测HPV及其对子宫颈病变诊断的敏感度、特异度和准确度分别为96.4%和92.2%、93.4%和84.2%、94.7%和84.5%。结论女性感染HPV比例较高,年轻女性更易受感染,感染型别以HPV 52、16、58、56和33为主,HPV感染与子宫颈病变程度高度相关,PCR-反向点杂交法检测HPV在方法学性能和对子宫颈病变的临床诊断性能上均能满足要求。     

抗HPV16L1 IgY抗体的制备及活性检测

目的 制备出高特异性的抗HPV16L1 IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法.方法 用纯化HPV16 L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法通过对转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中L1蛋白的检测评价IgY抗体的特异性.结果 3次免疫之后,IgY抗体效价达到1:10 240,同时可特异性与转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中EGFP-HPV16L1 结合.结论 采用HPV16L1蛋白免疫母鸡,成功获得了较高效价的特异性IgY抗体,并可用于HPV16L1蛋白的细胞学检测,为IgY抗体在免疫组织化学检中的应用提供实验依据.     

人乳头瘤病毒11型主要衣壳蛋白L1基因的克隆及序列分析

目的 从临床尖锐湿疣标本克隆人乳头瘤病毒（HPV）11型主要衣壳蛋白L1基因,进行序列测定及序列分析比较,以为研究该临床病毒株的免疫原性及流赞美同学奠定基础。方法 以临床尖锐湿疣标本总DNA为模板,用L1基因保守区简并引物以PCR方法分段扩增衣壳蛋白L1基因在部,重组入pGEM-3zf(-)质粒载体,以双脱氧法双向测定插入片段序列,拼接出L1基因序列,通过BLAST2.0与已报道序列进行比较。结果 从西安地区一尖锐湿疣临床标本克隆到的一株HPV11型L1蛋白编码序列与一文献报道大部分相同,但有些位点有点突变,结论 构建的pGEM-3zf(-)重组质粒为进一步通过杂交、体内分段表达等手段研究研究该株病毒L1蛋白的免疫学和流行病学性质创造了条件。     

人乳头瘤病毒16型主要衣壳蛋白L1基因的克隆和序列分析

目的 从已感染人乳头瘤病毒（HPV）的新鲜宫颈癌组织中获得HPV16型晚期表达基因L1，为HPV感染的检测和治疗奠定基础。方法 根据引物设计原则设计一对特异引物，并用PCR方法从宫颈癌组织中获得L1基因，用pGEM-T作为克隆物体，构建重组质粒并以双脱氧法双向测定插入片段序列，拼接出L1基因序列，自动测序验证并分析序列。结果 从西安地区1例宫颈癌临床标本克隆到的1株HPV16型L1蛋白编码序列经BLAST2．0分析与既往报道序列存在高度同蛋白编码序列经BLAST2．0分析与既往报道序列存在高度同源性。结论 构建的重组质粒为进一步研究L1蛋白的表达及其免疫学创造了条件。     

宫颈上皮内瘤变组织中人类乳头状瘤病毒分型检测的意义

目的 探讨广西地区宫颈上皮内瘤变(CIN)石蜡包埋组织中人类乳头状瘤病毒(HPV)分型检测的临床意义及基因芯片技术的应用.方法 应用基因芯片技术分别对CINⅠ级28例、CIN Ⅱ级25例、CIN Ⅲ级25例病理石蜡包埋组织标本进行HPV分型检测.结果 CINⅠ级HPV阳性率为46.4%(13/28),其中单一感染12例,三重感染(HPV16,33,59)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(14.3%)、58(10.7%)和52(7.1%).CIN Ⅱ级阳性率为64.0%(16/25),其中单一感染15例,双重感染(HPV11,18)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16 (20.0%)、58 (12.0%)和18 (12.0%).CINⅢ级HPV阳性率为96.0%(24/25),其中单一感染17例,双重感染7例(HPV16和58双重感染为主,共3例);HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(52.0%)、58(28.0%)和33( 16.0%).结论 HPV 16和58是广西地区各级CIN中最常见的感染亚型,HPV分型检测能够早期发现病原并且指导后续的治疗;基因芯片技术敏感性高,特异性强,可应用于病理石蜡包埋组织HPV分型检测.