乙型肝炎病毒多聚酶基因YMDD变异与临床治疗反应

目的：了解深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中HBV多聚酶基因YMDD变异的情况及其对治疗反应的影响。方法：对100例拉米夫定治疗中28例出现血清病毒核酸（HBV DNA）阳性的患者,采用限制性片段长度多态性分析法（PCR－RFLP）检测YMDD变异,并观察其血清HBV DNA及丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果：100例中有17例YMDD变异阳性，其中以YVDD（M550V）变异为主,占64．7％（11／17），YIDD（M550I）变异为35．3％（6／17）。发生YMDD变异的患者均伴有HBV DNA及ALT水平反跳，1例住院患者停用拉米夫定后出现病情加重。结论：深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中（疗程1年，100md/d）HBV多聚酶基因YMDD变异率为17．0％（17／100）。发生变异者较无变异者疗效降低，检测YMDD变异有助于监测疗效。     

拉米夫定耐药HBV毒株伴随变异与YMDD变异的关系

目的研究拉米夫定耐药（LAMr）HBV毒株伴随变异及其与YMDD变异的关系。方法PCR方法扩增LAMr病人血清的HBVRT区基因，直接测序PCR产物。对测序发现含有LAMr变异的105例病人血清检测变异时HBVDNA载量，分为第1组含rtV173L／M或rtV207M／L／I变异、第2组含rtS213T变异、第3组不含此3种变异，共3组进行分析。结果①拉米夫定（LAM）治疗B、C基因型乙型肝炎病毒（HBV）感染的慢性乙型肝炎（CHB）病人耐药主要变异位点为YMDD变异，可以伴随rtL180M、rtV173L／M、rtV207M／L／I、rtS213T等变异，LAMr变异形式构成与基因型无关（P=0．2620）。②rtM204I、rtM204V、rtM204V／I变异分别有38．8％、89．2％、73.3％伴随其它位点变异（P〈0．0001）。③3组测序发现变异时HBVDNA载量分别为（7．43±0．16）log10拷贝／mL、（5．01±0．90）log10拷贝／mL、（5.75±0．34）log10拷贝／mL（F=4．48，P=0．0240）。结论LAM治疗B、C基因型HBV感染的CHB病人耐药变异形式构成无显著差异，rtM204V变异较rtM204I变异更易伴随其它位点变异，伴随变异rtV173L／M、rtV207M／L／I可以增强YMDD变异HBV毒株的复制能力。     

应用错配PCR和限制性片段长度多态性分析技术检测HBV YMDD变异株

目的：建立简便易行的检测乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶基因（P基因）上YMDD变异株的方法，评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患对此变异的影响，方法：采用套式／错配聚合酶链反应（PCR）结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析技术对108例治疗前HBV DNA（PCR）阳性正在拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者的HBV YMDD变异情况进行检测。结果：运用上述技术能有效区分HBV YMDD野生株和变异株，上述108例患者经拉米夫定治疗后，HBV DNA阴转者63例（58．3％），HBV YMDD野生株和变异株分别为23例（21．3％）和22例（20．4％），结论：建立的套式／错配PCR－RFLP分析技术可用于HBV YMDD变异株的临床监测，拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者可导致部分患者的HBV多聚酶基因上YMDD发生变异。     

慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗不同阶段HBV DNA多聚酶分析

目的分析拉米夫定治疗不同时期HBV DNA多聚酶区耐药突变的变化规律和主要耐药突变的分布情况。方法将接受拉米夫定治疗的98例患者根据治疗时间进行分组,采用PCR方法对其血清HBV多聚酶区进行扩增并对聚合酶链反应（PCR）产物进行直接测序。结果拉米夫定治疗后血清HBV DNA水平≥10^4copies／ml的患者中,治疗时间〈6个月6例,其中1例发生突变;6～12个月13例,其中7例发生突变;12～24个月19例,其中13例发生突变;24～36个月20例,其中19例发生突变,各组之间耐药突变发生率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。耐药患者中有10种突变类型,其中以rtM204I突变最多见,为14例（35．0％）,其次为rtL180M／M204V（17．5％）、rtL180M／M2041（12．5％）。结论对拉米夫定治疗6个月以上而没有达到病毒学完全应答的患者进行乙肝病毒基因耐药突变的检测,有助于及时准确的调整治疗方案。     

核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎多位点耐药基因的检测

目的探讨核苷(酸)类似物治疗的乙肝患者多位点耐药基因突变与临床意义。方法对30例临床耐核苷酸类似物治疗的乙肝患者,分别从血清中提取HBV DNA,进行PCR和DNA直接测序,并进行单核苷酸多态性(SNP)分析判断有无变异及变异模式。结果 30例中有17例发生不同位点变异,变异率为56.67%,另有5例经DNA测序可见碱基突变,但未见明显耐药基因。常见基因变异模式依次为M204I、L180M、A181T、L180M+M204I+V173L、L180M+M204I/V、L180M+M204V+T184I,6种突变模式与ALT、HBV、DNA之间的关系差异无统计学意义(P0.05)。结论检测HBV多位点耐药基因相关突变有助于临床及时发现乙肝患者HBV耐药并指导临床用药。     

拉米夫定治疗引起HBVYMDD变异的检测及临床意义

目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎引起的HBVYMDD变异与HBVDNA病毒载量与血清谷丙转氨酶(ALT)之间的关系.方法 140例拉米夫定治疗48～96周的慢性乙型肝炎患者为研究对象.用荧光定量PCR法检测HBVDNA,基因序列分析检测HBVYMDD变异,全自动生化分析仪检测ALT水平.结果 140例检测标本46例存在YMDD变异,变异率为32.86%,其中29例(20.71%)为rtM204V/rtL180M变异,16例(11.43%)为rtM 204 I变异,1例(0.72%)为rtM204I/rtL180M变异.HBVDNA＞105拷贝/mL的发生率变异株组(40/46,86.96%)明显高于野生株组(6/94,6.38%)(χ2=90.889,P＜0.01).血清ALT水平变异株组(143.96±192.97)u/L明显高于野生株组(41.29±31.54)u/L(F=25.409,P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定48～96周YMDD变异率为32.86%,变异类型以rtM204V/rtL180M为主,其次为rtM 204I.变异时HBV-DNA病毒载量及ALT水平升高.     

HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法的建立

目的：建立一种简便，准确，实用的乙型肝炎病毒（HBV）耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法。方法：根据已公布的HBV DNA序列，在HBV多聚酶基因区设计合成了两对寡核苷酸引物，其中一只为错配引物；应用巢式错配聚合酶链反应（PCR）特异性扩增含有HBV多聚酶基因YMDD基序的片段，扩增产物用限制性内切酶（NdeI)酶切，琼脂糖凝胶电泳，观察酶切后目的片段的限制性片段长度多态性（RFLP）图谱，部分标本进行DNA测序。结果：（1）所建立的巢式错配PCR－RFLP法，从DNA提取到酶切后电泳分析仅需要11小时，灵敏度高，可以检测到10^3copies/ml的HBV DNA；特异性强，结果准确，经DNA测序证实。（2）检测20例长期服用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者的系列血清，发现YMDD变异者（45％）9例，YMDD野毒株者（55％）11例 ，表明该法可有效地鉴别HBV YMDD野毒株与变异株。结论：本实验所建立的用于检测HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异的巢式错配PCRRFLP方法简单，敏感，特异，适用于一般实验室及大规模的人群调查。     

慢性乙型肝炎拉米夫定治疗后病毒基因变异的分析

目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎发生病毒变异的情况,从而有效地指导临床治疗和预后判断.方法 采用基因测序技术检测74例经拉米夫定治疗后发生病毒变异的血清进行乙肝病毒P区全序列测定,按不同变异位点分为4组(rtV173L、rtL180M、rtM204V/I、rtL180M与rtM204V/I联合组),比较4个位点变异患者用药前及发生变异后的ALT、HBV DNA含量的变化情况.结果 74例拉米夫定变异患者rtV173L发生变异4例.rtL180M发生变异13例,rtM204V/I发生变异22例,rtL180M与rtM204V/I联合组发生变异35例.服药前各组ALT、HBV DNA含量差异无显著性(P＞0.05),rtL180M与rtM204V/I联合组发生变异的患者ALT和HBV DNA含量较单一变异组高,差异有显著性(P＜0,05).结论 乙型肝炎拉米夫定治疗发生变异位点为rtV173L、rtL180M、rtM204V/I、rtL180M与rtM204V/I联合组.联合变异组各项生化指标以及HBV DNA含量变化明显,提示临床预后较差.     

自然发生和拉米夫定诱导的乙型肝炎病毒逆转录酶区序列变异的特征

目的 研究慢性乙型肝炎（CHB）患者在自然状态或在拉米夫定（LVD）长期治疗过程中乙型肝炎病毒（HBV）逆转录酶区（RT）序列变异出现的时机和特点。方法 120例CHB患者按测序时机分3组：Ⅰ组初治患者25例，Ⅱ组病毒学突破患者74例，Ⅲ组病毒学部分应答患者21例。所有患者留血清标本，提取血清HBV—DNA，应用PCR扩增，直接测序HBV RT区，Chromas2．0软件分析HBVP基因RT区变异，同时使用Clustalxl．81．msw进行基因型分析。结果 120例CHB患者中，B型34例（28.3％），C型85例（70．8％），B／C型1例（0．8％）。Ⅰ组患者中，2例（8．0％）出现rt变异原发性LVD耐药（LVDr），其中1例为rtM204V＋rtL180M变异，另1例为rtL180M变异与野毒株并存；Ⅱ组患者中，67例（90．5％）出现继发性LVDr变异，rt变异位点为rtM204V／I、rtL180M、rtV173L／M、rtV207M/L/I、rtA181T,rtM250L；Ⅲ组患者中，出现rtV1911、rtF221Y变异各1例，没有出现LVDr相关的变异。结论 CHB患者在自然状态下和病毒学突破时HBV可出现LVDr变异，治疗前后对HBV逆转录酶区（RT）序列分析可指导临床抗HBV药物的选择。     

拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者HBV P基因区突变序列分析

目的 探讨拉米夫定耐药慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV P基因逆转录酶区(RT区)序列突变特点.方法 收集115例接受拉米夫定治疗的CHB患者的临床资料,采用PCR产物直接测序法检测HBV P基因RT区序列耐药变异.结果 人选的115例患者中103例检测到拉米夫定基因型耐药变异,最主要的耐药变异模式为rtL180M rtM204V和rtM204I,分别占58.3％和22.3％,其他耐药位点包括rtL80V/I、rtT184S和rtA200V,并在5例患者中检测到RT区3个位点的联合变异.结论 对拉米夫定治疗患者的耐药检测除了HBV P基因区常见的rtL180和rtM204位点变异外,还应考虑其他位点的联合耐药变异.     

204例大肠息肉的免疫组织化学研究

本文采用4种抗结肠癌单克隆抗体CL-2、CL-4、MC_3和MC_5检测了204例大肠息肉。结果显示,4种抗体的相应抗原在正常大肠粘膜为阴性表达,在炎性与幼年性息肉以及单纯性腺瘤阳性表达低,而在腺瘤不典型增生和腺癌癌变阳性表达较高,提示其阳性率与不典型增生有关(P<0.01),4种抗体的相应抗原在大肠癌组织中占优势,且对判定癌前病变的抗原表达有一定的价值,可作为早期判断腺瘤癌变的参考。     

围产儿胸腺的病理组织学观察

作者对204例尸检的围产儿胸腺作了组织学观察,发现胸腺的改变主要为胸腺退化和发育不良。按退化改变的程度分为轻、中、重三度。死胎死产儿的胸腺结构基本正常,而大部分早期新生儿因存活时间的长短不一致胸腺随病情不同而有不同程度的退化,以各种感染性疾病尤为突出。     

204例医疗纠纷构成原因分析

目的通过分析医疗纠纷的原因为医院规范医疗活动提供管理信息。方法回顾性分析某大医院2003年至2004年发生的医疗纠纷,以医疗、服务和管理三方面进行分类,在不同时间段、不同科室间进行分析,并作统计学处理。结果2003年与2004年比较,医疗、服务和管理上发生的医疗纠纷例数的差异无显著性,各科室发生的医疗纠纷例数的差异有显著性。结论分析医疗纠纷发生的原因和数量,有助于找出薄弱环节,强化医院管理。     

抗生素相关性腹泻204例临床研究

目的:分析医院感染抗生素相关性腹泻的发病情况,为临床制定有效的预防控制措施提供依据。方法:对2003年1月~2007年12月医院感染抗生素相关性腹泻成年住院病人204例病例进行回顾性分析,分析抗生素相关性腹泻(AAD)的易患因素、抗生素使用情况以及治疗和转归。结果:医院感染抗生素相关性腹泻多发生于老年人,抗生素使用时间>7天,联合使用抗生素腹泻感染率较高。粪菌检以G+菌为主。给予微生态制剂、甲硝唑、万古霉素治疗大多有效。结论:如果病人使用抗生素期间或之后短时间内出现腹泻要考虑抗生素相关性腹泻。合理使用抗生素,严格控制广谱抗生素的使用是预防控制医院感染抗生素相关性腹泻的关键措施。     

浅议臀位分娩的处理——附204例临床分析

本文分析了204例臀位分娩的处理,各科臀产式与围产儿死亡及并发症的关系.包括足位79例,完全臀位85例,单臀位35例,不详5例.围产儿死亡23例(107.8%.),均系臀牵引术分娩.臀助产73例,臀牵引86例,剖宫产40例、牵引+穿颅术5例.臀牵引术围产儿死亡率及并发症最高.作者应用王氏臀位评分法进行评分,结果评分5分以下剖宫产率占44%,优于阴道分娩,(p<0.001),评分愈高,预后愈好.     

204例输卵管妊娠临床病理分析

目的：探讨输卵管妊娠的诊断,特别是不典型病例的早期诊断。分析其发病及误诊原因。方法：对204例输卵管妊娠手术患者的临床资料进行回顾性分析,对输卵管切除标本经常规石蜡切片、HE染色后普通光学显微镜观察。结果：初诊确诊病例178例（87．3％）,误诊26例（12．1％）,流产史79例,放置宫内节育器101例,合并输卵管炎及盆腔炎45例,卵巢肿瘤10例,子宫肌瘤12例。结论：流产、宫内节育器放置及慢,巨炎症是最常见的引起输卵管异位妊娠的原因,病史、血β-HCG及B超检查对不典型病例的诊断具有重要作用。     

204例甲状腺癌的临床治疗

目的 总结分析吉林市人民医院甲状腺科收诊患者中甲状腺癌的发病状况及诊治经验.方法 回顾性分析吉林市人民医院收诊的204例甲状腺癌患者的临床资料.结果 204例甲状腺癌患者中男女发病比例约为1:4.5;病理类型明确者195例,其中乳头状癌179例(91.79％),滤泡状癌9例(4.62％),髓样癌6例(3.08％),未分化癌1例(0.51％);甲状腺癌患者中明确淋巴结转移者为161例,男、女淋巴结转移率分别为35.14％、28.74％.患者均进行手术治疗,手术方式为单侧病变行患侧腺叶+峡部及对侧大部切除、患侧腺叶+峡部切除术、双侧病变行一侧腺叶+峡部及对侧大部分切除、甲状腺全切除术,部分淋巴结转移患者行颈部淋巴结清扫术.术后常规给予内分泌治疗,根据患者具体情况予以131I内放射治疗.5年随访53例,存活50例(94.34％),10年随访15例,存活13例(86.67％).结论 针对不同类型的甲状腺癌,采取适当的手术方式,并结合内分泌治疗可取得较好的预后效果.     

204例早产儿贫血临床分析

目的 探讨早产儿贫血发病率与胎龄、体重之间的相应性。方法 对近2年来在我院儿科住院的早产儿的贫血发生率进行回顾性总结，运用x^2检验的方法，对资料进行统计学分析处理，进行对比。结果 早产儿贫血发生率随着胎龄、出生体重的增加而逐渐下降，不同胎龄之间及不同出生体重之间的贫血发病率均差异有显著性。结论 早产儿胎龄越小、出生体重越低,其贫血的发病率越高。临床上应关注早产儿贫血的发生，并对其进行积极的早期预防。