切除嗅球对成年大鼠脑室下区神经生发功能的影响

为了探讨嗅球对成年哺乳动物侧脑室外侧壁脑室下区神经生发活动的影响 ,本研究在机械性切除成年大鼠一侧嗅球后采用连续半薄切片、克紫染色和细胞核表面三维重建技术 ,观察了侧脑室外侧壁脑室下区的细胞核表面特征及其空间位置 ,并测量了细胞核的形态学指标。结果发现 ,在切除嗅球 3个月后 ,同侧侧脑室外侧壁脑室下区的区域变小 ,特有的中、小型、形状不规则的胶质细胞核的数量比例增大 ,而具有成神经细胞核特征的细胞核 (体积较大、呈规则的椭圆体形 )数量明显减少 ,且其同型细胞核聚集现象消失。说明同侧此区的神经生发活动减弱而胶质生发 (gliogenesis)相对增强。本研究结果提示 ,哺乳动物嗅球对成年侧脑室外侧壁脑室下区的神经生发机能可能具有促进作用     

嗅球切除对成年大鼠侧脑室外侧壁神经生发活动的影响

目的研究成年大鼠嗅球切除后侧脑室外侧壁（SVZ）的形态学变化,探讨嗅球对成年大鼠SVZ神经生发活动的影响。方法建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活2、4、8、12周;利用Nissl染色、多唾液酸神经细胞黏附分子（PSA—NCAM）、GFAP免疫组织化学染色的方法,分别观察成年SD大鼠嗅球切除后存活不同时间两侧SVZ的组织结构和免疫组织化学特征;计数模型动物脑两侧SVZ细胞总数及PSA-NCAM、GFAP免疫阳性细胞数,并进行统计学分析。结果嗅球切除4周后,嗅球切除侧SVZ的细胞总数增加,PSA—NCAM免疫阳性细胞数增加,但GFAP免疫阳性细胞数没有明显变化;SVZ的细胞总数及PSA-NCAM免疫阳性细胞数的增加有从SVZ嘴侧向尾侧蔓延的趋势。结论嗅球切除后在SVZ仍有新生神经元不断产生,说明SVZ的神经生发活动可能并不依赖于嗅球的存在。     

嗅球切除对成年大鼠侧脑室外侧壁新生细胞增殖和分化的影响

目的 研究嗅球切除后成年大鼠侧脑室外侧壁(SVZ)新生细胞增殖和分化的情况,进一步探讨嗅球对SVZ神经生发活动的影响.方法 建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活4周和12周,利用Nissl染色、多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)和BrdU免疫组织化学染色的方法观察了成年SD大鼠嗅球切除后存活不同时间两侧吻侧迁移流(RMS)BrdU阳性细胞数占总细胞百分比的变化以及两侧RMS PSA-NCAM阳性细胞的形态学变化.结果 1.嗅球切除后不同时间点,嗅球切除侧RMS的细胞数增加,BrdU免疫阳性细胞数增加,但BrdU免疫阳性细胞数占总细胞数的百分比随嗅球切除后大鼠存活时间的延长而下降,且以RMS的吻侧部分下降更明显;2.嗅球切除后,在切除侧断端吻侧颗粒层和RMS均出现较对照侧更多的具有较长突起的PSA-NCAM阳性细胞.结论 嗅球切除后仍有新生神经元沿RMS向吻侧迁移,但其增殖率随时间延长下调;嗅球的切除似乎并没有影响成神经细胞的分化.     

嗅成鞘细胞在新生大鼠嗅球的分布

中枢神经系统(CNS)内的胶质微环境是导致再生失败的重要因素。嗅觉神经元(olfactory sensory neurons,OSNs)具有终生再生的能力,因此嗅觉系统成为研究神经发生和轴突生长迁移的良好模型。嗅成鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)是决定OSNs轴突能够终生再生的关键因素。周长满等对成年大鼠嗅成鞘细胞的分布进行了研究。     

传入神经阻滞对成年大鼠嗅球calbindin表达的影响

目的：研究传入神经阻滞对成年SD大鼠嗅球中calbindin（CB）表达的影响。 方法： 成年SD大鼠，ZnSO4 灌流单边鼻孔，10、20、30和60 d后用免疫组化方法检测嗅球的CB表达。 结果： 损伤后10、20、30和60 d，与对照组相比，损伤组嗅球的CB阳性细胞密度和染色强度显著下降，并且从10、20到30 d逐渐下降，损伤后60 d的结果与30 d接近。 结论： 大鼠嗅球中CB的表达受传入神经阻滞的影响。     

传入神经阻滞对成年大鼠嗅球钙视网膜蛋白的影响

目的：研究传入神经阻滞对成年SD大鼠嗅球中钙视网膜蛋白(CR)的影响，探讨阻滞的影响是否与动物年龄相关。方法： 成年SD大鼠，以ZnSO4灌流单边鼻孔，用免疫组化方法，在损伤后10 d、20 d、30 d、60 d，检测嗅球中酪氨酸羟化酶(TH)和CR的表达，以TH表达下降作为传入神经阻滞的标志。结果： 损伤后10 d、20 d、30 d和60 d，与对照组相比，损伤组嗅球的TH阳性细胞密度和染色强度显著下降，并且从10 d、20 d到30 d逐渐下降，损伤后60 d的结果与30 d接近。而在所观察的各个阶段，损伤组嗅球的CR阳性细胞数目和染色强度与对照组相比，均无显著差异。结论： 大鼠嗅球中CR的表达不受传入神经阻滞的影响，且阻滞对CR表达的影响与动物年龄无关。     

成年大鼠嗅球成鞘细胞的原代培养

本实验取材于成年 Wistar大鼠嗅球的最外两层 ,进行原代培养嗅球成鞘细胞 ,用胶质纤维酸性蛋白抗体免疫组化方法确认。结果显示 :( 1)培养至第 10 d,原代培养物多见两种形态的细胞 :一种为单极、双极或多极细胞 ,带有细长的突起 ;另一种为所谓“煎蛋样”细胞 ,扁平状 ,胞质少极化 ,边缘不规则 ;( 2 )胶质纤维酸性蛋白反应显示这两种细胞均呈阳性 ,Nissl法复染后 ,可计数其纯度为 70 %～ 85 %。     

嗅茎切断对脑室下层细胞迁移的影响

为探讨嗅茎切断对大鼠前脑侧脑室脑室下层细胞迁移的影响 ,本实验在嗅球后切断嗅茎 ,手术后 30 d、6 0 d后灌注固定处死 ,制作脑的连续石蜡切片 ,计量嗅球后份平面吻侧迁移流的细胞密度 ,计算机图象分析吻侧迁移流横截面积 ,用免疫组织化学技术对吻侧迁移流内的细胞进行定性分析。结果发现 ,手术切断嗅茎导致手术侧吻侧迁移流细胞在切断平面的尾侧细胞密度增加 ,吻侧迁移流的横截面积增大 ,积聚的细胞为多唾液酸 -神经细胞粘附分子阳性的神经元前体细胞。结果提示 ,手术切断嗅茎导致吻侧迁移流内神经元前体细胞在切断平面的尾侧积聚     

成年大鼠脑室下区吻侧迁移流的细胞形态学研究

为了探讨成年大鼠脑室下区吻侧迁移流(RMS)神经干细胞的分布及特点,我们利用Nissl染色,BrdU、GFAP、PSA-NCAM和nestin免疫组织化学染色,nestin与GFAP免疫荧光双标记染色等方法观察了正常成年SD大鼠RMS的组织化学和免疫组织化学特征;同时观察了正常RMS的超微结构特征。结果观察到:(1)在光镜下,Nissl染色切片的RMS由深染和浅染细胞组成,其中深染细胞为PSA-NCAM、BrdU及nestin免疫反应阳性,浅染细胞为GFAP及nestin免疫反应阳性;(2)电镜下,RMS存在数量不等、由同一种类型的细胞聚集形成的细胞团,以及星型胶质细胞和少量少突胶质细胞,细胞团中可看到正在分裂的细胞。结果提示:(1)除少突胶质细胞外,RMS主要由两种类型细胞组成,即成神经细胞和星型胶质细胞;(2)成神经细胞存在于RMS全长并保持分裂特性,属神经元前体细胞;(3)目前还没有充分的证据证实RMS中存在干细胞。     

成年大鼠嗅黏膜嗅成鞘细胞的纯化

嗅成鞘细胞(OECs)是一种独特的中枢神经胶质细胞,分布于嗅球和鼻腔嗅黏膜,可分泌多种生物活性物质,现已证明来自嗅球的OECs与来自鼻腔嗅黏膜的OECs形态学特征与免疫组织化学性质是一致的,且都具有促进中枢神经系统轴突再生的作用。目前用于移植的OECs多数取材于嗅球,由于嗅黏膜OECs在自体取材上有着方便、快捷和安全性的特点,     

Pax-6在大鼠发育脑喙侧神经干细胞迁移流中的表达

目的 了解大鼠脑发育过程中,喙侧神经干细胞迁移流中不同时期Pax-6表达水平的时空差异。方法 用BrdU对胚胎14d、出生后0、1和7d的Wistar大鼠行活体标记,取各时相点鼠脑,冰冻切片,行BrdU、Nestin、Pax-6和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色,观察Pax-6在脑内增殖细胞中的表达情况,比较在上述4个时相点,Pax-6于室管膜前下区、迁移流主干部分和嗅球3个部分的表达差异。结果 1．在发育中大鼠脑内,Pax-6主要表达于神经干细胞内,在海马增殖细胞亦有较高表达。2．在喙侧神经干细胞迁移流内,Pax-6在迁移流主干部分的表达高于室管膜前下区和嗅球;在胚胎14d的表达与出生后0d和1d相似,表达水平较高,出生后7d迅速下降到很低水平。结论 在大鼠脑发育过程中,Pax-6主要表达于神经干细胞及海马增殖性细胞内,在大鼠出生后,随着大鼠脑的发育,Pax-6于喙侧神经干细胞迁移流的表达迅速减弱,但迁移流主干部分的表达始终高于室管膜前下区和嗅球。     

突触素在大鼠嗅球的分布

用免疫组织化学方法观察突触素在大鼠嗅球各层的分布。结果显示:小球层染色最深,其次为分子层、再其次是颗粒层。僧帽细胞胞体周围未见有明显阳性颗粒,纤维层和髓层不着色。     

大鼠嗅球乙酰胆碱酯酶阳性传入纤维起源的实验研究

本文应用荧光素逆行标记与乙酰胆碱酯酶(AchE)组织化学相结合技术,探索了嗅球AchE阳性传入纤维的起源。经观察在注射区同侧的下列核(区)可发现荧酶双标记细胞:嗅前核后部、斜角带核、屏状核、中缝背核、中央上核和蓝斑。     

大鼠嗅球传入联系的起源

用荧光逆行标记技术,探索大鼠嗅球传入纤维起源。一侧嗅球注入DAPI后,可在下列核(区)内找到DAPI逆行标记细胞:嗅前核、伏隔核、斜角带核、梨状皮质,视前大细胞核、中缝背核、中央上核和蓝斑.以DAPI-PI配对分别注入两侧嗅球后,可在嗅前核和中缝背核找到DAPI-PI逆行双标记细胞。     

成年大鼠脑内具有神经生发功能的脑室下区的细胞形态学研究

为研究成年大鼠脑内具有神经生发功能的侧脑室外侧壁脑室下区 (SVZ)细胞的组成及特征 ,本研究对该区组织切片进行了免疫特异性反应、镀银及铅铀染色 ,在光镜和电镜下进行了观察。结果发现 ,SVZ含有能被溴脱氧尿核苷 (Brd U)标记且具有成神经细胞形态学特征的分裂后细胞 ,还有胶质纤维酸性蛋白阳性细胞和少突胶质样细胞等其他类型细胞。另外发现 ,室管膜(EL)细胞、EL深部细胞、少突胶质样细胞以及不同细胞突起所组成的网络样结构与上述 SVZ成神经样细胞紧密相邻。实验结果表明 ,SVZ成神经样细胞周围可以没有特定的胶质细胞鞘包裹 ,位于侧脑室外侧壁的不同类型细胞可能在 SVZ神经生发过程中具有不同作用。