心肌缺血-再灌注损伤与细胞凋亡关系的研究

制备不同缺血时间的家兔心肌缺血-再灌注损伤模型，行凋亡细胞定量检测及凋亡抑制基因bcl-2检测。发现随着缺血时间延长，凋亡心肌细胞数目逐渐增多，再灌注损伤程度逐渐减轻；心脏在经缺血预处理后，缺血-再灌注损伤程度明显减轻。     

脑缺血再灌注后bcl-2、caspase-3 mRNA水平表达与大脑皮质及纹状体区炎性细胞浸润

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后bcl-2蛋白、caspase-3 mRNA的表达及炎性细胞浸润与神经细胞凋亡的关系。方法将54只Wistar大鼠随机分为二组：假手术组，缺血再灌注组。采用原位末端标记(TUNEL)、免疫组化和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌注后不同时间点神经细胞凋亡及损伤的变化与bcl-2、caspase-3 mRNA表达。结果bcl-2表达于缺血再灌注12～24h达高峰，再灌注2—4d呈下降趋势，至16d略高于假手术组；caspase-3 mRNA于缺血再灌注12—24h达高峰，2—4d呈降低趋势，至16d略高于假手术组。结论脑缺血再灌注后细胞凋亡介导神经细胞损伤、坏死是一个渐进的动态演变过程。bcl-2蛋白、caspase-3 mRNA表达在抑制细胞凋亡和介导神经细胞损伤等方面起非常重要的作用。     

红花黄色素对家兔缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的 通过在体兔心肌缺血再灌注模型,研究红花黄色素对家兔缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡及bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法 24只新西兰大白兔随机分为3组:缺血再灌注组(IR组),红花黄色素组(SY组),药物组(MI组),每组8只.实验终末,取缺血坏死区心肌在光镜、电镜下观察心肌细胞凋亡状况,并且检测bax和bcl-2蛋白在心肌细胞中的表达水平.结果 与IR组相比,SY组能减轻缺血心肌超微结构的改变,并通过上调bcl-2、下调bax表达抑制细胞凋亡.结论 红花黄色素能产生心肌保护作用,RISK信号转导通路可能参与了这一过程.     

低灌注处理对家兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察低灌注处理对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤家兔凋亡基因bcl-2、caspase 3表达及心功能的影响。方法家兔16只随机分为2组:心肌I/R组、低灌注处理组。记录两组家兔缺血前、缺血30 min及再灌180 min时的左室收缩峰压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压最大收缩/舒张变化速率(±dp/dtmax);运用免疫组化法检测心肌组织bcl-2蛋白表达;运用RT-PCR法检测心肌bcl-2、caspase-3 mRNA的表达。结果与对照组比较,低灌注处理组的±dp/dtmax、bcl-2 mRNA表达、bcl-2蛋白表达增高,而caspase-3 mRNA表达降低(P<0.05)。结论低灌注处理上调抑凋亡基因bcl-2、下调促凋亡基因caspase3的表达并能改善心肌I/R家兔的心功能。     

二氮嗪减轻兔心肌缺血再灌注损伤后的心肌细胞凋亡

目的探讨二氮嗪对兔心脏缺血再灌注损伤过程中心肌细胞凋亡和心肌细胞bcl-2和bax基因表达的影响.方法24只兔随机分成假手术组(P组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血预适应组(IP组)和二氮嗪组(DP组).阻断和松开左冠脉前降支制作缺血再灌注模型,缺血5 min/再灌注5 min连续3次循环诱导预适应.DP组在缺血前缓慢静脉注射二氮嗪3 mg/kg.再灌注结束后测算左室心肌梗死面积,取缺血区心肌行TUNEL法检测心肌凋亡细胞和免疫组化检测bcl-2和bax蛋白的表达.结果DP组和IP组梗死面积明显小于IR组(P＜0.001).凋亡细胞百分数DP组(34±5)%和IP组(32±6)%较IR组(56±8)%显著减少(P＜0.001).和IR组相比,bcl-2表达在IP组和DP组明显升高(P均＜0.01),bax基因表达在IP组和DP组则明显降低(P均＜0.001).结论二氮嗪能通过调节bcl-2和bax的表达来减轻兔心肌缺血再灌注损伤后的心肌细胞凋亡.     

抑制p38MAPK对大鼠缺血再灌注损伤心肌中TNF—α表达及细胞凋亡的影响

目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法：将30只SD大鼠按随机数字法随机均分为空白对照组、缺血再灌注组和抑制剂组,各10只。检测各组p38MAPK mRNA表达,TNF—α水平及心肌细胞凋亡率,并进行比较分析。结果：与空白对照组比较,缺血再灌注组TNF-α[（3．68±0．16）μg／L比（5．02±0．09）μg／L3、p38MAPK mRNA的表达[（1．76±0．46）比（2．35±0．02）]和心肌细胞凋亡率[-（3．51±0．40）％比-（1．8±0．23）％]显著升高（P均=0．001）。抑制剂组p38MAPK mRNA的表达[（2．09±0．16）]、TNF-α水平[（4．15±0．11）μg／L]及心肌细胞凋亡[-（2．9±0．50）％]均较缺血再灌注组显著降低（P均=0．001）。结论：通过抑制大鼠心肌p38丝裂原活化蛋白激酶的表达能减少肿瘤坏死因子-α的生成,减少心肌细胞凋亡,进而减轻心肌细胞缺血再灌注损伤。     

心肌细胞内Livin蛋白过表达对大鼠心肌缺血再灌注中细胞凋亡的影响

目的:观察大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中心肌细胞内黑色素瘤凋亡蛋白抑制剂(Livin)蛋白表达变化及Livin蛋白过表达对心肌细胞凋亡的影响。方法:健康SD大鼠80只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、注射表达Livin蛋白的逆转录病毒载体组(Livin组)和空载体组,其中Livin组和空载体组分别向开胸心肌内注射表达Livin的逆转录病毒载体或空载体,24h后行缺血再灌注过程,以实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定心肌组织内Livin和天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信使核糖核酸(mRNA)的表达,免疫组织化学方法检测Caspase-3的表达,以原位缺口末端标记(TUNEL)法测定凋亡心肌细胞。结果:①实时荧光定量RT-PCR扩增结果LivinmRNA相对表达水平:与假手术组比较Livin组显著增高(P0.01);与缺血再灌注组比较Livin组升高(P0.01)。Caspaes-3mRNA相对表达水平:与假手术组相比缺血再灌注组、Livin组、空载体组均增高(P0.01);与缺血再灌注组比较Livin组降低,差异有统计学意义(P0.01)。②免疫组化显示:与假手术组比较缺血再灌注组、Livin组、空载体组缺血再灌注过程中Caspase-3的表达明显增加(P0.05);与缺血再灌注组比较Livin组表达减少(P0.05),差异均有统计学意义。③TUNEL法检测:与缺血再灌注组比较假手术组、Livin组凋亡细胞数明显减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:心肌Livin蛋白过表达可以抑制缺血再灌注心肌Caspase-3表达,抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡的发生。     

p38丝裂原活化蛋白激酶介导大鼠心肌缺血再灌注损伤信号传导的研究

目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法:健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、单纯缺血组、缺血再灌注组、抑制剂组,每组6只.抑制剂组于术前30 min腹腔注射p38MAPK抑制剂SB 203580(5 mg/kg体重).采用夹闭冠状动脉30 min后再灌注2 h的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤动物模型.采用逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)检测p38MAPK信使核糖核酸(mRNA)表达,免疫组化法检测p-p38MAPK蛋白表达水平及心肌细胞凋亡率.结果:单纯缺血组与对照组比较,大鼠心肌组织中p-p38MAPK的蛋白含量增加,差异有统计学意义(P<0.01),p38MAPK mRNA的表达及细胞凋亡率也增加,但差异无统计学意义(P>0.05).缺血再灌注组与对照组比较,心肌组织中p38MAPK mRNA及p-p38MAPK蛋白水平和心肌细胞凋亡均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).与缺血再灌注组比较,抑制剂组大鼠心肌组织p38MAPK mRNA及p-p38MAPK蛋白水平及心肌细胞凋亡均降低,(P<0.05~0.001),差异均有统计学意义.结论:p38MAPK的激活主要发生于再灌注过程;p38MAPK的活化可使缺血再灌注心肌细胞凋亡增加;抑制p38MAPK的活化可以减少缺血再灌注心肌细胞凋亡,减轻缺血再灌注所致的大鼠心肌损伤.     

Tei指数、caspase-3 mRNA、bcl-2 mRNA检测在心肌缺血再灌注损伤中的应用价值

目的 探讨Tei指数、caspase-3 mRNA及bcl-2 mRNA表达与心肌缺血再灌注（IR）损伤的关系.方法 将新西兰大耳白兔16只随机均分为假手术组和IR组.IR 180 min后,检测其左心室Tei指数及心功能指标;并用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡灰度,半定量RT-PCR法检测caspase-3 mRNA、bcl-2 mRNA表达.结果 与假手术组比较,IR组Tei指数升高,左室射血分数降低,细胞凋亡灰度值、caspase-3 mRNA表达升高,bcl-2 mRNA表达降低（P均＜0.05）.结论 Tei指数、caspase-3 mRNA、bcl-2 mRNA与心肌细胞凋亡的相关性良好,可作为判定心肌IR损伤的有效指标.     

缺血后处理和三磷酸腺苷后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察缺血后处理(IPO)、ATP和腺苷受体激动剂CGS-21680后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法健康新西兰大白兔48只,随机分为对照组、IPO组、ATP组、CGS-21680组,每组12只。测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力;计算各组兔心肌梗死面积;HE染色观察心肌组织病理形态变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;实时荧光定量RT-PCR检测心肌组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)mR NA和Bcl-2 mRNA的表达。结果与对照组比较,IPO组、ATP组和CGS21680组血清丙二醛、CK-MB水平及心肌梗死面积明显降低,SOD活力明显升高。IPO组、ATP组和CGS-21680组心肌细胞凋亡指数较对照组明显降低,心肌组织损伤明显减轻。IPO组、ATP组和CGS-21680组较对照组caspase-3 mRNA表达明显下调,Bcl-2 mRNA表达明显上调。结论 IPO与ATP后处理可通过激活腺苷A2a受体,减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与上调Bcl-2和下调caspase-3的表达,抑制氧自由基氧化应激损伤,减少细胞凋亡有关。     

Y-27632预处理对心肌缺血再灌注损伤过程中d凋亡的影响研究

目的：探讨Rho激酶抑制剂Y-27623对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中细胞凋亡的影响,以及对丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）和凋亡相关蛋白表达水平的变化和意义。方法：成年雄性SD大鼠60只, 随机分为4组（n=15）:正常对照组(Sham组) 、缺血再灌注组(ischemia-reperfusion即I/R组) 、Dil组( diltiazem即地尔硫卓组)、Y-27632组。Dil组每日给予地尔硫卓(10mg/kg)灌胃, Y-27632组每日给予Y-27632（5mg/kg）,其余两组给予等体积清水。给药五天后Sham组只穿线,不结扎冠状动脉左前降支,I/R组、Dil组和Y-27632组建立MIRI模型。TUNEL法检测各组心肌凋亡,计算心肌细胞凋亡指数(AI),western blotting 法检测心肌组织中MAPK信号传导途径相关蛋白（p-JNK/ERK/P38）和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9）的表达。结果：相对于Sham组,I/R组AI明显增加（P<0.01）,MAPK信号传导途径和心肌促凋亡相关蛋白（Bax、Caspase-3和Caspase-9）表达显著增加（均为P<0.05）,心肌抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著减少（P<0.05）;相对于I/R组,Y-27632治疗组AI明显下降（P<0.01）,与Dil治疗组没有显著差异(P>0.05),Y-27632治疗组MAPK信号传导途径相关蛋白和Bax、Caspase-3和Caspase-9表达均显著降低（P<0.05）,Bcl-2表达显著增加（P<0.05）,与Dil治疗组没有显著差异(P>0.05)。结论：Y-27632通过抑制JNK/ERK/P38的磷酸化,抑制Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达,加强Bcl-2的表达,来减少心肌细胞的凋亡,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。     

Modulation of constitutive nitric oxide synthase, bcl-2 and Fas expression in cultured human coronary endothelial cells exposed to anoxia-reoxygenation and angiotensin II: role of AT1 receptor activation.

BACKGROUND: Angiotensin II (Ang II) plays a critical role in the pathophysiology of myocardial ischemia-reperfusion injury. We have recently shown that reoxygenation following a period of anoxia causes apoptosis of cultured human coronary artery endothelial cells (HCAECs). Ang II further enhances apoptosis of HCAECs via Ang II type 1 receptor (AT1R) activation. Recent studies suggest an important role of constitutive nitric oxide synthase (cNOS), Fas and bcl-2 proteins in apoptosis. This study was designed to examine the modulation of cNOS, and Fas and bcl-2 expression in HCAECs during exposure to anoxia-reoxygenation and Ang II. METHODS AND RESULTS: HCAECs were exposed to anoxia-reoxygenation and Ang II. Anoxia-reoxygenation significantly decreased cNOS mRNA, protein and activity in cultured HCAECs (P < 0.05 vs. control). Anoxia-reoxygenation also caused an increase in Fas and a decrease in bcl-2 protein expression in cultured HCAECs (both P < 0.05 vs. control). The presence of Ang II (0.3 microM) further enhanced these effects of anoxia-reoxygenation on cNOS, Fas and bcl-2 expression. The effects of Ang II were significantly attenuated by the AT1R inhibitor losartan (10 microM). CONCLUSION: During exposure of HCAECs to anoxia-reoxygenation and Ang II, AT1R activation induces important changes in cNOS mRNA, protein expression and activity, as well as bcl-2 and Fas protein expression which may have a bearing on the development of apoptosis.     

缺血预处理抑制减体积肝移植大鼠早期肝细胞凋亡的研究

目的探讨缺血预处理（IPC）对减体积肝移植大鼠再灌注损伤早期细胞凋亡的影响。方法建立50%减体积大鼠肝移植模型,将72只成年雄性SD大鼠随机分为两组：对照组和IPC组,检测术后2、6、24 h血清丙氨酸转氨酶（ALT）水平变化及组织病理学变化;TUNEL法检测术后24 h肝细胞凋亡指数;免疫组织化学检测bcl-2和caspase-3蛋白表达。结果与对照组比较,IPC组术后6、24 h ALT水平下降,术后24 h肝损伤减轻,肝细胞凋亡指数、caspase-3表达均下降,而抗凋亡蛋白bcl-2表达增加（P均〈0.01）。结论 IPC明显减轻减体积肝移植术后再灌注损伤,其机制与通过上调bcl-2、下调caspase-3蛋白表达,从而抑制肝脏细胞凋亡相关。     

依达拉奉对大鼠心肌再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对大鼠心肌再灌注损伤的保护作用及机制。方法将造模成功的24只Wistar大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(再灌注组)、保护组,每组8只。实验结束后检测各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛水平;光学显微镜观察心肌形态;采用TUNEL和免疫组织化学法分别检测心肌细胞凋亡及心肌凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果与对照组比较,再灌注组大鼠CK MB、丙二醛水平明显升高,GSH-PX活性明显降低,Bcl-2、Bax、Bax/Bcl-2明显升高(P0.01);与再灌注组比较,保护组大鼠CK-MB、丙二醛水平明显降低,GSH-PX活性明显升高,Bcl-2明显升高,Bax、Bax/Bcl-2明显降低(P0.01)。与保护组比较,再灌注组大鼠可见大面积心肌梗死,凋亡细胞数明显增加(P0.01)。结论依达拉奉能够减轻大鼠心肌损伤程度,其机制与减少自由基损伤、抑制心肌细胞凋亡有关。     

慢病毒介导p38MAPK基因沉默对高糖诱导成骨细胞凋亡的影响

目的 观察p38丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)在高糖诱导的MC3T3-E1成骨细胞凋亡中的作用,并探讨其对凋亡相关信号分子caspase-3、bax及bcl-2表达的影响.方法 构建靶向p38MAPK的shRNA慢病毒载体,将体外培养的MC3T3-E1成骨细胞分为正常对照组(A组)、高糖组(B组)、p38MAPK-shRNA慢病毒转染组(C组)、信号转导阻断剂组(D组)和无关shRNA转染组(E组).RT-PCR检测细胞p38MAPK mRNA的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测p38MAPK、p-p38 MAPK、caspase-3、bax、bcl-2蛋白水平,透射电镜观察细胞超微结构.结果 构建靶向p38MAPK的shRNA慢病毒载体,并成功导入MC3T3-E1成骨细胞.与高糖组和无关转染组相比,p38MAPK-shRNA转染能显著抑制高糖诱导的MC3T3-E1细胞p38MAPK过度活化,明显减少细胞的凋亡(P＜0.01);同时,p38MAPK-shRNA转染及p38MAPK阻断剂明显降低MC3T3-E1细胞中p38MAPK、p-p38MAPK、caspase-3及促凋亡基因bax蛋白表达,上调凋亡抑制基因bcl-2,与高糖组和无关转染组相比,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论 慢病毒介导p38MAPK靶向RNA干扰可通过抑制p38MAPK 信号通路的活化,降低p-p38MAPK、caspase-3、bax表达,上调bcl-2表达,最终抑制高糖所诱导的MC3T3-E1成骨细胞的凋亡.

Abstract：

Objective To examine the role of p38MAPK in high glucose-induced apoptosis of osteoblast MC3T3-E1 cell line, and to investigate its effect on the expressions of apoptosis-related molecules including caspase3, bax, and bcl-2. Methods The lentiviral vector containing short hairpin RNA targeting p38MAPK was constructed. The cultured osteoblast MC3T3-E1 cell were divided into 5 groups:normal control group(A group), high glucose group(B group), p38MAPK-shRNA transfection group(C group), signal transduction inhibitor group(D group), and transfection with negative control siRNA group(E group). RT-PCR was used to determine the p38MAPK mRNA expression levels in MC3T3-E1 cells. Flow cytometry(FCM)was employed to detect the cell apoptotic percentage. The protein levels of apoptosis-related molecules p38MAPK, p-p38MAPK, caspase-3, bax, and bcl-2 were assayed by Western blot. Ultrastructural alternation of MC3T3-E1 cell was observed under transmission electron microscopy(TEM). Results The lentiviral vector containing short hairp in RNA targeting p38MAPK was successfully constructed and transfected into MC3T3-E1 cells. RT-PCR result suggested that the siRNA targeting p38MAPK could effectively reduce the p38MAPK mRNA expression level induced by high glucose in MC3T3-E1 cell line. FCM showed siRNA significantly decreased high glucose-induced apoptosis percentage of MC3T3-E1 cells(P＜0.01). Meanwhile, we also found the siRNA significantly attenuated the proteins levels of p38MAPK, p-p38MAPK, caspase-3, and gene bax induced by high glucose in MC3T3-E1 cells, whereas the protein level of gene bcl-2 was enhanced remarkably when compared with high glucose group and negative control siRNA group(P＜0.01, P＜0.05).Conclusion The iRNA targeting p38MAPK suppressed high glucose-induced MC3T3-E1 cell apoptosis via inhibiting the activation of p38MAPK signaling pathway, thereby reducing the expressions levels of p-p38MAPK, caspase-3 and gene bax, and up-regulating the level of gene bcl-2.     

模拟失重对大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨模拟失重对体外培养的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法: 以原代培养的乳鼠心肌细胞为研究对象,以细胞回转器模拟失重效应,通过流式细胞检测技术观察模拟失重96 h对心肌细胞凋亡率的影响,进一步通过RT-PCR的方法,检测模拟失重96 h后,心肌细胞凋亡相关基因p53、bcl-2和caspase-3 mRNA表达的影响。结果: 模拟失重96 h可显著增高心肌细胞的凋亡率(P<0.05),与对照组相比,回转器模拟失重可显著增高促凋亡基因p53、caspase-3 mRNA的表达(P<0.05),而抑凋亡基因bcl-2 mRNA则表达显著减低(P<0.05)。结论: 回转器模拟失重96 h致心肌细胞凋亡表达增高,其可能机制是凋亡相关基因表达失衡有关。     

Tumor necrosis factor-α mediates JNK activation response to intestinal ischemia-reperfusion injury

AIM:To investigate whether tumor necrosis factor-α(TNF-α)mediates ischemia-reperfusion(I/R)-induced intestinal mucosal injury through c-Jun N-terminal kinase(JNK)activation.METHODS:In this study,intestinal I/R was induced by 60-min occlusion of the superior mesenteric artery in rats followed by 60-min reperfusion,and the rats were pretreated with a TNF-α inhibitor,pentoxifylline,or the TNF-α antibody infliximab.After surgery,part of the intestine was collected for histological analysis.The mucosal layer was harvested for RNA and protein extraction,which were used for further real-time polymerase chain reaction,enzyme-linked immunosorbent assay and Western blotting analyses.The TNF-α expression,intestinal mucosal injury,cell apoptosis,activation of apoptotic protein and JNK signaling pathway were analyzed.RESULTS:I/R significantly enhanced expression of mucosal TNF-α at both the mRNA and protein levels,induced severe mucosal injury and cell apoptosis,activated caspase-9/caspase-3,and activated the JNK signaling pathway.Pretreatment with pentoxifylline markedly downregulated TNF-α at both the mRNA and protein levels,whereas infliximab pretreatment did not affect the expression of TNF-α induced by I/R.However,pretreatment with pentoxifylline or infliximab dramatically suppressed I/R-induced mucosal injury and cell apoptosis and significantly inhibited the activation of caspase-9/3 and JNK signaling.CONCLUSION:The results indicate there was a TNFα-mediated JNK activation response to intestinal I/R injury.     

棓丙酯对高糖诱导人肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察樯丙酯对高糖诱导人肾小管上皮细胞损伤的保护作用.方法 传代培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,分为对照组、高渗组、高糖组、处理组1（桔丙酯浓度2μg/ml）和处理组2（棓丙酯浓度4μg/ml）,观察各组细胞增殖能力、凋亡率、活性氧（ROS）水平以及bcl-2和BaxmRNA的表达情况.结果 高糖刺激HK-2细胞后,细胞增殖能力下降、凋亡增加、ROS水平升高、bcl-2 mRNA表达减少、Bax mRNA表达增多.棓丙酯可以提高细胞增殖能力,减少凋亡,降低ROS水平,上调bcl-2 mRNA表达以及下调BaxmRNA表达;处理组2上述改变较处理组1明显（P均＜0.05）.结论 桔丙酯改善高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤,其机制可能与减轻氧化应激、上调bcl-2 mRNA表达以及下调Bax mRNA表达有关.     

白藜芦醇对心肌微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察白藜芦醇对缺血再灌注损伤心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)的保护作用。方法培养大鼠CMECs,模拟缺血再灌注损伤,随机分为对照组、缺血再灌注组及白藜芦醇组,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测CMECs凋亡率;酶联免疫吸附法检测半胱天冬酶3(caspase-3)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组比较,缺血再灌注组和白藜芦醇组吸光度值明显降低(P<0.01);CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量、SOD活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05.P<0.01);与缺血再灌注组比较,白藜芦醇组吸光度值、SOD活性明显升高[(0.47±0.06)vs(0.14±0.04),(28.9±2.9)μU/L vs(22.4+2.2)μU/L,P<0.01];CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量明显降低.差异有统计学意义[(15.6±0.4)%vs(38.6±0.6)%,(152.1±13.3)vs(307.2±25.3),(9.2±0.7)μmol/L vs(13.5±1.2)μmol/L,P<0.01]。结论白藜芦醇可减轻CMECs的缺血再灌注损伤,这种保护作用可能是通过抗氧化和抗调亡来实现。