高压氧对缺氧缺血新生大鼠脑组织存活素及细胞凋亡蛋白酶-3表达的影响

目的 观察高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)后脑组织存活素(survivin)及细胞凋亡蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响,并探讨其保护机制.方法 144只7 d龄SD大鼠随机分为对照组(n=16)、新生HIBD组(n=64)及HBO治疗组(n=64).采用经典的Rice法制作缺氧缺血性脑损伤模型,应用Epics XL流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并应用免疫组织化学法检测Survivin和Caspase-3表达变化.结果 与对照组相比,HIBD组细胞凋亡率及Survivin、Caspase-3表达水平明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).通过相关性分析,HBO治疗可促进存活素表达,其表达水平和caspase-3表达负相关.结论 HBO可能通过增加抗凋亡因子Survivin表达来抑制Caspase-3激活,减少缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡,发挥神经保护作用.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织颗粒酶b表达的影响

目的 研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑组织颗粒酶b的表达及高压氧(HBO)的治疗作用.方法 110只7 d龄SD大鼠随机分为假手术组(n=10)、HIBD组(n=50)及HBO治疗组(n=50).采用经典的Rice法制作缺氧缺血性脑损伤模型.应用免疫组织化学法检测颗粒酶b表达变化及应用Epics XL流式细胞仪检测伤侧脑组织细胞凋亡情况.结果 缺氧缺血后6 h,HIBD组和HBO组伤侧脑组织颗粒酶b表达水平和细胞凋亡率即明显升高,于1 d达到峰值后开始下降,至7 d仍明显高于假手术组(P<0.05).HBO组伤侧大脑中颗粒酶b表达水平及细胞凋亡率在缺氧缺血后12 h和1、3、7 d均明显低于HIBD组(P<0.05).结论 新生大鼠HIBD后颗粒酶b表达增加;HBO可抑制新生大鼠HIBD后颗粒酶b的表达,减少缺氧缺血后神经元凋亡的发生,发挥脑保护作用.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮质线粒体生物合成的影响

 目的 观察高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮质线粒体生物合成的影响及其相关信号通路。方法 新生7日龄Wistar大鼠48只随机分为假手术组(Sham,16只),HIBD模型组(HIBD,16只)和高压氧治疗HIBD组(HBO+HIBD,16只)。结扎左侧颈总动脉后暴露于92% 氮气和8%氧气缺氧环境中2 h 制备HIBD 模型。HIBD +HBO 组在缺氧缺血后给予高压氧干预,每次持续90 min,每日1次,连续7 d。末次高压氧干预后24 h,每组动物随机抽取8只处死,检测脑皮质COXⅣ、PGC-1α、Tfam和NRF1表达。剩余动物饲养至40日龄进行Morris水迷宫检测。结果 HBO+HIBD组与HIBD组比较,逃避潜伏期显著缩短[(21.49 ±3.77)s vs (42.50±6.46)s,P<0.01],穿越平台次数、COXⅣ、PGC-1α、Tfam和NRF1表达均显著升高[分别为(7.41±1.13)次 vs (5.26±0.78)次,(82.15±14.84)kPa vs (62.83±11.02)kPa,(112.19±18.41)kPa vs (67.26±10.40)kPa,(92.15±13.99)kPa vs (76.40±9.32)kPa和(72.29±12.88)kPa vs (49.28±7.14)kPa,P<0.05~0.01]。结论 高压氧可通过上调PGC-1过-NRF1/Tfam通路促进脑皮质线粒体生物合成,从而改善大鼠HIBD后空间学习记忆能力。     

高压氧、脑源性神经营养因子联合治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的 观察高压氧(HBO)、脑内注射脑源性神经营养因子(BDNF)联合治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBI)的疗效。方法 7d龄SD大鼠左侧颈总动脉结扎联合低氧吸入形成HIBI后，即刻脑室注射BDNF(0．5μg)并行HBO治疗(A)或常氧高压氮处理(B)，设单纯HIBI组(C)、假手术组(D)和正常组(E)，观察对脑水肿、皮层和海马脂质过氧化物(MDA)水平和细胞凋亡百分率的影响。结果 A，B组脑水肿程度、MDA和细胞凋亡百分率水平均显著低于C组；脑水肿程度、细胞凋亡百分率A组显著低于B组，尤以脑水肿降低更明显，接近于D组，MDA水平两组相差无显著意义。结论 联合应用HBO及脑室注射BDNF治疗可显著减轻HIBI后的脑损伤，其效果优于BDNF 常氧高压氮处理组，表明在HIBI的治疗中HBO与BDNF联合应用起到了协同作用。     

大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗对细胞凋亡和Caspase-3、Fas表达的影响

目的　研究大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗后肿瘤细胞凋亡的时程变化和Caspase 3、Fas的表达。方法　立体定向法制作C6大鼠脑胶质瘤模型 6 0只 ,分为治疗组和对照组 ,治疗组于肿瘤接种后 14d行伽玛刀治疗 ,治疗后不同时间点行流式细胞学检查测定肿瘤细胞的凋亡率以及Caspase 3和Fas基因蛋白表达情况 ,分析凋亡率与两种蛋白的相关性。结果　与对照组相比 ,治疗组肿瘤细胞的凋亡率明显增高 (P <0 0 5 ) ,治疗后 4 8h肿瘤细胞凋亡率达高峰 ,然后逐渐下降 ;Caspase 3和Fas的表达情况与凋亡率的变化呈正相关 (r1 =0 92 8,r2 =0 916 )。结论　肿瘤细胞的凋亡为伽玛刀治疗胶质瘤疗效之一 ,Caspase 3和Fas基因可能参与和调节伽玛刀照射后肿瘤细胞凋亡。     

高压氧治疗新生鼠缺氧缺血性脑病的病理学观察

目的：运用病理学手段观察高压氧治疗新生鼠缺氧缺血性脑病（HIE）疗效。方法：7d龄SD大鼠40只,结扎左侧颈总动脉,建立HIE模型,分为2组,一组给高压氧连续7d治疗,另一组为HIE对照组。7d后处死动物,观察大脑改变。结果：高压氧治疗组（HOB组）与损伤对照组（HIE组）都具有（1）神经元细胞变性,坏死;脑充血,水肿;胶质细胞增生,胶质结节形成;透明血栓生成等基本病变。（2）软化、空洞及钙化等继发性改变。HIE组与HBO治疗组统计学处理结果提示其损伤程度无明显差异（P＞0．05）。结论：本组资料显示高压氧治疗新生鼠缺氧缺血性脑病无明显效果,在方法学及疗效上值得商榷。     

高压氧对新生儿缺氧缺血性脑病的预后影响

目的探讨高压氧(HBO)对缺氧缺血性脑病(H IE)的远期疗效。方法将90例符合H IE诊断标准的足月新生儿分为两组。治疗组50例,对照组40例。对照组仅给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用HBO。结果治疗10 d后治疗组患儿的脑电图异常率,特别是重度异常率明显低于对照组(χ2=8.2,P<0.05);治疗1个月后治疗组头颅CT异常明显低于对照组(χ2=7.89,P<0.05);治疗3个月后治疗组DQ明显优于对照组(χ2=10.98,P<0.05)。结论高压氧对足月新生儿缺氧缺血性脑病的治疗作用明显,疗效肯定。     

高压氧治疗对大鼠脑挫裂伤后细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响

目的探讨高压氧(HBO)对创伤性脑损伤的治疗作用与对细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响之间的关系。方法制作SD大鼠自由落体脑挫裂伤动物模型,设立HBO治疗组和对照组,分别应用透射电镜、原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞技术对各组动物脑挫伤灶旁和海马结构的细胞凋亡情况进行检测;使用WesternBlot和免疫组化方法,检测bcl-2和Bax蛋白在脑组织中的表达情况。结果脑外伤后存在细胞凋亡,细胞凋亡的发生在伤后24h达到高峰,HBO治疗组在伤后24h和48h细胞凋亡发生率低于相应的对照组(P<0.05);脑挫裂伤灶和海马结构bcl-2蛋白的表达均增强,HBO治疗组bcl-2的表达强于对照组(P<0.05),而Bax的表达在各组间差异无统计学意义。结论HBO治疗对创伤性脑损伤后细胞凋亡的发生及凋亡相关蛋白的表达有影响,抑制细胞凋亡很可能是HBO对创伤性脑损伤治疗作用的重要机制。     

不同时间窗高压氧联合鸢尾素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元细胞凋亡及BDNF/TrkB信号通路的影响

目的分析不同时间窗高压氧(HBO)联合鸢尾素治疗对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马神经元细胞凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号通路的影响。方法选取7日龄新生SD大鼠36只, 采用随机数字表法分为H0、H1、H2、H3、H4、H5组, 每组各6只, 除H0组外均建立HIBD模型, 其中H2、H3、H4、H5组分别在HIBD后6、24、48、72 h予以HBO联合鸢尾素治疗。分别采用苏木精-伊红染色(HE)、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)观察海马组织形态和神经元细胞凋亡率, 采用逆转录聚合酶链反应及Western blotting法分别测定BDNF和TrkB的基因及蛋白表达水平。结果与H0组比较, 其余各组海马神经元细胞受损较严重, 大量神经元细胞发生凋亡, 其中H1组损伤最明显;H2组神经元细胞凋亡率高于H0组, 但低于H1、H3、H4、H5组;H4、H5组神经元细胞凋亡率高于H0、H2、H3组, 低于H1组, 差异均有统计学意义(P<0.05)。H2组BDNF和TrkB的基因及蛋白表达水平均高于H1、H3、H...     

高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经肽Y1-36和降钙素基因相关肽含量的影响

目的 观察高压氧（HBO）治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后血浆和大脑皮层的神经肽Y1-36（NPY）和降钙素基因相关肽（CGRP）含量的动态变化。方法 7d龄新生大鼠左侧颈总动脉结扎形成缺血,并吸低氧氮混合气形成缺氧,随机分为脑缺氧缺血 常氧高压氮组,脑缺氧缺血 HBO治疗组,假手术组和正常对照组,再按不同时间各分成4个小组,新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后即刻行HBO治疗,用放射免疫分析法测定治疗后不同时间血浆和大脑皮层的神经肽Y1-36和降钙素基因相关肽免疫活性物质（ir-NPY,ir-CGRP)含量的变化。结果 缺氧缺血性脑损伤后不同时间,血浆ir-NPY和ir-CGRP,双侧皮层ir-NPY,伤侧皮层ir-CGRP含量不同程度升高;HBO治疗,可部分抑制血浆ir-NPY,ir-CGRP的升高,左侧皮层ir-NPY水平的升高被明显抑制,右侧皮层ir-CGRP水平受影响较小。结论 缺氧缺血性性脑损伤的发生发展与外周及中枢神经肽Y1-36和降钙素基因相关肽的过量生成有关,HBO治疗降低外周神经肽Y1-36和降钙素基因相关肽,降低伤侧脑区神经肽Y1-36的水平,可能是减轻缺氧缺血性脑损伤的作用途径之一。     

早期高压氧暴露对大鼠脑外伤后脑组织水通道蛋白-4和半胱天冬酶-3表达的影响

目的观察早期高压氧（hyperbaric oxygen，HBO）暴露对实验大鼠脑外伤后水通道蛋白-4（aquaporin-4，AQP-4）和半胱天冬酶-3（caspase-3）的影响，探讨高压氧对脑外伤的治疗作用及脑保护的分子生物机制。方法采用Feeney自由落体法建立大鼠脑外伤模型，将大鼠随机分为假手术组、创伤组和HBO组，HBO组在损伤后1h内给予高压氧治疗，第4天用干湿重法测脑组织含水量、免疫组织化学法及图像分析技术检测AQP-4和caspase-3，用双重染色免疫组化法检测AQP-4与S100。结果与创伤组比较，大鼠脑外伤后早期给予高压氧能显著降低脑含水量及AQP-4和caspase-3的表达（P〈0．05）。结论早期高压氧治疗能减少大鼠脑外伤后AQP-4和caspase-3的表达，高压氧对创伤性脑损伤的脑保护机制可能与减轻神经胶质细胞介导的细胞性脑水肿、减少神经细胞凋亡有关。     

高压氧预处理对新生大鼠脑缺血损伤的保护作用

目的 观察高压氧预处理后缺氧缺血型脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)新生大鼠脑组织神经干细胞增殖变化以及后期脑发育和功能.方法 将6日龄新生大鼠进行0.25 MPa高压氧预处理150 min,24 h后制作HIBD模型,然后暴露于8%氧、92%氮的混合气中90 min.观察皮层和海马神经干细胞的增殖情况、损伤后大鼠体质量增长率和成年后脑形态,水迷宫检测学习记忆功能.结果 高压氧预处理组神经干细胞增殖显著,发育情况、脑形态和学习记忆功能与HIBD组有显著差异.结论 高压氧预处理可能通过促进神经干细胞增殖发挥对新生大鼠HIBD的保护作用并影响后期脑发育.     

高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病远期疗效分析

目的　研究高压氧 (HBO)对新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)远期疗效的影响程度。方法　将同期住院的 60例 HIE患儿随机分为 HBO组与对照组各 3 0例 ,两组在采取完全相同常规药物治疗的基础上 ,HBO组接受 HBO治疗 ,1次 / d,共 1 0 d。治疗后 5～ 7年对 HBO组 2 8例 (失访 2例 )、对照组 2 6例 (死亡 1例、失访 3例 )进行集中测查 ,采用龚耀先主持修订的中国韦氏幼儿智力量表 (C-WYCSI)进行智力测验 ,并做详细的体格、神经系统、头颅 CT、X线胸片、鼓膜、视网膜及视听检查。结果　 HBO组患儿后遗症的发生率 (2 / 2 8)低于对照组 (8/ 2 6) ,差异有显著性 ,χ2 =4.99,P<0 .0 5;HBO组总智商 (FIQ)92 .89± 1 5.78、言语智商 (VIQ) 93 .99± 1 6.91、操作智商 (PIQ) 89.1 8± 1 5.0 2均高于对照组 (FIQ82 .2 7± 1 9.80、VIQ 83 .1 2± 2 1 .2 5、PIQ78.96± 2 1 .45) ,差异有显著性 ,t值≥ 2 .1 0 ,P<0 .0 5;HBO组患儿智力缺损及边界状态的发生率 (4/ 2 8)明显低于对照组 (9/ 2 6) ,差异有显著性 ,χ2 =4.46,P<0 .0 5。两组患儿体格发育各项指标均在正常范围。结论　 HIE患儿在常规药物治疗基础上 ,配合 HBO治疗效果肯定 ,能够明显改善远期预后 ,提高智商水平 ,降低致残率。未发现肺发育不良及晶体后纤维增生等副     

高压氧治疗对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡和超微结构的影响

目的 探讨高压氧对糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡和超微结构的影响.方法 8只Wistar大鼠为正常对照组(对照组),空腹血糖16.7 mmol/L以上的24只Goto-Kakizaki (GK)大鼠,根据血糖高低排序后采用数字表法分为模型组、二甲双胍组、高压氧组,每组8只.对照组、模型组、高压氧组每天按5 ml/kg灌服纯净水,二甲双胍组按250 mg/kg灌服二甲双胍混悬液,高压氧组每天1次高压氧治疗.3周后,各组大鼠用异氟醚麻醉后取胰腺,部分组织制成电镜切片观察,部分组织制成石蜡切片后分别进行苏木素-伊红(HE)染色、原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)法检测胰岛细胞凋亡,免疫组织化学二步法对胰岛进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)标记.结果 电镜观.察到模型组胰岛细胞线粒体明显肿胀、脱颗粒、呈空泡状,高压氧组胰岛细胞线粒体病变较模型组病变轻.各组均有胰岛细胞凋亡发生,高压氧组凋亡指数(AI)为(1.57±0.33)％,caspase-3阳性细胞积分光密度值(IOD)为10.22 ±4.61,模型组AI和IOD值分别为(4.88±0.51)％和14.65 ±4.8,2组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),与对照组[AI为(1.16±0.31)％,IOD值为5.36 ±2.34]、二甲双胍组[AI为(1.72±0.14)％,IOD值为9.37 ±4.64]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 高压氧可保护线粒体膜,减轻高血糖对线粒体的损伤,抑制2型糖尿病大鼠胰岛细胞的凋亡和caspase-3抗原的表达,有利于糖尿病的治疗.     

高压氧对脑损伤大鼠行为学的影响

目的 研究高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗对脑损伤大鼠行为学的影响,为临床HBO治疗颅脑损伤提供实验依据.方法 Wistar雄性大鼠21只,随机分成HBO治疗组、脑损伤组及正常对照组,每组7只.应用液压撞击仪制作侧位液压冲击脑损伤大鼠模型,HBO组于术后24 h开始行HBO治疗,1次/d,连续10 d.各组从术后第6天开始应用Morris水迷宫实验测试并比较大鼠的行为能力、学习和记忆能力.结果 定位航行实验:前5 d的逃避潜伏期正常对照组HBO组>脑创伤组,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 HBO治疗对脑损伤大鼠学习、记忆能力的恢复有促进作用.     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血脑组织中强啡肽含量的影响

目的观察高压氧治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBI）后脑内强啡肽A（1-13）浓度的动态变化规律。方法7d龄SD大鼠左侧颈总动脉结扎联合低氧吸入形成HIBI模型，在HIBI后施以高压氧治疗（A组），并设HIBI＋常氧高压氮组（B组）、单纯HIBI组（C组）、假手术组（D组）和正常组（E组）。观察各组处理后不同时间左侧皮层、海马、纹状体和血浆强啡肽A（1-13）免疫活性物质（ir-DynA（1-13））含量的变化。结果高压氧单次处理后，A组皮层和海马中ir-DynA（1-13）含量较B组含量均显著降低（P〈0．01），但皮层ir-DynA（1-13）含量较D组仍显著升高（P〈0．05）；7次高压氧处理后，A组皮层、海马中ir-DynA（1-13）含量较B组仍显著降低（P〈0．05）。单次处理后与B或C组比较，A组血浆中ir-DynA（1-13）含量显著降低。结论强啡肽A（1-13）参与新生大鼠HIBI的病理生理过程，抑制中枢神经强啡肽A（1-13）水平的异常改变，是高压氧治疗新生大鼠HIBI的机制之一。     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤大鼠神经细胞凋亡及炎性因子的影响

目的 探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)大鼠神经细胞凋亡以及炎性细胞因子水平的影响.方法 成年雄性SD大鼠42只,随机分为对照组(6只)、空气加压组(18只)和高压氧(hyperbaric oxyen,HBO)治疗组(18只).采用Pulsineli法制作脑缺血大鼠模型.HBO治疗组第1、3、5天分别给予HBO治疗,1次/d.应用TUNEL染色检测大鼠海马神经元数量,同时检测大鼠细胞因子TNF、IL-1β和IL-6水平.结果 HBO治疗能有效抑制脑缺血引起的细胞因子TNF、IL-1β、IL-6释放(P<0.05或0.01),并减轻大鼠海马区神经元损伤,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBO治疗可以有效抑制炎性细胞因子的释放,从而保护脑缺血后神经细胞.