克霉唑对皮肤移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化的影响

目的探讨克霉唑在体使用对皮肤移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化的抑制作用。方法建立SD对Wistar大鼠移植皮肤模型，术后随即分组，使用克霉唑、环胞霉素在体干预，分离T淋巴细胞体外培养，MTT法测定T淋巴细胞增殖反应及IL-2活性，流式细胞仪测定T淋巴细胞增殖各周期变化。结采克霉唑可以抑制T淋巴细胞增殖反应及IL-2活性，克霉唑处于C0／G1期的细胞数目明显增多，同时S期和G2＋M期的的细胞数目明显减少，其作用差于环胞霉素，但克霉唑和环胞霉素合用作用优于单用环胞霉素．结论克霉唑对移植排斥反应有抑制作用，此作用与阻断T淋巴细胞IKCa1通道有关，克霉唑对环胞霉素有协同作用。     

桂枝汤对痹证小鼠T淋巴细胞的调节作用

目的:探讨桂枝汤对痹证T淋巴细胞的调节作用.方法:外周全血中T淋巴细胞亚群用免疫荧光标记流式细胞仪计数,脾脏中T、B淋巴细胞增殖功能用MTT法测定.结果:外周全血中CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞在应用桂枝汤后数量均降低,脾脏来源的T淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后降低,B淋巴细胞对丝裂原细菌脂多糖(LPS)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后无变化.结论:桂枝汤能减少外周血中T淋巴细胞的数量且对脾脏中T淋巴细胞的功能具有抑制作用.     

TRAM 34抑制腹腔心脏移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化

目的：探讨TRAM34离体使用对心脏移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化的抑制作用。方法：建立SD对Wistar大鼠腹腔心脏模型，术后7日制备受体鼠脾细胞悬液与受体系SD心肌细胞共培养，共培养使用克霉唑、环孢霉素离体干预，5日后分离T淋巴细胞。MTT法测定T淋巴细胞增殖反应度IL-2活性，流式细胞仪测定T淋巴细胞增殖各周期变化。结果：TRAM34可以抑制T淋巴细胞增殖反应度IL-2活性，使处于G0／G1期的细胞数目明显增多，同时S期和G1＋M期的的细胞数目明显减少，其作用差于环孢霉素，但TRAM34和环孢霉素合用作用优于单用环孢霉素．结论：TRAM34对移植排斥反应有抑制作用，此作用与阻断T淋巴细胞IKCal通道有关，TRAM34对环孢霉素有协同作用。     

山茱萸免疫活性部位F-1C的免疫抑制作用

目的：研究山茱萸免疫活性部位F-1C对小鼠免疫反应的抑制作用。方法：运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应、溶血空斑实验和流式细胞技术观察F-1C体外应用和口服对正常小鼠免疫反应和脾脏T细胞亚群的影响。结果：F-1C在10-200μg/ml剂量范围内无明显细胞毒性，但对小鼠ConA诱导的脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应和脾细胞抗体生成反应具有明显的抑制作用，对LPS诱导的裸鼠脾细胞增殖反应呈剂量依赖性的促进作用。连续7天口服给予40和80mg/kg，明显抑制脾细胞抗体生成反应和脾细胞自发增殖反应，对脾脏T细胞亚群CD4^ 细胞数目无明显影响，但明显升高CD8^ 细胞百分数，使CD4^ ／CD8^ 比值降低。同时给药组小鼠T抑制细胞(Ts)的抑制功能增强。结论：F-1C对正常小鼠免疫反应具有明显的抑制作用，增加Ts细胞数量并增强Ts细胞抑制功能可能是其发挥免疫抑制作用的途径之一。     

黑睛排斥汤防治大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的机理研究

目的探讨黒睛排斥汤在大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中作用的机理。方法角膜缝线法诱导角膜新生血管,建立大鼠高危角膜移植模型,随机分为A组(模型对照),B组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)),C组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)+CsA 10 mg/(kg.d))。行封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体全板层角膜移植,观察植片存活状况;应用流式细胞分析,免疫荧光组织化学等方法对受体局部和全身免疫状态机制进行检测。结果 1.角膜植片存活时间:A组(10.38±1.69)d,B组(13.00±2.03)d,C组(22.50±3.07)d,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞CD4+和CD8+亚群:术后7 d,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+各组之间比较均无明显差别(P>0.05);术后14 d,C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05);术后21 d,B、C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05),但各组CD8+比较无明显差异(P>0.05)。3.ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖:B组、C组脾T淋巴细胞的增殖被明显抑制,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以C组更为明显。结论黒睛排斥汤对高危角膜移植排斥反应模型大鼠术后免疫排斥反应的抑制作用主要是通过抑制T淋巴细胞的增殖来实现的。     

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠脾脏CD4+T、CD19+B细胞凋亡的影响

目的：研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理。方法：运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡。结果：雄性BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡加速,中药狼疮静颗粒可明显抑制BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡率。结论：中药狼疮静颗粒通过抑制T、B淋巴细胞过度凋亡,可能阻抑了过量核酸抗原释放,从而抑制了B细胞的异常增生活化,使自身抗体产生减少而达到治疗系统性红斑狼疮目的。     

雷公藤在移植免疫中的研究与应用概况

器官移植已成为现代医学拯救许多末期器官功能衰竭患者生命的有效手段,但由于移植器官的排斥反应使其器官移植的成功率受到严重影响,尽管有不少抗移植排斥反应的免疫抑制剂的使用,但因毒副作用,使其应用受到了限制。因此,寻找低毒有效的抗排斥反应的药物制剂是移植免疫学的重要课题之一。为了从传统中药中寻找有效、低毒的抑制移植排斥反应药物制剂,人们对雷公藤进行了大量的研究并进行了临床应用。     

喘可治对小鼠异基因皮片移植影响及细胞机制研究

目的 研究喘可治注射液(CKZ)对小鼠异基因皮片移植排斥作用的影响及体内外CD4+ CD25+ Tr变化来探究其细胞机制.方法 建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型同时注射喘可治,记录皮片存活时间,流式细胞仪检测手术前后各组小鼠外周血CD4+ CD25+T细胞;将喘可治作用于小鼠体外CD4+ CD25+T细胞,检测T细胞CD69和CD25表达.结果 同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间较同种异基因移植对照组显著延长,分别为(20.6±3.2)d和(8.3±2.1)d,P＜0.01.喘可治抑制ConA诱导T细胞活化标志分子CD69表达却促进CD25表达.结论 喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间,通过升高CD4+ CD25+T细胞水平而发挥免疫抑制效应可能是其机理之一.     

中医药对HIV感染者CD4~＋T淋巴细胞凋亡抑制作用研究之我见

HIV感染患者的CD4＋T细胞的数量随着病程进展进行性下降。临床实践中对其进行一定时期中医药临床治疗后,CD4＋T淋巴细胞计数保持稳定或有所上升。笔者分析提出这样的一种假说,即中医药治疗抑制了HIV感染后引起的细胞凋亡的进展可能是CD4＋T细胞计数保持稳定或有所上升的一个重要原因。基于此,笔者认为有必要从中医药抑制CD4＋T淋巴细胞凋亡角度进行研究,以揭示中医药治疗是否具有抑制CD4＋T淋巴细胞凋亡的现象,探索研究抑制CD4＋T淋巴细胞凋亡是否是中医药治疗HIV感染者的可能机制之一,为中医药治疗艾滋病提供临床应用基础研究的支撑,为研究符合中医药治疗特点的艾滋病疗效评价指标提供基础依据。     

中医药对HIV感染者CD4+T淋巴细胞凋亡抑制作用研究之我见

HIV感染患者的CD4+T细胞的数量随着病程进展进行性下降.临床实践中对其进行一定时期中医药临床治疗后,CD4+T淋巴细胞计数保持稳定或有所上升.笔者分析提出这样的一种假说,即中医药治疗抑制了HIV感染后引起的细胞凋亡的进展可能是CD4+T细胞计数保持稳定或有所上升的一个重要原因.基于此,笔者认为有必要从中医药抑制CD4+T淋巴细胞凋亡角度进行研究,以揭示中医药治疗是否具有抑制CD4+T淋巴细胞凋亡的现象,探索研究抑制CD4+T淋巴细胞凋亡是否是中医药治疗HIV感染者的可能机制之一,为中医药治疗艾滋病提供临床应用基础研究的支撑,为研究符合中医药治疗特点的艾滋病疗效评价指标提供基础依据.     

Immunosuppressive effects of an ethyl acetate extract from Urtica dentata Hand on skin allograft rejection

Aim of the study

To investigate the immunosuppressive effects of HPLC qualitied ethyl acetate extract (EAE) from Urtica dentate Hand on skin allograft rejection in a murine model.

Materials and methods

Allo-skin transplantation model was established by placing skin allograft of C57BL/6 mice in the wound bed which was on the back of Balb/c mice. We used FACS to study the effects of EAE on dendritic cells (DCs) maturation and CD4⁺CD25⁺T regulatory cells (Tregs) differentiation. We also studied spleen lymphocyte proliferation and T-bet gene expression in DCs. Concentration of Th1/Th2 cytokines was monitored as markers of Th1/Th2 responses by ELISA.

Results

A significant prolongation of skin allografts survival was observed as a dose-dependent manner in the animals treated with EAE. By FACS, we found that treatment with EAE (200 mg kg⁻¹) resulted in an immature statement of DCs and stimulated the differentiation of CD4⁺CD25⁺Tregs. Additionally, the expression of T-bet gene and the proliferation of spleen lymphocytes were efficiently abated in EAE treated mice. Comparing to the model control, EAE-treated recipients showed a significant down-regulation (P < 0.01) of Th1 cytokines (IL-2, IFN-γ) and an obviously increase (P < 0.01) of Th2 cytokine (IL-10) in the serum, which presented in a dose-related way.

Conclusions

The anti-allograft rejection effect of EAE by enhancing CD4⁺CD25⁺Tregs differentiation and sustaining DCs immaturation makes EAE to be a possible choice for treating autoimmune diseases in a way of inducing a stable immunological tolerance state.     

雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠T细胞及其亚群的影响

目的：观察雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病时小鼠脾，皮肤，肺，肠组织中T细胞及其亚群（CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞）的影响，探讨雷公藤多甙对急性移植物抗宿主病的作用及机理。方法：用直线加速器排空受鼠骨髓后注入供鼠骨髓与脾淋巴细胞的混合液，复制出急性移植物抗宿主病（aGVHD)模型。观察雷公藤多甙，雷公藤多甙加环孢素A（CsA),CsA加甲氨蝶呤对各组小鼠脾CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞（流式细胞仪检测），皮肤，肺，肠组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞浸润情况（应用免疫组化技术检测）的影响。结果：雷公藤多甙组小鼠脾，皮肤，肺组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞明显低于异基因移植组（P<0.05)，而小肠组织CD3^+,CD4^+,CD8^+细胞变化不明显（P>0.05)。结论：雷公藤多甙可降低脾T细胞及亚群数量，减少皮肤肺的T细胞浸润，具有明显的抗aGVHD作用。     

重组葡萄球菌肠毒素A及其突变体蛋白促淋巴细胞增殖作用的研究

 目的 观察重组葡萄球菌肠毒素A（rSEA）及其突变体蛋白对淋巴细胞增殖、活化作用及对淋巴细胞亚群分群的影响。方法 分离健康人外周血单个核细胞（PBMC）及小鼠脾淋巴细胞悬液,体外经rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白刺激后,采用噻唑蓝法（MTT）检测人和小鼠脾淋巴细胞增殖水平,采用流式细胞术检测人外周血中T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞）及活化CD4⁺、CD8⁺ T细胞和自然杀伤细胞（NK）的含量。结果 5~20 mg·L^-1的rSEA及其3个突变体蛋白对人PBMC和小鼠脾淋巴细胞均有明显促增殖作用（P<0.05）;经rSEA、rSEA/H225A刺激后的人PBMC中,CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞的含量明显高于对照组,rSEA/H187A能上调CD3⁺和CD8⁺T细胞,而rSEA/D227A只上调CD8⁺T细胞（P<0.05）;rSEA及3种突变体蛋白均能上调活化CD4⁺和CD8⁺T细胞,rSEA、rSEA/H187A、rSEA/H225A能上调NK细胞含量（P<0.05）。结论 rSEA及其3种突变体（rSEA/H187A、rSEA/H225A和rSEA/D227A）蛋白对淋巴细胞均有明显促增殖和活化作用,并可不同程度地上调T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ 及NK细胞的含量,为筛选出低毒、高效的升白细胞相关药物候选突变体奠定基础。
     

电针对消化道肿瘤患者围手术及围化疗期T淋巴细胞亚群和淋巴细胞转化功能的影响

目的　观察电针对消化道肿瘤患者围手术及围化疗期 T淋巴细胞亚群和淋巴细胞转化功能的影响。方法　应用流式细胞仪测定消化道肿瘤患者手术或手术加化疗及针刺治疗前后 T淋巴细胞亚群的变化 ,同时用 MTT法检测外周血淋巴细胞转化功能。结果　手术后第 3日 ,患者 CD3 细胞百分率、淋巴细胞转化功能明显低于手术前 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,而电针治疗组患者 CD3 细胞百分率、淋巴细胞转化功能则未见降低 ,与手术组病人相比有显著差异 (P<0 .0 5 )。手术后第 10日 ,患者淋巴细胞转化功能基本恢复至手术前水平 ,电针组患者 CD8 细胞明显减少 (P <0 .0 5 ) ,CD4 / CD8 比值明显升高 (P <0 .0 5 )。手术并化疗后第 3日 ,CD3 细胞百分率 ,CD4 / CD8 比值较手术前有降低 ,但统计学上无差异 ,电针能明显提高手术加化疗后第 3日患者的 CD4 细胞百分率 (P<0 .0 5 )以及 CD4 / CD8 比值 (P<0 .0 5 ) ,与手术前自身比较 ,电针治疗能提高手术并化疗后患者的淋巴细胞转化功能 (P<0 .0 1,P<0 .0 0 1)。结论　电针对恶性肿瘤患者围手术期及围化疗期的细胞免疫功能有明显改善作用     

茯苓素预防大鼠肾移植急性排斥反应的实验研究

目的探讨茯苓素(Poria cocos)预防大鼠肾脏移植急性排斥反应的作用和机制。方法以Wist-ar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立原位(腹腔)肾脏移植模型,移植前按照分组分别以生理盐水、茯苓素25mg.kg-1.d-1、茯苓素50 mg.kg-1.d-1和环孢素A(CsA)5 mg.kg-1.d-1灌胃。术后观察大鼠移植肾功能和存活时间,测定各组术后1周外周血中白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)含量以及CD4+、CD8+细胞百分比和CD4+/CD8+的比值,并观察移植肾的病理变化。结果茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组移植肾和受者存活时间较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著延长(P0.05),而且病理损害程度较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组明显减轻,但茯苓素50 mg.kg-1.d-1组较CsA组移植肾存活时间显著减少(P0.05)。各组移植肾功能和尿量变化与存活时间和移植肾病理变化相一致,茯苓素50 mg.kg-1.d-1组和CsA组肾功能异常发生时间明显晚于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组。茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血IL-2和IFN-γ的含量较茯苓素25 mg.kg-1.d-1组和生理盐水组显著降低(P0.01),但显著高于CsA组(P0.01);茯苓素50 mg.kg-1.d-1组外周血CD4+细胞百分比显著低于茯苓素25 mg.kg-1.d-1组(P0.05)和生理盐水组(P0.01),CD8+细胞百分比显著低于生理盐水组(P0.05)。结论茯苓素对肾脏移植急性排斥反应有较好的抑制作用且与剂量呈正相关,但效果不如CsA。     

柳叶腊梅灌肠剂对慢性盆腔炎模型鼠免疫调节影响研究

目的:观察柳叶腊梅灌肠剂对慢性盆腔炎模型鼠T淋巴细胞的影响。方法:建立慢性盆腔炎大鼠模型,用柳叶腊梅灌肠剂灌肠。结果:各药物组T淋巴细胞CD4+含量明显提高,CD8+含量降低,CD4+/CD8+显著提高,与模型组比较有非常显著性差异(P0.01)。柳叶腊梅灌肠剂高剂量组与庆大霉素组比较有非常显著性差异(P0.01),与空白组比较无显著性差异(P0.05)。结论:柳叶腊梅灌肠剂能够明显改善慢性盆腔炎模型鼠细胞免疫功能。     

野生仙人掌多糖对小鼠特异性免疫功能的调节作用

目的:观察野生仙人掌多糖(ODPs)对小鼠特异性(体液及细胞)免疫功能的调节作用。方法:采用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,检测ODPs对血清溶血素IgMI、gG含量、脾淋巴细胞增殖反应和外周血T淋巴细胞亚群比例的影响;检测分离纯化的ODPs主要组分ODP-I对体外培养的淋巴细胞增殖作用。结果:ODPs能显著增强免疫抑制小鼠血清溶血素IgMI、gG的生成;显著增强免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞的增殖能力,且均使之恢复至正常水平;显著降低免疫抑制小鼠CD4+T细胞亚群比例,从而显著降低CD4+/CD8+T细胞比值,使之接近正常水平,且均有剂量关系。ODP-I可极显著促进小鼠脾淋巴细胞自然增殖,协同有丝分裂原ConA或LPS诱导T、B淋巴细胞的增殖。结论:ODPs对免疫抑制小鼠特异性免疫功能具有调节作用,对体外淋巴细胞具有增殖作用,是一种良好的免疫调节剂。     

红车轴草提取物对小鼠同种异基因皮片移植的影响

目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠同种异基因皮片移植的影响。方法:受体BALB/c小鼠分为生理盐水对照组(physiologicsaline,PS)与TLE处理组,通过背-背法进行C57BL/6的全厚皮皮片移植,以观察TLE处理组移植皮片生长情况是否优于PS组。取受体小鼠淋巴细胞进行羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE)标记的增殖追踪及混合淋巴细胞反应。结果:尾静脉注射TLE25μg/kg每天的处理组移植皮片生长情况优于PS组。TLE处理组BALB/c小鼠淋巴细胞增殖低于PS组。结论:TLE可能参与了小鼠免疫系统调节,诱导了其对同种异基因皮片的耐受。     

Differential Inhibition of T Lymphocyte Proliferation and Cytokine Synthesis by [6]‐Gingerol, [8]‐Gingerol,and [10]‐Gingerol

[6]‐Gingerol, [8]‐gingerol, and [10]‐gingerol are pungent components of fresh ginger, extracts of which inhibit various components of the inflammatory response. Because little is known regarding the effect of gingerols with different unbranched alkyl side chain lengths on the activation and effector function of T lymphocytes, we compared the effects of [6]‐gingerol, [8]‐gingerol, and [10]‐gingerol on murine T lymphocyte proliferation, expression of CD25 and CD69 activation markers, cytokine synthesis, and interleukin (IL)‐2 receptor signaling. All three gingerols inhibited DNA synthesis by T lymphocytes, as well as interferon‐γ synthesis. In contrast, only [8]‐gingerol and [10]‐gingerol inhibited CD25 and CD69 expression, and IL‐2 synthesis. None of the gingerols affected IL‐4 synthesis. Exogenous IL‐2 enhanced T lymphocyte proliferation in the presence of [6]‐gingerol but did not significantly increase T lymphocyte proliferation in the presence of [8]‐gingerol or [10]‐gingerol. In line with this finding, [8]‐gingerol and [10]‐gingerol impaired IL‐2‐induced proliferation of CTLL‐2 cells, but constitutive CD25 expression was unaffected, indicating inhibition of IL‐2 receptor signaling. In general, [10]‐gingerol and [8]‐gingerol were more potent inhibitors of T lymphocytes than [6]‐gingerol. Suppression of T lymphocyte responses by gingerols suggests that these phytochemicals may be beneficial in chronic inflammatory conditions associated with excessive or inappropriate T lymphocyte activation. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.