应用亲合素——生物素过氧化物酶复合物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)诊断人体包虫病

包虫病广泛流行于我国西北各省。目前在其临床诊断及流行病学调查中急需简便、快速有效的免疫学诊断方法。本文应用近年来发展起来的亲合素—生物素过氧化物酶复合物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)进行对人体包虫病的诊断研究,同时行常规ELISA法对比,结果如下。     

生物素-亲和素-ELISA及其在传染病诊断中的应用

综述生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验技术的原理、方法及其在传染病诊断中的应用研究,根据生物素-亲和素与酶的联结方式,本法主要有三种类型:即生物素-亲和素-酶标生物素法;生物素-酶标亲和素法和亲和素-生物素酶复合物法,三者均有较高的敏感性和特异性,已试用于多种微量抗原和抗体的检测,为流感杆菌、结核杆菌(结核性脑膜炎)、布鲁氏杆菌、乙型肝炎病毒、人疱疹病毒、日本乙型脑炎病毒和日本血吸虫等传染病、地方病的免疫学诊断提供了一种比常规酶联免疫吸附试验更灵敏的新方法。晚近,该技术也已在微生物学、病毒学、寄生虫学、免疫学、生物化学、病理学以及临床多学科中进行着应用研究,具有广阔的前景。     

生物素-抗生物素蛋白系统试剂

生物素(Biotin)与抗生物素蛋白(亦称亲合素Avidin)有极大的亲合力(Ka为10~(15)L/mol),它们又分别可与抗体、抗原、酶、凝集素或其他小分子物质偶联结合。由此得到系列的生物素-抗生物素蛋白系统(BAS)试剂。这些试剂在免疫组织化学和免疫学中广泛用于细胞表面组分的定位检测及微量抗体、抗原的ELISA检测,具有灵敏度高、特异性强和试剂价廉及使用方便等优点。     

牛角角蛋白与人角质层抗原检测抗角质层抗体的比较研究(摘要)

本文以牛角角蛋白和人角质层为抗原,用生物素——亲和素酶联免疫吸附试验(BA—ELISA)检测了50名银屑病患者和32名正常人血清中抗角质层抗体(ACAS 的滴度,虽然以牛角角蛋白作抗原     

应用ABC-ELISA和SPA-ELISA诊断华枝睾吸虫病的初步比较

本文应用生物素-亲和素过氧化物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)检测华枝睾吸虫病患者血清IgG抗体,并与常规SPA-ELISA比较。前法与粪检的阳性和阴性符合率分别为100％和87％,后法分为100％和95.7％。用SPA-ELISA检测12份日本血吸虫病兔血清未见交叉反应。由于SPA-ELISA操作简便,试剂价廉,因此更适宜于基层单位推广使用。     

McAb-BA-ELISA及McAb-ELISA检测青霉素特异IgE及其评价

用单克隆抗体及生物素与亲和素,建立了McAb-BA-ELISA(单克隆抗体-生物素亲和素-酶联免疫吸附试验)和McAb-ELISA(单克隆抗体酶联免疫吸附试验),角于检测I型青霉素过敏反应患者血清青霉素特异IgE,40例I型青霉素过敏患者中,BPO-Spec-IgE阳性率为45％,BPO-Spec-IgE阴性者中,用McAb-ELISA检测BPE-Spec-IgE与6-APA-SpecIgE,阳性率分别为12.5％及35.0％,总阳性率为92.5％,对照组315例非青霉素过敏者全部阴性。结果表明,此方法在青霉素变态反应特异抗体检测中,敏感性及特异性皆高,具有实际应用价值。     

血液抗精子抗体与精子表面抗体的相关性

目的 统计分析男性不育患者血液抗精子抗体与精子表面抗体的结果,并进行比较,对它们在男性免疫性不育的临床价值进行评价.方法 运用酶联免疫吸附法(ELISA)对2055例男性不育患者进行血液抗精子抗体检测.运用混合抗球蛋白反应试验(MAR)对1672例男性不育患者进行精子表面抗精子抗体检测,运用SPSS 25.0统计软件,...     

酶联免疫吸附试验影响HBsAg常见因素与对策

<正>酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent assay ELISA)是一种常用的固相酶免疫测定法。ELISA的基本原理是:使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;使抗原(或抗体)于某种酶联结成酶标抗原(或抗体)     

E-coli和Yeast菌体蛋白ELISA定量测定方法的建立

目的:提高酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的灵敏度。方法:将聚苯乙烯微孔板(PS)经过紫外线(UV)辐照后,用葡萄球菌A蛋白(SPA)预包被,再应用生物素-链霉亲和素(BSA)反应建立双抗体夹心ELISA。结果:检测低限为1.95ng/ml,方法的批内变异分别为7.96%和8.63%。结论:为菌体蛋白的测定提供了一种新的方法。     

ELISA法与胶体金吸附法检测丙肝抗体特异性比较

目的 比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与胶体金吸附试验检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体的特异性.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测480例临床手术前患者血清.如酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测为阳性者,再采用肢体金吸附试验方法重新检测抗HCV.结果 480例样本中,抗HCV酶联免疫吸附试验法(ELISA)阳性10例,阳性率2.10%.胶体金吸附试验法阳性6例,阳性率1.25%.结论 酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测抗HCV检出率高出肢体金检测法0.85%.     

不同抗原包被法测抗精子抗体的结果比较与分析

目的 :通过建立不同的精子抗原包被法 ,减少酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测抗精子抗体 (AsAb)的非特异性吸附。方法 :用化学试剂提取精子抗原并经凝胶过滤 ,将其包被于酶标板上 ,与整精子包被法比较检测患者AsAb。结果 :提纯抗原包被法检测AsAb降低了标本的非特异性吸附 ,且稳定性及重复性均好。结论 :提纯抗原包被法测AsAb是一种有价值的新方法     

快速检测人血清可溶性CD40配体ELISA试剂盒的研制及评价

目的 建立快速灵敏、特异和稳定的检测人血清可溶性CD40配体(sCD40L)酶联免疫测定(ELISA)试剂盒.方法 采用自制的鼠抗人CD40L单克隆抗体La为包被抗体,识别人CD40L不同位点的生物素标记的自制单克隆抗体Lb为检测抗体,以HRP-链亲合素-多聚赖氨酸复合物为反应底物,采用反应板包被孔中直接加入检测抗体,试验时仅需再加入HBP-链亲合素-多聚赖氨酸复合物,研制一种快速双抗体夹心的检测人血清sCD40L ELISA试剂盒,并测定400例健康人血清sCD40L含量.结果 成功研制出快速检测人血清sCD40L ELISA试剂盒,灵敏度为0.06 ng/ml.该试剂盒于4℃放置3个月,CV＜±5.7%,回收率为96.2%～105.9%,提示该检测系统具有良好的灵敏度、稳定性和准确性,与国外商品化同类试剂盒的分析结果相似.应用该试剂盒测得400例健康人血清sCD40L含量为(2.13±2.00)ng/ml.结论 研制成功快速、灵敏、特异和稳定的检测人血清sCD40L ELISA试剂盒,能够对血清中sCD40L进行准确定量分析.     

哮喘患者血清中IL-4、IL-12、IL-13、IFN-γ、IgE水平的测定及其临床意义

目的:研究哮喘患者血清中白细胞介素-4、白细胞介素-12、白细胞介素-13、γ干扰素、免疫球蛋白E水平的测定及临床意义。方法:采用生物素亲合素双抗体夹心酶联和间接酶联免疫吸附法测定98例哮喘患者不同分期和分级血清IL-4、IL-12、IL-13以及IFN-γ水平和IgE水平,观察不同分期和分级各项观察指标的水平,并与60例健康对照组进行比较。结果:观察组及发作期患者IL-4、IL-13、IgE水平均明显升高(P0.05),IFN-γ、IL-12水平均明显降低(P0.05)。结论:IL-4、IL-12、IL-13、IFN-γ、IgE在哮喘发病中起重要调控作用。     

胶体金法、酶联免疫吸附试验和明胶颗粒凝集试验检测血清梅毒抗体的结果比较

目的探讨胶体金法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒抗体假阴性结果的现象。方法 50例梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)阳性标本同时进行胶体金法和ELISA法实验,比较结果的差异性。结果胶体金法和酶联免疫吸附法实验检测梅毒有假阴性结果。结论胶体金法和酶联免疫吸附法实验应结合TPPA一起检测梅毒抗体,避免漏诊现象发生。     

乙型肝炎表面抗原的免疫PCR检测

目的探讨一种适用性强、敏感性高的乙型肝炎(乙肝)表面抗原检测方法。方法在乙肝表面抗原与相应抗体特异性反应的基础上,逐步加入生物素化抗体、亲合素-DM耦联物,PCR扩增相应的DNA标记,通过检测DNA来反映相应抗原的量。结果免疫PCR检测敏感度为常规酶联免疫试剂盒的300倍。结论免疫PCR是一种适用于乙肝表面抗原的、高度敏感的检测方法。     

非何杰金恶性淋巴瘤病人血清及瘤组织中β—葡萄糖醛酸酶同步测定及意义

目的：探索非何杰金恶性淋巴瘤病人体内β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase,β-G）的变化规律。方法：采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunsorbent assay,ELISA)方法,免疫组织化学方法对13例非何杰金恶性淋巴瘤患者血清及瘤组织中β-G进行同步测定,并对其中3例进行了免疫电镜研究。结果：β-G在非何杰金恶性淋巴瘤患者血清及瘤组织中均呈明显表达,与对照组有显著性差异（P＜0．01）。结论：对β-G进行机能学与形态学的联合检测,可能成为非何杰金恶性淋巴瘤诊断的辅助指标。     

酶联免疫吸附测定诊断试剂盒使用中出现的问题和解决方法

自从1971年Engvall等发表了酶联免疫吸附测定(En—zynle linked immunosorbent assay ELISA)用于IgG定量测定的文章后,使1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测量方法,即当今广泛使用的ELISA     

生物素—亲和素酶联免疫吸附试验检测脑脊液结核抗体方法的建立

报道生物素——亲和素酶联免疫吸附试验(BA-ELISA)检测脑脊液抗 PPD-IgG 方法的建立,并对最佳检测条件进行了探讨。取代试验和阻断试验证明本法特异性较高,并有较好的可重复性。其抗体滴度为常规 ELISA 的4倍。本法检测脑脊液抗体滴度灵敏度为95.2％,特异度为100％,应能在临床应用中成为脑膜结核免疫学诊断的一种较常规 ELISA 更敏感的方法。     

SARS病房工作的医护人员血清中特异抗体测定分析

目的检测密切接触SARS患者的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平,对SARS病毒有无隐性感染作初步调查.方法分别用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,ⅡFA)检测200例正常人,200例在SARS病房工作1个月的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平.结果正常人及医护人员血清中未检测到SARS病毒IgM及IgG抗体.结论不同于普通的流行性传染性疾病,SARS病毒可能不具有隐性感染性.     

HIV 逆转录酶抑制剂酶联免疫评估方法的研究

目的:建立检测逆转录酶活性的酶联免疫吸附实验方法,用于筛选人类免疫缺陷病毒(HIV-1)逆转录酶抑制剂.方法:利用DNA的固相固定技术将引物固定于96孔微量滴定板上,以poly(rA)· Oligo(dT)15为模板,在逆转录酶的作用下,将生物素标记的dUTP掺入,用碱性磷酯酶反应系统检测酶活性.结果: 建立了检测逆转录酶活性的酶联免疫(ELISA)法,并用ELISA法验证了已知阳性药物对逆转录酶的抑制作用,对ELISA法在动力学研究的应用做了初步探讨,评估ELISA法的重复性、稳定性、特异性和敏感性.结论: ELISA 法检测HIV-1 逆转录酶活性具有简单、快速、特异性强、重复性好、污染小等特点,适用于以HIV-1 逆转录酶为靶点的抑制剂的筛选及相关机制的研究.