不同月龄雌性SD大鼠成骨细胞内雌激素受体表达规律分析

目的探讨不同月龄雌性SD大鼠成骨细胞内雌激素受体表达规律,以此拟描述不同年龄人类女性个体成骨细胞内雌激素受体表达的生理曲线。方法以不同月龄雌性SD大鼠为标本,二次酶消化法收集成骨细胞并培养,倒置相差显微镜观察成骨细胞形态,钙钴法碱性磷酸酶染色、上清液碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(OCN)检测对成骨细胞进行鉴定。结果二次酶消化法获得的成骨细胞,形态呈多边形,碱性磷酸酶染色阳性细胞染色率80%,不同培养时间的成骨细胞和成纤维细胞上清液碱性磷酸酶和骨钙素含量相比较成骨组明显高于成纤维组。结论二次酶消化法可获得较多的成骨细胞,符合成骨细胞的生物学特性,可作为成骨细胞相关研究的细胞来源。     

雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体表达的研究

目的：研究雌性大鼠一生中成骨细胞内雌激素受体(ER)表达水平的变化规律。方法：采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞并进行鉴定,应用半定量Western blot对不同月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞内雌激素受体进行检测。结果：ER表达在1、2月龄组呈低度表达,3月组ER开始呈现上升趋势,至8、9、10月组ER达到高峰,10月组以后表达呈现下降趋势。结论：ER表达在不同月龄大鼠呈规律性分布,雌激素受体的表达应与雌激素水平是相一致的。     

去卵巢大鼠成骨细胞雌激素受体表达的研究

目的 观察研究去卵巢SD大鼠成骨细胞内雌激素受体(ER)表达水平的变化规律.方法 SD雌性大鼠随机分为正常对照组和去卵巢(OVX)后第5周组、第7周组;采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠颅骨成骨细胞,进行钙钴法碱性磷酸酶(ALP)染色,I型胶原免疫组化染色来观察、鉴定大鼠成骨细胞.应用半定量Western blot对各组SD大鼠成骨细胞内雌激素受体进行检测.结果 通过ALP染色、I型胶原免疫组化及形态学观察符合成骨细胞特征.western blot显示雌激素受体表达OVX组明显低于正常组,第7周组低于第5周组.结论 随着去卵巢后时间延长,成骨细胞表达的雌激素受体下降,骨质疏松风险变大.     

骨质疏松大鼠成骨细胞雌激素受体与颅骨IL-10表达的相关性研究

目的探讨骨质疏松sD大鼠颅骨中IL-10的表达与成骨细胞内雌激素受体表达的相关性。方法40只SD雌性大鼠用随机数字表法随机分为对照纽20只和去势（去卵巢）组20只（去势第5周组、第7周组各10只）,用双能X线吸收法测定各组骨密度,用免疫组织化学ABC法及图像分析技术观察各组颅骨组织中IL-10表达;用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠颅骨成骨细胞,并用钙一钴法碱性磷酸酶（ALP）染色法则型胶原免疫组化染色法观察、鉴定大鼠成骨细胞。应用半定量Western blot法检测各组SD大鼠成骨细胞内雌激素受体。结果去势组骨密度明显低于对照组（P〈0．01）;去势组骨小梁周边IL-10阳性成骨细胞数明显少于对照组（P〈O．01）,并且染色较对照组浅。ALP染色、Ⅰ型胶原免疫组化及形态学观察符合成骨细胞特征。去势组雌激素受体表达明显低于对照组,去势第7周低于去势第5周（P〈0．01）。结论雌激素受体的表达与成骨细胞IL-10表达水平成正相关。     

健骨颗粒对大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响

目的探讨健骨颗粒对骨组织成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法通过切除6月龄SD雌性大鼠卵巢,建立绝经后骨质疏松症动物模型,分假手术组、模型组、治疗组,运用RT-PCR实时荧光定量SYBR GREEN法检测雌激素受体ERα、ERβmRNA的表达。结果治疗组与模型组比较,ERα、ERβmRNA的相对表达量增加,差异有显著性(P0.01)。结论健骨颗粒能提高去卵巢骨质疏松模型大鼠的成骨细胞ERα、ERβ的表达,促进成骨细胞增殖。     

β2肾上腺素受体阻滞剂对雌激素刺激大鼠成骨细胞分化与增殖的影响

目的:研究β2肾上腺素受体阻滞剂对雌激素刺激大鼠成骨细胞分化与增殖的影响.方法:将不同浓度的β2肾上腺素受体阻滞剂(ICI118551)加入含雌激素(17β-E2)培养的第2代大鼠成骨细胞中,分别于培养3、6、9、12天时,使用PNPP法和放免方法检测成骨细胞培养基中的碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素含量,并用MTT法检测成骨细胞的增殖率.结果:ICI118551可提高雌激素刺激成骨细胞培养上清中碱性磷酸酶浓度促进细胞增殖,尤其当其浓度为10-5及10-6mol/L时,但对成骨细胞培养上清中骨钙素水平的影响不显著.结论:β2肾上腺素受体阻滞剂能够显著促进雌激素刺激大鼠成骨细胞的释放和增殖作用.     

补肾健骨汤对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响

目的考察补肾健骨汤体外对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响.方法采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,取第3代为实验模型,用常规计数法每日同时间检测成骨细胞增殖情况,连续7 d,观察补肾健骨汤提取液及载药血清对成骨细胞增殖的影响;以酶免法测定培养第5天细胞内骨钙素的含量.结果补肾健骨汤提取液及载药血清对体外培养的成骨细胞增殖均有显著的促进作用,其中提取液的作用在0～100 μg/mL浓度范围内呈剂量依赖性;提取液与载药血清均提高细胞内碱性磷酸酶和骨钙素含量,与空白对照组比较均有显著差异(P＜0.05).结论补肾健骨汤体外对成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶、骨钙素的合成具有促进作用.     

骨巨细胞瘤中成纤维样基质细胞体外钙化能力的研究

目的：探讨骨巨细胞瘤的组织来源。方法：体外培养。Ｇｏｍｏｒｉ法碱性磷酸酶染色,生化检测细胞培养上清液中的碱性磷酸酶含量。免疫组织化学染色检测骨钙素在成纤维样基质细胞中的表达。使用含Ｂ甘油磷酸钠和ＣａＣｌ２的培养液,观察成纤维样基质细胞体外钙化能力。结果：成纤维样基质细胞中碱性磷酸酶和骨钙素呈阳性表达,在体外具有钙化能力。在细胞培养上清液中有碱性磷酸酶。结论：骨巨细胞瘤中的成纤维样基质细胞具有某些成骨细胞的特点,为进一步探讨其组织来源提供了实验依据。     

SD大鼠髁突软骨下骨成骨细胞的原代培养与鉴定

目的：建立新生SD大鼠髁突软骨下骨成骨细胞培养模型。方法用新生24 h SD大鼠,分离获取髁突,去尽软骨层,获得纯尽软骨下骨。采用改良贴壁组织块反复消化法培养细胞。通过相差显微镜和HE染色观察其细胞形态,并且用碱性磷酸酶染色和钙化结节染色方法进行细胞鉴定,噻唑蓝（MTT）比色法检测其增值能力。结果细胞呈多种形态,有三角形、梭形、不规则形。碱性磷酸酶染色和钙化结节染色均呈阳性,细胞接种后1～3 d内细胞增殖缓慢,第8天达到高峰,以后增长速度逐渐减慢。结论该方法获得新生SD大鼠髁突软骨下骨成骨细胞能在体外稳定培养,并且细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。     

雌激素替代治疗对大鼠心壁雌激素受体表达的影响

目的 :观察雌、孕激素替代治疗时去卵巢大鼠心脏雌激素受体 ( ERα)的表达。方法 :通过免疫组化方法 ,分别测定去势和雌激素替代治疗 ( ERT)组 SD大鼠心脏雌激素受体水平 ,并对血清雌激素及血脂水平进行了检测。结果 :1去势大鼠 ER(免疫阳性物质明显减少 ( P<0 .0 5 ) ,雌激素替代治疗 ( ERT) 8周后 ,ERα表达明显改善 ;2去势组雌性大鼠血清雌二醇水平较假手术组明显下降 ( P<0 .0 1 ) ,胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( TG)水平明显升高。结论 :ERα广泛存在于心肌组织中 ,且其表达受雌激素的调控     

成人成骨细胞雌激素受体研究

目的研究雌激素受体(estrogen receptor，ER)在成人成骨细胞的分布；探讨雌激素调节骨代谢的作用机制及雌激素受体变化在骨质疏松症中的作用。方法用多次酶消化法进行人成骨细胞体外培养；用免疫组织化学法分别检测不同程度的骨质疏松病人和正常对照成人成骨细胞雌激素受体；显微镜下观察ER阳性细胞；计算各组人群ER阳性细胞率；t检验分析各组间ER阳性细胞率的差异。结果成骨细胞细胞核和／或细胞质有ER存在；各组人群阳性细胞标记率有明显差异。结论雌激素不仅通过调节钙调节激素间接影响骨重建，还可与成骨细胞ER结合调控骨代谢；ER存在于成骨细胞的细胞核和细胞质；人成骨细胞：ER减少可能是绝经后骨质疏松症的主要原因之一。     

雌激素对去卵巢大鼠动脉中雌激素受体表达及血中一氧化氮含量的影响

目的探讨雌激素对去卵巢大鼠动脉中ER的表达及血清中NO含量的影响. 方法成年雌性大鼠切除卵巢后,随机分为两组①去卵巢+E2组,给予E2;②单纯去卵巢组,为对照.2个月后处死大鼠取材,用免疫组化法检测动脉中的ER表达,并分别用放免法和重氮法检测血清中的E2和NO.结果去卵巢+E2组大鼠动脉中ER的表达显著高于对照组,血清中NO含量也显著升高(P<0.001).结论雌激素能使去卵巢大鼠动脉中ER的表达增加,血清中NO的含量显著增加.这可能是雌激素对绝经后妇女心血管保护作用的机制之一.     

ER、PR检测在子宫内膜癌的价值

目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)检测在子宫内膜癌中的价值.方法:选择子宫内膜癌组30例,采用免疫组织化学快捷染色法检测ER、PR.结果:ER、PR在子宫内膜癌中阳性表达率随组织分级升高,临床分期升高,组织类型升高.结论:ER、PR的缺失加速子宫内膜癌病情的恶化,对临床估计患者预后和临床选择激素治疗具有重...     

葛根素影响雌激素受体α启动子甲基化调控成骨细胞增殖分化的研究

目的：探究葛根素对大鼠成骨细胞代谢调控的途径,为绝经后骨质疏松治疗提供理论依据。方法取新生 SD 大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞,分别加入不同浓度（5、10、25、50、100μmol／L）葛根素分组培养,应用巢式甲基敏感性聚合酶链反应方法观察雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）启动子 A 区甲基化,反转录－聚合酶链反应方法观察 ERαmRNA 表达,MTT 法和对硝基苯磷酸酯方法观察体外培养成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶活性。结果随着葛根素浓度增加,ERα基因启动子甲基化程度逐渐减弱;同时发现细胞中 ERα mRNA 表达逐渐增强,25μmol／L葛根素浓度时表达最强（P ＜0．01）。葛根素能刺激成骨细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性（P ＜0．01）。结论葛根素抑制 ERα启动子甲基化及增加 ERαmRNA 表达,可能通过此途径促进成骨细胞增殖分化。     

Effects of estrogen and tibolone on bladder histology and estrogen receptors in rats

Background Estrogen deficiency causes atrophic changes within the urogenital tract, and is associated with urinary symptoms. The purpose of this study was to investigate the effects of estrogen and tibolone on bladder histology, and the changes of estrogen receptor a and β （ERα and β） protein expression in the detrusor muscle.
Methods Forty female rats were separated into four groups of ten each. They received a sham operation （Sham）, ovariectomy （Ovx）, ovariectomy plus estrogen replacement （Ovx＋E）, or ovariectomy plus tibolone treatment （Ovx＋T）. After 12 weeks each rat was anesthetized and the bladders were removed. The bladders＇ ultra structure, collagen fiber （CF） to smooth muscle（SM） ratio and ER subtypes were studied. Statistical analyses were performed using the one-way analysis of variance test.
Results Ovx resulted in significant degeneration in bladder ultra structure; however, estrogen and tibolone reversed those changes. Ovx increased the CF/SM ratio, estrogen and tibolone resulted in an increase. Two estrogen receptors （ERs） were expressed in the bladder detrusor, with ERβ the main subtype. Ovx resulted in up-regulation of ERα and down-regulation of ERβ. With estrogen and tibolone treatment, ERβ showed a significant increase but ERα showed no significant difference compared with Ovx.
Conclusions Estrogen deficiency deteriorates bladder ultra structure and histology. Supplementary estrogen can improve bladder function which may be due to inhibition of collagen hyperplasia and increased SM density. ERβ has an important role in mediating estrogen function in the bladder. Tibolone has a mild estrogenic action and has an effect on bladder function and structure to some degree.     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

ERα基因多态与子宫内膜异位症

雌激素受体属于核受体超家族的成员,是女性生殖系统中最重要的激素之一。雌激素需与其受体结合而发挥其重要生理作用,雌激素受体α(ERα)基因的多态性影响ERα的表达和功能。子宫内膜异位症是一种雌激素依赖性疾病,ERα基因多态与子宫内膜异位症是否相关及有怎样的关系尚有争议,本文就ERα基因多态性及其与子宫内膜异位症的关系予以综述。     

熟地黄对雌性小鼠老化进程中雌、孕激素受体含量的上调作用

目的 :探讨熟地黄对雌性小鼠老化进程中血清雌激素 (E2 )浓度、脾细胞雌激素受体 (ER)含量、成骨细胞孕激素受体(PR)含量的调节作用。方法 :应用放射免疫法、放射配体结合分析法技术 ,研究熟地黄对雌性小鼠老化进程中上述指标的调节作用。结果 :对照组随着老化进程的发展 ,血清中E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量均明显下降 ,并随老化程度呈阶段性变化 ;熟地黄组对应指标也有所下降 ,与对照组相比 ,PR、ER含量的下降速度明显减慢 (P <0 .0 1)。结论 :熟地黄有抵抗老化进程中血清E2 浓度、脾细胞ER含量和成骨细胞PR含量下降这种生理性变化的功能 ,即有抗衰老作用。