检测嗜肺军团菌胶体金免疫层析法的建立

目的:建立基于胶体金免疫层析法(immuno-chromatographic assay,ICA)的敏感、特异且使用方便的嗜肺军团菌抗原检测技术.方法:采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒、标记抗嗜肺军团菌血清1型抗原的多克隆抗体,制成免疫层析检测试剂.结果:应用嗜肺军团菌ICA检测试剂可特异性地检测出嗜肺军团菌血清1型抗原,最低检出量为10 ng/ml,与其他血清型抗原不发生交叉反应,与美国Binax NOW ICT试剂盒的检测结果一致.结论:嗜肺军团菌ICA检测试剂具有特异性强、敏感性高、简便快速的特点,适合基层单位和现场使用.     

石头鱼毒素胶体金检测试纸条的研制

目的：研制石头鱼毒素（neoverrucotoxin,stonefish toxin,neoVTX）的胶体金检测试纸条,建立一种该毒素的快速检测方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,以neoVTX马血清抗体用于胶体金标记,并将该抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,利用双抗体夹心法原理制备胶体金检测试纸条。结果制备的检测试纸条对该毒素检测灵敏度为50 ng／ml,该试纸与牛血清白蛋白、卵清蛋白及水母毒素等蛋白无反应,具有较好的特异性。结论成功研制了石头鱼毒素胶体金检测试纸,该试纸条灵敏度高,特异性好,可用于该毒素的快速检测。     

一起A型肉毒毒素中毒的调查报告

1996年1月6日我院收治同一单位同时发病的4名患者,次日又送来3名患者,追问病史及食物检测诊断为A型肉毒毒素中毒,经治疗全部痊愈出院,报告如下.1 临床资料     

A型肉毒毒素治疗眼睑痉挛的临床观察

目的观察A型肉毒毒素治疗眼睑痉挛的疗效。方法对40例眼睑痉挛患者进行局部多点注射A型肉毒毒素,评价其疗效。结果40例患者中,32例完全缓解(80%、),6例明显缓解(15%),2例部分缓解(5%),总有效率达100%。药物持续时间为2.5-6个月,无全身不良反应及过敏反应,局部反应轻微,短暂可逆。结论A型肉毒毒素局部注射治疗眼睑痉挛是一种安全、有效、简便、易行的方法。     

A型肉毒毒素的临床应用

肉毒杆菌毒素(botulinumtoxin ,BT)早在1897年被发现,194 6年SchantzEJ提纯出A型肉毒毒素(BTA)结晶。1973年,ScottAB首先报告了BTA对猴眼外肌有麻痹作用,引起医学界重视,许多学者开始致力于BTA动物实验及临床方面的研究,成果显著,1989年被美国食品与药品管理局(FDA)批准用于临床。大量研究结果证实,BTA的临床应用越来越广泛,对不少疾病疗效肯定,对某些疾病的疗效尚在探索之中。本文就近年来BTA的临床应用进展作一总结。1　概述肉毒杆菌毒素(BT)是由革兰氏阳性厌氧肉毒杆菌(Clostridiumbotulinum)产生的一种神经毒素,分A、B、C…     

A型肉毒毒素治疗面肌痉挛的近远期疗效观察

面肌痉挛又称面部抽搐症,表现为阵发性半侧面部肌肉的不自主抽动,严重影响了病人的社会交往和生活质量。其病因不明,治疗方法众多,但疗效不一。我科自2001年始应用A型肉毒毒素治疗面肌痉挛,经过3年的临床观察及随访取得满意疗效,现报告如下。     

A型肉毒毒素治疗Meige综合征的临床疗效观察

目的观察A型肉毒毒素治疗Meige综合征疗效。方法病例分组，观察治疗组与对照组治疗前后痉挛强度的变化。结果治疗组总有效率达97．44％。对照组总有效率仅为56．25％。结论A型肉毒毒素治疗Meige综合征安全、有效。     

A型肉毒毒素治疗慢性头痛的临床研究

目的：探讨慢性每日头痛采取A型肉毒毒素治疗的疗效。方法选取80例收治的CDH患者,根据治疗方式将入选的CDH患者分为对照组与实验组,分别给予醋酸泼尼松龙＋2％利多卡因治疗和A型肉毒毒素注射治疗,观察两组疗效。结果对照组临床有效率显著低于实验组（ P＜0．05）;在疼痛程度上,两组治疗30 d后,均显著降低（ P＜0．05）,对照组至90 d时又显著上升,至90 d时显著高于实验组（ P＜0．05）;在疼痛发作天数上,实验组在治疗30 d、90 d后均显著低于疗前（ P＜0．05）,而对照组仅30 d时与疗前比较差异性（ P＜0．05）,各时间段组间比较有差异性（ P＜0．05）。结论慢性每日疼痛采取A型肉毒毒素治疗,疗效显著,且作用更为持久,安全性可靠,具有借鉴价值。     

肉毒毒素

肉毒毒素毒力极强,一般分为7种类型,各型分子结构基本一致,但他们的抗原性和免疫原性及其毒性作用机制则不同。本文对肉毒毒素作用的临床效应包括肌肉化学性去神经支配效应、自主神经系统效应、镇痛效应作了详细阐述。对肉毒毒素的作用机制及转归也作了介绍。     

A型肉毒毒素治疗面肌痉挛40例疗效观察

目的观察A型肉毒毒素对面肌痉挛患者的治疗效果。方法对40例面肌痉挛患者进行局部注射A型肉毒毒素。在治疗前后对痉挛程度改善情况进行评定,并对药物的副作用进行观察。结果完全缓解32例,明显缓解6例,部分缓解2例。结论局部注射A型肉毒毒素可迅速缓解或消除面肌痉挛患者肌肉痉挛,提高患者的生活质量。     

A型肉毒毒素联合氟尿嘧啶在瘢痕疙瘩手术治疗中的应用

 目的 探讨A型肉毒毒素联合氟尿嘧啶在瘢痕疙瘩手术治疗中的应用。方法 选取西京医院烧伤与皮肤外科2015-07至2017-07行瘢痕疙瘩手术切除的患者68例,随机分为观察组和对照组,每组34例。其中观察组术后注射A型肉毒毒素联合氟尿嘧啶,对照组术后注射曲安奈德,比较两组患者愈合的瘢痕美容评估与评级(scar cosmesis assessment and rating,SCAR)量表评分、温哥华瘢痕评分、瘢痕疙瘩复发率及患者满意度。结果 在SCAR量表评分[(7.46±1.26)分 vs (11.51±2.33)分]、温哥华瘢痕评分[(6.31±4.16)分 vs (9.37±4.82)分]、瘢痕疙瘩复发率(5.88% vs 23.53%)及患者满意度[(9.17±0.82)分 vs (6.62±1.16)分]方面,观察组均优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 瘢痕疙瘩手术后注射A型肉毒毒素联合5-氟尿嘧啶可减轻术后切口瘢痕,提高手术效果,复发率更低,患者更为满意,值得临床推广。     

A型肉毒毒素保护性抗原在酵母细胞中的表达与抗原性分析

目的：在酵母系统中实现A型肉毒毒素(BoNTa)Hc基因的可溶性分泌表达。方法：将Hc基因克隆入表达载体pPIC9K，用SacⅠ将重组质粒线性化，电转化巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞，筛选G418抗性阳性整合子，进行Mut^ 表型株甲醇快速利用诱导。结果：经过体外高拷贝整合子的筛选和诱导表达条件的优化，毒素Hc在pH6．5培养基BMMY中实现稳定的分泌表达，最终筛选到蛋白表达量占上清蛋白10％的分泌高表达株。免疫印迹和酶联免疫检测结果显示，重组BoNTa Hc可以识别特异抗肉毒马血清并具良好的特异结合活性，可以诱导小鼠产生特异性抗体。结论：酵母系统来源的具有良好免疫原性的重组BoNTa保护性抗原可以作为有效的候选重组疫苗分子。     

Improved intramuscular blood flow and normalized metabolism in lateral epicondylitis after botulinum toxin treatment

Lateral epicondylitis is a common cause of elbow pain, and decreased microcirculation in extensor carpi radialis brevis (ECRB) has recently been suggested to contribute to the symptoms. The purpose of this pilot study was to investigate the treatment response after injection of botulinum toxin type A. Ten patients with unilateral epicondylitis and decreased intramuscular blood flow in ECRB participated. Handgrip, 2-pinch grip and muscle strength during radial deviation and dorsal extension of the wrist were recorded. Perceived pain during contraction was evaluated with the Visual Analogue Scale (VAS) and function in daily activities was assessed using the Disability of Arm, Shoulder and Hand instrument (DASH) and the Canadian Occupational Performance Measure instrument (COPM). Intramuscular blood flow was recorded by laser Doppler flowmetry, and microdialysis was used to analyze muscle metabolism. The difference in intramuscular blood flow between the control and the affected side had decreased 3 and 12 months after treatment ( P =0.03). Lactate concentration at the 12-month follow-up had decreased ( P =0.02); perceived pain was reduced and function in daily activities had improved. Injection of botulinum toxin is an alternative treatment for epicondylitis. Symptom relief may be due to enhanced microcirculation causing an aerobic metabolism.     

抗A型肉毒毒素鼠源性单克隆抗体的制备和鉴定

目的：制备与鉴定抗A型肉毒神经毒素重链C端（ heavy chain of botulinum neurotoxin serotype A, BoNT／AHc）特异性鼠单克隆抗体。方法通过纯化BoNT／AHc抗原、免疫BALB／c小鼠并建立杂交瘤细胞以制备鼠单抗,用ELISA、Western印迹实验和抗体分型试剂盒进行分析鉴定,并通过ELISA检测鼠单抗与BoNT／AHc突变体结合,初步鉴定其在BoNT／AHc的结合表位。结果得到纯度较高的BoNT／AHc抗原,制备了4株特异性鼠单抗1A4、3H3、3H7、5H8。间接ELISA结果显示,单抗细胞上清效价均＞3．0×103;Western印迹检测结果显示,单抗均能与BoNT／AHc特异性结合;抗体亚型鉴定结果为1A4、3H7属于IgG1（Κ）,3H3属于IgM（Κ）,而5H8属于IgG2b （Κ）;叠加ELISA实验表明,4株单抗抗原识别表位相近;用ELISA检测单抗与BoNT／AHc突变体结合实验结果初步确定了4株单抗与BoNT／AHc的结合表位。结论对抗A型肉毒毒素鼠源性抗体完成了制备和鉴定,为肉毒毒素中和抗体的开发与阐明中和抗体的表位奠定了基础。     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

Recommendations for the use of botulinum toxin type A in the management of cerebral palsy

Botulinum toxin type A (BTX-A) is increasingly being used for the treatment of childhood spasticity, particularly cerebral palsy. However, until very recently, all such use in this indication has been unapproved with no generally accepted treatment protocols, resulting in considerable uncertainty and variation in its use as a therapeutic agent. In view of the increasing awareness of, and interest in, this approach to the treatment of spasticity, and also the recent licensing in a number of countries of a BTX-A preparation for treating equinus deformity in children, it would seem timely to establish a framework of guidelines for the safe and efficacious use of BTX-A for treating spasticity in children. This paper represents an attempt, by a group of 15 experienced clinicians and scientists from a variety of disciplines, to arrive at a consensus and produce detailed recommendations as to appropriate patient selection and assessment, dosage, injection technique and outcome measurement. The importance of adjunctive physiotherapy, orthoses and casting is also stressed.     

肉毒梭菌神经毒素检测技术的研究进展

肉毒神经毒素(BoNT)是迄今为止所发现的生物毒素中毒性最强的物质,能引起人和动物以松弛性麻痹为主症的肉毒中毒,同时也是最重要的生物毒素战剂和生物恐怖剂之一.研究和建立BoNT检测与鉴定方法具有十分重要的军事和医学意义.本文综述了近年BoNT检测与鉴定方法的研究进展.