酶联免疫吸附法检测血清舒芬太尼血药浓度的应用价值

目的探讨应用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清舒芬太尼浓度及其在产妇镇痛分娩、婴儿脐带血血药浓度监测中的应用价值。方法应用ELISA两步法定量检测舒芬太尼浓度,拟合标准曲线,测定检测限,并检测自控椎管内镇痛分娩产妇和婴儿脐带血血清样本各48份,分别检测用药1、3、5h和脐带血的血药浓度。结果此方法绘制的舒芬太尼标准曲线为：Y=420.375 X＋32.043,1h血清舒芬太尼浓度为（0.087±0.013）μg/mL,3h舒芬太尼浓度为（0.026±0.011）μg/mL,5h舒芬太尼浓度为（0.011±0.050）μg/mL,脐带血血药浓度为（0.040±0.029）μg/mL。结论 ELISA方法测定人血舒芬太尼简便、快捷,血药浓度1h达峰值,分娩镇痛效果理想,可用于临床药动学研究。婴儿脐带血药物浓度极低,未见药物不良反应。     

噬菌体裂解法检测结核杆菌药物敏感性的研究

目的利用结核分支杆菌噬菌体裂解法检测结核杆菌对利福平、异烟肼、链霉素敏感性。方法选用传统方法判定为利福平、异烟肼、链霉素的耐药或敏感菌株,采用噬菌体裂解法检测其对以上三种药物的敏感性,对比其特异性和敏感度。结果运用噬菌体裂解法检测结果显示,异烟肼药物浓度为1μg/ml时,其灵敏度为87.0%,特异度为93.3%,与传统方法的符合率为92.0%;链霉素药物浓度为4μg/ml时,其灵敏度为96.2%,特异度为92.0%,与传统方法的符合率为92.9%;利福平药物浓度为5μg/ml时,其灵敏度为91.4%,特异度为96.2%,与传统方法的符合率为94.7%。结论采用噬菌体裂解法检测结核杆菌药物敏感性简便易行,灵敏度、特异度高,与传统方法比较符合率较高,便于临床推广。     

CRP及PCT联合检测在新生儿重症感染性疾病中的临床意义

目的：探讨C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT ）联合检测在新生儿重症感染性疾病中的临床意义。方法于本院确诊的感染性疾病新生儿50例纳入观察组,50例健康新生儿纳入对照组,比较组间血清CRP、PCT水平的差异,采用受试者工作特征曲线分析CRP、PCT的诊断性能。结果观察组CRP、PCT水平分别为（10．7±6．8）mg/L、（11．2±6．1）μg/L ,明显高于对照组的（3．3±1．0）mg/L、（1．2±0．5）μg/L（P＜0．05）;CRP诊断灵敏度、特异度分别为56．9％、70．6％,PCT诊断灵敏度、特异度分别为67．5％、85．0％。结论PCT、CRP联合检测对新生儿重症感染性疾病的早期诊断及治疗具有非常重要的临床价值。     

血中阿托品的高效液相色谱检测及灌流清除效率的实验研究

目的研究血中阿托品的高效液相色谱快速检测方法及血液灌流对硫酸阿托品的定量清除效率。方法模拟临床血液灌流装置,对含有硫酸阿托品的血样进行灌流吸附,用高效液相色谱法紫外检测器检测硫酸阿托品的残留量。结果低、中、高三种浓度的加标回收率为107.0%～110.7%,相对标准偏差为0.95%～7.8%。灌流前硫酸阿托品浓度为74.51μg/ml;在灌流1h、2h和3h后,血中残留硫酸阿托品浓度为：0.5g组分别是16.00μg/ml、3.85μg/ml、1.51μg/ml;1.0g组分别是6.45μg/ml、0.81μg/ml、0.21μg/ml;1.5g组分别是4.50μg/ml、0.43μg/ml、0.32μg/ml。结论该法能够做到快速准确地检测血中硫酸阿托品;包膜活性炭血液灌流同样对硫酸阿托品有较强的清除作用,临床灌流过程中要严格监测血中阿托品浓度,适时补充阿托品。     

不同剂型异烟肼血药浓度监测结果分析

目的分析不同剂型异烟肼血药浓度监测结果,指导临床合理用药。 方法将2016年5月至2017年6月昆明市第三人民医院耐药与重症结核病科住院的128例初治肺结核患者分为注射异烟肼组和口服异烟肼组,其中注射组65例,口服组63例。规范用药7 d后采集并检测2组患者7个不同时间点异烟肼的血药浓度,注射组7次采血时间分别为异烟肼输注完0、1、2、3、4、8、24 h;口服组7次采血时间分别为服药后0.5、1、2、3、4、8、24 h。应用秩和检验比较2组间不同采血点血药浓度及峰浓度、谷浓度和血药浓度均值的差异,采用χ²检验比较组间异烟肼达到最低抑菌浓度时例数的差异。 结果注射组异烟肼最高浓度出现在异烟肼输注完0 h,其浓度为2.78（1.86,4.81）μg/ml,口服组最高浓度出现在服药后2 h,浓度为1.00（0.67,2.54）μg/ml;注射组在第1、2、3采血点浓度均高于口服组［2.78（1.86,4.81）μg/ml vs 0.35（0.04,2.28）μg/ml;2.05（1.41,2.49）μg/ml vs 0.76（0.06,3.03）μg/ml;1.02（1.49,2.22）μg/ml vs 1.00（0.67,2.54）μg/ml］,差异均具有统计学（Z=-5.354、-3.394、-2.155,P<0.001、=0.001、=0.031）。注射剂型异烟肼峰浓度、谷浓度、血药浓度均值均高于口服剂型［3.334（2.187,5.310）μg/ml vs 1.179（0.869,1.754）μg/ml;0.009（0.003,0.056）μg/ml vs 0.003（0.001,0.144）μg/ml;1.179（0.869,1.754）μg/ml vs 0.680（0.431,1.836）μg/ml］,且峰浓度和均值浓度比较差异具有统计学意义（Z=-4.631、-1.205、-3.414,P<0.001、=0.228、=0.001）。注射组总的达到最低抑菌浓度患者为88.5%,口服组为87.8%,组间差异无统计学意义（χ²=0.114,P=0.736）。 结论注射剂型异烟肼的血药浓度高于口服剂型,对重症肺结核患者,建议使用注射剂型异烟肼,提高其血药浓度,增加临床疗效。     

万古霉素对脓毒症患者肾功能的影响

目的 探讨脓毒症患者万古霉素治疗时急性肾损伤（AKI）发生的原因.方法 51例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的脓毒症患者,初始使用万古霉素2 g/d,分4次给药,5个半衰期后监测万古霉素谷、峰血药浓度,根据血药浓度调整万古霉素使用剂量,记录7d内万古霉素使用总剂量.检查记录使用万古霉素前及治疗7d后C反应蛋白（CRP）、最高体温,记录治疗7d中脑钠肽（BNP）、中心静脉压（CVP）、乳酸平均值.根据血药浓度调整万古霉素每日使用剂量.万古霉素治疗7d中根据48 h SCr增加超过26.4μmol/L确定为AKI,并分组为AKI组（n=28）和非AKI组（n=23）,比较两组之间万古霉素血药浓度、乳酸、CRP、BNP、CVP、当日最高体温的差异.结果 使用万古霉素5个半衰期后所有患者平均谷浓度（9.18 ±6.15） μg/ml,峰浓度（25.73 ±20.30） μg/ml,调整剂量5d后平均谷浓度（10.26±5.10）μg/ml,峰浓度（23.52±6.83） μg/ml.A组与B组之间万古霉素血药浓度差异无统计学意义.两组之间CRP、BNP、CVP、乳酸、最高与最低体温差值均有统计学差异.结论 使用适当剂量万古霉素治疗脓毒血症时AKI的发生与否可能与感染控制效果及患者血容量是否充足有关.     

4种方法检测低水平乙型肝炎表面抗原比较

目的比较4种方法对低水平乙型肝炎表面抗原检测的灵敏度与符合率。方法采用Axsym微粒子酶免分析（MEIA）、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免疫层析（GICA）4种方法对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L血清标本及定值质控标本进行检测与比较。结果MEIA、TRFIA、ELISA、GICA检测HBsAg的灵敏度分别为0．125μg/L、0．25μg/L、0．50μg/L和2．50μg／L，对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L的血清阳性检出率为74．5％、70．6％、63．2％、22．1％。以MEIA及中和确认试验为准，TRFIA、ELISA、GICA3种方法对HBsAg浓度在5μg/L以下的血清标本漏检率占阳性总检出者的5．9％、16．4％和70．4％。与MEIA的相符率为95．1％、86．8％、47．5％。结论不同的方法对低水平HBsAg检测灵敏度差异较大，HBsAg浓度5μg／L以下的血清标本阳性检出率高低依次为MEIA〉TRFIA〉EUSA〉CICA。     

4种方法检测低水平乙型肝炎表面抗原比较

目的比较4种方法对低水平乙型肝炎表面抗原检测的灵敏度与符合率。方法采用Axsym微粒子酶免分析（MEIA）、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免疫层析（GICA）4种方法对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L血清标本及定值质控标本进行检测与比较。结果MEIA、TRFIA、ELISA、GICA检测HBsAg的灵敏度分别为0．125μg/L、0．25μg/L、0．50μg/L和2．50μg／L，对204例HBsAg浓度介于（0～5）μg／L的血清阳性检出率为74．5％、70．6％、63．2％、22．1％。以MEIA及中和确认试验为准，TRFIA、ELISA、GICA3种方法对HBsAg浓度在5μg/L以下的血清标本漏检率占阳性总检出者的5．9％、16．4％和70．4％。与MEIA的相符率为95．1％、86．8％、47．5％。结论不同的方法对低水平HBsAg检测灵敏度差异较大，HBsAg浓度5μg／L以下的血清标本阳性检出率高低依次为MEIA〉TRFIA〉EUSA〉CICA。     

不同浓度氧化性低密度脂蛋白对成年大鼠心肌细胞的损伤作用

目的：研究不同浓度氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）对成年大鼠心肌细胞的损伤作用。方法本实验采用铜氧化LDL法制备ox-LDL,分为1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml、10μg/ml 5个浓度组和PBS对照组。LDL亦分为相应浓度组。测定培养的心肌细胞的存活率。结果与对照组相比,2.5μg/ml ox-LDL组心肌细胞培养24 h、5μg/ml ox-LDL组培养8 h、10μg/ml ox-LDL组培养4 h,心肌细胞存活率均明显降低（P＜0.05）。LDL组与对照组相比心肌细胞存活率无明显差异,随着ox-LDL作用时间的延长,心肌细胞的存活率逐渐下降。结论 ox-LDL的浓度和作用的时间与心肌细胞损伤的程度有着密切的关系。     

降钙素原与C反应蛋白联合检测在细菌感染中的应用

目的评价联合检测降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）水平的改变在细菌感染患者疗效观察及预后判断中的临床意义。方法对重症监护病房（ICU）的60例细菌感染患者血清PCT、CRP的含量及动态变化进行检测,同时将60例细菌感染患者分为重症感染组和局部感染组,并与病毒感染组进行分析比较。结果重症细菌感染组血清PCT、CRP浓度中位数分别为15.0μg/L和90.0 mg/L;局部细菌感染组血清PCT、CRP中位数分别为1.8μg/L和55.3 mg/L;重症感染组和局部感染组血清PCT、CRP浓度均明显升高,与病毒感染组比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;经有效抗菌药物治疗后,细菌感染组患者PCT、CRP水平与治疗前比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;重症感染组与局部感染组比较,差异亦有统计学意义（P〈0.001、0.05）;以PCT〉0.5μg/L为界,诊断细菌感染的敏感性为96.7%（58/60）,特异性为85.3%（29/34）;以CRP〉8 mg/L为界,诊断细菌感染的敏感性为96.7%（58/60）,特异性为73.5%（25/34）。结论血清PCT、CRP联合检测在细菌感染的早期诊断中有一定价值,动态监测PCT水平有助于评估治疗效果,协助临床判断病情的转归和恶化。     

Molecular Basis of Receptor/G-Protein-Coupling Selectivity

Molecular cloning studies have shown that G-protein-coupled receptors form one of the largest protein families found in nature, and it is estimated that approximately 1000 different such receptors exist in mammals. Characteristically, when activated by the appropriate ligand, an individual receptor can recognize and activate only a limited set of the many structurally closely related heterotrimeric G-proteins expressed within a cell. To understand how this selectivity is achieved at a molecular level has become the focus of an ever increasing number of laboratories. This review provides an overview of recent structural, molecular genetic, biochemical, and biophysical studies that have led to novel insights into the molecular mechanisms governing receptor-mediated G-protein activation and receptor/G-protein coupling selectivity.     

家族性蛋白C与蛋白S基因联合杂合突变家系的基因变异特点与临床特征分析

目的:对1个蛋白C和蛋白S基因联合杂合突变的家系进行各项抗凝功能检测、基因诊断及临床特征分析.方法:采集家族成员外周血,分析各项出凝血指标和血浆抗凝蛋白活性,采用聚合酶链反应、双脱氧链终止DNA测序法(Sanger测序法)检测基因突变.结果:在该家系中发现多人为遗传性蛋白C与蛋白S联合杂合突变,其中6位家族成员伴有深静...     

干化学法与免疫透射比浊法检测尿蛋白结果对比分析

以往尿液中的蛋白质常采用化学方法来检测，现阶段大都采用尿液分析仪干化学法来检测，由于其敏感性差且干扰因素较多，尿液分析仪只能作为一种过筛试验，尿微量白蛋白的检测正好弥补了这方面的不足。微量白蛋白尿是指尿中蛋白含量超过正常范围的上限而蛋白定性的化学方法又不能检测出来的阶段，在此阶段，运用化学方法检测往往不能满足临床的要求。两种方法实际上都是检测尿液中的白蛋白成分，但由于方法学、灵敏度和影响因素的不同，测定结果之间也存在着一定的差异。为了了解二种方法检测结果之间的一致性，笔者在用尿液分析仪检测尿蛋白的同时，采用免疫透射比浊法对尿微量白蛋白进行了检测，现将两种测定结果的对比分析如下.     

脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达

目的在大肠杆菌中表达脑钠肽前体(proBNP)及氨基末端前体蛋白(NT-proBNP)。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-proBNP和PGEX-20T-NT-proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白。结果在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性。结论两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂盒的开发奠定基础。     

Hedgehog信号通路效应蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路中效应蛋白在人前列腺癌、癌旁正常前列腺组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测51例前列腺癌和癌旁正常前列腺组织中Shh、Ptchl和Glil的表达。结果Shh、Ptchl和Glil在前列腺癌组织中均为高表达,Shh与Ptchl的表达呈正相关。结论在前列腺癌Hh信号通路中Shh、Ptchl和Glil呈现高度表达状态,Glil更能准确地反映前列腺癌细胞的增殖水平和分化程度。     

Automated immunoturbidimetric methods for the determination of retinol binding protein, prealbumin and transferrin in urine

We describe the development of rapid and simple automated methods for the estimation of retinol binding protein (RBP), prealbumin (PA) and transferrin (TRF) in urine. These methods measure the turbidity formed as a result of reaction between the protein and a specific antibody in a phosphate buffer containing 70 g/L polyethyleneglycol as accelerator for the antigen antibody reaction. The method for retinol binding protein (RBP) correlated well when compared with a method based on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (r = 0.978). The recoveries were 93-104%, 84-95% and 84-100% for RBP, PA and TRF respectively. The between-batch coefficients of variation were 2.6-10.6, 2.8-12.6 and 4.2-8.7% respectively. The analytical range of the method was 0.0625 to 40 mg/L for RBP, 0.28 to 45 mg/L for PA and 0.14 to 70 mg/L for TRF. The methods can be performed manually using a simple spectrophotometer or can be easily automated.     

急性淋巴细胞白血病患者血清PTK7 mRNA和蛋白表达水平及其临床意义

本研究旨在检测不同亚型急性淋巴细胞性白血病患者血清PTK7 mRNA和蛋白的表达水平,探讨其诊断的临床价值.选择2012年5月-2014年4月在本院诊断为急性淋巴细胞白血病（ALL）患者,按照纳入和排除标准共纳入136例患者,按照细胞形态学将他们分成L1组（n=42）、L2组（n=45）和L3组（n=49）,另外选择48例正常儿童为对照组.使用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中PTK7 mRNA转录水平,采用Westem blot检测血清中PTK7蛋白表达量.结果表明,L1组PTK7转录水平显著高于正常组（P=0.000）.L2组PTK7转录水平显著高于L1组（P =0.000）.L3组与L2组之间无显著性差异（P =0.123）.L1组患者PTK7蛋白水平显著高于正常组（仁1.564,P=0.000）,L2组PTK7蛋白水平显著高于L1组（t=1.437,P=0.003）,L3组PTK7蛋白水平与L2组比较无显著差异（t=0.821,P=0.312）.结论：血清PTK7蛋白表达检测具有诊断ALL的潜在临床价值,但对ALL分型不具有型特异性.     

p16、CyclinD1及nm23在非小细胞肺癌中的表达

目的 研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３基因蛋白的表达和意义。方法 应用免疫组化ＳＰ方法检测６４例ＮＳＣＬＣ中ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３蛋白的表达。结果 ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１及ｎｍ２３在ＮＳＣＬＣ中的表达率分别为４２．２％、６５．６％、５３．１％;ｐ１６蛋白阳性表达率与ＮＳＣＬＣ的分化程度和患者术后生存期呈正相关（Ｐ〈０．０５）;ｐ１６、ｎｍ２     

Recurrent acute stent thrombosis associated with protein C and S deficiencies

Protein C and protein S deficiencies may uncommonly be responsible for coronary arterial thrombosis. We report a young woman with recurrent acute stent thrombosis due to the deficiency of protein C and S. After coronary stenting, stent thrombosis occurred two times despite aggressive antiplatelet therapy, including aspirin, clopidogrel and glycoprotein IIb/IIIa inhibitor. This report suggests that the deficiency of protein C and S should be born in mind in a young patient with recurrent thrombotic events, and that anticoagulants in addition to antiplatelet agents considered in the presence of their deficiency.