UV通过p38MAPK促进大鼠胶质瘤C6细胞凋亡

目的：探讨p38MAPK在紫外线损伤刺激细胞中的特异性信号转导作用。方法：流式细胞仪检测紫外线照射30min后1，2及4h的C6细胞周期变化和是否有凋亡发生；应用免疫细胞化学技术观察紫外线刺激前后p38MAPK在C6细胞中的表达强度和分布特征。结果：细胞周期结果显示1，2和4h后C1期细胞数分数各增多0．12，0．21和0．19，而S期细胞数分数减少0．10，0．14和0．15；各组的凋亡率分别是12％，49％和34％；未受刺激的细胞中，p38MAPK在胞质和胞核表达较弱；紫外线损伤作用2h后，细胞核区的染色强度即明显增强，而胞质区域的染色强度相对降低。结论：C6细胞受紫外线损伤后可通过p38MAPK通路发生凋亡。     

p38MAPK基因诱导胶质瘤细胞凋亡

目的 研究p38MAPK基因转染大鼠胶质瘤细胞系C6后对其生物学特性的影响。方法 利用脂质体介导法将p38MAPK基因导入大鼠胶质瘤细胞系C6中,用免疫细胞化学染色检测其在细胞转染前后的表达情况,用HE染色、流式细胞仪等方法研究其对细胞形态、粘着状况和生长周期的影响。结果 转染pCMV5-P38MAPK质粒组p38MAPK蛋白表达阳性,细胞形态发生变化,贴壁性降低,出现大量凋亡细胞。结论 转染p38MAPK基因可诱导胶质瘤细胞凋亡。     

p38MAPK信号通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的观察用特异性p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养大鼠HSC株,用SB203580(浓度为5、10、20μmol/L)对乙醛(浓度200μmol/L)刺激的大鼠HSC进行干预,分别以酶标仪及流式细胞仪检测HSC增殖、凋亡及周期的变化。结果不同浓度SB203580对HSC增殖有抑制作用,增殖抑制率分别为21.6%、27.0%、31.5%,与乙醛对照组有显著差异(P<0.05),且呈剂量效应关系;对HSC凋亡有促进作用,凋亡率分别为(13.7±0.3)%、(14.9±0.2)%、(16.1±0.2)%,凋亡率逐渐增加,与乙醛对照组有显著差异(P<0.05),且呈剂量效应关系;可以明显阻滞乙醛刺激的HSC由G1期进入S期,G1/G0期细胞比例逐渐增高[(29.1±1.9)%、(35.5±3.4)%、(46.0±2.6)%],S期细胞比例逐渐降低[(53.4±2.6)%、(48.4±3.6)%、(43.8±1.1)%],与乙醛对照组有显著差异(P<0.05),呈...     

不同浓度伊马替尼对大鼠C6胶质瘤细胞凋亡和细胞周期的影响

目的 研究伊马替尼对大鼠C6胶质瘤细胞凋亡和细胞周期的影响.方法 采用MTT法测定伊马替尼对C6胶质瘤细胞生长曲线的影响.用Hochest/PI染色法和流式细胞仪观察伊马替尼不同浓度(0.156、10和15 μmo/L)作用前后,大鼠C6胶质瘤细胞凋亡和细胞周期的变化.结果 伊马替尼15 μmo/L可显著影响C6胶质瘤细胞的生长曲线.伊马替尼诱导C6细胞凋亡呈时间-剂量依赖性;在72 h时间点,10和15岬μmo/L组G1/G0期细胞比例增加,分别达到(68.53±0.83)%和(70.41±0.62)%(p<0.01);G2期细胞比例分别降至(14.48±0.12)%和(13.84±2.86)%(P＜0.01);S期细胞比例分别降至(16.98±0.72)%和(15.78±2.28)%(P<0.01).结论 伊马替尼可诱导大鼠C6胶质瘤细胞凋亡,改变细胞周期的分布.     

Role of p38MAPK in mediating TNF-α-induced apoptosis of rat glioma cell line C6

Objective: To study the role of p38MAPK in mediating TNF-α-induced apoptosis of rat glioma cell line C6. Methods: Effect of TNF-α on the proliferation of C6 cells was determined by MTT assay. The TNF-α induced apoptosis was detected by transmission electron microscopy and flow cytometry. The expression of p38MAPK was detected by SABC method and Western-blot. The effect of SB202190, a specific inhibitor of p38MAPK, on TNF-α-induced apoptosis was observed by flow cytometry and SABC method. Results: Inhibitory rate of TNF-α(2×105 U/L) on C6 cells was 43. 75% . In the TNF-α treated group, apoptotic cells were observed by transmission electron microscopy and the apoptotic rate was 37. 5% by flow cytometry. p38MAPK positive signals were detected by SABC method and Western-blot. In the SB202190 treated group, the apoptotic rate was 7. 0% and no p38MAPK signals were found. Conclusion: Apoptosis of C6 cells and expression of p38MAPK can be induced by TNF-α. The activation of p38MAPK promotes the apoptosi     

人参皂甙Rh2对C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

观察人参皂甙Ｒｈ２对Ｃ６胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并在分析分子水平探讨其作用机理,方法：细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果：①Ｒｈ２２,４．８μＭＯＬ／ｌ对Ｃ６胶质瘤细胞有增殖抑制作用,且呈明显量效关系;②Ｒｈ２作用７２ｈ后,４μｍｏｌ／Ｌ浓度对Ｃ６胶质瘤细胞诱导凋亡作用最为明显;③Ｒｈ２作用后,Ｇ０／Ｇ１期细胞百分率明显下降,而Ｓ期细胞百分率显著增加。,结论：     

HCMV感染对人神经胶质瘤U251细胞p38MAPK活性的影响

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中的感染非常普遍。随着器官移植的广泛开展、艾滋病的传播以及耐药病毒株的出现,对HCMV致病、致畸机制的研究越来越受到重视。MAPK是细胞内的一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,它介导的信号转导通路是生物信号引起核反应的重要通路,参与细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程,并在细胞恶性转化等病理过程     

p38MAPK在细胞凋亡中的作用

丝裂素活化的蛋白激酶(mitogen-activated pro-tein kinase,MAPK)级联是细胞内重要的信号转导系统,参与细胞的生长、发育、分化和凋亡等一系列生理病理过程。在哺乳动物中,细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)亚族最先被发现和克隆,并已进行了比较详细的研究。近年来又鉴定了c—Jun氨基末端激酶(c—Jun N—ter-minal kinase,JNK),ERK5/大丝裂素活化蛋白激酶 l     

p38在榄香烯致鼠胶质瘤C6细胞周期阻滞中的作用

目的探讨莪术提取物——榄香烯对神经胶质瘤细胞的细胞周期的影响及相关机制。方法采用流式细胞分析、免疫印迹等方法分别检测榄香烯对大鼠胶质瘤细胞的细胞周期的影响和p38蛋白表达的变化,并观察p38抑制剂和其显性失活突变体对榄香烯作用的影响。结果经榄香烯40、60及80μg/ml处理后,细胞周期结果显示G0／G1期细胞百分数依次增加11％、16．95％、19．57％,且榄香烯可明显上调磷酸化p38蛋白表达,呈时间、剂量依赖性。SB203580及转染DN—p38能抑制p38的激活,阻断榄香烯的作用。结论榄香烯能诱导胶质瘤细胞的G0／G1期的阻滞,上调磷酸化p38蛋白质表达可能是榄香烯诱导C6细胞周期阻滞的机制。     

p38MAPK gene transfection induced the apoptosis of rat glioma cells C6

Thephosphorylationanddephosphorylationofproteinisoneofthemostimportantmechanismsofcellularsignaltransduction.Theconjugationofphos-phoricacidresiduesandspecificaminoacidresiduesofproteiniscatalyzedbyproteinkinases.Seriesofproteinkinasesandtheirphosphorylationmakeupthecascadereactionofsignaltransduction.Mitogen-activatedproteinkinase(MAPK)signalpathwayisahotpointinrecentyears.Ithasbeenidentifiedthat4signalpathwaysareineukaryoticcells:extracellularsignal-regulatedproteinkinase(ERK)，c-JunN-te…     

过度表达G蛋白调节子16促进大鼠胶质瘤C6细胞增殖

目的 探讨G蛋白调节子16（RGS16）对大鼠胶质瘤C6细胞的生物学特性的影响。方法 利用脂质体介导法将RGS16基因导入C6细胞中，在倒置显微镜下观察细胞形态变化和贴壁情况；^13H-TdR法检测C6细胞在转染不同梯度pCMV5-RGS16和pCMV5质粒后的增殖情况；免疫细胞化学法检测转染前后PGS16蛋白的表达情况；流式细胞仪检测转染pCMV5-RGS16和pCMV5质粒36h后细胞周期变化和细胞是否有凋亡发生。结果 转染pCMV5-RGS16质粒24h后30％细胞贴壁性降低，突起收缩，细胞变圆；RGS16蛋白表达阳性；^3H-TdR法检测显示C6细胞增殖速度与转染pCMV5-RGS16的量呈正相关；细胞周期结果显示G1期细胞百分数减少10％，而S期细胞百分数增多14％；未发现RGS16与凋亡直接关系。结论 RGS16可能促进C6细胞的增殖。     

雷公藤内酯醇通过p38MAPK信号通路诱导Hut102细胞凋亡

目的 探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)诱导皮肤T细胞淋巴瘤蕈样肉芽肿细胞株Hut102的凋亡及其机制.方法 体外培养的Hut102细胞与12.5、25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇共同孵育,分别在24、48、72 h用MTT法检测Hut102细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测Hut102细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、caspase-3蛋白的表达水平.结果 不同浓度雷公藤内酯醇(12.5、25、50、100 nmol/L)作用Hut102细胞24 h后的增殖抑制率分别为8.67%、30.02%、52.54%、59.62%.Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测经25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇处理24 h后Hut102细胞凋亡率分别为9.19%、21.49%、26.34%,当50 nmol/L雷公藤内酯醇组预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后,Hut102细胞凋亡率下降为14.35%.不同浓度雷公藤内酯醇(50、100 nmol/L)处理Hut102细胞后p38、caspase-3蛋白的表达被激活,同样50 nmol/L雷公藤内酯醇组也预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预,结果p-p38的表达降低,caspase-3激活被抑制.结论 雷公藤内酯醇可以抑制Hut102细胞的增殖,其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路使部分Hut102细胞产生凋亡.     

p38丝裂原激活蛋白激酶基因重组慢病毒载体的构建及其在建立人前列腺癌稳定细胞株中的应用

目的构建p38丝裂原激活蛋白激酶基因(MAPK)重组慢病毒载体并建立表达外源性p38基因的人前列腺癌稳定细胞株。方法采用限制性内切酶酶切、T4 DNA连接酶连接等方法,将EGFP/p38融合基因插入慢病毒载体pTYF-EF1α-IRES-EGFP中,构建启动子EF1α调控的EGFP/p38共表达慢病毒载体pTYF-EF1α-EGFP/p38,经酶切鉴定后,利用慢病毒三质粒系统,通过脂质体法转染包装细胞HEK 293T细胞,收集病毒上清后转导人前列腺癌DU145细胞株,经有限稀释法筛选重组EGFP/p38稳定细胞株,用Western blotting检测细胞总p38的表达,用计数法绘制细胞的生长曲线。结果经酶切鉴定,成功构建EGFP/p38重组慢病毒载体,并包装慢病毒,检测病毒悬液的滴度为4.7×106 TU/ml,利用此病毒悬液感染DU145细胞,成功筛选到EGFP/p38稳定表达细胞株,Western blotting显示该细胞株能稳定表达外源性EGFP/p38融合蛋白,这种过表达p38的细胞株的生长速度明显低于对照组。结论成功构建p38 MAPK重组慢病毒载体并建立了表达外源性p38 MAPK基因的稳定细胞株EGFP/p38-DU145,细胞内p38过表达能够抑制DU145细胞的增殖。     

黄芩苷通过激活JNK/p38 MAPK通路诱导ALL Reh细胞凋亡

目的探究黄芩苷对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株Reh增殖和凋亡的影响及c-Jun氨基蛋白激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路在其机制中的作用。 方法黄芩苷处理或联合活性氧(ROS)清除剂NAC共处理Reh细胞;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平和线粒体膜功能(MMP);免疫荧光实验观察凋亡细胞的数目及其形态变化。Western blotting免疫印迹检测Reh细胞内凋亡蛋白和信号通路蛋白的表达水平。 结果与对照组比较,黄芩苷组Reh细胞增殖被抑制,细胞凋亡率、促凋亡蛋白、ROS、JNK和p38磷酸化水平显著上升,抗凋亡蛋白表达下调,MMP明显受损(P＜0.01)。NAC清除ROS后明显恢复细胞增殖,JNK和p38磷酸化水平明显下降,Survivin表达恢复(P＜0.01)。 结论黄芩苷经激活JNK/p38 MAPK通路活化Caspase3/7,诱导Reh细胞凋亡。