抗人心肌肌钙蛋白T杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

[目的]建立稳定分泌抗人心肌肌钙蛋白T(cardic troponin,cTnT)单克隆抗体的杂交瘤细胞株.[方法]以纯化的cTnT(分子质量为3.7×107)加福氏佐剂免疫8周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞sp2/0融合,以酶联免疫吸附法(ELISA)筛选.阳性克隆以有限稀释法进行克隆化、Western blot法鉴定所制备的单克隆抗体.[结果]共筛出4株稳定分泌抗cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的抗体效价高达10-5,经免疫学鉴定其分泌的免疫球蛋白类型均为IgG1、κ型,且Western b1ot鉴定4株细胞株所分泌的抗体均与人cTnT均有很好的反应性.[结论]获得4株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为cTnT的临床研究提供了可能性.     

抗人脑钠肽单克隆抗体的制备及其鉴定

目的:制备抗人脑钠肽单克隆抗体并对其进行初步鉴定。方法:实验于2004-12/2006-02在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所进行。利用碳化二亚胺法将合成的人脑钠肽与牛血清白蛋白偶联制备完全抗原,反复免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与Balb/c小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)在PEG下融合,HAT选择性培养,间接酶联免疫吸附方法对细胞培养上清检测、筛选,选择筛选结果脑钠肽抗体阳性的细胞株连续进行3次亚克隆,建立稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株。扩大培养阳性单克隆细胞株后,腹腔注射小鼠,制备腹水。对腹水亲和层析纯化,所得的单克隆抗体行初步鉴定。结果:免疫小鼠血清呈脑钠肽抗体阳性,经筛选得到3株稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的单克隆抗体经鉴定为IgG型,蛋白质印迹分析证实单克隆抗体可特异识别脑钠肽,具备较高的特异性及敏感性。结论:成功制备了3株抗脑钠肽特异性的单克隆抗体,可用于脑钠肽免疫检测方法的建立。     

人血浆凝血因子Ⅶ单克隆抗体的制备与应用初探

目的制备能稳定分泌人凝血因子Ⅶ(FⅦ)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化人FⅦ单克隆抗体并初步应用。方法 1)以纯化的人血浆FⅦ为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术筛选出能分泌人FⅦ单克隆抗体的细胞株,用体内诱生法制备小鼠腹水,经硫酸铵沉淀、DEAE-affi-gel-blue凝胶层析纯化单克隆抗体;鉴定抗体的纯度和亚类、抗体与FⅡ、FⅨ、FⅩ的交叉反应性、二价金属离子对抗原抗体结合的影响等特性。2)将人FⅦ单克隆抗体连接到GoldMag-@磁微粒表面,检测连接效率;将磁微粒连接的抗体与FVⅡ反应,并用含有二价金属离子的缓冲液进行洗脱,探索用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法纯化FⅦ的方法和可行性。结果 1)成功制备出22株分泌人FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为HFⅦ001～022;所选取的HFⅦ002、0040、050、130、140、21等6株细胞制备的纯化的抗体,其重链的亚类均为IgG1,除与FⅦ反应外,均不与FⅡ、FⅨ、FⅩ发生交叉反应,其中HFⅦ005可以抑制血浆FⅦ的凝血活性,HFⅦ0020、040、05与FⅦ的结合明显受Zn2+的抑制。2)上述6株细胞抗体与磁微粒的连接率为24.0%～94.7%,HFⅦ0020、050、13等3株细胞抗体连接磁微粒后可以结合FⅦ,对其中1株磁微粒连接抗体(HFⅦ005)进行试验显示:其结合的FⅦ在有Zn2+存在时能解离下来。结论制备出能分泌人血浆FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株并纯化出单克隆抗体;应用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法,可以分离纯化人FⅦ。     

抗粉螨Ⅰ类变应原单克隆抗体细胞株的建立与鉴定

目的建立粉螨Ⅰ类变应原(dermatophagoides farinaeⅠ,Der fⅠ)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der fⅠ单克隆抗体进行鉴定。方法用重组Der fⅠ蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体,Western blot法确定单克隆抗体的丙种球蛋白特异性,对单克隆抗体进行鉴定。结果获得2株可稳定分泌高效价Der fⅠ单克隆抗体的杂交瘤细胞株;Western blot试验证明2株单抗与DerfⅠ蛋白均有特异性反应。结论成功制备2株抗Der fⅠ的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力。     

抗人脑钠肽单克隆抗体的制备及其鉴定

目的：制备抗人脑钠肽单克隆抗体并对其进行初步鉴定。 方法：实验于2004-12／2006-02在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所进行。利用碳化二亚胺法将合成的人脑钠肽与牛血清白蛋白偶联制备完全抗原，反复免疫Balb／c小鼠，应用杂交瘤技术将免疫小鼠的脾细胞与Balb／c小鼠骨髓瘤细胞（SP2／0）在PEG下融合，HAT选择性培养，间接酶联免疫吸附方法对细胞培养上清检测、筛选，选择筛选结果脑钠肽抗体阳性的细胞株连续进行3次亚克隆，建立稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株。扩大培养阳性单克隆细胞株后，腹腔注射小鼠，制备腹水。对腹水亲和层析纯化，所得的单克隆抗体行初步鉴定。 结果：免疫小鼠血清呈脑钠肽抗体阳性，经筛选得到3株稳定分泌脑钠肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株，纯化的单克隆抗体经鉴定为IgG型，蛋白质印迹分析证实单克隆抗体可特异识别脑钠肽，具备较高的特异性及敏感性。 结论：成功制备了3株抗脑钠肽特异性的单克隆抗体，可用于脑钠肽免疫检测方法的建立。     

人肝素酶蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

目的构建人肝素酶蛋白的原核表达载体,表达并纯化重组人肝素酶蛋白和制备其单克隆抗体。方法将人肝素酶cDNA克隆至原核表达载体pET30a(+),经大肠杆菌表达、纯化后,获得的肝素酶纯化蛋白免疫小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备能产生肝素酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用Western blotting、ELISA等技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定。结果原核表达重组质粒在大肠杆菌中能高效表达人肝素酶蛋白,并进一步从10株杂交瘤细胞中选取了3株能稳定分泌人肝素酶单抗的杂交瘤细胞株。结论成功制备了3株人肝素酶特异性单克隆抗体。     

邻苯二甲酸单苄酯单克隆抗体的制备

目的制备抗邻苯二甲酸单苄酯(mono-benzyl phthalate,MBzP)的单克隆抗体。方法本实验利用活泼酯法,将邻苯二甲酸单苄酯分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,获得完全抗原MBzP-BSA和MBzP-OVA,用MBzP-BSA免疫Balb/c小鼠,制备杂交瘤细胞,利用ELISA方法检测阳性杂交瘤细胞株分泌抗体的效价。结果获得了稳定分泌抗MBzP的细胞株1B9,以该细胞株体内诱生腹水制备腹水型单克隆抗体,纯化后效价为1∶128 000。结论成功制备了抗邻苯二甲酸单苄酯的单克隆抗体。     

抗HCCR单克隆抗体的制备及其鉴定

目的制备抗人宫颈癌癌基因（HCCR）单克隆抗体（mAb）,并进行鉴定。方法以HCCR重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,常规筛选杂交瘤细胞。腹水诱导法制备抗人HCCR单克隆抗体,并经蛋白A亲合层析进行纯化。用Western blot和免疫荧光等方法检测HCCR mAb的特异性。用纯化HCCR蛋白进行包被,建立间接ELISA方法,检测系列稀释的HCCR mAb,确定其灵敏度。结果筛选出2株分泌抗人HCCR mAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明抗人HCCR抗体能与HCCR蛋白特异性结合,免疫荧光结果显示肝癌HepG2细胞中胞浆和胞膜均呈阳性染色。间接ELISA方法检测HCCR mAb的灵敏度可达到1μg/L。结论成功制备并鉴定了特异性抗人HCCR mAb的杂交瘤细胞株,为进一步深入研究HCCR的生物学特征和临床应用打下基础。     

人乳腺珠蛋白单克隆抗体制备及生物特性鉴定

目的构建重组hMAM蛋白,通过杂交瘤技术获得特异性的抗hMAM的单克隆抗体,并鉴定其生物特性。方法克隆表达hMAM 8-93AA、20-52AA、43-70AA、56-82AA、67-93AA区段的抗原,以纯化的pBV220/hMAM(8-93AA)为免疫原,杂交瘤技术筛选出能稳定分泌抗hMAM单克隆抗体的细胞株。采用Western blotting和免疫组织化学染色方法鉴定其表位和特异性。结果获得6个高纯度的重组抗原,通过pBV220/hMAM(8-93AA)免疫小鼠后,获得2株稳定分泌抗hMAM抗体的杂交瘤细胞株。Western blotting结果显示MAb1、MAb2分别是识别hMAM20-52AA、hMAM52-67AA片段的特异性单克隆抗体。免疫组织化学染色结果显示该抗体仅在乳腺组织中呈阳性反应,在其他肿瘤组织中不反应。结论通过杂交瘤技术成功制备了两株稳定分泌且高特异性的抗hMAM不同位点的单克隆抗体细胞株,为进一步研制高灵敏的乳腺癌早期检测试剂奠定了基础。     

抗人FcεRIα单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备鼠抗人IgE高亲和力受体FceRIa的单克隆抗体并对其进行初步鉴定,为过敏性疾病的相关研究提供条件。方法用人FceRIα重组蛋白作为抗原免疫BALB／C小鼠,常规方法进行融合,经筛选及克隆化建立可稳定分泌抗人FceRIαmAb的杂交瘤细胞株,用ELISA、免疫荧光标记、荧光显微镜和流式细胞仪分析以及Western—Blot方法进行抗体的初步鉴定。结果筛选到2株可稳定分泌抗人FcεRIα单克隆抗体的细胞株,流式细胞术分析此2株抗体与CHO3D10细胞的结合率均大于95％,免疫荧光显示2株抗体均能与FcεRIα发生特异性反应。Western-Blot结果显示抗体轻重链分别约28Kd与50Kd。结论制备的两株FcεRIα的单克隆抗体可特异性与细胞表面FcεRI结合,可用于肥大细胞功能以及变态反应病临床治疗的进一步研究。     

抗卵巢上皮癌单克隆抗体的制备和鉴定

以人的浆液性卵巢上皮癌细胞系ＨＯ－８９１０为抗原，制备分泌抗卵巢癌单克隆抗体的杂交瘤，经间接免疫荧光组化鉴定证实。制备的单克隆抗体ＯＣ１Ｃ３与ＨＯ－８９１０呈强阳性反应，与其他肿细胞系则无反应或反应极弱。在冰冻切片中，单克隆抗体ＯＣ１Ｃ３与卵巢恶性肿瘤呈强阳性反应（７／８），与绒癌有部分交叉反应（１／２），与正常卵巢和胚胎组织无反应。结果表明ＯＣ１Ｃ３是卵巢恶性肿瘤的一种特异性抗原的单克隆抗体。为     

铜绿假单胞菌VgrG1a蛋白的原核表达及其人鼠嵌合型单抗的制备与鉴定

目的：探究铜绿假单胞菌Ⅵ型分泌系统VgrG1a蛋白的原核表达方法，并制备鼠源性和人鼠嵌合型单克隆抗体为抗铜绿假单胞菌感染提供了研究基础。方法：根据NCBI网站上查找到的VgrG1a序列合成重组质粒pET-21a-VgrG1a，转化大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）plysS进行诱导。通过免疫沉淀法和酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）对诱导得到的重组蛋白进行表达、纯化和鉴定。用纯化后的VgrG1a重组蛋白免疫BALB/c小鼠，制备鼠源多克隆抗体，并利用ELISA方法测定小鼠血清抗体的效价和特异性。通过P3X63Ag8.653骨髓瘤细胞融合小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞，再通过有限稀释法获得单克隆细胞。经多次ELISA筛选出能够稳定产出特异性抗体的细胞株。在公司测序后获得单克隆抗体的序列信息，并设计出含有此抗体的质粒，转染Expi293细胞，制备人源化单克隆抗体。结果：结果显示，实验成功构建了VgrG1a重组质粒，经探索在最佳表达诱导条件下（温度16℃，IPTG浓度0.5mM，诱导时间16小时），表达得到了重组蛋白VgrG1a，SDS-PAGE显示72kDa处重组蛋白浓度最高。检测制备的鼠源抗体在稀释到1/640000后效价仍较高，并且与目的蛋白能够能特异性的识别并结合。人鼠嵌合型单克隆抗体8A4F5对抗原VgrG1a亲和力高于鼠源单克隆抗体。结论：以上结果表明，该原核表达的重组蛋白具有良好的免疫原性，利用表达的重组蛋白制备的单克隆抗体具有较高的抗体效价和特异性，为进一步研究蛋白的结构与功能、研制相关的诊断试剂及疫苗提供了生物材料。     

心型脂肪酸结合蛋白金标记免疫层析法的建立

目的建立胶体金免疫层析检测人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法。方法采用胶体金标记抗H-FABP单克隆抗体67D3,将其与生物素化的抗H-FABP单抗66E2包被于吸水纤维,将链霉亲合素结合于硝酸纤维素膜,制成免疫层析试条,依据试剂条上出现肉[可见的红色线条判定结果。用其检测93例发病6h内的胸痛患者血浆中的H-FABP,与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)的检测结果比较,评价其诊断急性心肌梗死(AMI)的敏感性和特异性。结果金标记试条检测H-FABP的浓度低限值为16.8ng/ml,检测结果与ELISA方法比较符合率达96.9%,诊断发病3h内和6h内AMI的敏感性分别为64.29%和84.38%,高于cTnI(28.57%、53.13%)和CK-MB(21.43%、56.25%)(P<0.05),特异性无显著性差异。结论本法简便、快速、准确,可用于AMI早期筛查。     

Characterization of a monoclonal antibody directed against mouse macrophage and lymphocyte Fc receptors

To investigate the antigenic relationship between the macrophage and lymphocyte Fc receptors (FcR), a monoclonal antibody capable of blocking mouse macrophage Fc receptors was selected. Hybrids were formed by fusing the P3U1 mouse myeloma and spleen cells from a rat immunized with the mouse macrophage-like cell lines J774 and P388D1. The Fab fragment of the monoclonal IgG secreted by clone 2.4G2, inhibited the trypsin-resistant Fc receptor II (FcRII), which is specific for immune aggregates of mouse IgG1 and IgG2b, but had no inhibitory effect on the trypsin-sensitive Fc receptor I (FcRI), which binds monomeric IgG2a and erythrocytes coated with IgG2a. Thus, the monoclonal 2.4G2 IgG appeared to be specific for macrophage FcRII. Further evidence that the 2.4G2 IgG was directed against FcRII came from binding studies of the monoclonal antibody to J774 cells and a series of independently isolated variants which do not express FcRII. These variants of J774 bound 5% as much of the monoclonal antibody as the parent line, which bound 600,000 molecules of 2.4G2 IgG per cell. The antigenic relatedness of mouse lymphocyte FcR to mouse macrophage FcRII was demonstrated by the binding of 2.4G2 IgG to FcR-bearing lymphoid cell lines and the inhibition of the lymphocyte FcR by the monoclonal antibody. Preincubation of spleen cells and peritioneal cells with 2.3G2 IgG likewise inhibited rosette formation with ox erythrocytes coated with rabbit IgG. The ability of the hybridoma IgG to inhibit mouse FcRII was independent of the major histocompatibility complex. The 2.4G2 IgG antigenic determinant was not present on rat, guinea pig, rabbit, or human FcR-bearing cells.     

鼠源性抗星形胶质细胞上调基因1单克隆荧光抗体在恶性浆膜腔积液检测中的应用

目的应用鼠源性抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆荧光抗体检测恶性浆膜腔积液中的肿瘤细胞。方法应用PCR及Western-blot方法检测浆膜腔积液脱落细胞中的AEG-1表达;用鼠源性抗AEG-1单克隆荧光抗体与恶性浆膜腔积液中的肿瘤细胞共孵育,同时采用良性病变的浆膜腔积液作为阴性对照。结果恶性浆膜腔积液脱落细胞中AEG-1表达呈阳性,而良性病变的浆膜腔积液脱落细胞中AEG-1表达为阴性或弱阳性;同时鼠源性抗AEG-1单克隆荧光抗体直接标记脱落细胞的结果与PCR和Western-blot检测结果一致。结论鼠源性抗AEG-1单克隆荧光抗体为浆膜腔积液中的肿瘤细胞鉴定提供了新的实验手段。     

抗脑源性神经营养因子单克隆抗体在骨髓瘤异体移植动物模型中的抗肿瘤效应

为探索BDNF／TrkB途径是否可能成为治疗MM的潜在靶点、抗脑源性神经营养因子（BDNF）单克隆抗体能否阻碍疾病的发展，用骨髓瘤异体移植的动物模型评估在体内BDNF单克隆抗体的抗肿瘤活性。选择糖尿病抵抗／重症联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠，皮下注射人骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞建立异体移植动物模型。抗体以20μg/只的剂量于接种肿瘤细胞后第1、2、3天腹腔内注射或者以100μg／只的剂量于检测到瘤体后每周1次腹腔内注射。采用组织学方法检测瘤细胞的形态特征，以免疫组织化学染色法分析瘤组织的微血管密度，应用^3H—TdR掺入法和Matrigel网状结构形成实验分别检测BDNF单克隆抗体对RPMI8226细胞体外增殖和PRMI8226细胞诱导的内皮细胞血管新生的影响。结果表明：在建立的骨髓瘤细胞异体移植动物模型内，多次注射BDNF单克隆抗体可缩小肿瘤体积，降低瘤组织微血管密度，延长无病生存期和生存时间，而且BDNF单克隆抗体可显著抑制体外RPMI8226细胞的增殖和诱导内皮细胞血管新生，而相应的对照抗体却无此效应。结论：BDNF单克隆抗体可抑制动物模型中皮下浆细胞瘤的生长和血管新生：     

Monoclonal rat anti-major histocompatibility complex antibodies display specificity for rat,mouse, and human target cells

24 monoclonal rat antibodies are described that are reactive with determinants encoded by the major histocompatibility complex (MHC) of the rat. These hybridoma antibodies were derived by fusing mutant mouse myeloma cells to spleen cells from Lewis rats immunized with allogeneic Brown Norway cells. All 24 antibodies are cytotoxic for both Brown Norway target cells and target cells from the appropriate MHC congenic rats. Pattern of cytotoxicity and hemagglutination strongly suggest reactivity against class I (K or D equivalent) rat MHC determinants. Cytotoxic cross-reactivity patterns were generated for each monoclonal antibody on a panel of rat and mouse lymphoid cells and human peripheral T lymphocytes. A high degree of interspecies cross- reactivity was noted with approximately one-half of the antibodies positive on human and/or mouse target cells. 11 antibodies recognized polymorphic determinants in the mouse, and, by using target cells from MHC congenic mouse strains, it was shown that these determinants are encoded by genes within the H-2 complex. Finally, by considering the overall reactivity patterns of these monclonal antibodies on all target cells, one can show that these 24 antibodies represent a minimum of 14 antibody specificities.     

Monoclonal antibodies directed against the T-cell activation molecule CD137 (interleukin-A or 4-1BB) block human lymphocyte-mediated suppression of tumor xenografts in severe combined immunodeficient mice

A monoclonal antibody specific for the human analog of the murine T-cell activation molecule 4-1BB was generated and is shown here to react selectively with activated human CD4+ and CD8+ T lymphocytes. Treatment of these T cells in a one-way mixed lymphocyte culture with the anti-h4-1BB antibody enhanced the cell proliferation of the allostimulated lymphocytes. Previous studies in the mouse have shown that treatment of tumor-bearing mice with antibodies to 4-1BB augments anti-tumor immunity that is mediated by both CD4+ and CD8+ T cells. The authors consider the possibility that a similar approach may be efficacious for human cancer immunotherapy. This question was addressed by evaluating the effect of an anti-h4-1BB monoclonal antibody on human lymphocyte-mediated suppression of a human tumor xenograft in SCID mice. Mice treated with a control antibody and co-injected with the tumor and peripheral blood lymphocytes exhibited a lymphocyte dose-dependent suppression of tumor growth. In mice treated with the anti-h4-1BB antibody, the lymphocyte-mediated tumor suppression was completely eliminated and tumors grew progressively (as was observed in mice inoculated with tumors without lymphocytes). This monoclonal antibody specific for anti-h4-1BB, which augments the proliferation of allostimulated cells in vitro, blocks T-cell anti-tumor activity in vivo. These results suggest that although 4-1BB plays a role in the human peripheral blood lymphocyte-mediated suppression of tumor growth, antibodies to this molecule on human cells fail to stimulate anti-tumor activity, as was observed in tumor-bearing mice treated with an antibody to murine 4-1BB.     

原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的分析

背景：近年来，有观点认为原发性肝癌的发生机制可能为肝干细胞分化不全或分化异常所致。目前，肝干细胞研究正处于起步阶段，对人原发性肝癌的“干细胞起源”学说尚需进一步验证。目的：观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。设计：观察对比实验。单位：解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心。对象：实验于2003-09／2004-07在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心完成，选用94例肝细胞癌和12例肝内胆管细胞癌和10例混合型肝癌石蜡包埋组织，同时选用5例肝硬化和4例正常肝组织作为实验对照，均取自病理科存档资料。肝癌组织均为患者首次肝癌切除手术时采取，包括肿瘤组织和癌旁组织，患者均无化疗和放射治疗史，并对受检项目知情同意。实验主要抗体均购自SantaCruz公司。方法：采用苏木精一伊红染色、免疫组织化学SP方法（检测的免疫标志有鼠抗人细胞角蛋白19单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白8＆18单克隆抗体、鼠抗人c—kit单克隆抗体、鼠抗人Thy—1单克隆抗体、鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体）观察各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。、主要观察指标：各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。结果：在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达，均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化，以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高（P〈0．05）。正常组和肝硬化组干细胞免疫表型特征为阴性。结论：不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞。     

抗人H血型物质单克隆抗体的研制

经H血型物质免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞用PEG融合,获得一株分泌抗人H血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞株—6H_3,为IgG_1类。其效价,细胞培养上清液为512,腹水达16384。凝血特异性试验、吸收放散试验、血凝抑制试验证明其仅对人H血型物质特异。杂交瘤细胞在液氮中贮存1年,分泌抗体能力不变。抗体经56℃保温30min及-20℃和37℃反复冻融试验,凝血活性保持稳定。可望能取代传统的抗H试剂而用于临床血型分型。