盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织CD14和Toll样受体4表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织CD14和Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,2月龄,体重230 ～ 280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8),对照组(C组):腹腔和尾静脉均注射生理盐水1 ml/kg;急性肺损伤组(ALI组):腹腔注射生理盐水1 ml/kg,30 min后经尾静脉注射内毒素5 mg/kg;盐酸戊乙奎醚低剂量组(LP组)和高剂量组(HP组):分别腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.3和1.0 mg/kg,30 min后经尾静脉注射内毒素5 mg/kg.静脉注射生理盐水或内毒素后6h时,取肺组织,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测CD14、TLR4蛋白及其mRNA的表达水平,并观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组、LP组和HP组肺组织CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达上调(P＜0.05);与ALI组比较,LP组及HP组肺组织CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达下调(P＜0.05).LP组和HP组CD14、TLR4蛋白及其mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).LP组和HP组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过降低肺组织CD14、TLR4的活性减轻大鼠内毒素性急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时TLR4 mRNA表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响.方法 健康SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为5组(n=8):假手术组(S组)、失血性休克致急性肺损伤组(ALI组)和低、中、高剂量盐酸戊乙奎醚预先给药组(P1～3组).S组仅行动静脉穿刺,不放血,ALI组股动脉放血至35～45 mm Hg制备急性肺损伤模型,P1～3组分别于放血前30 min股静脉注射盐酸戊乙奎醚0.3、1.0、3.0 mg/kg,随后制备急性肺损伤模型.各组复苏后4 h时处死大鼠取肺,称重后计算肺湿干重比,检测TLR4 mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平,观察病理学结果.结果 与S组比较,ALI组和P1组TLR4 mRNA、NF-κB p65蛋白表达水平及肺湿干重比升高(P＜0.05或0.01),P2.3组差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,P2,3组TLR4 mRNA、NF-κB p65蛋白表达水平及肺湿干重比降低(P＜0.05或0.01);P2组和P3组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).P2,3组肺组织病理学损伤程度较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过抑制肺组织TLR4 mRNA表达上调,进而降低NF-κB活性,从而减轻失血性休克诱发大鼠的急性肺损伤.     

不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响

目的 比较不同液体复苏对失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤的影响.方法 60只雄性SD大鼠,体重250～280 g,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、失血性休克-内毒素组(SL组)、乳酸钠林格氏液组(LR组)、7.5%氯化钠组(HS组)和羟乙基淀粉(HES)130/0.4组(HES组).分为院前期(90 min)、院内复苏期(1 h)和复苏后观察期(3.5 h).院前期:SL组、LR组、HS组和HES组颈总动脉放血建立失血性休克模型(维持MAP 35～45 mm Hg 60 min)后,气管内注射内毒素2mg/kg,同时断尾,注射内毒素后即刻分别经30 min静脉输注3倍放血量的乳酸钠林格氏液、7.5%氯化钠4ml/kg和等放血量的6%HES 130/0.4;院内复苏期:结扎尾部断端止血,在1 h内回输全部放出的血液及等放血量的0.9%氯化钠;复苏后观察期3.5 h时采集动脉血样,进行血气分析,计算肺组织湿/干重量比(W/D)和肺通透指数(PPI),测定肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度和肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5mRNA表达水平,光镜下观察肺组织病理学结果,记录大鼠存活情况.结果 与SL组和LR组比较,HS组和HES组MAP、pH值、PaO2和SaO2升高,血乳酸浓度、BE、W/D、PPI和BALF蛋白浓度降低,HS组肺组织AQP-1 mRNA表达上调,HES组肺组织AQP-1 mRNA和AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05或0.01);与HS组比较,HES组W/D降低,AQP-5 mRNA表达上调,大鼠存活率升高(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻.结论 6%HES 130/0.4和7.5%氯化钠可减轻失血性休克-内毒素二次打击大鼠急性肺损伤,6%HES 130/0.4的效果更好,其机制与抑制AQP-1和(或)AQP-5表达下调有关;而乳酸钠林格氏液对其无效.     

环腺苷酸-蛋白激酶A在大鼠内毒素性急性肺损伤时血红素加氧酶-1表达上调中的作用

目的 探讨环腺苷酸-蛋白激酶A(cAMP-PKA)在大鼠内毒素性急性肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)表达上调中的作用.方法 健康清洁级雄性SD大鼠48只,体重180 ～ 220 g,2.5 ～ 3.0月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12)∶正常对照组(C组)股静脉注射生理盐水(LPS溶媒)0.5 ml,2h后皮下注射生理盐水(H89溶媒)0.5 ml;内毒素性急性肺损伤组(ALI组)股静脉注射10 mg/kg LPS 0.5 ml,2h后皮下注射生理盐水0.5 ml; H89+内毒素性急性肺损伤组(H+ALI组),股静脉注射10 mg/kg LPS 0.5 ml,2h后皮下注射5 mg/kg H89 0.5 ml; H89组(H组)股静脉注射生理盐水0.5 ml,2h后皮下注射5 mg/kg H89 0.5 ml.静脉注射LPS后6h时处死大鼠,取肺组织,行病理学评分,测定肺组织含水量;采用Western blot法测定HO-1和PKA表达;采用荧光定量PCR法测定HO-1mRNA表达.结果 与C组比较,ALI组和H+ALI组肺组织含水量和病理学评分升高,肺组织PKA、HO-1和HO-1 mRNA表达上调(P＜0.05),H组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,H+ALI组肺组织含水量和病理学评分升高,肺组织PKA、HO-1和HO-1 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 大鼠内毒素性急性肺损伤时HO-1表达上调的机制与cAMP-PKA信号通路活化有一定关系.     

不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 研究不同剂量6%羟乙基淀粉130/0.4(6% HES 130/0.4)预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 72只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为6组(n=12),对照组(C组)经尾静脉注射生理盐水30 ml/kg;肺损伤组(L组)经尾静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg;不同剂量6%HES130/0.4组分别经尾静脉注射6%HES 130/0.4 7.5 ml/kg(H1组)、15 ml/kg(H2组)和30 ml/kg(H3组),1 h后再经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;H4组经尾静脉注射6%HES 130/0.4 30 ml/kg.各组给药速率均为0.2ml/min.注射LPS后4 h行动脉血气分析,气管插管.每组取6只大鼠,测定肺组织微血管通透性指数(PMPI);每组取6只大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织湿/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肺组织病理学.结果 与L组比较,H2组血清TNF-α、IL-1β、MDA浓度和肺组织MPO活性降低,血清IL-10浓度和SOD活性升高,H1组IL-1β浓度降低,H1组、H2组和H3组PMPI、BALF蛋白浓度和W/D均降低(P＜0.05);与H2组比较,H1组和H3组血清TNF-α、MDA浓度和肺组织MPO活性升高,血清SOD活性、IL-10浓度降低,H3组血清IL-1β浓度升高(P＜0.05).H1组、H2组和H3组较L组肺组织损伤较轻,其中H2组损伤最轻.结论 15 ml/kg6%HES 130/0.4预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制炎性因子释放、减少肺内中性粒细胞聚集和氧自由基生成、改善肺微血管通透性有关.     

活化蛋白-1在大鼠内毒素性肺损伤时血红素加氧酶-1上调中的作用

目的 评价活化蛋白-1(AP-1)在大鼠内毒素性肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)上调中的作用.方法 健康清洁级雄性SD大鼠48只,体重200 ～ 220 g,2.5 ～ 3.0月龄,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=12):正常对照组(C组)腹腔注射0.1％二甲基亚砜(姜黄素溶媒)0.5 ml,30 min时股静脉注射生理盐水(LPS溶媒)0.5 ml;内毒素性肺损伤组(ALI组)腹腔注射0.1％二甲基亚砜0.5ml,30 min时股静脉注射10 mg/kg LPS0.5 ml;姜黄素+内毒素性肺损伤组(Cur+ ALI组)腹腔注射20mg/kg姜黄素0.5 ml,30 min时股静脉注射10 mg/kg LPS 0.5 ml;姜黄素组(Cur组)腹腔注射姜黄素20mg/kg,30 min时股静脉注射生理盐水0.5 ml.静脉注射LPS 6 h时处死大鼠取肺组织,行病理学评分,测定MDA含量和SOD活性;采用Western blot法测定HO-1和AP-1表达;采用荧光定量PCR法测定HO-1 mRNA表达.结果 与C组比较,ALl组和Cur +ALI组肺组织病理学评分和MDA含量升高,SOD活性降低,HO-1 mRNA、HO-1和AP-1表达上调(P＜0.05),Cur组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与ALl组比较,Cur+ ALl组肺组织病理学评分和MDA含量升高,SOD活性降低,HO-1mRNA、HO-1和AP-1表达下调(P＜0.05).结论 内毒素性肺损伤时HO-1上调的机制与转录因子AP-1活化有一定关系.     

杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽对内毒素/脂多糖致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的　观察杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽(BNEP)对内毒素/脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)的作用。　方法　将BALB/c小鼠随机分为对照组、LPS组、BNEP组,每组20只。LPS组和BNEP组分别经鼻滴注等渗盐水(NS) LPS和NS LPS 尾静脉注射BNEP复制小鼠ALI模型。对照组处理方式类似,但仅滴注NS.检测各组小鼠肺脏湿干重比、肺血管通透性、肺组织病理学变化,应用免疫组织化学法检测肺组织中Toll样受体(TLR) 2、4表达水平的变化。　结果　BNEP组与LPS组比较,肺湿干重比减小,肺血管通透性降低,肺内以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润减轻, TLR2、4在肺组织中的表达减弱(两组TLR2分别为128±10、214±12,P<0. 01).　结论　BNEP对由LPS引起的小鼠ALI有较好的保护作用。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的 评价盐酸戊乙奎醚预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤时缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 健康成年雌性SD大鼠120只,体重180 ～ 220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=40):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).采用腹腔注射内毒素5 mg/kg制备大鼠内毒素性急性肺损伤模型.C组腹腔注射等量生理盐水,P组于注射内毒素前30 min时腹腔注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg.于注射内毒素后2、4、8和24 h时各组随机取8只大鼠处死取肺,采用RT-PCR法检测肺组织HIF-1α mRNA的表达.于注射内毒素后6h时随机取8只大鼠处死取肺,测定湿干重比(W/D比),用ELISA法检测肺组织IL-6的含量,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组和P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平升高(P＜0.05);与ALI组比较,P组注射内毒素后6h时W/D比、IL-6含量、各时点HIF-1α表达水平降低(P＜0.05).P组肺组织病理学损伤程度较ALI组减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药通过下调肺组织HIF-1α表达,抑制炎性反应,从而减轻大鼠内毒素性急性肺损伤.     

小容量不同液体治疗对内毒素血症大鼠肾血流的影响

目的 评价小容量不同液体治疗对内毒素血症大鼠肾血流的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠30只,体重180～250 g,随机分为5组(n=6):对照组(C组)、内毒素血症组(LPS组)、7.5%高渗氯化钠溶液组(HS组)、羟乙基淀粉130/0.4溶液组(HES组)和高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液组(HSH组).LPS组、HS组、HES组和HSH组经左侧颈总动脉导管注射LPS 1 mg/kg,C组注射等容量生理盐水.30 min后,C组和LPS组注射生理盐水4 ml/kg;HS组、HES组和HSH组分别注射7.5%高渗氯化钠溶液、羟乙基淀粉130/0.4溶液或高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液4 ml/kg.于给予LPS前、给予LPS后30 min、液体治疗后10、30、60 min时进行左肾脏超声多普勒检测,记录左肾动脉的收缩峰值血流速度(Vmax)、舒张末期血流速度(Vmax)和阻力指数(RI).取肾组织,观察病理学结果.结果 内毒素血症大鼠肾血流逐渐减弱,分布面积减小,肾皮质血流几乎消失,肾小管上皮细胞严重变性、崩解脱落、集合管内可见细胞碎片充塞,左肾段动脉Vmax和Vmin降低,RI升高(P＜0.01).与LPS组比较,HS组、HES组和HSH肾血流增强,Vmax和Vmin升高,RI降低,其中HSH组效果更佳(P＜0.01).结论 小容量羟乙基淀粉130/0.4溶液、高渗盐水和高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液治疗可增强内毒素血症大鼠肾血流,改善肾脏微循环;高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液效果更佳.     

p38MAPK/iNOS/HO-1信号通路在赤芍减轻大鼠内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 评价p38MAPK/iNOS/HO-1信号通路在赤芍减轻大鼠内毒素性急性肺损伤(AL1)中的作用.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组(n=8):生理盐水对照组(C组)、内毒素组(L组)、赤芍组(R组)、赤芍预处理组(PR组)和SB203580组(S组).气管内滴注脂多糖(LPS)制备大鼠ALI模型.L组气管内滴注1 ml LPS溶液(2.5 mg/kg);C组滴注等容量生理盐水;R组、PR组分别于气管内滴注LPS后、滴注前2 h,经股静脉输注赤芍注射液15 mg·kg-1·h-1 2 h;S组于气管内滴注LPS前3 h,经股静脉输注SB203580溶液2.5 μmol·kg-1·h-1 3 h.于气管内滴注LPS后6 h时,经颈动脉采血样2 ml,行血气分析及测定血清NO浓度;颈动脉放血处死大鼠,测定支气管肺泡灌洗液蛋白浓度,计数中性粒细胞及细胞总数,检测肺组织MDA含量,p38MAPK、HO-1及iNOS的表达.观察肺组织病理学结果 .结果 与C组比较,其余各组肺组织p38MAPK、iNOS及HO-1表达上调,支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数比、蛋白浓度、肺组织MDA含量及血清NO浓度升高.PaO2和HCO1浓度降低(P<0.01);与L组比较,R组、PR组和S组p38MAPK及iNOS表达下调,HO-1表达上调.支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数比、蛋白浓度、肺组织MDA含量及血清NO浓度降低,PaO2和HCO3-升高(P<0.05);R组、PR组和S组肺组织损伤程度较L组减轻.结论 赤芍可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,可能与抑制p38MAPK/iNOS/HO-1信号通路有关.     

戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤时NF-κB的影响

目的 探讨戊乙奎醚预先给药对大鼠急性肺损伤(ALI)时NF-κB的影响.方法 雄性SD大鼠35只,体重210～280 g,随机分为5组(n=7):对照组(C组)、ALI组和低、中、高剂量戊乙奎醚组(P1-3组).采用经尾静脉注射内毒素5 mg/kg的方法建立大鼠ALI模型.C组和ALI组经腹腔注射生理盐水0.5 ml,P1～3组分别经腹腔注射戊乙奎醚0.03、0.1和3 mg/kg,30 min后ALI组、P1～3组制备AU模型,C组不制备模型.于静脉注射LPS后4 h时,行血气分析,计算氧合指数;称量肺组织湿重(W)、干重(D),计算W/D;采用比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用RT-PCR法测定肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达水平;采用ELISA法测定肺组织TNF-α和IL-1β的含量;采用非放射性EMSA法测定肺组织NF-κB活性;采用免疫组织化学法测定肺组织NF-κB的表达水平.结果 与C组比较,其余各组氧合指数降低,肺组织W/D和MPO活性、TNF-α,IL-1β含量及其相应mRNA表达水平、NF-κB活性和表达水平均升高(P<0.05或0.01);与ALI组比较,P1～3组氧合指数升高,肺组织W/D和MPO活性降低,TNF-α、IL-1β含量及其相应mRNA表达水平降低,NF-κB活性和表达水平降低(P<0.05);P1～3组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 戊乙奎醚预先给药减轻大鼠急性肺损伤的机制可能与抑制NF-κB的活化,下调NF-κB的表达,降低肺组织炎性反应有关.     

A2B腺苷受体在6%羟乙基淀粉130/0.4降低脓毒症大鼠肺毛细血管通透性中的作用

目的 探讨A2B腺苷受体(A2BAR)在6%羟乙基淀粉(HES)130/0.4降低脓毒症大鼠肺毛细血管通透性中的作用.方法雄性SD大鼠50只,体重250～300 g,随机分为5组(n=10):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)、低剂量HES组(H1组)、中剂量HES组(H2组)和高剂量HES组(H3组).CLP组、H1组、H2组和H3组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,S组仅开腹后缝合.盲肠结扎穿孔术后4 h时,H1组、H2组及H3组分别经2 h输注6%HES 130/0.4 7.5、15.0、30.0 ml/kg,CLP组给予生理盐水30 ml/kg.CLP后6 h时处死动物,取肺组织,测定肺毛细血管通透性、A2BAR表达、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的含量.结果与S组比较,其余各组肺毛细血管通透性和A2BAR表达上调,CLP组肺组织cAMP、IL-6和TNF-α含量升高,H1组、H2组和H3组肺组织cAMP、PKA、IL-6、IL-10和TNF-α含量升高(P＜0.05或0.01);与CLP组比较,H1组、H2组和H3组肺毛细血管通透性均降低,A2BAR表达均上调,肺组织cAMP、PKA和IL-10含量升高,而肺组织IL-6和TNF-α含量降低(P＜0.05或0.01);6%HES 130/0.4降低肺毛细血管通透性及上调A2BAR表达的效应呈剂量依赖性(P＜0.05或0.01);6%HES 130/0.4 15.0ml/kg升高肺组织cAMP和PKA含量及抑制炎性反应的效应最明显(P＜0.05或0.01).结论 6%HES 130/0.4可上调脓毒症大鼠肺组织A2BAR表达,从而降低肺毛细血管通透性.     

6%羟乙基淀粉130/0.4液体复苏对创伤性脑损伤合并失血性休克大鼠的脑保护作用

目的 探讨6%羟乙基淀粉130/0.4(6%HES 130/0.4)液体复苏对创伤性脑损伤合并失血性休克大鼠的脑保护作用.方法 健康成年雄性SD大鼠60只,体重300～350 g,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、模型组(M组)、生理盐水组(NS组)、6%.HES 130/0.4组(HES组)和晶体.胶体高渗透压混合液组(HHS组).分别参照Feeney改良法和Wiggers改良法制备大鼠创伤性脑损伤模型和失血性休克模型.S组仅切开头皮,钻开骨窗,不制备创伤性脑损伤和失血性休克模型;M组制备创伤性脑损伤和失血性休克模型;其余3组均制备创伤性脑损伤和失血性休克模型,并于休克60 min时开始复苏.NS组经股静脉输注3倍于放血量的生理盐水;HES组经股静脉输注等于放血量的6%HES 130/0.4;HHS组经股静脉输注等于放血量的HHS(10%HES 130/0.4与7.5%NaCl按1:1混合),各复苏组均在30 min内将液体输注完毕.实验期间记录平均动脉压(MAP),采用ELISA法测定血清S-100β蛋白浓度;于复苏180 min时取脑组织,计算脑组织含水量,采用EUSA法测定脑组织TNF-α和IL-6的含量.结果 与M组比较,NS组、HES组和HHS组复苏后MAP和脑组织含水量升高,HES组脑组织TNF-α和IL-6的含量降低,HES组和HHS组复苏后血清S-100蛋白浓度降低(P<0.05),NS组血清S-100β蛋白浓度差异无统计学意义(P>0.05);与NS组比较,HES组和HHS组复苏后MAP升高,脑组织含水量和血清S-100β蛋白浓度均降低,HES组脑组织TNF-α和IL-6的含量降低(P<0.05);与HES组比较,HHS组脑组织TNF-α和IL-6的含量升高,血清S-100β蛋白浓度升高(P<0.05),MAP差异无统计学意义(P>0.05).结论 6%HES 130/0.4液体复苏可对创伤性脑损伤合并失血性休克大鼠产生脑保护作用,且该作用强于HHS,其脑保护作用的机制可能与降低脑组织炎性反应有关.     

阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨阿米洛利预先给药对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为4组(n=8):对照组(C组)、急性肺损伤组(ALI组)、阿米洛利组(A组)和阿米洛利预先给药组(AL组).C组股静脉输注生理盐水3 ml,ALI组股静脉输注生理盐水1 ml、内毒素6 mg/kg,A组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、生理盐水2 ml,AL组股静脉输注阿米洛利10 mg/kg、内毒素6 mg/kg,输注速率均为0.05 ml/rain,给药间隔均为30 min.于输注内毒素结束后6 h时处死大鼠取肺,观察肺组织病理学,并行病理学评分,称重后计算肺湿干重比,检测髓过氧化物酶(MPO)活性,测定支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的浓度,采用Western blot法检测肺组织钠氢交换体1(NHE1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和细胞外信号调节激酶(ERK)的表达水平.结果 与C组比较,ALI组和AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1、p38MAPK和ERK的表达水平明显升高(P＜0.01),A组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,AL组肺组织病理学评分、肺湿干重比、MPO活性、支气管肺泡灌洗液总蛋白、TNF-α和MIP-2浓度、肺组织NHE1和ERK的表达水平明显降低(P＜0.01),p38MAPK表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿米洛利预先给药可减轻大鼠内毒素性急性肺损伤,其机制可能与抑制ERK信号转导通路激活有关.     

瑞芬太尼对兔内毒素性急性肺损伤的影响

目的 探讨瑞芬太尼对兔内毒素性急性肺损伤(Au)的影响.方法 健康成年雄性新西兰大白兔30只,体重2.5～3.5 kg,随机分为5组(n=6):对照组(C组)、ALI组、低剂量瑞芬太尼组(LR组)、中剂量瑞芬太尼组(MR组)和高剂量瑞芬太尼组(HR组).C组经30 min静脉输注生理盐水10 ml;ALI组经30 min静脉输注大肠杆菌内毒索(LPS)0.5 mG/kg;LR组、MR组和HR组分别静脉输注瑞芬太尼0.2、0.4和0.8μg·kg~(-1)·min~(-1)至处死,输注15 min时开始给予LPS,方法同ALI组.于LPS输注前即刻(T_0)、输注结束后1、2.5、5.5 h时记录平均动脉血压(MAP)、心率(HR)和气道峰压(P_(peak),测定动脉血氧分压(PaO_2)和血浆细胞间粘附分子1(ICAM-1)浓度,称量肺组织湿重(W)和干重(D),计算W/D比,并在光镜和电镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,ALI组MAP、HR和PaO_2,降低,W/D比、P_(peak)和血浆ICAM-1浓度升高(P<0.05);与ALI组比较,LR组、MR组和HR组MAP、HR 升高,肺组织W/D比降低,P(peak)和血浆ICAM-1浓度降低,PaO_2升高(P<0.05);与LR组比较,MR组和HR组MAP、HR、P(peak)、血浆ICAM-1浓度和肺组织W/D比降低,PaO_2升高(P<0.05);与MR组比较,HR组注肺组织W/D比降低,PaO_2升高(P<0.05).LR组、MR组和HR组肺组织病理学损伤较ALI组减轻.结论 瑞芬太尼可减轻兔内毒素性急性肺损伤,且呈剂量依赖性,其机制可能与抑制ICAM-1的表达有关.     

雾化吸入和静脉注射米力农对大鼠急性肺损伤疗效的比较

目的 比较雾化吸入和静脉注射米力农对大鼠急性肺损伤(ALI)的疗效.方法 SD大鼠40只,体重300～350 g,随机分为4组(n=10):对照组(Ⅰ组)、ALI组(Ⅱ组)、米力农雾化吸入组(Ⅲ组)和米力农静脉注射组(Ⅳ组).Ⅰ组经右颈外静脉插管注入0.1%BSA溶液2 ml/kg;Ⅱ组经20 min注入油酸混悬液2 ml/kg;Ⅲ组注入油酸后30 min雾化吸入1 mg/ml米力农10 min,每60分钟重复一次,共4次;Ⅳ组注入油酸后30 min经右颈外静脉注射米力农10 μg/kg,然后静脉输注米力农1 μg·kg-1·min-1 10min,每60分钟重复一次,共4次.各组于第4次治疗结束后放血处死大鼠.于治疗开始即刻、第1次治疗时、第2次治疗时、第3次治疗时和第4次治疗时,记录平均动脉压(MAP)和肺动脉压(PAP),测定动脉血气和混合静脉血气,计算氧合指数(PaO2/FiO2)和肺内分流率(Qs/Qt).回收支气管肺泡灌洗液(BALF),进行中性粒细胞计数,采用Bradford法测定蛋白浓度;测定肺组织湿,干重比(W/D)和髓过氧化物酶(MPO)活性;观察肺组织超微结构.结果 与Ⅲ组比较,Ⅳ组第3次治疗和第4次治疗时MAP和Pa02/FiO2降低,第4次治疗时PAP和Qs/Qt升高,BALF蛋白浓度、中性粒细胞计数和肺组织W/D、MPO活性均升高(P＜0.05).结论 雾化吸入米力农减轻大鼠ALI的作用优于静脉注射米力农,对血液动力学影响小.     

异丙酚对内毒素诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Toll样受体4表达水平的影响

目的 探讨异丙酚对内毒素诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达水平的影响.方法 SPF级雄性Wistar大鼠,体重180～250 g,8～9周龄,原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,经鉴定后随机分为5组,每组18孔,对照组(C组):不给予任何药物,继续培养3 h;LPS组:加入LPS,终浓度1μg/ml,孵育3 h;异丙酚组(P1～3组):同时加入LPS(终浓度1μg/nd)和终浓度分别为25、50、100 μmol/L的异丙酚,孵育3 h.孵育结束后测定肺泡Ⅱ型上皮细胞TLR4 mRNA、TLR4蛋白表达和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放量.结果 与C组比较,LPS组和P1组TLR4 mRNA及其蛋白表达上调(P<0.05),P2组和P3组差异无统计学意义(P>0.05);与LPS组比较,P2组和P3组TLB4 mRNA和其蛋白表达下调,TNF-α释放量降低(P<0.05或0.01),P,组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);P2组与P3组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 异丙酚可抑制LPS诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞TLR4 mRNA及其蛋白表达上调,且呈浓度依赖性,这可能是其抑制肺局部炎性反应的机制.