铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导增殖与分化

目的:探讨植物生长调节剂、基本培养基、蔗糖质量浓度以及相关添加物对铁皮石斛茎段原球茎的诱导、增殖、分化以及根部生长等方面的影响。方法:通过正交试验方式,要求没有添加激素下,对铁皮石斛茎段原球茎进行消毒处理、试验培养基的配备、对原球茎进行诱导、对原球茎进行增殖和分化处理、生根的培养等,分析不同植物生长调节剂、基本培养基配比对于茎段原球茎的诱导影响,不同基本培养基、马铃薯泥以及蔗糖浓度增殖分化原球茎效果,以及香蕉泥、萘乙酸(NAA)和马铃薯泥对铁皮石斛茎段原球茎生根效果。结果:1)最适宜诱导铁皮石斛茎段原球茎的培养基组合是NAA 0.1 mg/L+1/2MS(Murashige and Skoog)培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4 mg/L。2)铁皮石斛茎段原球茎增殖最佳的培养基是:MS+蔗糖30 g/L;分化的最佳培养基是:马铃薯泥10%+蔗糖10 g/L+1/2 MS。3)铁皮石斛茎段原球茎的生根最佳培养基组合是马铃薯泥10%+1/2 MS+NAA 1 mg/L+香蕉泥10%。结论:在没有添加激素的前提下,基于正交试验方式发现变化蔗糖含量和基本培养基能够对铁皮石斛茎段原球茎增殖和分化效果进行调节,并找出了最理想的组合模式。     

云南珍稀民族药黑蒴茎芽组织培养快繁体系研究

目的建立黑蒴茎芽愈伤组织诱导、分化及生根组织培养快繁体系。方法以黑蒴带节嫩茎芽为外植体,以MS(1/2MS)为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤组织诱导、分化及茎芽生根的影响。结果芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,愈伤诱导率71.2%;愈伤分化不定芽最佳培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,芽诱导率为84.2%;茎芽生根培养基为1/2MS+NAA 0.1~0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,生根率超过87.2%。结论筛选出茎芽诱导愈伤、分化不定芽、生根的培养基,建立了黑蒴嫩茎芽组织培养快繁体系。     

球花石斛的离体快繁体系研究

目的建立球花石斛离体快繁研究体系。方法利用球花石斛种子为外植体,采用种子培养方式开展繁育试验研究。结果球花石斛种子接种MS+香蕉泥13%的培养基上,可成功诱导其原球茎;MS+0.1mg/L NAA+1.5mg/L 6-BA+香蕉汁13%为球花石斛增殖的最佳培养基,增殖系数为7.9;无根苗生根的适宜培养基为1/2 MS+0.1mg/L NAA+2mg/L 6-BA+香蕉汁13%+土豆汁10%+活性炭2mg/L,生根率达到95%,平均根数为6.3条;组培养移栽到松树皮+水苔(3∶1)的栽培基质上,成活率为100%,且植株长势良好。结论寻找到球花石斛离体繁育研究中各阶段最佳培养基,建立了该植物的离体快繁体系。     

铁皮石斛组织培养研究进展

目的：探讨铁皮石斛种子无菌萌发的最佳条件、原球茎诱导试管苗的最佳配方、不同器官诱导芽分化的最佳条件、试管苗生根的最佳配方。方法：收集、整理、归纳近20年来国内外有关铁皮石斛组织培养的文献资料。结果：将文献中铁皮石斛种子无菌萌发的情况、原球茎诱导试管苗的情况、不同器官诱导芽分化的情况及试管苗生根的情况分别列表进行对照比较。结论：各种外植体都可诱导不定芽的分化,以MS培养基使用量为普遍,试管苗生杭率达到96.67%。     

植物生长调节素对黑果菝葜组织培养的影响

目的:建立黑果菝葜Smilax glauco-china Warb.的组织培养繁殖体系。方法:以黑果菝葜的幼嫩茎段为外植体,MS、1/2MS为基本培养基,利用正交设计研究不同植物生长调节素多因素组合(6-BA、NAA、IAA和IBA)对黑果菝葜初代诱导、继代增殖及诱导生根的影响。结果:黑果菝葜最佳的初代诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L;利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L,增殖倍数为6.3;最佳的诱导生根培养基为1/2MS+NAA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC 1.0 g/L,生根率达到70%。结论:建立了黑果菝葜的组织培养繁殖体系,可为人工种植提供健壮种苗。     

铁皮石斛原球茎的诱导与增殖影响因素研究

目的:研究铁皮石斛原球茎诱导与增殖的最适培养基配方。方法:以铁皮石斛种胚为材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物激素6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和激动素(KT)或其组合及马铃薯提取液(PE)、香蕉提取液(BE)、苹果提取液(AE)和椰乳(CM)等有机添加物对铁皮石斛原球茎诱导和增殖的影响。结果:6-BA与NAA配比不利于种胚萌发,萌发度均低于MS培养基;添加10%的PE、CM有利于原球茎诱导;2,4-D对原球茎的生长和增殖不利,一定浓度的BA、KT和NAA有利于原球茎的增殖;KT浓度为1.0 mg/L时,原球茎40 d增殖倍数最高,达9.0;PE、CM、AE都能不同程度的促进原球茎的增殖,以10%的CM效果最好。结论:适宜铁皮石斛原球茎的诱导培养基为MS+10%CM+1.0 g/L AC;适宜铁皮石斛原球茎增殖的培养基为MS+1.0mg/L KT+0.2mg/L NAA+10%CM。     

霍山石斛原球茎分化影响因素的探讨

目的以霍山石斛原球茎为试材,以1/2MS为基本培养基,研究不同浓度萘乙酸(NAA)、6-苄氨基嘌呤(简称6-BA)、香蕉泥、土豆泥对霍山石斛原球茎分化的影响。方法试验方案为4因素3水平L_9(3~4)正交设计,数据处理软件为DPS7.05。结果 NAA、6-BA、香蕉泥、土豆泥对原球茎分化苗长势的影响均显著,最优浓度分别为0.5mg/L、1.0 mg/L、0g/L、100g/L;NAA、6-BA、香蕉泥、土豆泥对原球茎分化苗黄化率的影响均显著,最优浓度分别为1.0mg/L、2.0 mg/L、50g/L、100g/L;NAA和土豆泥两个因素对原球茎分化过程重量的增加影响显著,最优浓度分别为0.5mg/L、100g/L,而6-BA和香蕉泥对原球茎分化过程重量的增加影响不显著。结论霍山石斛原球茎分化培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+香蕉泥50g/L+土豆泥100g/L+食糖20g/L+琼脂6.0g/L时,分化苗长势、黄化率及增重均显著优于其他处理,分化率100%,60d增殖倍数3.13。     

箭根薯愈伤组织诱导及无性系的建立

目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系.方法 以箭根薯野生种为材料,采用不同激素组合对不同部位(根茎、叶片、叶柄)进行诱导,对比诱导效果,筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合.结果 外植体的消毒以0.1％ HgC12溶液处理8 min的效果最佳;诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄;愈伤组织诱导的最佳培养基是MS +6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100％;不定芽诱导分化的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,分化率高达90％;生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率高达100％.结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合.     

铁皮石斛茎节离体培养的研究

目的通过无菌茎段实现铁皮石斛快速繁殖。方法将铁皮石斛试管苗茎节接种于不同NAA浓度的MS培养基上诱导腋芽萌发,并在含不同激素配比和有机添加物的培养基上继代和诱导生根。结果NAA0.4mg/L,6-BA5mg/L时铁皮石斛腋芽萌发率达93.33%;NAA0.3mg/L,6-BA2mg/L时丛苗的生根率达96.67%,香蕉汁和土豆汁能够显著促进丛生芽的增殖和壮苗生根。结论建立了适合铁皮石斛茎段离体培养的快速繁殖体系。     

乌头离体培养和快速繁殖

目的建立乌头的快繁体系。方法利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA4.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.5mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L和MS NAA0.1mg/L 6-BA2.0mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS IBA1mg/L AC3.0g/L。结论以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。     

土茯苓离体快繁研究

以土茯苓Smilax glabra Roxb根状茎侧芽的生长锥为外植体,以MS、3/2MS、B5和改良H等培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行离体培养研究.结果表明:外植体在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L培养基上芽的萌动速度较快;萌动芽在MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L 10%CM(椰子汁)培养基上丛生芽诱导和增殖的效果最佳;3/2MS 6-BA 0.05 mg/L 4%蔗糖培养基的壮苗效果较好;H NAA 0.5 mg/L培养基的生根率可达94%以上;以沙和泥炭土各1/2为基质移栽试管苗,成活率达到95%以上.     

白头翁组织培养研究

目的 :为加快白头翁种苗生产速度及其生产的现代化。方法 :利用组织培养的方法 ,在添加不同种类植物激素处理组合的培养基上 ,对不同的外植体进行初代培养、丛生芽继代培养及其生根培养进行研究。结果 :适宜于白头翁的初代培养基 :MS + 6-BA 1.0～ 30mg·L ^-1+NAA 0～ 0.05mg·L ^-1+蔗糖 3 0g·L ^-1;增殖培养基 :MS + 6-BA 0 .2mg·L ^-1+NAA 0.02mg·L ^-1+BR 0.000 01mg·L ^-1+蔗糖 3 0g·L ^-1;生根培养基 :1/ 2MS +NAA 0.4mg·L ^-1+蔗糖 20g·L ^-1。结论 :采用白头翁的茎尖和花蕾作为外植体 ,利用组织培养的方法能够实现种苗的工厂化快速繁殖。     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究

目的：建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法：以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果：最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS＋ 2.0mg L-1 6-BA＋ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3％;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS＋ 1.5mgL-1 6-BA ＋0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS＋0.5mgL-1 IBA ＋0.5mgL-1 NAA＋ 0.2％ AC,组培苗生根多,生根率达到72％.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8％,蔗糖浓度均为2％,pH5.6 ～5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88％.结论：利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究

目的研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L,出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1 mg/L+KT 3.0 mg/L,分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L,生根率达95%。结论波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株。     

水半夏组培快繁体系的建立

目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织;丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。     

黄独脱毒苗快繁技术的研究

目的 以黄独脱毒苗为试材,研究不同因素对黄独带芽茎段芽增殖和生根的影响,以期对黄独脱毒苗的快繁技术进行优化.方法 采用植物组织培养的方法 进行茎尖培养和快繁研究,采用RT-PCR法对茎尖脱毒植株进行病毒检测.结果 黄独脱毒苗带芽苇段的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;黄独脱毒苗带芽茎段增殖的最佳蔗糖质量浓度和琼脂质量浓度分别是30和0 g/L;黄独脱毒苗带芽茎段生根的最佳培养基是1/2 MS+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+PP_(333) 1 mg/L;黄独试管苗移栽的最好基质是珍珠岩:蛭石(2:1);黄独试管苗移栽时最佳的PP_(333)质量浓度是50 mg/L.结论 首次成功建立了黄独脱毒苗的快繁技术,为黄独脱毒苗的工厂化生产奠定了技术基础.