深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

血液中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶耐药基因型研究

目的 了解本地区血液标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分离率、耐药性和基因型.方法 收集临床血液标本分离的产ESBLs的大肠埃希菌26株,应用PCR基因扩增技术分别检测SHV、TEM、CTX-M、PER、CTX-M-2、Ampc、GES基因,DNA测序确定CTX-M、TEM基因型.结果 在26株菌株中15株为CTX-M型,占57.69%,11株为TEM型,占42.31%.结论 本地区临床血液标本分离的产ESBLs大肠埃希菌流行的主要基因型是CTX-M型和TEM型.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

郑州地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的:研究郑州地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型分布.方法:收集郑州大学第一附属医院、第三附属医院检验科细菌室2007年至2008年分离的产ESBLs大肠埃希菌138株,采用PCR技术进行ESBLs型别检测.结果:138株大肠埃希菌中共检出TEM(102株)、SHV(87珠)、CTX.M-1(42株)、CTX-M-14(66株)、CTX-M-25(9株)、CTX-M-38(6株)、OXA-1(12株)和OXA-20(3株)8种型别,其中以TEM型最为多见(74.9%).同一菌株可携带1-5种ESBLs基因型别,1种基因型别中TEM为多见(13.0%),2种基因型别中以SHV+CTX-M-14为多见(10.9%),3种基因型别中以SHV+TEM+CTX-M-1为多见(10.9%),4种基因型别中以SHV+TEM+CTX-M-1+CTX-M-14为多见(8.7%),5种基因型别为SHV+TEM+CTX-M-14+CTX-M-25+CTX-M-1(2.2%).结论:郑州地区ESBk基因型别以TEM型为主,同一菌株可携带多种型别ESBLs.     

肠杆菌属细菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的表达状况研究

目的 研究超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和高产AmpC酶在肠杆菌属细菌的表达状况以及ESBLs的基因型,了解肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用酶提取物三维及抑制试验检测121株肠杆菌属细菌高产AmpC酶和产ESBLs的情况;采用聚合酶链反应检测产ESBLs菌株的基因型。结果 在121株肠杆菌属细菌中,酶提取物三维及抑制试验共检出产ESBLs菌株29株（24.0%）,高产AmpC酶并产ESBLs菌株14株（11.5%）,高产AmpC酶并产ESBLs的菌株占总高产AmpC酶菌株的43.8%（14/32）。在25株PCR扩增阳性菌株中,TEM型为7株,SHV型10株,CTX-M-1组6株,CTX-M-13组7株,OXA组为阴性,其中有5株同时检测出两种ESBLs基因型。结论 除高产AmpC酶外,产ESBLs也是肠杆菌属细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要因素之一。肠杆菌属细菌产ESBLs的基因型包括TEM、SHV、CTX-M型,以CTX-M型为主。     

新生儿科病房产ESBLs分离株耐药基因初步分型

目的:了解新生儿科病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)分离株基因型分布情况.方法:用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证方法,对我院新生儿科病房分离的非重复的34株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证.分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物对ESBLs阳性株进行聚合酶链反应(PCR),PCR扩增产物经1 %琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,用凝胶成像系统观察结果进行初步分型.结果:34株细菌中,检出ESBLs阳性菌17株,检出率为50 %.17株ESBLs菌中TEM基因阳性2株,SHV基因阳性15株,CTX-M基因阳性9株;其中,8株单SHV基因阳性,2株TEM、CTX-M基因同时阳性,7株SHV、CTX-M基因同时阳性.结论:SHV型ESBLs是新生儿科病房最常见的ESBLs,其中产ESBLs肺炎克雷伯菌SHV基因的携带率为100 %,CTX-M型也较为常见.     

新生儿科产ESBLs大肠埃希菌的基因型研究

目的分析我院新生儿病房分离的大肠埃希菌产ESBLs基因型,为临床合理用药提供依据。方法ESBLs表型筛选、确证试验采用K—B法,采用PCR方法对ESBLs基因型进行检测。结果90株产ESBLs大肠埃希菌进行PCR引物扩增,TEM型引物扩增阳性79株,占87．8％;SHV型引物扩增阳性76株,占84．4％;CTX—M型引物扩增阳性90株,占100％;OXA型引物扩增阳性7株,占7．8％。而72株同时产TEM型、SHV型CTX—M型3种酶。结论在本院新生儿科分离的大肠埃希菌中流行ESBLs的基因型主要是CTX—M型,且同时存在产3种酶,应引起临床重视。     

肺炎克雷伯杆菌40株超广谱β内酰胺酶基因的分型

目的：分析肺炎克雷伯杆菌临床分离株中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法：用表型确证试验检出产ESBL。的肺炎克雷伯杆菌40株，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物对这些耐药株进行聚合酶链反应(PCR)扩增。结果：PCR扩增结果显示，TEM、SHV和CTX-M的阳性率分别为30％、60％和45％。结论：SHV和CTX．M型是南京医科大学第一附属医院产ESBLs菌株的主要基因型。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究与药敏分析

目的 探讨广州地区部分医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分布规律.方法 用NCCLS推荐的表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌62株,用Etest测定其最低抑菌浓度(MIC),分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2,CTX-M-9组通用引物进行聚合酶链反应(PCR),并对结果进行分析.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药,对亚胺培南的敏感率最高(98.2%),其次是头孢吡肟(72.7%),头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/三唑巴坦分别为69.6%和63.6%.PCR扩增结果显示TEM,SHV和CTX-M基因的阳性率分别为16.1%,50%和61.3%,21%的菌株同时携带多个基因.结论 广州地区肺炎克雷伯菌对亚胺培南酌敏感率最高,产ESBLs最常见的基因型是CTX-M型,其次是SHV,TEM型.     

高耐药洛菲不动杆菌分离株超广谱β内酰胺酶的基因变异

目的：探讨高度耐药的洛菲不动杆菌超广谱β内酰胺酶基因型及基因变异特征,分析基因变异对氨基酸序列及对超广谱β内酰胺酶可能产生的影响。方法：从下呼吸道感染的患者标本中分离得到3株高度耐药的洛菲不动杆菌超广谱β内酰胺酶阳性菌,PCR检测TEM、SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因,并对耐药基因进行全序列测定,比较不同菌株耐药基因及其编码氨基酸序列的变异特征。结果：2株耐药基因为TEM型,SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因均未检出,另1株5种耐药基因均未检出。2株TEM基因扩增序列分别长1012bp、1007bp,2株同源性为98.2%,在17个位点上存在碱基差异,TEM基因为832bp,编码277个氨基酸,两株间有8个氨基酸出现差异,差异主要位于天冬氨酸、甘氨酸和丝氨酸,这些氨基酸分别被组氨酸、精氨酸/丙氨酸、半胱氨酸取代。软件分析显示,2株TEM基因编码TEM型超广谱β内酰胺酶的等电点分别为5.479、5.083。 结论：山东济南地区高度耐药洛菲不动杆菌ESBLs耐药基因可见TEM型,不同临床分离株耐药基因存在不同程度的变异,这种变异使其编码的氨基酸序列发生改变,可能影响超广谱β内酰胺酶的某些特性,给耐药菌的检测带来影响。     

深圳市观澜地区产超广谱β-内酰胺酶菌株基因分型及耐药性分析

目的:了解深圳观澜地区产超广谱β-内酰胺酶菌株基因型分布情况,并分析其耐药性。方法:利用PCR技术扩增产ESBLs菌株质粒DNA的基因,统计分析各基因型阳性率。应用琼脂稀释法检测所有菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果:81株基因分型,SHV型检出率为34.6%,TEM型检出率为9.9%,CTX-M-1型检出率为11.1%,CTX-M-9型检出率为44.4%。药敏试验结果显示亚胺培南MIC90为0.25μg/ml,敏感率为100%。阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,MIC90分别为8μg/ml和16μg/ml,敏感率为86.1%和90.1%。结论:深圳观澜地区流行产ESBLs菌株主要为CTX-M型,其次为SHV型。亚胺培南对ESBLs菌株抗菌活性最强,其次为阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,氨苄西林/舒巴坦抗菌活性差。     

脑外科医院获得性肺炎产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究脑外科医院获得性肺炎(HAP)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析41例脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌患者的临床资料,采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验,纸片扩散法作药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为85.42%;仅对亚胺培南、美罗培南敏感;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等;SHV、CTX-M和TEM基因的检出率分别为73.17%(30/41)、63.26%(26/41)和14.63%(6/41);46.34%(19/41)的菌株同时携带多个基因。结论脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重,治疗应首选碳青霉烯类抗生素;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素;最常见的ES-BLs基因型是SHV,其次为CTX-M。     

儿童福氏志贺菌超广谱β内酰胺酶CTX-M基因型的研究

目的 了解唐山地区产CTX-M型超广谱B内酰胺酶（EsBk）福氏志贺菌的流行基因型,为有效预防和控制该类感染提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs的福氏志贺菌43株,采用CLSI推荐的表型筛选和确证试验检测ESBLs,采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M基因型。结果43株产ESBLs的福氏志贺菌中,产CTX-M基因型的有19株（44．2％）,经PCR扩增及测序,19株具有ESBLs表型的福氏志贺菌中有17株表达CTX-M-14,1株表达CTX-M-57,1株表达CTX-M-3。结论唐山地区存在着CTX-M基因的流行,应加强唐山地区产CTX-M型ESBLs菌株的检测。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况. 方法:用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其基因型;用微量液体稀释法做药敏实验. 结果:将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证,用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs (58.1%);而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株. PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 19株、SHV型8株、CTX-M型36株、OXA型11株. 结论:近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带多种耐药基因;亚胺培南仍为首选药物, 头孢哌酮/ 舒巴坦、哌拉西林/ 他唑巴坦为候选药物.     

长春地区部分医院革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的基因类型及分布

目的:了解长春地区部分医院超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)基因在革兰阴性杆菌中的分布及类型,为合理使用抗生素提供依据。方法：对165株临床分离革兰阴性杆菌采用 PCR方法分别扩增SHV、TEM和CTX基因片段。PCR产物经测序后,登录GenBank查询并比较基因类型。结果：在165株革兰阴性杆菌中检出耐药基因及多重耐药基因68株, 其中 TEM型检出率最高（12.12%）,其余依次为CTX-M-1型（4.24%）,SHV型（3.64%）和CTX-M-9型（3.03%）;同时检出 SHV+TEM型、TEM+CTX-M-1型、TEM+CTX-M-9型、TEM+CTX-M-1+CTX-M-9型和 SHV+TEM+CTX -M-1+CTX-M-9型等多组多重耐药基因。随机选择扩增阳性的 PCR产物进行测序,得到 SHV-11亚型、TEM-1亚型、CTX-M-3亚型、CTX-M-15亚型、CTX-M-14和CTX-M-18亚型。结论:长春地区部分医院革兰阴性杆菌ESBLs的基因类型主要为TEM-1亚型、SHV-11亚型、CTX-M-14亚型和CTX-M-18亚型。     

浙江地区门诊分离菌ESBLs的检测及基因型分布

目的了解门诊患者分离菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检出率及其基因型分布情况。方法对浙江部分地区门诊患者分离的145株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌通过聚合酶链反应进行ESBLs基因型确证。结果145株菌中共检出ESBLs株27株,总检出率为18．62％;27株ESBLs阳性株中,含有CTX—M基因的有18株,占66．67％;TEM基因的有6株,占22．22％;含有SHV基因的有3株,占11．11％。同时发现在这些ESBLs阳性株菌中同时含有两种基因的有5株,0株同时检出3种基因。结论浙江地区门诊患者分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率相对较低,最常见的基因型为CTX—M型。     

铜绿假单胞ESBLs基因分布及同源性分析

目的研究温州医学院附属第一医院临床分离铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶（EsBL8）产生情况、基因分布及流行特性,为临床合理使用抗菌药物、控制耐药性的传播提供理论依据。方法选取2005—2009年每年6-9月临床连续分离非重复铜绿假单胞菌共169株。PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶基因（TEM、SHV、VEB、PER、GES、TLA、IBC、CTX—M-1、CTX—M-2、CTX—M-8、CTX—M-9、OXAⅠ、OXAⅡ、OXAⅢ、OXAⅣ和OXAⅤ）。采用脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）分析产超广谱β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌株间的同源性。结果169株铜绿假单胞菌,经PCR方法检测,检出产超广谱β-内酰胺酶菌株84株,阳性率为49．7％;169株PA中检出TEM、CTX—M-9、CTX—M-1、CTX—M-2、OXAⅠ、OXAⅣ、GES、OXAⅡ基因型各占32．0％,5．3％,4．7％,2．4％,1．8％,1．8％,1．2％,0．6％。在54株TEM阳性PA中,挑取同一病区不同患者不同标本分离的铜绿假单胞菌共21株,利用PFGE分析其同源性,多呈现散发流行,仅三株具有同源性。结论铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶基因型以TEM为主,GES、CTX—M-1、CTX—M-2、CTX—M-9、OXAⅠ、OXAⅡ、OXAⅣ等基因都有检出,未检出PER基因。脉冲场凝胶电泳结果显示,本院临床分离的铜绿假单胞菌大多无同源性,呈散发流行趋势,个别病区存在轻微的克隆播散现象。