热休克蛋白70在创伤愈合中的表达及意义

热休克蛋白70(ＨＳＰ70)是一类具有细胞保护作用的应激蛋白,笔者探讨其与创伤愈合的关系。一、材料与方法昆明种小鼠25只,按伤后1,3,7,10天及愈合后随机分为5组,建立小鼠背部全层皮肤缺损模型,术后按预定时相点切取创伤组织标本行组织学及免疫组化观察。ＨＳＰ70单抗(Ｓｉｇｍａ公司),ＰＣＮＡ单抗及ＳＡＢＣ试剂盒(博士德公司)。二、结果创面愈合为痂下愈合,平均愈合时间为15.5天。伤后1天炎症反应明显,大量中性粒细胞浸润;伤后3天见肉芽组织生成及上皮新生;术后7,10天,肉芽组织中,细胞成分多,毛细血管丰富,新生上皮明显,组织增生活跃,炎性…     

人源性热休克蛋白70在大肠杆菌中的表达及鉴定

为在大肠杆菌中表达人源性热休克蛋白70（HSP70）的基因，以质粒为模板，采用PCR方法进行扩增，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，回收大小约1.96kb的片段；回收片段经T－A克隆法克隆到pUCm-T载体上，并进行DNA测序；将目的基因片段从pUCm-T载体上酶切后，亚克隆到表达载体pET-21a( )上，将重组质粒pET-21a( )/HSP转化大肠杆菌，经IPTG诱导后，收集细菌，菌体裂解后进行SDS－PAGE及Western blot检测。结果表明，应用PCR方法扩增出约1.96kb的目的片段，序列测定结果证实，扩增的HSP70基因序列与GeneBank中HSP70 cDNA序列一致；经EcoR I Xho I酶切及PCR鉴定证实，HSP70基因成功地克隆到原核表达载体pET-21a( )上，转入重组质粒的大肠杆菌经IPTG诱导后，进行SDS－PAGE，发现在分子量为72000处有表达量明显增多的蛋白条带，Western blot证实其为目的的条带。表明在大肠杆菌中已成功地表达了HSP70基因。     

热休克蛋白70在创伤愈合中的作用

目的 探讨热休克蛋白70（heat shock protein70,HSP70）在创伤愈合过程中的变化及其意义。方法 取大鼠伤后1天伤口液作为创伤修复启动微环境,刺激真皮多能干细胞,24小时后检测细胞表达HSP70含量的变化。同时制作单纯创伤和难愈创伤动物模型,通过免疫组化和图像分析方法观察伤后不同时相点伤口组织HSPT0含量变化。结果 创伤早期伤口液作用真皮多能干细胞后,HSP70表达显著增加。单纯创伤组大鼠伤后各时相点伤口局部HSP70表达均显著增加,尤以真皮组织增加明显,其峰值为伤后3天。难愈创伤组大鼠伤口局部HSP70含量在伤后各时相点亦显著增加,但与单纯创伤组相比,其含量在伤后各时相点均显著减少,尤以真皮组织表达减少更为明显,并且HSP70表达峰值显著延迟,为伤后7天。结论 HSP70不仅是一种应激保护分子,而且还是参与调节创伤愈合的一种重要分子。     

热休克蛋白70在正常和放射复合伤口愈合血管再生过程中表达及意义研究

目的：探讨HSP70在正常和放射复合伤口愈合过程中表达变化规律及其意义。方法：72只Wistar二级大鼠背部皮肤制作圆形伤口后以25Gy^60Coγ射线局部照射，于伤后2、5、10、15、21、和28d活杀取材，采用LSAB免疫组织化学技术研究HSP70基因表达及意义。结果：单纯创伤组于伤后2d见新生血管内皮细胞浆内15d后，HSP70逐渐减少。创伤＋照射组伤后5d始见血管内皮细胞浆内弱阳性，10－15d时阳性，21天阴性。结论：HSP70参与伤口愈合血管再生的过程，可能对血管再生起促进作用，辐射使血管内皮细胞表达HSP70减少可能是辐射延迟伤口愈合的原因之一。     

高温与热休克蛋白

热休克蛋白是组织在应激条件下所合成的一类蛋白质。高温时诱导热休克基因的表达,从而在组织中合成热休克蛋白。在高温状态下从培养的组织细胞到哺乳类动物脑组织中均发现了hsp70 mRNA和hsp70。Hsp70mRNA存在于一些神经元丰富的区域,如小脑的颗粒细胞层。通过对hsp70的功能研究,发现它是一种内源性的保护因子。Hsp70在应激条件下不能够稳定其它蛋白和促进蛋白复原,对损伤的组织细胞有减轻再损伤的作用。     

热休克蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的作用

热休克蛋白是近年来研究较多的生物体内内源性保护因子 ,许多原因如高温、缺血、缺氧均可使热休克蛋白合成增加 ,且生成量与心肌保护程度呈直接关系。其中时间因素很重要。本篇就热休克蛋白及其与心肌缺血再灌注损伤之间的关系作一综述。1　热休克蛋白概述　　热休克蛋白 (ＨｅａｒｔＳｈｏｃｋＰｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)是指细胞在应激原诱导下生成的一组蛋白质 ,最早由Ｒｉｔｏｓｓａ〔1〕于 196 2年在果蝇唾液腺中发现 ,直到 1974年Ｔｉｓｓｅｒｅｓ将其从果蝇体中分离出来 ,并命名为热休克蛋白。热休克蛋白是一类在进化上高度保守、广泛存…     

热适应与热休克蛋白研究进展

人类对热环境的适应是一个广泛的综合性的问题。热适应在人体的多个水平出现 ,比如 :器官水平、细胞水平、亚细胞水平〔1〕。热休克蛋白 ((ｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｏｒｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ,ＨＳＰ)是机体在应激情况下迅速合成的一组蛋白质。近年 ,热适应时机体ＨＳＰ变化与ＨＳＰ在热适应中的作用研究方面报道并不多 ,现综述如下 :1　ＨＳＰ生物学功能及基因调控从原始细菌到人 ,所有的生物在温度提高到正常生理体温之上时都会引起热应激反应 (Ｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅ)。它包括基因表达的一系列复杂变化 ,其结果是合成了…     

热休克蛋白在宫颈病变中的表达

目的研究几种主要热休克蛋白（heat shock protein, HSP）在不同病理改变的宫颈组织中的表达.方法根据病理诊断,把478例宫颈活检标本分为宫颈癌组（63例）、宫颈上皮内瘤形成组（CIN组,106例）、宫颈炎组（293例）及正常宫颈组（16例）.采用以特异性复合cRNA为内参照的定量RT-PCR法,检测各组标本的HSP70、HSP90α和HSP90β mRNA的表达.结果 （1）HSP70、HSP90α和HSP90β mRNA在宫颈浸润癌、CIN、宫颈炎及正常宫颈组织中的表达量均呈现阶梯式下降,差异均有极显著意义（P＜0.01）.（2）HSP90β mRNA在晚期宫颈癌中的表达比早期表达高（P＜0.05）;HSP70和HSP90β mRNA在低分化宫颈癌中的表达比高分化表达高（P＜0.05）;而HSP70、HSP90α和HSP90β mRNA在不同组织类型宫颈癌中的表达均无显著性差异（P＞0.05）.结论热休克蛋白在宫颈癌的发生和发展中起着重要的协同作用.HSP70和HSP90α与宫颈癌细胞的转化和增殖密切相关,HSP90β可能参与细胞的分化.     

热休克蛋白在脑缺血性损伤中的作用研究进展

脑缺血后虽然总蛋白的合成下降 ,但某些蛋白质合成增加 ,如热休克蛋白 (ＨＳＰ) [1] 。这是脑缺血早期引起一系列应激反应 ,诱导有关基因表达 ,合成相关的应激蛋白。ＨＳＰ被认为是脑缺血性损伤时敏感且可靠的标志之一 ,并认为对神经有保护作用。目前对脑缺血引起脑内ＨＳＰ基因表达 ,合成ＨＳＰ与脑细胞功能状态 ,损伤时程以及保护机制之间关系的研究日益受到重视。1　ＨＳＰ的命名、分类和功能1 1　ＨＳＰ的命名　 196 2年Ｒｉｔｏｓｓａ在观察果蝇幼虫唾液腺细胞多丝线粒体在过热环境中形态变化时首先发现热休克(Ｈｅａｔｓｈｏｃｋ ,Ｈ…     

EZH2和Ki67蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究EZH2和Ki67蛋白在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法对72例膀胱癌患者癌组织中的EZH2和Ki67蛋白进行测定。结果膀胱癌组织中EZH2及Ki67蛋白阳性率显著高于膀胱正常黏膜组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 EZH2蛋白表达增高与膀胱癌的临床分期,复发密切相关,并与Ki67正相关。联合检测EZH2及Ki67可以作为反映膀胱癌预后的生物学因子。     

膀胱移行细胞癌中促凋亡基因bak mRNA的表达及意义

目的：研究促凋亡基因bak在膀胱移行细胞癌组织中的表达。探讨bak基因在膀胱移行细胞癌发生演变过程中的意义。方法：应用原位分子杂交方法检测52例膀光移行细胞癌组织的bak mRNA的分布与表达。结果：52例膀胱移行细胞癌组织中bak基因mRNA表达的阳性率为57．7％,其阳 率随膀胱癌病理分级,临床分期的上升而降低,结论：促凋亡基因bak在大多数膀胱移行细胞癌细胞中有不同程度的表达。bak基因可能参与膀胱移行细胞癌的凋亡调节,并与膀胱移行细胞癌组织的分化有关。     

P—糖蛋白在膀胱肿瘤中的表达及临床意义

选择４９例膀胱移行细胞癌标本，１０例正常膀胱组织标本。应用免疫组化法观察多药耐药基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）在膀胱肿瘤组织中的表达及临床意义，结果显示：（１）正常膀胱组织中Ｐ－ｇｐ无表达，膀胱肿瘤组织中Ｐ－ｇｐ阳性表达率为７１．４％：（２）Ｐ－ｇｐ阳性表达的膀胱肿瘤复发率为５１．６％：（３）在死亡组中Ｐ－ｇｐ阳性表达＊率为８３．３％。表明膀胱肿瘤中Ｐ－ｇｐ的高阳性表达提示其复发率高，预后差，可作为临床上判定膀胱肿瘤患者预后情况及选择治疗方案的一个参考指标。     

Immunohistochemical localization of heat shock protein 70 in the human medulla oblongata in forensic autopsies

Heat shock protein 70 (hsp70) can be induced under various stresses in experimental animals. We investigated hsp70 immunoreactivity in the human medulla oblongata in forensic autopsies. Hsp70 immunoreactivity was observed in the cytoplasm of some neurons in the hypoglossal nucleus (XII), the dorsal motor nucleus of the vagal nerve (X), the lateral cuneate nucleus (Cun), and the inferior olive (Oli). Neurons with positive hsp70 immunoreactivity were statistically significantly fewer in the Oli than in the XII, X, and Cun. There was no statistically significant correlation between the AMI (the antemortem interval between the onset of injury and death) or PMI (the postmortem interval between death and autopsy), and the percentage of positive cytoplasmic hsp70 immunoreactivity in any of the nuclei studied. Age had a statistically significant negative correlation with the percentage of positive hsp70 immunoreactivity in the Oli. The percentages of positive hsp70 immunoreactivity in the XII and Cun were statistically significantly lower in burn cases than in other cases. Therefore, the induction of hsp70 immunoreactivity in the medulla oblongata may not reflect the duration of stress in the AMI, but may reflect the regional (nuclei) and conditional (burns) differences in autopsy specimens.     

nm23-H1基因蛋白在膀胱癌的表达及临床意义

目的：探讨肿瘤抑制基因nm23-H1在膀胱中的表达及临床意义，方法：应用免疫组织化学S－P法检测18例正常膀胱组织中及38例膀胱移行细胞癌组织中nm23-H1的表达。结果：nm23-H1在正常膀胱组织，膀胱癌中阳性表达率分别为83．3％（15／18），44．7％（17／38），二者间有显著差异（P＜0．01），提示nm23-H1阳性表达率与膀胱移行细胞癌的临床分期，临床分级，肿瘤大小及是否转移有密切关系，结论：nm23-H1在膀胱癌中的阳性表达对抑制肿瘤生长，浸润和转移起重要作用，可作为膀胱癌患者预测转移和预后及判断膀胱移行细胞癌生物学行为的良好指标。     

膀胱移行细胞癌组织中ΔNp63的表达及意义

目的研究△Np63在膀胱移行细胞癌（TCCB）组织中的表达及意义。方法采用RT—PCR方法对36例膀胱移行细胞癌及10例正常膀胱粘膜上皮组织中／~Np63mRNA的表达情况进行检测和比较。结果28例膀胱移行细胞癌组织（77．78％），1例正常膀胱粘膜上皮组织（10．00％）△Np63mRNA呈阳性表达，膀胱移行细胞癌组△Np63mRNA的阳性率明显高于正常组，蔗异有显著性（P〈0．01）。△Np63mRNA在不同临床分期和病理分级的阳性表达差异无显著性（P〉0．05）。结论△Np63mRNA在膀胱移行细胞癌中高表达，可能与膀胱移行细胞癌的发生有关。     

膀胱移行细胞癌患者血管抑素的定量检测及其临床意义

目的 :探讨血清及尿液中血管抑素含量与膀胱移行细胞癌发展、转移、疗效及预后的关系。方法 :采用赖氨酸 -酶联免疫吸附分析 (Lysine -ELISA)法检测 6 9例膀胱移行细胞癌患者治疗前血清及尿液中血管抑素 (angiostatin)的水平 ,以及治疗后血清中血管抑素的水平。结果 :膀胱移行细胞癌患者治疗前血清及尿液中血管抑素的水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,并与肿瘤大小、临床分期、分级及有无远处转移密切相关。膀胱移行细胞癌患者治疗后 2 4h血清中血管抑素的水平并无显著降低 (P >0 .0 5 ) ,治疗后 1周血管抑素水平明显降低 ,与治疗前差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :膀胱移行细胞癌患者血清和尿液中血管抑素的水平在一定程度上可以反应膀胱移行细胞癌的发展及治疗情况。     

人肝细胞肝癌组织中p53蛋白和热休克蛋白70的表达

目的：进行抗人肝癌的肿瘤主动性免疫研究,初步探讨人肝细胞肝癌（HCC）中p53蛋白及热休克蛋白70（HSP70）的表达并分析其间的关系。方法：免疫组织化学Envision法。结果：p53蛋白及HSP70均定位于细胞核或／和细胞质中。HCC中p53蛋白及HSP70阳性率分别为56．60％及49．06％;p53阳性者中88．68％伴有HSP70阳性,而HSP70阳性者中96．23％同时有p53阳性。结论：HCC中p53蛋白及HSP70表达增高,两者表达间有相关性。     

HP对消化性溃疡患者热休克蛋白60影响的临床研究

 目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)对消化性溃汤(Peptic ulcer,PU)患者热休克蛋白60(Heat shock protein 60,HSP60)的影响.方法观察HP清除率,运用Western斑点印迹技术对患者血清及胃黏膜匀浆HSP60进行检测,并将相关结果进行比较.结果HSP60含量治疗前与对照组比较,HP阳性者明显增高(P＜0.01);治疗后HP阳性者仍明显高于HP阴性者及HP清除者(P＜0.05),而后两者无明显差异.结论HP感染可促进HSP60表达,HP清除使HSP60表达能力下降,HP与HSP60存在关联.     

MMP—9与膀胱移行细胞癌浸润转移的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达与膀胱移行细胞癌浸润、转移和预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测61例膀胱移行细胞癌组织及23例癌旁组织基质金属蛋白酶－9的表达。结果：膀胱移行细胞癌MMP－9表达与侵袭程度成正相关（P＜0.01）,预后不良组膀胱移行细胞癌MMP－9表达显著高于预后良好组（P＜0.01）。结论：MMP－9的表达与膀胱移行细胞癌的侵袭、转移和预后有关,是膀胱移行细胞癌侵袭、转移较好的分子标志,可用于膀胱移行细胞癌的预后判断。