CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症易感性的研究

目的:探讨P450酶系的CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术(PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR技术(AS-PCR)对100例ICP患者和100例正常对照孕妇CYP19基因第3外显子Rsal酶切多态和CYP1B1基因外显子3密码子432(C-G)多态性进行分析。结果:①对照组CYP19的基因型AA、AG、GG频率分别为30.0%、50.0%、20.0%,ICP组分别为38.0%、45.0%、17.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因A、G频率分别为55.0%、45.0%,ICP组分别为60.5%、39.5%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。②对照组CYP1B1的基因型CC、CG频率分别为80.0%、20.0%,ICP组分别为70.0%、30.0%,两组均无突变纯合子(GG),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因C、G频率分别为90%、10%,ICP组分别为85%、15%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.0S)。结论:CYP19外显子3基因多态性和CYP1B1外显子3密码子432基因多态性与ICP发病无关。     

CYP1A1和CYP1B1基因多态性与RPL易感性

目的 探讨CYP1A1、CYP1B1基因多态性与复发性流产(RPL)遗传易感性关系,为预防和治疗该病提供新靶点.方法 本研究采用等位基因特异性PCR (As-PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCRRFLP)方法,针对CYP1A1基因MspI酶切位点和CYP1B1 L432V多态位点,检测81例患有原因不明RPL病例组和98名有生育史健康女性对照组之间差异.结果 RPL组和对照组CYP1A1 MspI位点3种基因型m1/m1、m1/m2、m2/m2分布频率差异无统计学意义(x2=0.335,P＞0.05);CYP1B1 L432V多态位点3种基因型C/C、C/G、G/G在病例组和对照组分布差异有统计学意义(x2=7.467,P＜0.05);2组间C、G等位基因分布差异有统计学意义(x2=9.129,P=0.003);G/G、C/G基因型与C/C基因型比较,RPL危险度分别提高2.620、1.954倍;等位基因G使RPL危险性增加2.038倍.结论 CYP1B1 L432V突变基因型增加RPL发病风险,尚不能认为CYP1A1基因MspI位点多态性与RPL易感性有关.     

雌激素代谢酶CYP17、CYP1A2基因多态性与子宫肌瘤易感性的关系

目的:探讨参与雌激素合成和代谢的CYP17和CYP1A2基因多态性与成都地区子宫肌瘤发病的关系。方法:应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对100例子宫肌瘤患者和100例对照组人群CYP17基因启动子区T-C多态和CYP1A2基因2964位点G-A多态性进行分析。结果:两组均存在CYP17基因T-C多态,但两组基因型TT、TC、CC频率和等位基因T、C频率的比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组均存在CYP1A2基因G-A多态,但两组基因型GG、GA、AA频率和等位基因G、A频率的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CYP17基因启动子区T-C多态和CYP1A2基因2964位点G-A多态性与成都地区子宫肌瘤发病风险无相关性。     

吉林市汉族妇女GSTM1基因和CYP1A1基因Exon7位点多态性与 子宫内膜异位症易感性的研究

目的:探讨在吉林地区汉族妇女中细胞色素P450(CYP1A1)基因Exon7位点多态性即Ile-Val位点的多态性及GSTM1基因多态性和子宫内膜异位症易感性的相关关系。方法:以病例对照的研究方法,采用PCR技术检测216例子宫内膜异位症和216例对照人群的CYP1A1基因Ile-Val位点及GSTM1基因多态性的表达。结果:吉林地区汉族人群中GSTM1空白基因型分布频率0.463,内异症人群中空白基因型分布频率0.667,两组差异有统计学意义(P<0.05),空白基因型患内异症的危险是功能基因型的1.896倍;Ile-Val三种多态基因型在内异症组和对照组分布差异有统计学意义(P<0.05),Ile/Val、Val/Val基因型患内异症的危险分别是Ile/Ile基因型的1.901倍和3.056倍;CYP1A1 Ile/Val联合GSTM1空白基因型个体的OR值为3.409(95%C I 1.897~6.125,P<0.01),而CYP1A1Val/Val联合GSTM1空白基因型个体的OR值增高至7.143(95%C I 2.584~19.742,P<0.01)。结论:CYP1A1 Exon7的Ile/Val、Val/Val基因型及GSTM1空白基因型与内异症的易感性有关,二者联合效应具有协同作用,可望作为内异症易感人群筛选的重要指标。     

TRAIL基因多态性与妊娠期糖尿病的相关性

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因1 525位点G/A、1 595位点C/T单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)的关系及TRAIL在GDM发生中的可能作用。方法:利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测TRAIL基因1 525位点G/A、1 595位点C/T多态性,并测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等生化指标。计算相应的基因型频率和等位基因频率,通过χ2检验和方差分析,分析TRAIL基因型和等位基因与GDM及各生化指标的相关性。结果:GDM组TRAIL基因型频率和等位基因频率高于正常妊娠组(分别为P<0.05和P<0.01);GDM组GA/CT、AA/TT基因型FPG、FINS均高于GG/CC基因型(P<0.05)。结论:TRAIL基因1 525位点G/A、1 595位点C/T单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病密切相关,可能参与GDM的发病机制。     

广西壮族人群CYP1B1基因Leu 432 Va1多态性分析

目的研究CYP1B1第432密码子在广西壮族人群中遗传特征,为进一步研究CYP1B1基因多态性与疾病的发生易感性奠定基础。方法采用人工修饰双等位基因特异性引物扩增法(diASA-AMP)技术对288名广西壮族正常成人进行CYP1B1 Leu 432 Va1基因分型,探讨性别间差异及与国内外其他人群分布频率差异。结果广西壮族女性和男性人群CYP1B1 Leu 432 Va1均以C等位基因为主,分别为89.1%和91.4%;CC野生纯合子型、CG杂合子型和GG突变纯合型在女性人群中分别为78.3%、21.3%和0,男性人群则为83.6%、15.6%和0.8%;统计分析表明,广西壮族CYP1B1 Leu 432 Va1等位基因和基因型分布频率无性别差异,与朝鲜人群相应位点基因型分布频率无差异,但与国内江苏汉族、上海和四川女性相比具有统计学差异(P<0.05),与日本、印度、波兰、尼日利亚、美国白人和美国黑人等人群相应位点基因型分布频率有明显差异(P<0.01)。结论广西壮族人群CYP1B1基因Leu 432 Va1呈多态性分布,基因型分布频率无性别差异,存在种族差异。     

MDR3基因错义突变与妊娠肝内胆汁淤积症相关性

目的:探讨MDR3基因外显子14错义突变与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:运用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对60例ICP患者(ICP组)和60例正常孕妇(对照组)MDR3基因外显子14和sexAⅠ酶切多态性进行分析。结果:ICP组MDR3基因外显子14基因型G/G、G/A、A/A频率分别为83.33%、16.67%、0%,对照组分别为100%、0%、0%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ICP组等位基因G、A频率分别为91.67%、8.33%,对照组分别为100%、0%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MDR3基因外显子14错义突变可能与妊娠期肝内胆汁淤积症的发病相关。     

广西部分壮族妇女CYP1B1基因Ala119Ser多态性与乳腺癌易感性研究

目的探讨CYP1B1基因Ala119Ser与乳腺癌易感性的关联性。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术对88例广西壮族女性乳腺癌患者和106例健康对照者进行CYP1B1 Ala119Ser基因分型,并分析其与乳腺癌患病的关系。结果病例组CYP1B1 Ala119Ser T等位基因分布频率(30.7%)明显高于对照组(19.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。病例组3种基因型(GG、GT、TT)分布频率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);病例组CYP1B1 Ala119Ser突变型纯合子(TT)的分布频率为10.2%,明显高于对照组(2.8%);与野生型纯合子(GG)相比,病例组TT基因型能增加乳腺癌患病风险(OR=4.74,95%CI为1.22~18.51)。结论 CYP1B1 Ala119Ser突变可能增加广西壮族妇女乳腺癌易感性。     

CYP1A1基因多态性与肺癌个体易感性研究

[目的 ]探讨CYP1A1Msp1和Ile/Val多态性单独或联合作用 ,对肺癌易感性的影响。 [方法 ]以病例一对照研究的方法 ,采用PCR扩增限制酶切法 (PCR -RFLP)和等位基因特异性扩增 (Allele SpecificAmplification ,ASA)检测 92例肺癌病人 (病例组 )和 98例非肿瘤病人 (对照组 )CYP1A1基因Msp1和Ile/Val基因型。 [结果 ]Msp1多态性位点 :具有B和C基因型者患肺癌的危险性是A基因型者的 1 85倍 (χ2 =4 3 6,P <0 0 5 ,OR =1 85 ,95 %CI 1 0 4～ 3 3 0 )。Ile/Val多态性位点 :Val/Val基因型者患肺癌的危险性是Ile/Ile基因型者的 3 3倍 (χ2 =4 12 ,P <0 0 5 ,OR =3 3 ,95 %CI 1 0 2～10 72 )。Ile/Val基因型联合B基因型、C基因型或Val/Val基因型联合C基因型与Ile/Ile基因型联合A基因型相比 ,患肺癌的危险性增加 ,其相对危险度分别为 3 0 9(χ2 =5 81,P <0 0 5 ,95 %CI 1 7～ 9 96) ;4 74(χ2 =4 74,P <0 0 5 ,95 %CI1 11～ 2 0 9) ;5 5 (χ2 =4 42 ,P <0 0 5 ,95 %CI 1 2 7～ 2 3 6)。 [结论 ]CYP1A1基因的B、C和Val/Val基因型可能是肺癌的易感基因型 ,两种易感基因型同时存在 ,更增加对肺癌的易感性     

辽宁地区汉族人群多巴胺D1受体基因-48G/A位点的多态性研究

目的探讨辽宁地区汉族人群多巴胺D1受体（dopamine D1 receptor,DRD1）基因-48G/A位点的基因型及等位基因的频率分布。方法用等位基因特异性扩增技术对101名辽宁地区汉族人的DRD1基因-48G/A多态性进行检测,并与其他人群做比较。结果 （1）DRD1基因-48G/A的等位基因频率分别为43.6%和56.4%。均符合Hardy-Weinberg平衡定律。（2）中国人群与其他人群基因多态性分布频率对照研究发现,-48G/A多态性分布差异有统计学意义。结论 DRD1基因-48G/A多态性分布具有种族差异。     

母亲和新生儿GSTM1、GSTT1和细胞色素P_(450)1A1基因多态性与早产易感性关系

目的探讨母亲和新生儿GSTM1、GSTT1基因以及细胞色素P4501A1基因多态性对早产的影响。方法采用病例-对照调查方法,应用多重PCR和限制性内切酶PCR(RFLP-PCR)技术对早产母亲和对照母亲以及早产新生儿和对照新生儿GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性分别进行检测。结果GSTM1、GSTT1基因和CYP1A1基因MSPI位点多态性在早产母亲和对照母亲组中没有显著性差异(P>0.05);以上基因在早产新生儿和对照新生儿组中也没有显著性差异(P>0.05)。GSTM1与GSTT1联合基因型在母亲和新生儿的病例与对照组中也没有显著性差异(P>0.05);GSTT1缺失型和CYP1A1变异型联合基因在早产母亲组与对照母亲组中有显著性差异(χ2=4.683,P<0.05,OR=2.440)。结论携带GSTT1缺失型基因以及CYP1A1变异型基因的母亲,其发生早产的危险性增大。     

TPH2G1463A基因多态性与女性抑郁及自杀行为的关联研究

目的:探讨色氨酸羟化酶2(TPH2)基因G1463A单核苷酸多态性与女性单相抑郁症及自杀行为的关系。方法:提取中国北方地区219例女性单相抑郁患者(病例组)和215名健康对照者(对照组)基因组DNA,采用TaqMan探针SNP基因分型技术测定包含TPH2基因G1463A位点的基因组DNA片段,检测病例组及对照组基因型的多态分布,应用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果:病例组与对照组SNPs基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);病例组携带的TPH2G1463A基因型A/A、T/T、A/T频率分别为38.36%(84/219)、0.46%(1/219)和61.19%(134/219),对照组分别为48.37%(104/215)、40.00%(86/215)、11.63%(25/215),两组比较差异有统计学意义(χ2=159.874,P=0.000);病例组TPH2 G1463A等位基因A、T频率分别为68.95%(302/438)、31.05%(136/438),对照组分别为54.19%(233/430)、45.81%(197/430),两组比较差异有统计学意义(χ2=20.001,P=0.000);病例组内有自杀行为的个体携带TPH2 G1463A基因型A/A、T/T、A/T的频率及等位基因A、T频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:TPH2基因G1463A单核苷酸多态性与女性单相抑郁症有明显关联,可能与女性抑郁症自杀行为易感性无关。     

新生儿不明原因高胆红素血症与SLCO1B1基因多态性的相关分析

目的探讨SLCO1B1基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症发病风险的关系。方法收集金华地区新生儿不明原因高胆红素血症患儿66例为疾病组,同时选取健康新生儿42例作为对照组。提取外周血DNA,采用PCR和Sanger测序法对基因多态性的情况进行分析。观察基因变异频率及基因型分布、基因多态性与新生儿不明原因高胆红素血症的相关性及对患儿血清胆红素水平的影响。结果金华地区新生儿SLCO1B1基因c.388A>G、c.521T>C、c.571T>C和c.597C>T的变异率分别为93.5%、25.9%、37.0%和63.9%,这些位点在疾病组和对照组中分布差异无统计学意义(P>0.05)。在c.388A>G、c.571T>C和c.597C>T 3个位点的不同基因型中,疾病组患儿总胆红素、未结合胆红素、结合胆红素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);c.521T>C位点纯合变异型血清总胆红素水平与杂合变异型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SLCO1B1基因的4个SNPs位点与金华地区新生儿不明原因高胆红素血症的发病风险没有显著相关性,但c.521T>C位点纯合变异型可能对血清总胆红素水平有一定的影响。     

NQO1C609T、XRCC1G28152A基因多态性与吸烟的交互作用和胃癌的关系

目的 探讨NQO1C609T、XRCC1G28152A基因多态性与吸烟的交互作用和胃癌的关系.方法 采用1∶1配对病例对照研究方法,应用PCR-RFLP对基因多态性进行分析,根据交互系数γ判断交互作用类型,探询胃癌可能的遗传及环境因素.结果 334例胃癌患者,平均年龄在57岁,其中男性占65.3%;病例组吸烟率(55.09%)显著高于对照组(36.53%);NQO1C609T基因杂合突变型(CT)、纯合突变型(TT)增加了胃癌的发病风险(OR值分别为1.507、3.050);XRCC1G28152A基因多态性与胃癌遗传易感性没有关系;同时携带XRCC1AG和NQO1TT个体较XRCC1AG和NQO1CC个体胃癌的发病增加2.789倍;携带XRCC1GG和NQO1TT个体的胃癌发病风险是XRCC1GG和NQO1CC个体的4.448倍;NQO1纯合突变型(TT)与吸烟在胃癌发生中有正向交互作用(OR=4.057,γ=1.272),XRCC1纯合突变型(GG)与吸烟在胃癌发生中有正向交互作用(OR=3.094,γ=2.070).结论 NQO1、XRCC1基因多态性与吸烟的交互作用增加了胃癌发病风险.胃癌的发生表现为基因及环境因素综合作用的结果.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between polymorphism of NAD (P)H quinone oxidoreductase 1 (NQO1)and X-ray repair cross-complementing group 1 (XRCC1) and their correlation with smoking on the susceptibility to gastric cancer. Methods A 1:1 case-control study of 334 patients with primary gastric cancer, with non-cancer or alimentary inpatients as control group (matched for ages ± 5 years, sex and reqion) in Anhui province was conducted to analyze theNQO1C609T and XRCC1G28152A. Gene types by PCR-based restriction fragment length polymorphism techniques. Interaction index (γ) was calculated to determine the type of gene- environment interaction. Results The average age of 334 cases of gastric cancer patients was 57 years, with 65.3% of them were male. Smoking rate in the case group (55.09%) was significantly higher than in the control group (36.53%). The consequence showing that it carried the heterozygous variant (CT)or homozygous variant (TT) of NQO1 could enhance the risk of gastric cancer(OR= 1.507,3.050),but not the XRCC1G28152A gene polymorphism or the susceptibility to gastric cancer. At the same time,individuals that carrying XRCC1AG and NQO1TT could increase 2.789 times the incidence of gastric cancer than those who carrying the XRCC1AG or NQO1CC. The gastric cancer risk of XRCC1GG individuals that carrying NQO1TT was 4.448 times higher than those who carrying XRCC1GG or NQO1 CC. The positive interactions of NQO1 homozygous variant (TT) , XRCC1 homozygous variant (GG) and smoking were revealed in the occurrence rates of gastric cancer (OR=3.094,γ =2.070). Conclusion Our research findings showed that the significant interactions between genetic polymorphisms of NQO1, XRCC1 and smoking added the risk of gastric cancer, while genetic and environmental hazardous factors co-effecting the development of gastric cancer.     

醛固酮合成酶基因-344T/C多态性与蒙古族高血压的关联

目的 探讨醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344T/C多态性与蒙古族高血压的关系.方法 采用整群抽样的方法 ,选择内蒙古通辽市的1575名蒙古族居民作为研究对象,其中正常血压者417名,高血压前期者596例,高血压患者562例.对研究对象进行面对面问卷调查;采集血液标本;测量身高、体重、腰围、血压及血糖、血脂等指标,检测CYP11B2基因-344T/C的多态性.采用无序多分类反应变量logistic回归分析CYP11B2基因与高血压的关联.结果 蒙古族高血压前期和高血压粗患病率分别为37.84%(596/1575)和35.68%(562/1575),高血压前期和高血压年龄标化患病率分别为38.57%和31.53%;正常血压组、高血压前期组及高血压组CYP11B2基因-344T的频率分别为0.66(481/728)、0.69(696/1042)和0.71(706/998),C的基因频率分别为0.34(247/728)、0.33(346/1042)和0.29(292/998).logistic回归分析结果 表明,CYP11B2基因与高血压前期有关联,TT、TC基因型相对于CC型的OR值分别为1.33(95%CI:0.87～2.01)和1.74(95%CI:1.13～2.67),含TT或者TC基因型(TT+TC)相对于CC型的OR值为1.49(95%CI:1.01～2.22);CYP11B2基因与高血压有关联,含TT、TC基因型相对于CC型的OR值分别为1.70(95%CI:1.07～2.70)和1.59(95%CI:0.98～2.50),含TT或者TC基因型(TT+TC)相对于CC型的OR值为1.66(95%CI:1.06～2.58).结论 CYP11B2基因-344T/C多态性与蒙古族原发性高血压的发生有关联.     

Detection of CYP1A1 gene polymorphism using designed RFLP and distributions of CYP1A1 genotypes in Japanese

Isoleucine (Ile)-valine (Val) polymorphism, which is caused by a point mutation from A to G in exon 7, is reported to be associated with an elevated risk of lung cancer among Japanese. Because CYP1A1 catalyzes bioactivation of environmental procarcinogens, such as benzo[a]pyrene, it is very important to study the clinical meaning of Ile-Val polymorphism using an epidemiological study. In an epidemiological study, easy, economical, rapid and reliable identification of the CYP1A1 genotype is necessary. The present study shows that the new method, designed restriction fragment length polymorphism (designed RFLP), can detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 The Ile-Val polymorphism detected using this new method was consistent with that found by the allele-specific PCR amplifications (ASA) method in six cases tested. This new method detected Ile-Va1 polymorphism of CYP1A1 using 240 healthy Japanese who lived in the northern Kyusyu region. The frequency of the genotypes was as follows: Ile/Ile, 159 (66.2%); Ile/Val, 65 (27.1%); Val/Val, 16 (6.7%). The frequency of the Ile gene was 0.798 and that of the Val gene, 0.202. There was no difference in Ile-Val polymorphism based on sex or age. Racial differences influenced the distribution of this polymorphism, but Japanese regional differences did not. Since this new method, designed RFLP, is rapid, reliable and suitable for large-scale screening of polymorphisms, it may be used routinely to detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 Furthermore, it will help to evaluate the relationship between CYP1A1 polymorphism and individual sensitivity to xenobiotics that may affect the incidence of lung cancer.     

CYP1A1基因多态性与焦炉工尿中1-羟基芘水平的关系

目的 研究CYPIAl多态性与焦炉工尿中1-羟基芘水平的关系.方法 按照苯并[a]芘(B[a]P)接触水平将223名焦炉工分为炉顶组(76名)、炉侧组(82名)和炉底组(65名),以119名无职业性接触多环芳烃的工人为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)CYPIAl基因Mspl位点多态性、等位基凶特异性扩增方法 检测CYPlAl基因1462V位点的多态性.结果 炉顶组、炉侧组和炉底组焦炉工尿中1-羟基芘水平分别为(3.77+0.64)、(3.57+0.49)、(3.26+0.80)μmol/mol Cr,明显高于对照组,差异有统计学意义(PO.05).炉侧组和炉顶组CYPIAl 1462V位点的各基因型尿中1-羟基芘水平均为Ⅱe/Ⅱe<Ⅱe/Val相似文献   

IL-1B和IL-1RN基因多态性 与非贲门胃癌发病风险的研究

摘要:目的　探索IL-1B+3954,IL-1RN-9876,IL-1RN-9739和 IL-1RN-9091基因多态性与非贲门胃癌发病风险之间的关系。方法　采用病例对照研究,收集四川省176名非贲门胃癌患者作为病例组,308例健康者作为对照组。使用自行设计的调查问卷,通过基因组测序检测IL-1B和IL-1RN的基因型。结果　病例组和对照组的男性分别为122例（69.3%）和224例（72.7%）,两组的平均年龄分别为（57.7±10.6）和（57.6±11.1）岁,年龄和性别在两组间具有可比性。家族癌症史和饮酒在病例组与对照组之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。病例组和对照组携带IL-1B+3954 CC基因位点分别为166例（94.3%）和298（96.8%）,IL-1RN-9876 GG分别为141（82.5%）和229（81.5%）,IL-1RN-9739 AA分别为145（82.4%）和252（81.8%）,IL-1RN-9091 AA分别为60（34.1%）和118（38.3%）。本次研究的4个SNP位点与非贲门癌发病风险之间不存在关联（IL1B+3954 C/T调整OR值1.73,95% CI 0.69～4.30;IL-1RN-9876 G/A调整OR值0.99,95% CI 0.59～1.65;IL-1RN-9739 A/G调整OR值1.02,95% CI 0.62～1.68;IL-1RN-9091 A/C调整OR值1.25,95% CI 0.84～1.86）。此外,对IL-1RN 3个SNP位点进行的单倍体分析尚未发现其是非贲门癌发病的高危因素。结论　四川地区汉族人群IL-1B+3954,IL-1RN-9876,IL-1RN-9739和 IL-1RN-9091基因多态性与非贲门癌发病无关。