人淋巴细胞酯酶染色法有关问题的探讨

非特异性酯酶(acid α-naphthylacetate esterase,简称ANAE)染色法,在国内外已有不少报道。该法作为人T淋巴细胞标记物,代替E花环试验检查人末稍血T淋巴细胞,已应用于临床。我们在实践中体会到该试验受各种因素的影响,在操作过程中,如稍不适合,就会严重影响结果。为了严格控制试验条件,我们通过反复实践认为应注意以下几点。     

流行性出血热患者淋巴细胞酸性酯酶活性测定

<正> 我们用酸性非特异性酯酶(简称ANAE)染色对流行性出血热(简称EHF)患者的淋巴细胞进行染色观察,发现EHF病初4日内ANAE活性就已明显低于正常人,对EHF的早期诊断具有一定的参考价值。本文报告了64例EHF患者淋巴细胞ANAE活性的首次检测结果,并同时对其中的44例     

氦-氖激光对小鼠巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内 非特异性酯酶影响的图像分析研究

目的探讨氦-氖(He-Ne)激光照射对机体免疫功能的影响。方法将小鼠随机分成4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ～ⅣV组为He-Ne激光照射的不同时间组,采用a-茶酚醋酸酯法显示非特异性酯酶,并用图像分析系统对小鼠腹腔巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内非特异性酯酶作定量分析。结果各照射组的三种免疫细胞内非特异性酯酶的各项指标均较对照组差异有非常显著性(P＜0.01),各照射组之间比较,差异也均有非常显著性(P＜0.01)。结论He-Ne激光可激活三种免疫细胞,增强机体免疫力。     

T淋巴细胞α醋酸萘酯酶检测法的改进

目前,鉴定与计数T淋巴细胞的非特异性α醋酸萘酯酶检测,多用薄血片法,其优点是染色清晰,但由于血片上淋巴细胞数甚少,计数费时。也有用从静脉抗凝血分离的白细胞作涂片,但需静脉采血,不易被病人     

氦—氖激光对小鼠巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内非特异性酯酶影响的图像

目的：探讨氦－氖（He-Ne)激光照射对机体免疫功能的影响。方法：将小鼠随机分成4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ－Ⅳ组为He-Ne激光照射的不同时间组,采用a－荼酚醋酸酯法显示非特异性酯酶,并用图像分析系统对小鼠腹腔巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞内非特异性酯酶作定量分析。结果：各照射组的三种免疫细胞内非特异性酯酶的各项指标均较对照组差异有非常显著性（P＜0．01）,各照射组之间比较,差异也均有非常显著性（P＜0．01）。结论：He-Ne激光可激活三种免疫细胞,增强机体免疫力。     

麻风患者的细胞免疫——外周血中的T淋巴细胞及其对PHA的反应

瘤型麻风(LL)有特异性和非特异性细胞免疫缺陷,但机制不明。有人认为与遗传因素有关,也有人认为是表示免疫耐受或免疫偏离状态。这种细胞免疫缺陷的发生部位可能在T淋巴细胞或者麻风菌诱导的淋巴细胞与巨噬细胞相互作用点。另有人认为可能由于存在血清因子所致。本文目的在于探     

T淋巴细胞酯酶活性检测法的改进及其影响因素

近年来,酸性非特异性酯酶(ANAE)活性染色法已被广泛地应用于检测小鼠及人类外周血、脑脊液、关节滑膜液及组织切片中T淋巴细胞。但该法仍较繁琐,许多因素可直接影响染色效果。为此,我们对该法的步骤进行简化和改进,并对一些影响因素进行了探讨。 材料和方法 一、检测对象:JCR、C57BL/6J、BAIB/C小鼠及非近交系昆明种小鼠。另外检测了5名正常成年人。 二、溶液的配制:基本上参照Horwitz的方法(Horwitz D A et al:Clin Exp Immunol,30:     

酸性α-醋酸萘酯酶标记T淋巴细胞研究的一些进展

Mueller 1975年首先发现酸性α醋酸萘酯酶(Acid αnaphthyl acetta esterase,ANAE)能特异性地标记T淋巴细胞,这种方法用血涂片或组织切片在光学显微镜下即可鉴别T和B淋巴细胞,操作简便、快速、重复性好、特异性强,不需要特殊的条件和仪器,是识别T、B淋巴细胞技术上的一大改进,对细胞免疫学的研究和应用将起重要推动作用。现将我们所复习到的有关这方面研究文献综合介绍如下。一、ANAE 反应的原理ANAE反应的原理是细胞质内酸性α-醋酸萘酯酶能将孵有液内α醋酸萘酯水解,产生α-萘酚和醋酸离子,然后α萘酚和孵育液内的六偶氮副品红或fast garnetGBC偶联,在酶所在部位形成不溶性的棕红色沉淀物,从而对细胞起标记作用。淋巴细     

ANAE标记人周血淋巴细胞的方法改进及细胞分型观察

通过对酸性非特异性酯酶(ANAE)标记人周血淋巴细胞方法的10项步骤对比,见到对分离的淋巴细胞以戊二醛弱固定,15％福尔马林钙(1.3％)复固定时,酶活性保存和胞核复染好。此福尔马林钙固定全血膜片,尚具有溶解红细胞的优点,尤其是固定以磷酸缓冲盐水稀释的血膜片,比血涂片更易使片上的红细胞溶去,而使淋巴细胞数目集中,易于计数。以国产重氮化副品红及0.5mg/ml的α-醋酸萘酯浓度的培育液,于37℃培育约2h,ANAE细胞分型辨别较好。共观察28例成人,血片淋巴细胞及分离的淋巴细胞的ANAE分型中,点型约占56％,弥散型约占25％,阴性型约占19％,两者计数结果近似。对同一个体分离的淋巴细胞与血片淋巴细胞做对比观察,见到点型减少不显著,弥散型明显增多,阴性型明显减少。     

划分三种类型人类细胞毒淋巴细胞的根据

CTL和NK之间的关系虽经多年研究但仍有争议。问题在于只根据功能去鉴别这两种细胞。所有不受MHC限制的细胞毒性淋巴细胞都被认为是NK细胞,而具有抗原特异性的细胞则被认为是CTL。但人们观察到在植物血凝素、同种抗原和淋巴因子活化的淋巴细胞中存在表达T细胞抗原的非MHC限制性细胞毒细胞。这就使得上述差别更     

伤寒患者外周血中T和B细胞的变化——Ⅰ.T与B细胞数量和活化状态检查

本文对43例伤寒患者和51例正常健康人进行临床观察和外周血中T和B淋巴细胞的数量和活化状态检测。T细胞的检测法采取总E花环(E_t),活化E花环(E_a)和稳定性E花环(E_(?))试验,部分病人对E_t和E_(?)花环形成细胞作了非特异性酯酶染色,B细胞则用FBC鉴定。结果如下:1)白细胞的总数显著下降(P<0.001),淋巴细胞的百分率与绝对数和B细胞的绝对数均上升(P<0.001、<0.01和<0.05)。T细胞的E_(?)-RFC％与E_t-RFC％减低(P<0.001和<0.05),但绝对数的变化不明显。E_(?)-RFC％和绝对数的增多非常显著(P<0.001)。2)用非特异性酸性酯酶染色E_t-RFC和E_a-RFC,并将酯酶颗粒分成大、中、小和无四级,发现正常人E_t和E_a-RFC中酯酶颗粒的分布相似。病人E_t-RFC的酯酶染色反应有一定变化,而E_a-RFC中颗粒分布呈显著右移。以上证明伤寒患者的T、B细胞均呈现质与置的变化,提示二者均积极参予免疫应答过程。     

40例肿瘤病人外周血红细胞免疫功能和T细胞ANAE~ 细胞数检测结果

应用微量法RBC_(c3)b受体酵母花环试验和RBC免疫复合物花环试验,对40例肿瘤病人和30例健康人,进行了红细胞免疫功能检测。同时用微量法酸性非特异性酯酶染色法进行T淋巴细胞(ANAE)阳性细胞的观察。结果如表1。从表中可以看出,肿瘤患者的RBC_(c3)b受体花环率下降,与正常对照比,除胃癌组(P<0.05)     

针刺对豚鼠血淋巴细胞阿片样肽免疫组织化学反应影响的研究

本文报道对64只豚鼠的血淋巴细胞,分别在电针、给予纳洛酮或外源性阿片样肽(OLP)等不同条件下,以PAP免疫组织化学法显示甲脑啡肽(MEK)、亮脑啡肽(LEK)及β-内啡肽(β-EP)的免疫反应(IR)。另对部分免疫组织化学标本,随后显示酸性非特异性酯酶(ANAE)。约96％的血淋巴细胞呈强弱不等的OLP阳性反应。甲脑啡肽强阳性反应淋巴细胞(MEK-IIRL)和β-EP强阳性反应淋巴细胞,与ANAE的点型淋巴细胞,均呈显著正相关;但LEK强阳性反应淋巴细胞与ANAE的点型淋巴细胞的相关不显著。电针豚鼠“足三里”穴后,MEK、LEK及β-EP的强阳性反应淋巴细胞计数均显著提高。将电针组、纳洛酮组和对照组的结果做比较,见3组间的OLP(包括脑啡肽和内啡肽)的强阳性反应淋巴细胞计数差别皆不显著。但当分别加10~(-7)mol/L MEK、LEK和β-EP体外孵育淋巴细胞后,纳洛酮对OLP强阳性反应淋巴细胞有抑制效应,纳洛酮组和电针组的OLP强阳性反应淋巴细胞计数均呈显著差异。在外加10~(-12)～10~(-3)mol/L MEK体外孵育淋巴细胞后,可见电针组比对照组在10~(-10)～10~(-3)mol/L浓度间MEK免疫反应呈现一个明显高峰,提示电针可能提高潜在未结合的MEK受体的活性。     

shRNA抑制淋巴细胞TNFα的表达

目的观察RNA干扰技术是否有效抑制原代培养的脾淋巴细胞肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达。方法体外合成针对TNFα基因序列的特异性发夹状双链RNA(shRNA)的表达载体,与L ipofectam ine2000结合后转染原代培养的由脂多糖(LPS)激活的脾淋巴细胞,用ELISA和RT-PCR法检测TNFα表达的变化。结果ELISA检测结果表明,特异性RNA干扰组TNFα蛋白表达较对照组下降34.2%,而非特异性干扰组TNFα表达与对照组无明显差异;RT-PCR检测结果表明,特异性RNA干扰组TNFαmRNA表达较对照组下降61.3%。结论RNA干扰可以有效抑制原代培养的淋巴细胞TNFα的表达,该过程具有严格的基因序列特异性,为TNFα相关疾病的基因治疗提供了新策略。     

GM—CSF诱导外周血单核细胞的分化及其对混合淋巴细胞反应的 …

作者对ＧＭ－ＣＳＦ作用下的外周血血单菜态特征及免疫表型进行了测定,并观察了其对混合淋巴细胞反应的影响。结果显示,ＧＭ－ＣＳＦ可使外周血单核细胞分化为ＣＤ１４＾＋、ＣＤ１ａ或低表达、ＣＤ８０、ＣＤ８６低表达、ＨＬＡ－ＤＲ＾＋、ＣＤ１１,和非特异性酯酶呈强阳性反应的细胞,符合巨噬细胞的形态及表型特征。     

补体依赖性供者特异性淋巴细胞毒性试验的临床研究应用

采用供者脾脏淋巴细胞的补体依赖的特异性淋巴细胞毒性试验以及５１例肾移植术－血清学检查结果，认为该方法可作为术后诊断急性排斥反应的特异性免疫指标和鉴别急性排斥反应与ＣｓＡ肾中毒的有效手段。     

“感冒一洗净”对小鼠耳廓微循环的影响

“感冒一洗净”对小鼠耳廓微循环的影响罗宇慧，王殿俊，沈明勤，石磊日化产品＂感冒一洗净＂洗发香波可使毛发、皮肤通过吸收洗发香波中药物有效成分达到预防及治疗感冒的作用。本实验观察小鼠耳廓微循环［１］及Ｔ－淋巴细胞非特异性酯酶（简称酯酶）［２，３］二项指标...     

CD2 mRNA在人类淋巴细胞中的诱导和调节

近来不同实验室报道了CD2分子的cDNA克隆。CD2表达于T淋巴细胞白血病细胞株(如Jurkat)中,而在CD_2阴性T细胞白血病、正常或恶性B淋巴细胞和非淋巴样细胞均检测不到CD2 mRNA。说明CD2转录的控制亦呈现细胞特异性基因表达,为了鉴定CD2的调节,作者报道T淋巴细胞在有丝     

胸腺因子对小鼠血液酯酶标记阳性T淋巴细胞的影响

本文报道用胸腺因子作用小鼠,以α-醋荼酯酶(ANAE)染色,标记小鼠未梢血液ANAE~+T淋巴细胞,测定胸腺因子对血液淋巴细胞的影响。结果表明:胸腺因子有明显提高小鼠血液ANAE~+T淋巴细胞总数的作用。根据结果,本文讨论了胸腺因子对淋巴细胞的免疫促进作用。     

胸腺因子对小鼠腹腔巨噬细胞的作用

据报道胸腺因子能诱导前T淋巴细胞分化、发育、成熟变为有免疫功能的T细胞,对机体超免疫促进作用。我们用胸腺因子作用小鼠,观察其对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响和代表巨噬细胞活性的酸性磷酸酶(ACP)和酸性非特异性酯酶(ANAE)的变化,以探讨胸腺因子对有免疫功能的巨