乳癌及癌前病变细胞核内DNA定量研究

应用显微分光光度计检测40例乳癌、癌旁单纯增生、异型增生及正常导管上皮细胞核内的DNA含量,结果表明:癌细胞核内DNA含量明显高于正常和癌旁上皮,癌旁异型增生的程度与DNA含量之间有着内在联系,多倍体的出现是细胞恶变的早期表现。局部细胞癌变时DNA含量明显增高,且高于高分化腺癌。作者认为检测细胞核内DNA含量对乳癌的诊断,癌及癌前病变的分级以及早期发现癌变趋势具有重要意义。     

显微分光光度计测定法对大鼠诱发性乳腺癌及其癌前病变的细胞发生研究

本实验用显微分光光度计测定DMBA诱发大鼠乳腺癌过程中的正常、增生终末蕾腺上皮和肌上皮细胞,以及癌细胞核面积与相对DNA方量。正常腺上皮细胞多为2cDNA含量,增生腺上皮和癌细胞核面积和相对DNA含量增加,与正常腺上皮之间均有极显著差异(P<0.01),直含图为分散的非整倍体模式。正常与增生肌上皮细胞的胞核面积与DNA方量无显著性差别(P>0.05),直方图为2c分布。上述实验结果提示:终末蕾细胞增生具有发展成乳腺癌的趋势,很可能为大鼠乳腺癌前病变,肌上皮细胞不参与孔腺癌的形成。     

乳腺癌及癌前病变细胞DNA的定量分析及其与激素受体、癌胚抗原的关系

检测119例乳腺癌及40例癌旁增生性病变的DNA含量、类固醇激素受体(SR)和癌胚抗原(CEA)表达。结果显示:正常导管上皮、不同级别的癌旁增生上皮和癌细胞的DNA含量均有明显差异。多倍体的出现是细胞恶变的早期表现。癌细胞DNA含量与SR水平呈负相关,而与CEA表达呈正相关。SR阳性乳癌患者术后存活5年以上者DNA含量和核面积均小于5年内死亡者。     

肝硬化细胞癌变与DNA含量关系的研究

本文应用显微分光光度计对23例肝硬化、31例肝细胞癌和4例正常肝组织的细胞核DNA含量进行了定量测定,并与临床特征及其生物学行为进行了比较,结果显示,多数肝硬化患者的DNA含量为二倍体/近二倍体（D/ND）,DNA组方图为单峰型。少数病例（13.04％）出现DNA异倍体（AN）组方图为组合型,类似肝癌,并与病理学上的非典型增生相伴发。对照组的31例肝癌,DNA含量水平位于D/ND者2例,占6.4％,AN者29例,占93.6％。组方图均为多峰型和组合型,4例正常肝组织均为二倍体。因此,DNA含量的异常可作为肝细胞具有潜在恶性或恶变的客观指标。     

线粒体DNA与人宫颈细胞癌变的关系

目的探讨线粒体DNA与人宫颈细胞癌变的关系.方法采用PCR方法制备地高辛标记的3条人mtDNA探针,对一株人宫颈癌Hela细胞系、1例原代培养人皮肤成纤维细胞和24例子宫颈癌患者的活检癌组织及癌旁宫颈组织的染色体或间期细胞核进行了荧光原位杂交分析.结果 3条mtDNA探针在原代培养人皮肤成纤维细胞染色体或间期核中均未出现阳性杂交信号;而在人宫颈癌Hela细胞和24例肿瘤组织标本的部分染色体或间期细胞核中均出现了阳性杂交信号.而在癌旁组织的部分染色体或间期细胞核中虽也出现了阳性杂交信号.但与肿瘤组织标本相比有显著性差异.结论表明癌细胞核基因组中存在mtDNA的同源序列,这些同源片段的出现可能与细胞癌变有关.     

显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用

细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1 3 ] ,然而传统的Feulgen染色操作时间较长 ,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程。我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色 ,大大缩短了染色时间 ,并取得了良好效果 ,满足了快速病理诊断的要求。一、材料和方法1.材料 :复旦大学华山医院近期外科手术切除的各 5例乳腺纤维腺瘤及乳腺癌标本 ,例 1～ 5为纤维腺瘤 ,例 6～ 10为腺癌 ,均分别制成印片、冷冻切片、快速石蜡切片各 2份。2 .试剂及仪器设备 :常规配制的Schiff试剂、0 .5 %偏重亚硫酸钠溶…     

形态定量分析及DNA含量测定在乳腺增生性疾病与乳腺癌鉴别的应用

目的　探讨形态定量分析及DNA含量测定在乳腺增生性病变与乳腺癌的鉴别诊断中的实用价值。方法　应用HE和Feulgen染色法对乳腺腺病 4 0例、乳腺癌 5 0例进行染色后 ,采用MPILAS 5 0 0多媒体病理彩色图文分析系统选择胞核面积 ,胞核周长 ,胞核直径 ,胞核体积 (包括胞核S 体积和胞核L 体积 ) ,形状因子 ,胞核圆形度 ,胞核圆球度、C 异形指数共 9项参数和DNA指数 (DI值 )进行测量 ,所获数据采用U检验进行分析。结果　乳腺增生与乳腺癌两组间细胞形态定量测定的 9项参数差异显著 (C 异形指数P <0 0 5 ,其余 8项参数均为 P <0 0 1 )。结论　细胞形态定量测定和DNA含量测定在乳腺增生性病变与乳腺癌的鉴别诊断中具有实际应用价值     

乳腺癌类固醇激素受体的免疫组化细胞原位定量研究

应用图像分析技术对75例女性乳癌类固醇激素受体(SR)免疫组织化学染色结果进行定量测定。结果显示,SR阳性的光密度值与染色强度呈正相关;SR的阳性率及含量与乳癌的组织学分级及腋淋巴结的转移状况明显相关,提示SR含量高的乳癌恶性程度低,不易发生淋巴结转移。图像分析技术克服了半定量法的主观误差,结果精确可靠,它为肿瘤生物学特性的研究提供了一种新型定量指标。     

人胎盘蜕膜细胞5-羟色胺及其受体的免疫组织化学及原位杂交研究

目的　观察 5 -羟色胺 (5 - HT)及其受体在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。　方法　采用免疫组织化学、原位杂交及图像分析技术。　结果　人胎盘蜕膜细胞呈 5 - HT及其受体免疫反应性 ,两种阳性反应物质均分布于胞质 ,胞核为阴性。蜕膜细胞同样含有 5 - HT1 A受体 m RNA杂交信号。蜕膜细胞 5 - HT及其受体免疫反应产物的相对含量随妊娠周龄的增加而增加。　结论　人胎盘蜕膜细胞既能产生 5 - HT,又能表达 5 - HT受体。说明 5 -HT对蜕膜细胞可能具有自调节作用。     

正常人与牙周炎患者牙龈组织肥大细胞的组织化学与超微结构的研究

正常人牙龈组织１０例及牙周炎患者牙龈组织３９例，对其中的肥大细胞进行光镜与电镜观察。结果表明：牙周炎患者牙组织中的肥大细胞比正常者明显增多（Ｐ〈０．０００５），而且与炎症程度密切相关。用Ａｌｃｉａｎ蓝－藏红染色以后，正常人牙龈肥大细胞有的为蓝色，有的为红色，而牙周炎患者主要为蓝色，仅少数为红蓝混合色。牙周炎组肥大细胞的临界电解质浓度值也较低。电镜观察。牙周炎患者肥大细胞有显著脱颗粒现象，其附近还可     

离体培养人肿瘤细胞和正常细胞对~3H-血卟啉衍生物的摄取和存留

用液闪计数测定经组织培养的6株人肿瘤(MGC 80-3、SGC-7901、BEL-7402、Os-732、Detroit-6和 HeLa)细胞及1株正常成纤维细胞对~3H-HPD 的摄取和存留。MGC 80-3和成纤维细胞的摄取量,在测定的24h 内,随温育时间延长而增加;温育30 min 换液,再培养30 min,血卟啉衍生物含量就明显减少,MGC 80-3和成纤维细胞分别只含原摄入量的32.01%和40.75%;但在以后的24h 内,维持在类似的水平上。7株细胞温育30min 摄入~3H-HPD 量,按多少顺序依次为成纤维细胞、HeLa、BEL-7402、Detroit-6、SGC-7901、MGC 80-3 及 Os-732;但是,培养24h 后,由于各株细胞排出量不同,~3H-HPD 存留率大小顺序为 Os-732、Detroit-6、BEL-7402、HeLa、SGC-7901,MGC 80-3 及成纤维细胞。环境因素对细胞摄取~3H-HPD 起重要作用,提高 pH 值、加入血清或降低温度都使摄入减少。本文结果提示,恶性组织比正常组织血卟啉衍生物含量高,不是因为恶性细胞摄入多,而是由于存留时间长,与体内实验结果一致,可供 HPD 光敏治疗恶性肿瘤作参考。     

人体乳腺单纯癌癌细胞线粒体及溶酶体形态结构的定量研究

对三例晚期女性乳腺单纯癌癌细胞线粒体、溶酶体１６个形态参数进行体现学统计分析，结果发现癌细胞与正常细胞比较，线粒体、溶酶体的有关体积、表面积、膜面积、面数密度、数密度等１０个形态参数有高度显著和显著差异。并讨论了它们的功能和形态结构变异的定量依据。     

用原位缺口翻译法比较两种细胞死亡的DNA状态

用原位缺口翻译法比较了细胞凋亡和坏死所伴随的ＤＮＡ断裂类型。ＩＮＴ实验条件为：取大鼠小肠制备冰冻切片，乙醇／醋酸固定，加２０μｍｏｌ／Ｌｂｉｏｔｉｎ－１１－ｄＵＴＰ、０．２ＩＵ／ＬＤＮＡ聚合酶Ｉ，小于３７℃中孵育３ｈ。正常大鼠小肠绒毛顶端上细胞可迅速被染色，而位于肠绒毛基底部的Ｓ期上皮细胞则不着色，仅在用蛋白酶Ｋ处理后才着色。细胞凋亡体本取自皮下注射氢化可的松的大鼠胸腺；细胞坏死用ＣＣＬ４（１００     

正常人周围神经内膜中的纤维性长间距体及神经束膜细胞的超微结构

本文报道在电镜下观察了正常人腹壁神经小分支的神经束膜细胞的超微结构,并在神经内膜间质中发现了纤维性长间距体(FLS)。 1.2～5层神经束膜细胞紧密地包绕着神经束。束膜细胞呈扁平样排列,胞质内有丰富的微丝和吞饮小泡,基膜明显而连续。紧贴其外的和神经内膜中的成纤维细胞均无基膜。两相贴的束膜细胞之间可见缝管连接和丰富的桥粒,也可见胶原纤维。神经内膜间质中胶原原纤维细,有FLS体存在;而束膜外侧的胶原原纤维较粗,未见FLS体。 2.多数FLS体与无髓神经纤维的Schwann细胞基膜相连,个别处周围为一般胶原原纤维,未见基膜;有髓神经纤维的Schwann细胞处未见FLS体。纵切面上,多数FLS体呈纺锤状,大小不等,其长轴与相邻胶原原纤维的长轴平行,有时可见两者相互延续移行。偶见FLS体呈桥样架于两Schwann细胞之间,FLS体的暗带与两侧Schwann细胞的基膜相延续。还见2～3个FLS体并为一体,但横纹错开。FLS体的斜断面近似长方形,也呈横纹样结构,与纵断面没有很大区别。FLS体的横纹周期长约133nm,暗带约53nm,主要由电子较密的颗粒状物构成;明带约80nm,由方向大致相同的微丝网构成;横纹周期中无细横纹存在。本文并对神经束膜细胞可能的作用、FLS体与基膜的关系、FLS体的横纹周期问题进行了讨论。     

人胰腺癌组织3、5、7、9和18号染色体部分位点的杂合性丢失

目的了解人胰腺癌组织３、５、７、９和１８号染色体部分位点的杂合性丢失的状况。方法选择来自３、５、７、９和１８号染色体不同位置的９对多态性引物，对４５例胰腺癌存档石蜡标本经显微镜下剥离后，以ＰＣＲ－ＳＳＬＰ－银染法检测胰腺癌中这些位点的杂合性丢失。结果胰腺癌组织在１８ｑ２１．１、３ｐ１４．２、３ｐ２１．１和９ｑ２２－３１等处存在较高频率的杂合性丢失。结论胰腺癌的发生和发展可能涉及这些部位基因的改变     

亚硒酸钠对Bcap-37人乳腺癌细胞体外增殖及3种酶细胞化学的影响

目的 观察体外培养中亚硒酸钠的浓度变化和培养时间的延长对Bcap-37人乳腺癌细胞增殖及酶活性的影响。方法 在体外培养Bcap-37人乳腺癌细胞中加入不同浓度的亚硒酸钠,常规染色显示其形态和增殖情况及各组Bcap-37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和非特异性酯酶活性。结果 2umol／L的亚硒酸钠对肿瘤细胞的生长具有一定的抑制作用,而10umol／L、50umol／L的亚硒酸钠具有一定的细胞毒性。Bcap-37人乳腺癌细胞内的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、非特异性酯酶活性随着硒浓度的加大,培养时间的延长呈下降趋势,并且10umol／L、50umol／L亚硒酸钠培养2d后,3种酶的活性完全消失。结论 硒对肿瘤细胞的生长和酶的活性都具有抑制作用,并且两者之间存在着一致性。     

胚胎内分泌腺内铁和锰的测定

本文采用火焰原子吸收法测定了120具3～10月胎尸内分泌腺内铁和锰的含量.结果三种腺体每克湿重铁和锰的含量都随胎龄的增大而减少,经检验差异均非常显著(P<0.01).铁在5～8个月含量为甲状腺>胸腺>肾上腺;9～10个月为甲状腺>肾上腺>胸腺;3～4个月为胸腺>甲状腺>肾上腺;锰在7～10个月为甲状腺>肾上腺>胸腺;3～6个月含量为甲状腺>胸腺>肾上腺.经检验,差异均非常显著(P<0.01).     

婴儿和足月胎儿下颌下腺的微血管构筑

用血管铸型扫描电镜法，观察了婴儿和足月胎儿下颌下腺的微血管构筑，腺泡微动脉自小叶内部行至腺泡周围分成毛细胞管网，或穿出小叶至小叶的基底面，沿小叶表面延伸并分成毛细血管网，腺泡毛细血管网排列稀疏。足月胎儿的纹状管周围为毛细血管后微静脉和微静脉交织吻合成的网状微静脉丛。婴儿的纹状管周围为排列密集的毛细血管网。足月胎儿的腺泡毛细血管汇入纹状管周围微静脉丛，婴儿的与纹状管周围毛细血管网相连。小叶间导管周围