RECK及MMP-14在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨RECK及MMP-14与肝细胞肝癌（HCC）的侵袭转移以及预后的关系。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测61例HCC患者癌组织、癌旁肝组织以及18例正常肝组织中RECK及MMP-14的mR-NA表达情况;并分析RECK及MMP-14的mRNA的表达与相关临床参数的关系。结果：RECKmRNA在HCC组织中的表达水平显著低于在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平（P〈0.01）,而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平差异无显著性（P〉0.05）;MMP-14mRNA在肝癌组织的表达水平显著高于在癌旁肝组织中的表达水平（P〈0.01）,在癌旁肝组织中的表达水平显著高于在正常肝组织中的表达水平（P〈0.01）。RECKmRNA和MMP-14mRNA在HCC组织中的表达呈负相关（P=0.027）,而两者在癌旁肝组织及正常肝组织中的表达无相关性。RECKmRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发等明显相关,而与肿瘤直径、肿瘤个数、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。MMP-14mRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤直径大小明显相关,而与肿瘤数目、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。结论：本研究提示RECK及MMP-14的mRNA表达与HCC的浸润转移有关,RECK及MMP-14可能在肝细胞肝癌的发生、发展中起重要作用,有可能作为预测肝癌复发、转移的参考指标。     

B-myb在人肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨B-myb的mRNA在人肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其意义。方法:用荧光实时定量聚合酶链反应(RealtimePCR)技术检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例正常肝组织中B-mybmRNA的表达情况。结果:B-mybmRNA在HCC组织(0·0375±0·0168)及癌旁肝组织(0·0353±0·0128)中的表达水平明显高于在正常肝组织(0·0265±0·0099)中的表达水平,P<0·05,而在HCC组织及癌旁肝组织中的表达水平差异无统计学意义,P>0·05。B-myb在人HCC组织中的表达与临床分期、肝外转移及术后复发明显有关,而与门静脉癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系。结论:B-myb可能与HCC的发生、发展有关。     

肝癌组织GPC-3 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA表达及其临床意义的研究

目的:探讨人肝细胞癌(HOC)组织GPC-3 mRNA和胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)mRNA的表达夏其与肿瘤发生发展的关系.方法:RT-PCR法检测70例HCC组织、癌旁肝组织和18例正常肝组织中GPC-3 mRNA和IGF-ⅡmRNA的表达.结果:HOE组织GPC-3阳性率(82.85%)及其mRNA表达水平(0.596±0.205)均明显高于癌旁组织(34.28%,0.428±0.137),P<0.01;HOC组织IGF-Ⅱ阳性率(92.86%)及其mRNA表达水平(0.750±0.309)也均明显高于癌旁组织(81.43%,0.648±0.237),P<0.05,GPC-3 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA在HOC组织中的表达水平均与肿瘤直径、肿瘤分化程度和肝外转移等明显相关,而与临床分期、门静脉癌栓、肿瘤个数、血清AFP水平及术后复发等无明显关系.GPC-3 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA在HOC组织中的表达呈正相关,r=0.281,P=0.038;而两者在癌旁肝组织的表达不相关.结论:HCC组织中GPC-3及IGF-Ⅱ高表达,可促使HCC细胞增殖,与HCC的发生发展密切相关.     

CD146 mRNA在人肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨CD146mRNA在人肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:用荧光实时定量聚合酶链反应(realtimePCR)技术定量检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例非癌肝组织中CD146mRNA的表达情况。结果:CD146mRNA在肝癌组织(0.044±0.0178)明显高于在癌旁肝组织(0.0367±0.0121)中的表达水平(P<0.01),癌旁肝组织中的表达水平明显高于非癌肝组织(0.0263±0.0102)中的表达水平(P<0.05)。CD146mRNA在人肝癌组织中的含量与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发明显有关,而与肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系。结论:本研究结果提示CD146可能与肝癌的发生、发展及术后转移复发有关;可作为预测肝癌转移复发的参考指标之一。     

金属蛋白酶抑制基因RECK在肝细胞癌中的表达及生物学意义

目的探讨金属蛋白酶抑制基因RECK在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其临床意义。方法用实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）技术和免疫组化方法分别检测61例HCC、癌旁组织及18例正常肝组织中RECK mRNA和蛋白表达情况。结果 RECK mRNA在HCC中表达水平（0.0269±0.0026）低于癌旁肝组织（0.0378±0.0031,P〈0.05）。RECK蛋白在HCC组织中阳性表达率（59.0%）也显著低于癌旁肝组织（78.7%,P〈0.05）。RECK在HCC组织中的阳性检出率与肿瘤大小、是否复发、有无门脉癌栓、肿瘤有无完整包膜等临床因素显著相关（P〈0.05）,而与年龄、性别、有无肝硬化、乙肝表面抗原、AFP水平等无关。对61例患者的随访资料进行生存分析显示,RECK阳性组3年生存率83.9%,明显高于RECK阴性组52.1%（P〈0.05）。结论 RECK可能参与HCC的发生发展,有可能成为预测HCC浸润与转移的参考指标。     

肝细胞癌组织中β-Catenin的表达与第三外显子突变的关系

背景与目的:广西南部是肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)高发地区,也是粮食受黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)污染较重的地区.β-Catenin 的异常表达与多种肿瘤有关.而AFB1是诱发HCC的重要因素.本研究旨在探讨AFB1高暴露地区HCC患者癌组织中β-Catenin基因突变及表达情况.方法:用基因直接测序、RT-PCR、免疫组化和Western blot等方法,检测52例来自广西南部AFB高暴露地区HCC患者癌、癌旁组织和18例非肝癌肝组织中β-Catenin基因的表达.结果:癌组织中未见β-Catenin基因第三外显子的突变.β-Catenin mRNA 在癌、癌旁和正常肝组织中的表达分别为0.42±0.24、0.20±0.16和0.23±0.12,癌组织中的表达显著高于癌旁组织或正常肝组织(P＜0.01);免疫组化染色癌组织中阳性率为55.8%(29/52),显著高于癌旁组织[36.5%(19/52)](P＜0.05).β-Catenin蛋白表达与肝外转移、术后复发、门静脉癌栓和临床分期有关(P＜0.05),而mRNA的表达与上述临床参数均无明显关系(P＞0.05).结论:β-Catenin在HCC组织中高表达,但其异常表达不是由基因第三外显子上GSK-3β磷酸化位点的突变引起.     

原发性肝细胞癌组织中T、B淋巴细胞浸润的研究

目的 研究原发性肝细胞癌(HCC)组织中T、B淋巴细胞的浸润情况,探讨肿瘤的局部免疫功能状态.方法 用免疫组织化学S-P法对50例HCC和10例正常肝组织进行CD3、CD20染色,对阳性细胞数进行定量分析.结果 T、B淋巴细胞的数量在HCC癌组织及癌旁肝组织高于正常肝组织(P＜0.05),癌旁有肝硬化组织高于无肝硬化组织(P＜0.05);T淋巴细胞的数量在癌组织、癌旁肝硬化组织高于B淋巴细胞(P＜0.05);T或B淋巴细胞数量与HCC分化程度、临床分期及有否门静脉癌栓形成无关(P＞0.05).结论 HCC局部以细胞免疫为主;淋巴细胞计数不能作为判断患者预后的指标.     

肝细胞癌组织中PTEN蛋白的表达以及与肝癌侵袭转移的关系

目的研究人原发性肝癌(HCC)中的磷酸酶基因(PTEN基因)蛋白的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况。结果PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织(P=0.038),其阳性率也显著低于癌旁肝组织(P=0.007)。PTEN蛋白的表达与HCC患者的年龄、血清AFP水平、肿瘤个数、肿瘤直径、临床分期、术后复发、有无肝外转移、病理分级等多数临床病理学指标无关,而与有无门脉癌栓有密切的关系。无门脉癌栓的患者的肝癌组织中的PTEN蛋白较有门脉癌栓的表达高(P=0.010)。结论HCC的发生中可能存在PTEN基因的突变或缺失。PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度,疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系。PTEN基因低表达,HCC患者病程较晚、肝癌的恶性程度较高,较容易发生侵袭转移,预后较差。     

肝癌组织中NHE1蛋白的表达及其临床意义

目的:研究人原发性肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的钠氢交换蛋白1(Na+/H+ exchanger1,NHE1)的表达以及与肝癌侵袭转移的关系,进一步探讨其在临床中的意义.方法:用免疫组织化学方法检测人HCC组织、癌旁组织中NHE1蛋白的表达水平,分析人HCC组织中NHE1蛋白的表达情况与临床病理因素之间的相关性.结果:人HCC组织中NHE1蛋白的表达显著高于癌旁组织中NHE1蛋白的表达(t=17.821,P＜0.05),其阳性率也显著高于癌旁组织(X2=42.507,P＜0.05).NHE1蛋白的表达与组织学分级、临床TNM分期以及有无门静脉癌栓密切相关(P＜0.05),而与HCC患者的年龄、肿瘤大小、肿瘤个数、血清AFP水平临床病理学指标无关(P＞0.05).结论:NHE1蛋白在人HCC组织中表达水平升高,可能与HCC的恶性程度、疾病的进程以及人HCC的侵袭转移有密切的关系.     

血小板衍生生长因子-D在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的研究血小板衍生生长因子(PDGF) D在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其与临床病理指标的关系。方法用RT-PCR方法检测PDGF-A、B、C、D及其受体PDGFRα和PDGFRβ基因在40例肝癌组织及对应的30例癌旁组织和10例正常肝组织标本中mRNA的表达。结果HCC组织中PDGF-A、B、C、D及其受体PDGFRα和PDGFRβ阳性表达分别为37.5%(15/40)、70%(28/40)、52.5%(21/40)、92.5％(37/40)、22.5％(9/40)、42.5%(17/40);与其相对应的癌旁组织的阳性表达率分别为23.3％(7/30)、16.7%(5/30)、16.7%(5/30)、26.7%(8/30)、13.3%(4/30)、16.7%(5/30);而正常肝组织中未见表达。在HCC组织中PDGF家族的表达均显著高于癌旁组织和正常组织,三组比较差异有统计学意义(P＜0.01),且PDGF-D的阳性表达显著高于PDGFs其他亚型(P＜0.05)。在HCC、癌旁、正常肝脏组织中PDGF-D平均光密度值为0.5900±0.0364、0.3954±0.0654、0,三者比较差异有统计学意义(P＜0.01)。HCC组织中PDGF-D的阳性表达与肿瘤的分化程度、淋巴及转移有关（P＜0.05）;与年龄、性别、肿瘤大小、血清AFP的值及门静脉癌栓无关(P＞0.05)。结论PDGF家族中以PDGF-D表达率最高且与肿瘤的分化程度和转移相关,提示PDGF家族,尤其是PDGF-D在HCC的发生、发展和转移中可能发挥着重要的作用,可作为肝癌辅助诊断指标和治疗靶点。     

WFDC-1基因在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的检测WFDC-1基因在肝癌和正常肝组织的表达差异并探讨其临床意义。方法采用荧光实时定量PCR（FQ-RT-PCR）法检测30例肝癌组织及相应远端正常肝组织WFDC-1mRNA的表达,分析其表达与肝癌患者临床特征的相关性。结果 WFDC-1mRNA在肝癌组织中的表达水平（0.050±0.026）明显低于远端正常肝组织（0.113±0.040）,两者差别有统计学意义（P〈0.05）。WFDC-1mRNA在肝癌中的表达水平与HBsAg水平有关,合并HBsAg阳性的肝细胞癌（HCC）中的表达低于HBsAg阴性HCC组（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、AFP及有无肝硬化无关（P〉0.05）。结论肝癌组织中WFDC-1基因表达水平明显低于相应正常肝组织,提示WFDC-1表达与降低肿瘤发生有一定的相关性,为潜在的抑癌基因。     

EGF mRNA和EGFR mRNA在肝细胞癌组织中的表达及其意义

背景和目的有众多证据表明表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)家族在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,但EGFR与肝癌的关系目前尚未明确。本文旨在探讨表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)及其受体的mRNA在人肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其意义。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测60例HCC患者癌组织及癌旁肝组织中EGFmRNA和EGFRmRNA的表达情况。结果EGFmRNA阳性率在肝癌组织中(60%,36/60)显著低于癌旁组织(80%,48/60)(P<0.05);EGFRmRNA阳性率在肝癌组织中(60%,36/60)显著高于癌旁组织(41.67%,25/60)(P<0.05)。EGFRmRNA在肝癌组织中的检出率与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤数目等明显有关,而与肿瘤直径、血清AFP水平、分化程度以及癌旁肝硬化无明显关系。EGFmRNA检出率与肿瘤直径明显有关,而与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤数目、血清AFP水平、分化程度以及癌旁肝硬化等无明显关系。结论本研究结果提示EGF可能与肝癌的发生、发展无关;而EGFR与肝癌的发生、发展及术后复发有关;可作为预测肝癌复发、转移的参考指标。     

MMP-2 mRNA及蛋白的表达在原发性 肝细胞癌组织中的意义

 目的 探讨原发性肝细胞癌（HCC）组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA和MMP-2蛋白的表达,及其与临床病理参数之间的关系。方法 应用RT-PCR技术、免疫组织化学Maxvison^TM法,分别检测47例HCC组织及其癌旁组织、20例正常肝组织中MMP-2 mRNA和MMP-2蛋白的表达情况。结果（1）MMP-2 mRNA和MMP-2蛋白在肝癌中的表达分别为70.2%（33/47）和63.8％（30/47）,均高于癌旁组织12.7％（6/47）和正常组织10％（2/20）, 差异有统计学意义(P＜0.01), 癌旁组织和正常组织中MMP-2的表达差异无统计学意义(P>0.05);MMP-2mRNA和MMP2蛋白在肝癌中表达的两种检测方法差异无统计学意义(P>0.05);（2）癌组织中MMP-2的表达在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期组中的阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期组(P＜0.05),血管内有肿瘤栓组MMP 2阳性率明显高于无瘤栓组(P＜0.05）,有转移组的阳性率高于无转移组(P＜0.05）。结论 MMP-2的表达与HCC的TNM分期、血管内有无瘤栓和转移密切相关,可作为判断HCC侵袭性的评估指标之一。     

FoxM1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨 FoxM1（fork head box M1）在结直肠癌（CRC）中的表达情况及其临床意义。方法：采用PCR（qRT －PCR）及免疫组化检测80例结直肠癌及对应癌旁组织中 FoxM1的水平,分析 FoxM1表达与临床病理参数及预后的关系。结果：结直肠癌组织中 FoxM1的相对表达量为1．326±0．018,高于癌旁结直肠组织的 FoxM1水平0．612±0．036（P ＜0．05）。免疫组化示结直肠癌组织中 FoxM1表达水平（70．0％,56／80）明显高于癌旁结直肠组织（12．5％,10／80）（P ＜0．05）,且其表达水平与肿瘤病理分期、Dukes 分级、淋巴结转移、肝脏转移均有关（P ＜0．05）。FoxM1表达阴性者的无瘤生存率明显高于表达阳性者,差异有统计学意义（P ＝0．002）。结论：FoxM1在结直肠癌组织的表达对预测 CRC 患者无瘤生存期及总生存期有重要意义。     

二酰甘油激酶α mRNA在肝癌中的表达

 目的　检测二酰甘油激酶α（DGKα）mRNA在肝癌中的表达,探讨DGKα在肝癌发生、发展过程中的作用。方法　应用半定量RT-PCR和原位杂交法检测DGKα mRNA在30例肝癌、癌周肝硬化及5例正常肝组织中的相对表达量及分布。结果　半定量RT-PCR检测结果显示： DGKα mRNA的表达水平在肝癌组织（0.798±0.317）和正常肝组织（0.908±0.425）显著高于癌周肝硬化组织（0.205±0.102）,差异有统计学意义（P＜0.05）;原位杂交染色显示：DGKα mRNA在肝癌组织和癌周肝硬化组织主要分布于肝细胞胞质,阳性细胞数分别为（57.6±6.3）个／mm2和（26.3±4.9）个／mm2;在正常肝组织分布于肝细胞核,阳性细胞数为（69.8±8.7）个／ mm2;癌周肝硬化组织与肝癌组织、正常肝组织之间阳性细胞数差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　DGKα在肝癌的不同时期的表达变化,很可能与肝癌的发生、发展密切相关。     

IGF-Ⅱ、VEGF和MVD在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）、血管内皮生长因子（VEGF）以及CD34抗体标记肿瘤微血管密度（MVD）在人原发性肝细胞癌（HCC）中的表达水平、临床意义及其相关性。方法应用免疫组织化学法检测50例HCC患者手术切除肝癌组织和癌旁组织标本中IGF-Ⅱ、VEGF和CD34的表达,分别对IGF-Ⅱ和VEGF表达进行积分光密度值（IOD）测定,对CD34阳性组织进行MVD计数,并结合临床资料进行统计学分析。结果 IGF-Ⅱ在HCC肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中的IOD值分别为55940.00±44570.41、83688.81±64460.15和0;VEGF的IOD值分别为37315.79±27315.09、38181.70±33391.02和2528.96±1445.21。肝癌组织、癌旁组织与正常肝组织相比,IGF-Ⅱ和VEGF的IOD值差异均有统计学意义（P〈0.05）;但肝癌组织与癌旁组织比较,IGF-Ⅱ的IOD值差异有统计学意义（P〈0.05）,而VEGF的IOD值差异无统计学意义（P〉0.05）。HCC肝癌组织MVD值为42.10±20.63,癌旁组织MVD值为28.96±8.55,正常肝组织MVD值为17.70±9.67,三者差异有统计学意义（P〈0.01）。IGF-Ⅱ、VEGF和MVD的表达都与淋巴结或肝内转移、病理分化程度有关（P〈0.05）,而与其他因素无关（P〉0.05）;且IGF-Ⅱ与肿瘤大小有关（P〈0.05）。IGF-Ⅱ和VEGF共阳性表达组MVD值为44.24±21.22,高于IGF-Ⅱ和VEGF共阴性表达组MVD值（19.25±14.45）,差异有统计学意义（P〈0.05）。且IGF-Ⅱ在HCC肝癌组织中的表达与VEGF呈明显正相关（P〈0.01）,随着IGF-Ⅱ强度的增加,VEGF表达增强。结论 IGF-Ⅱ在HCC中表达显著增加,并可能诱导VEGF和MVD的过表达,且与HCC的侵袭性生物学行为密切相关。     

乙酰肝素酶的表达与肝癌侵袭转移及预后的关系

目的探讨乙酰肝素酶(Heparanase Hpa)在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组织化学法检测Hpa mRNA及Hpa蛋白在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及肝癌细胞株中的表达。结果肝癌Hpa mRNA的表达显著高于癌旁及正常肝组织(P<0.05),肝癌组织中Hpa mRNA的表达与肿瘤包膜受侵、门脉受侵、肝内转移、TNM分期、复发有关(P<0.05)。肝癌Hpa蛋白的表达与包膜和门脉是否受侵、Edmondson分级、有无肝内转移、TNM分期及复发有关(P<0.05)。结论Hpa mRNA及蛋白在肝癌中高表达,并与肝癌的侵袭转移、复发、预后有关。