延边地区朝鲜族乙型肝炎病毒感染者病毒基因型的检测与分析

目的:分析延边地区朝鲜族HBV感染者HBV基因类型分布及其临床意义.方法:延边地区朝鲜族HBV感染者215例分为无症状携带者36例,急性乙型肝炎5例,慢性乙型肝炎106例,肝炎肝硬化50例,原发性肝癌18例.利用特异性引物聚合酶链反应法(PCR),对患者血清标本进行基因型检测.结果:215例HBV感染者中检出B基因型61例(28.0%),C基因型154例(72.0%),未检出其他基因型.在慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、肝细胞癌患者中,C基因型比例(79.0%、84.0%、89.0%)明显高于无症状携带者及急性乙型肝炎(25.0%、60.0%,P<0.01),在无症状携带者中,B基因型比例高于C基因型(75.0%vs 25.0%,P<0.01).HbeAg阳性组C基因型比例高于HBeAg阴性感染组(73.0% vs 54.0%,P<0.05),HbeAg阴性组的B基因型比例高于HBeAg阳性组(46.0% vs 27.0%,P<0.01).结论:延边地区朝鲜族HBV感染主要为C基因型,其次为B基因型.C基因型在临床上以慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、肝细胞癌多见.其发生率显著高于B基因型.     

慢性HBV基因型C型感染者临床特征分析

目的:在了解延安地区乙型肝炎病毒基因型分布特征的基础上,进一步探讨延安地区HBV基因型C型感染者的临床分型与病毒学和生化学指标的特征.方法:随机选取HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者122例(病史均超过12 mo),在可检出基因型121例患者中,慢性无症状HBV携带者(ASC)58例,慢性乙型肝炎(CHB)46例,肝硬化(LC)17例,采用乙型肝炎病毒核酸扩增荧光定量检测HBV DNA载量;时间分辩荧光免疫分析(TRFIA)技术定量检测乙肝血清标志物,微板核酸杂交-ELISA法测定HBV基因型.结果:在121例可检出基因型的患者中,C型116例(95.87%-95%CI:92.32%-99.42%).C基因型感染者中:ASC组HBV DNA载量、HBeAg定量明显高于CHB组及LC组(t=3.94、4.75,P=0.000,0.000;t=4.82、3.94,P=0.000,0.001):ASC组HBeAb定量、ALT水平明显低于CHB组及LC组(t=3.71、12.09,P=0.000、0.000;t=12.44、7.81.P=0.000、0.000).CHB组与LC组HBV DNA载量、HBeAg定量、ALT水平明没有明显差异(P=0.38,0.58,0.047);ASC组、CHB组、LC组年龄之间比较差异明显(t=5.07、9.72、4.99,P=0.000、0.000、0.000),ASC组年龄最低;CHB组、LC组男性比例明显高于ASC级(X2=9.37,5.18,P=0.002,0.023).结论:HBV基因型C型是延安地区慢性HBV感染者优势株:C型感染者ASC组、CHB组、LC组间分析结果基本符合慢性HBV感染者临床自然史转归特征.     

云南地区乙型肝炎病毒基因型分布与临床的相关性

目的: 了解云南地区乙型肝炎病毒基因型分布特征, 探讨其与慢性HBV感染者的性别和年龄、不同临床疾病谱、病毒复制水平的关系.方法:选择云南地区慢性HBV感染者117例, 其中慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)26例、慢性乙型肝炎(CHB)55例(轻度21例、中度24例、重度10例)、慢性重型肝炎(CLF)18例、乙肝后肝硬化(LC)11例及原发性肝细胞肝癌(HCC)7例, 采用反向杂交技术(RDB)检测HBV基因型, 并对与其性别年龄、临床分型和病毒复制水平的关系进行分析.结果: 云南地区HBV基因型以B型和C型为主, 分别为41.0%(48/117)和54.7%(64/117) , 并以C型为最多(χ2 = 4.38, P = 0.036);D型1例(0.86%), B、C混合型2例(1.71%), A、C混合型2例(1.71%). B基因型在轻度慢乙肝组所占的比例显著高于中、重度慢乙肝组(χ2 = 8.27、11.98, P = 0.004、0.001)、ASC组(χ2 = 5.46, P = 0.02)、CLF组(χ2 = 4.13, P = 0.042)和LC/HCC组(χ2 = 11.3, P = 0.001). C基因型在LC/HCC组和重度慢乙肝组所占的比例均显著高于轻度慢乙肝组(χ2 = 11.3, P = 0.001;χ2 = 8.78, P = 0.003), 与其他各临床型组间的比较则无显著性差异(P>0.05). C基因型在HBV DNA( )组和HBeAg(-)组r所占的比例均分别显著高于HBV DNA(-)组(χ2 = 6.63, P = 0.01)和HBeAg( )组(χ2 = 7.12, P = 0.008). B基因型在HBV DNA低水平复制组中所占的比例显著高于高水平复制组(χ2 = 4.12, P = 0.042). C基因型在HBV DNA高水平复制组中所占的比例显著高于B基因型(χ2 = 3.89, P<0.05). C基因型在年龄≥30岁组中所占的比例(63.3%)高于年龄<30岁组(45.6%)(χ2 = 3.7, P = 0.05). HBV基因型在性别间的分布无统计学差异(P>0.05)结论:云南地区存在HBV的B、C、D、B C和A C基因型, 以B型和C型为主要基因型, 并以C型为最多. B基因型在轻度慢乙肝的比例显著高于其他各临床型HBV感染者, 并且与HBV的低水平复制和低年龄有关. C基因型主要分布于重度慢乙肝和LC/HCC、HBV DNA高水平复制、年龄≥30岁的患者中. 提示C基因型与慢乙肝重度、肝硬化、肝细胞肝癌及HBV DNA高水平复制关系密切.     

山西省HBV基因型分布特点和临床意义

目的:了解山西省常见的乙型肝炎病毒(HBV)基因型,探讨HBV各基因型与血清HBV-DNA水平以及疾病进展的临床意义.方法:随机收集山西省HBV DNA阳性病例680例进行基因分型,并结合临床资料进行统计学分析.结果:680例HBV感染者中,有65例(9.6％)未测出基因型.在可检出基因型的615例患者中,基因型B、C、B/C分别占8.9％、82.6％、8.5％.C型、B/C型的HBV DNA载量明显高于B型(P＜0.05);各基因型与肝病的严重程度间差异有显著性意义(P＜0.05).结论:山西省HBV基因型中以C型为优势,其次为B/C和B型.基因C型和B/C型在慢性重型肝炎中较为常见,基因C型更易发生肝硬化和肝癌.     

25例乙肝患者HBV基因分型

对随机挑选的25例荧光定量PCR检测HBV-DNA阳性的乙肝患者,进行乙肝病毒（HBV）基因分型,并分析其与乙肝血清标记物及谷丙转氨酶之间的关系。结果检出HBV B型5例,占20.00%;C型16例,占64.00%;非B非C型4例,占16.00%。B型HBeAg阳性率为40.00%,C型HBeAg阳性率93.75%,B、C型谷丙转氨酶阳性率分别为20.00%和37.50%。结果表明,乙肝病人HBV感染以C型为主,且C型感染者HBeAg阳性率比B型感染者高。C型HBV可能与HBV复制有相关性。     

乙型肝炎病毒基因型的分布及与临床相关性

目的了解镇江地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及与临床的相关性。方法选择镇江地区HBV感染者257例,其中慢性HBV携带者49例,慢性乙型肝炎轻度52例、中度38例、重度32例,重型肝炎22例,肝硬化41例,原发性肝癌23例。应用聚合酶链反应(PCR)微板核酸杂交-酶联免疫吸附(ELISA)技术检测HBV的基因型。结果257例HBV感染者中B基因型112例(43.6%),C基因型140例(54.5%),B C基因型5例(1.95%),未发现A、D、E、F、G和H基因型。C基因型在慢性乙型肝炎重度、重型肝炎、肝硬化、肝细胞癌中占绝对优势,分别占65.6%、72.7%、68.3%、78.3%,显著高于慢性HBV携带者的38.8%,P<0.05。C基因型HBV感染者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平(262.3±319.7u/L)、总胆红素(TBIL)水平(69.9±35.8μmol/l)、HBeAg阳性率(67.1%)、HBV DNA定量中位数绝对值(6.02±1.34)显著高于B基因型(141.5±206.1u/L)、(38.3±22.4μmol/l)、46.4%和4.18±1.10,P<0.05。B基因型HBV感染者的血清白蛋白(ALB)水平(39.6±9.6g/)显著高于C基因型(30.1±7.3g/l),P<0.05。结论PCR微板核酸杂交—ELISA技术可用于HBV基因型的临床检测。镇江地区HBV感染者基因型以单一的B型或C型为主,含少量B C型。C基因型为本地区优势基因型,并在严重肝病和原发性肝癌中比例较高,其引起的ALT、TBIL、病毒血症水平均较高,HBeAg血症持续时间长,故预后较差。     

长春市702例HBV感染者的病毒基因分型及临床意义

目的了解长春市HBV基因型的分布情况,分析不同基因型与病毒复制水平、血清标志物及肝损伤的关系及临床意义。方法收集2013年8月-2016年5月于吉林大学第一医院就诊的HBV感染者702例,采用real-time PCR法检测HBV基因型,并检测HBV DNA载量、血清标志物及肝功能,分析基因型与临床检测项目的相关性。计量资料组间比较采用独立样本t检验;计数资料组间比较采用χ2检验。HBV基因型在不同疾病中的分布选用Mann-Whitney U检验。结果 702例HBV感染者中成功分型664例,其中C基因型484例(72.9%),B基因型168例(25.3%),B+C基因型12例(1.8%)。HBV基因型分布无性别、年龄差异。C基因型感染者HBV DNA载量为(6.68±1.20)log10拷贝/ml,显著高于B基因型(5.15±1.37)log10拷贝/ml,差异有统计学意义(t=13.714,P0.001);C基因型HBsAg(+)+HBeAg(+)+抗-HBc(+)高于B基因型,差异有统计学意义(χ2=21.687,P0.001);但HBsAg(+)+抗-HBe(+)+抗-HBc(+)两者间差异无统计学意义(χ2=2.124,P=0.145);B基因型HBsAg和抗-HBc双阳性率显著高于C基因型(χ2=28.780,P0.001)。C基因型感染者ALT、AST水平显著高于B基因型[(307.6±113.4)U/L vs(285.8±96.2)U/L,(211.1±96.4)U/L vs(192.7±89.2)U/L],差异有统计学意义(t值分别为2.229、2.172,P值分别为0.026、0.030)。C基因型感染者Alb水平(37.6±9.1)g/L低于B基因型(39.9±10.6)g/L,差异有统计学意义(t=2.701,P=0.007)。C基因型感染者发展为慢性肝炎264例,肝硬化202例,肝癌18例,B基因型感染者发展为慢性肝炎142例,肝硬化20例,肝癌6例,前者对肝脏的损伤程度强于后者,差异有统计学意义(U=28 894.000,P0.001)。结论长春市HBV感染者以C基因型为主,B基因型次之。HBV基因型与性别、年龄差异无关。C基因型感染者的HBV DNA复制较为活跃,与肝损伤严重程度的相关性高于B基因型。     

新疆维吾尔族慢性乙型肝炎病毒感染者病毒基因型及亚型分布特点

目的 了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)维吾尔族慢性HBV感染者基因型、基因亚型分布情况及其与预后的关系.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法,分析109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者感染病毒的基因型及基因亚型.多标本均数比较采用单向方差分析.结果 109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者,其中慢性乙型肝炎88例,乙型肝炎肝硬化17例,肝癌4例.13基因型HBV感染者9例,占8.3%,C基因型感染者50例,占45.9%,C/D基因型重组体32例,占29.4%,D基因型感染者18例,占16.5%,C基因型、C/D基因型重组体为主要基因型.经过聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析及测序检测,鉴定9份B基因型HBV,均为Ba亚型.50例C基因型HBV感染者病毒基因亚型分布情况:Cl亚型27例,占54%,C2亚型23例,Cl亚型比C2亚型感染者多.在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌患者中,HBV Ba基因亚型感染者分别为8例(9.1%)、1例(5.8%)和0例;C2基因亚型感染者分别为17例(19.3%)、8例(47.5%)和2例(50%);C/D基因型感染者分别为29例(33.0%)、2例(11.9%)和1例(25%),随着病情加重,Ba基因亚型和C/D基因型感染者所占比例呈下降趋势,C2基因亚型感染者所占比例增加.结论 新疆地区维吾尔族慢性HBV感染者以Cl基因亚型为主,新疆维吾尔族慢性HBV感染者存在C/D基因型重组体.C2基因亚型HBV感染预示病情严重,预后差.     

门诊慢性HBV感染者初次就诊的临床诊断亚类构成比分析

目的:了解门诊就诊的慢性乙型肝炎不同临床诊断亚类患者的构成比及其变化趋势.方法:通过门诊电子病历获取肝病门诊2007～2009年3年期间初次就诊慢性HBV感染者的临床信息,统计分析9类慢性HBV感染者临床诊断亚类的构成比及其3年的变化趋势.结果:3年期间共有2 677例门诊初次就诊的慢性HBV感染者,其诊断分类构成比依次为:HBeAg阳性慢性乙型肝炎32％；非活动HBsAg携带者24.1％；HBeAg阴性慢性乙型肝炎23.9％；慢性HBV携带者12.1％；HBeAg阴性代偿性肝硬化4 4％；乙肝相关性原发性肝癌1.4％；HBeAg阳性代偿性肝硬化0.9％；乙肝合并其他疾病0.6％；失代偿性乙肝后性肝硬化0.4％.3年期间各亚类患者构成比及排序保持相对稳定,其中HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者构成比有逐年下降趋势,HBeAg阴性慢性乙型肝炎构成比有逐年上升趋势；各诊断类型患者的平均年龄与HBV自然史保持一致；男/女患者比例约2.55.结论:慢性乙型肝炎和携带者是肝病门诊慢性HBV感染者的就诊主体,HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者构成比有逐年下降趋势,可能是受我国乙肝疫苗接种计划的影响.     

原发性肝癌患者血清HBV基因型分析

目的了解本地区肝癌病人HBV感染情况和HBV基因型分布及意义。方法对92例肝癌患者进行HBVM和抗-HCV检测并对30例单纯HBV感染者和14例慢性乙型肝炎患者进行了HBV基因型检测。结果92例中单纯HBV感染67例(72.83%),HBV和HCV重叠感染6例(6.5%),单纯HCV感染1例(1.08%);在30例检测的患者中,B基因型20例(66.7%),C基因型9例(30%),F基因型1例(0.3%)。结论在肝癌患者中HBV感染率高达81.4%,说明原发性肝癌的发生与HBV有着非常密切的关系,主要是B和C基因型。     

慢性肝病患者乙型肝炎病毒BCP变异对HBV DNA复制水平影响的研究

目的探讨乙型肝炎病毒慢性感染中C基因启动子(BCP)变异对HBV DNA复制水平的影响及其临床意义。方法采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,检测74例乙型肝炎病毒慢性感染者BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764碱基G→A联合突变。结果在74例乙型肝炎病毒慢性感染者中检出BCP区T1762 A1764突变24例(32.4％),BCP变异阳性组的HBV DNA含量(10~(8.2992±0.8665)拷贝/ml)显著高于BCP变异阴性组的含量(10~(7.1737±1.1539)拷贝/ml ) P<0.001)。结论 BCP变异可引起HBV致病力增强,复制水平提高。     

乙型肝炎孕妇HBV血清标志物与HBVDNA载量及ALT的相关性分析

目的 分析乙型肝炎(乙肝)孕妇HBV血清标志物、HBVDNA载量及ALT检测结果,为HBV感染孕妇的诊治提供参考。方法 回顾性分析2016年11月—2017年11月在我区孕检的120例乙肝孕妇的临床资料,应用酶联免疫吸附法检测血清五项HBV标志物,同时采用荧光实时定量PCR技术检测HBVDNA水平,酶速率法检测ALT,并对检测结果进行统计分析。结果 120例孕妇血清中,感染模式Ⅰ(大三阳)HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)58例,占48.33%;HBVDNA(+)49例,占84.48%,其中HBVDNA>106IU/ml42例,占72.41%;ALT增高39例,异常率为67.24%。感染模式Ⅱ(小三阳)HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)45例,占37.50%;HBVDNA(+)27例,占60.00%,其中HBVDNA>106IU/ml15例,占33.33%;ALT增高20例,异常率为44.44%。感染模式Ⅰ孕妇HBVDNA阳性率、HBVDNA>106IU/ml率和ALT异常率最高,感染模式Ⅱ孕妇次之。结论 HBV血清标志物与HBVDNA高载量和ALT水平密切相关,三者相结合能为孕妇的临床诊断、围产期干预措施以及疗效观察提供参考依据。     

Recognition of HBV antigens and HBV DNA by dendritic cells

BACKGROUND:Hepatitis B virus(HBV)is a hepatotropic, noncytopathic,DNA virus which can cause acute and chronic infection.Viral persistence is associated with a weak or absent specific immune responses to HBV,particularly the cellular immune response.Dendritic cells(DCs)are professional antigen-presenting cells with a unique T cell stimulatory aptitude that play a crucial role in the instruction of adaptive immune responses upon infection.An impaired function of DCs was suggested by recent studies to account for the T and B cell hyporesponsiveness in chronic HBV infection.This review summarizes recent insights into the recognition of HBV antigens by DCs. DATA SOURCES:Studies were identified by searching MEDLINE and/or PubMed for articles using the key words"hepatitis B virus (HBV)","dendritic cells","C-type lectins","mannose receptor", "toll-like receptor",and"dendritic cell-specific intercellular-adhesion-molecule-3 grabbing nonintegrin(DC-SIGN)"up to December 2009.Additional papers were identified by a manual search of the references from the key articles. RESULTS:DCs play an important role in the progress of hepatitis B,especially in the recognition of HBV.There are three main ways of recognition of HBV antigens by DCs. First,HBV DNA can be recognized by DCs through toll-like receptor 9(TLR9)which activates the NF-κB signal pathway and p38 MAPK to up-regulate the expression of interferon (IFN)regulatory factor 7(IRF-7)in a manner independent of type I IFN signaling,resulting in secretion of type I IFN and inflammatory cytokines,and induction of DC maturation and the adaptive immune response.Second,HBc/HBeAg cannot be recognized by DCs,but DNA or ssRNA encapsulated within HBcAg can be internalized by DCs through TLRs.Third,HBsAg can be internalized by DCs through the mannose receptor,which lacks the ability to induce DC maturation without the assistance of DC-SIGN.Meanwhile,there is some cross-talk among the three mechanisms,which induces an effective anti-viral response or HBV persistence. CONCLUSIONS:On the basis of these recognition processes, methods have been used to enhance the efficacy of DC-based vaccine against HBV and have been useful in the clinical application of HBV vaccine therapy.But the interactions between HBV antigens/HBV DNA and DCs are not clear, and cross-talk between TLRs and various ligands makes HBV antigen recognition by DCs more complicated.More efforts should be made to define the mechanisms and develop effective vaccines and therapies.     

HBV感染者胎盘组织HBV ccc DNA检测

目的建立HBV ccc DNA在胎盘组织中定性及定位检测方法,了解慢性HBV感染者胎盘组织中HBV ccc DNA的存在状况,进一步探讨其意义及乙型肝炎病毒母婴传播机制。方法选取首都医科大学北京地坛医院慢性乙型肝炎病毒感染者孕晚期胎盘组织40例,阳性对照肝组织标本3例,阴性对照为健康足月妊娠产妇胎盘标本,共5例。所有胎盘标本均分两份,分别于-80℃冷冻和福尔马林室温浸泡保存。冷冻标本采用质粒抽提法提取胎盘组织中HBV ccc DNA,液相PCR定性检测;福尔马林处理标本作石蜡切片,用于原位PCR定位检测。结果 40例标本中,液相PCR检测出HBV ccc DNA阳性者8例,其相应的血清HBV DNA均>105拷贝/ml。取该8例及另2例乙型肝炎患者孕晚期胎盘石蜡切片经HBV ccc DNA原位扩增,7例检测出HBV ccc DNA阳性,胎盘绒毛毛细血管内皮细胞、绒毛合体滋养层细胞、PBMC等多种细胞均存在HBV ccc DNA阳性信号。结论研究表明,胎盘组织HBV感染与孕妇血液中HBV DNA含量显著相关。胎盘组织的HBV ccc DNA原位PCR检测显示,HBV可感染胎盘各层细胞。羊膜上皮细胞中也发现HBV ccc DNA阳性信号。胎盘组织感染的HBV及其在这些细胞中的复制是否直接与HBV宫内感染相关尚需进一步研究。     

Distribution of HBV genotypes among HBV carriers in Benin： phylogenetic analysis and virological characteristics of HBV genotype E

AIM: To determine the distribution of Hepatitis B virus (HBV) genotypes in Benin, and to clarify the virological characteristics of the dominant genotype. METHODS: Among 500 blood donors in Benin, 21 HBsAg-positive donors were enrolled in the study. HBV genotypes were determined by enzyme immunoassay and restriction fragment length polymorphism. Complete genome sequences were determined by PCR and direct sequencing. RESULTS: HBV genotype E (HBV/E) was detected in 20/21 (95.2%), and HBV/A in 1/21 (4.8%). From the age-specific prevalence of HBeAg to anti-HBe seroconversion (SC) in 19 HBV/E subjects, SC was estimated to occur frequently in late teens in HBV/E. The comparison of four complete HBV/E genomes from HBeAg-positive subjects in this study and five HBV/E sequences recruited from the database revealed that HBV/E was distributed throughout West Africa with very low genetic diversity (nucleotide homology 96.7-99.2%). Based on the sequences in the basic core promoter (BCP) to precore region of the nine HBV/E isolates compared to those of the other genotypes, a nucleotide substitution in the BCP, G1757A, was observed in HBV/E. CONCLUSION: HBV/E is predominant in the Republic of Benin, and SC is estimated to occur in late teens in HBV/E. The specific nucleotide substitution G1757A in BCP, which might influence the virological characteristics, is observed in HBV/E.     

Quantification of HBV core antibodies may help predict HBV reactivation in patients with lymphoma and resolved HBV infection

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