检测抗双链DNA抗体的两种方法比较及假阳性病例的病因分析

目的:探讨免疫印迹法(IBT)和间接免疫荧光法(IIFA)检测抗dsDNA抗体的异同,并分析IBT法出现假阳性病例的病因及临床意义。方法:收集IBT法检测抗dsDNA抗体阳性患者的血清标本65例,追踪各病例的临床诊断,分为自身免疫性疾病组(A组),非自身免疫性疾病组(NA组),分析两组患者临床特点和疾病组成;再采用IIFA法进行抗dsDNA抗体的检测,根据IIFA法结果分为IBT+IIFA-组和IBT+IIFA+组,分析两种方法的特异性。结果:A组患者30例,NA组患者35例,A组患者较NA组平均年龄较更小,女性比例更高,差异有统计学意义(P<0.01);IBT+IIFA-组40例,IBT+IIFA+组25例,IBT+IIFA+组中有24例患者为SLE活动期,1例为干燥综合症;IBT+IIFA-组中SLE患者仅有4例,1例为混合型结缔组织病,自身免疫性疾病的比例IBT+IIFA+组高于IBT+IIFA-,差别有统计学意义(P<0.01),IBT+IIFA-组中确诊为急慢性支气管炎、肺部感染患者22例,慢性乙肝患者5例,慢性肾炎患者6例,肿瘤患者2例。结论:IIFA法检测抗dsDNA抗体的特异性较IBT法明显高,IBT法检测特异性低,而在支气管、肺部炎症患者中易呈假阳性。     

静注缩宫素与子宫按摩联合应用预防产后出血的效果观察简

目的：探讨免疫印迹法（IBT）、胶体金斑点法（DIGFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CL-IIF）用于检测抗dsDNA抗体的临床价值。方法：提取我院系统性红斑狼疮（SLE）患者血清78份,选取同期健康血清72份,用四种方法检测两组抗dsDNA抗体。对比抗dsDNA阳性率,四种方法测SLE的敏感性及特异性。结果：红斑狼疮组抗dsD-NA抗体阳性率均高于健康组,且P〈0．01;四种方法敏感性依次为57．3％、54．8％、62．5％、51．8％,特异性为93．4％、89．5％、86．2％、97．7％。结论：四种检测抗dsDNA抗体方法中,CL-ⅡF特异性最高,ELISA敏感性最高,DIGFA与IBT表现居中。     

四种检测抗dsDNA抗体方法的比较及临床价值

①目的比较间接免疫荧光法（IIF）、放射免疫法（Farr）、免疫印迹法（IBT）和酶联免疫吸附法（ELISA）4种方法检测抗双链DNA抗体（抗dsDNA）的特点，为开展临床联合检测寻找合适的方法。②方法收集经确定的SLE患者血清120份，另健康体检者血清50份为对照组，同时用以上4种方法检测抗dsDNA抗体。比较4种方法检测SLE组和对照组抗dsDNA抗体对SLE诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。⑧结果经IIF、Farr、IBT及EUSA法检测，SLE组抗dsDNA抗体的阳性率分别为31．2％、54．5％、58，6％、和61．9％，与健康对照组差异有统计学意义（P〈0．05）；4种方法的特异度分别为99．1％、95．3％、89．7％和84．8％；敏感度分别为28．2％、52．8％、54．7％和60．3％；阳性预测值分别为98．5％、87．5％、82．3％和77．O％；阴性预测值分别为62．3％、67．5％、70．O％和83．1％。④结论4种检测方法检测IIF法特异性最高，敏感性最低；而ELISA法检测敏感性高，特异性差；IBT法特异性低于IIF法和Farr法，但总体表现较好；Farr法与ELISA法敏感性很接近，但有放射性核素污染。4种方法各有优缺点，建议用ELISA法筛查，用IIF法临床确认。     

系统性红斑狼疮患者自身抗体检测的临床意义

目的探讨抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,ANuA)、抗双链DNA抗体(anti-doublestrandedDNA,dsDNA)、抗史密斯抗体D1(Anti-SmD1antibody,SmD1)等特异性自身抗体联合检测在SLE的诊断及临床应用中的价值.方法分别用酶联免疫吸附(ELISA)法和间接免疫荧光法检测SLE患者及对照组患者血清中的ANuA、抗dsDNA、抗SmD1抗体,并分析它们之间的关系.结果70例SLE患者中单项检测抗dsD-NA、抗SmD1、ANuA的阳性率分别为40.0%、75.7%、64.3%,三者联合检测后的阳性率为87.1%.结论抗SmD1、ANuA、抗dsDNA联合检测提高了诊断的敏感性,对SLE的诊断和治疗有重要意义.     

抗核小体抗体检测在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的探讨抗核小体抗体（AnuA）对系统性红斑狼疮（SLE）诊断的敏感性和特异性,并了解其临床意义。方法用免疫印迹法和间接荧光免疫法检测SLE患者、疾病对照组（其他风湿病患者）和正常人血清中的AnuA、抗dsDNA抗体及抗Sm抗体。比较分析SLE组、疾病对照组和正常人血清中的AnuA、抗dsDNA抗体及抗Sm抗体的关系。结果①AnuA在SLE患者组、疾病对照组和正常人中的阳性率分别为71.9%,3.6%,0%,SLE患者AnuA阳性率显著高于疾病对照组（P〈0.01）。②AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体在SLE患者中的敏感性和特异性分别为71.9%和96.4%,51.6%和98.2%,29.7%和100%.AnuA敏感性明显高于其他抗体（P均〈0.01）,特异性比较无显著性差异。结论 AnuA对SLE诊断的敏感性高、特异性强,是SLE的另一标志性抗体,联合检测AnuA、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体能有效提高SLE的实验室诊断率。     

间接免疫荧光法与ELISA检测抗核抗体、抗双链DNA抗体的比对分析

目的 探讨间接免疫荧光法(IIFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗核抗体(ANA)和抗双链DNA(ds-DNA)抗体的异同.方法 抽取确诊或疑为自身免疫性疾病患者血清125例,同时采用IIFA法和ELISA法检测 ANA 82例,抗ds-DNA抗体检测57例,其中14例同时检测ANA和抗ds-DNA抗体.对两种方法 检测结果 不符者采用免疫印迹法复查抗可溶性核抗原(ENA).结果 82例 ANA阳性率IIFA法与ELISA法分别为87.8%和73.17%,差别有统计学意义(P<0.01);57例血清中抗ds-DNA抗体检测阳性率IIFA法与ELISA法分别为77.19%和71.93%,差别无统计学意义(P>0.05).采用不同cutoff值时两种方法 符合率比较,ANA、抗ds-DNA抗体检测结果 差别均有统计学意义(P<0.01).两法对一些稀有核型ANA检测符合率较低,而抗ds-DNA抗体的符合率在不同核型上没有差异.ANA检测以1:100为cutoff滴度,抗ds-DNA抗体以弱阳性为cutoff值时,两种方法 可获得较高的符合率,但在检测滴度1:100 ANA、弱阳性抗ds-DNA抗体时两种方法 存在明显的不一致.结论 IIFA法检测总ANA、抗ds-DNA抗体的敏感性均高于ELISA法, IIFA法作为ANA的筛查方法 ,阳性标本再进行ELISA法检测,可在获得荧光核型信息同时观察抗体滴度的变化情况,并且更快捷经济.两种或多种不同方法 学原理的实验互相佐证,有助于减少实验误差.     

抗核小体抗体对系统性红斑狼疮的临床诊断价值

目的评价抗核小体抗体（AnuA）对系统性红斑狼疮（SLE）诊断的敏感性和特异性。方法选取风湿免疫科住院患者及门诊健康体检者,用ELISA法检测血清AnuA水平,其中94例SLE患者、50例疾病对照组和30例正常对照组。结果 SLE患者血清AnuA阳性率为78.7%,疾病对照组为8.0%,正常对照组全部为阴性;AnuA对SLE诊断的敏感性和特异性分别为78.7%、97.4%,其敏感性与抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体比较差异有统计学意义（P〈0.01）,特异性差异无统计学意义（P〉0.05）;与ANA比较,特异性有统计学意义（P〈0.01）,敏感性无统计学意义（P〉0.05）。在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、ANA阴性的SLE患者中,AnuA阳性率分别为88.1%、91.4%、81.8%。结论 AnuA在SLE患者血清中水平明显增高,AnuA测定在SLE诊断中有很高的特异性,特别是对抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗核抗体阴性的SLE的诊断有重要意义。     

AnuA、抗dsDNA及抗C1q抗体在系统性红斑狼疮及狼疮肾炎诊断中的作用

目的:探讨抗核小体抗体(AnuA)、抗dsDNA及抗C1q抗体在系统性红斑狼疮(SLE)及狼疮肾炎(LN)诊断中的价值。方法:采用酶联免疫吸附法检测SLE患者(n=88)、疾病对照组(n=59)和正常对照组(n=48)血清中的AnuA、抗dsDNA及抗C1q抗体阳性率,并与SLE患者临床实验室指标﹑活动性评分及LN的病理分型进行相关性分析。结果:AnuA﹑抗dsDNA及抗C1q抗体的阳性率在SLE患者中为67.05%、77.27%、68.18%,均显著高于疾病对照组和正常对照组患者(均P<0.05)。3种抗体与SLE患者C3、C4呈负相关(P<0.05),与血沉、C反应蛋白升高、补体下降呈正相关(均P<0.05)。3种抗体均与SLEDAI活动性评分呈正相关(P<0.01)。3种抗体对SLE诊断的特异性分别为77.97%、79.66%、74.58%,联合检测的特异性为89.83%。抗C1q抗体在狼疮增殖性肾炎(Ⅱ﹑Ⅲ﹑Ⅳ型LN)患者中表达明显高于膜性肾炎(Ⅴ型LN)的患者(P<0.05)。结论:AnuA﹑抗dsDNA及抗C1q抗体检测对SLE及LN的诊断和疾病活动性判断有重要价值。三抗体联合检测可增加SLE的诊断特异性。抗C1q抗体参与了狼疮增殖性肾炎的免疫发病机制,可能对LN的病理类型有一定的预测价值。     

374例系统性红斑狼疮患者自身抗体检测及结果分析

目的 探讨血清自身抗体检测对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值和临床意义.方法 采用间接免疫荧光法（IIFA）检测SLE患者血清中的抗核抗体（ANA）;抗ds-DNA抗体的检测采用免疫斑点金渗滤法;采用酶免疫斑点法检测6种特异性核抗原的自身抗体（抗Sm、RNP、SS-A、SS-B、Scl-70和JO-1抗体）.结果 ①374例SLE患者中,IIFA检测ANA阴性31例,ANA阳性者343例（阳性率91.7%）,主要荧光模式为核颗粒型、核颗粒/均质型;②抗Sm、RNP、SS-A、SS-B、Sc1-70、Jo-1、dsDNA的阳性率分别为15.0%、23.8%、50.5%、12.0%、0%、0.3%和43.8%.结论 ANA的联合检测对SLE的诊断和疗效观察具有重要意义.     

ELISA法和免疫印迹法检测抗ENA抗体的比较

目的：将目前国内新开展的两种检测ＥＮＡ技术,即免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶免疫法（ＥＬＩＳＡ）进行对比、分析。方法：用 ＩＢＴ法及 ＥＬＩＳＡ法同时检测 １３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果：２０例健康人,两法均为阴性;８０例结缔组织病患者,两法检出抗 Ｓｍ抗体的符合率为 ９１．３％,检测抗 ＲＮＰ抗体的符合率为 ８２．５％,以上抗体两法的敏感性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。检测抗ＳＳＡ抗体,ＩＢＴ法检出率低。抗ＳＳＢ抗体检出率两法亦无显著差异（Ｐ＞０．０５）,符合率为８７．５０％,在１２例ＳＳ的检测中符合率比较低,为５０％。结论：两种方法在检测抗Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体时,敏感性无显著差异,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。上述两种方法在临床应用于抗ＥＮＡ抗体的检测中于可互相验证和补充。     

高亲合力抗双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的探讨高亲合力抗双链DNA抗体（抗dsDNA抗体）在系统性红斑狼疮（SLE）病人中的分布情况以及与性别、年龄、狼疮肾炎等指标之间的关系。方法收集2017年8月至2018年4月广东省中医院抗dsDNA抗体阳性的血清标本共155例,其中SLE组116例,非SLE组39例,分别使用酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光法（IIF）同时测定血清样本的总抗dsDNA抗体和高亲合力抗dsDNA抗体水平;采用Kappa分析探讨不同检测方法间结果的一致性;Spearman相关系数分析高亲合力dsDNA抗体与性别、年龄等临床指标的相关性。结果在非SLE组中IIF法总抗dsDNA抗体（dsDNA-IIF）阴性,ELISA法总抗dsDNA抗体（dsDNA-ELISA）阳性的例数为15例,说明dsDNA-ELISA检测结果对SLE的特异性不高。dsDNA-IIF与dsDNA-ELISA的总体符合率为58.7%（91/155）,Kappa=0.172 < 0.4,两种方法的一致性较低（P < 0.01）;而dsDNA-IIF与高亲合力抗dsDNA抗体的总体符合率为61.9%（96/155）,Kappa=0.514,0.4 < Kappa < 7.5,两种方法的一致性一般（P < 0.01）。高亲合力抗dsDNA水平与dsDNA-IIF和dsDNA-ELISA水平呈正相关（P < 0.01）,与性别、年龄、是否是狼疮肾炎无相关性（P>0.05）;dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体联合诊断敏感率为90.5%（105/116）,特异性为100%（39/39）。结论dsDNA-IIF和高亲合力抗dsDNA抗体水平的联合检测更有助于对SLE的诊断。高亲合力抗dsDNA抗体与年龄、性别和是否为狼疮性肾炎无相关性。     

ELISA法检测血清TB4抗体对结核病的诊断价值

目的 评价结核分支杆菌H37RV多肽(TB4)抗体对结核病的诊断价值.方法 采用结核分支杆菌多肽(TB4)为包被抗原,应用ELISA法检测69例临床诊断为肺结核患者、45例支气管炎患者、70例健康体检者血清抗结核抗体水平,计算诊断试验的相关指标.结果 TB4抗原以ELISA法检测结核病的敏感性为76.8%、特异性为95.7%、阳性预测值为91.4%、阴性预测值为87.3%、准确率为88.6%.结论 以TB4为抗原,采用ELISA法检测血清抗结核抗体,可用于临床结核病的辅助诊断.     

系统性红斑狼疮患者血清apo M 的表达及其与疾病活动度的相关性

目的：研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清载脂蛋白M(apolipoprotein M,apo M)的含量及其与病情活动度的相关性。方法：选取2013年4月至11月来中南大学湘雅二医院就诊的SLE患者65例(SLE 组)和对照组120例,根据SLE疾病活动度指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)将SLE组又分 为SLE轻度活动组、中度活动组、重度活动组(分别n=16,16,33),对照组又分为疾病对照组(n=60)和健康对照组 (n=60)。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测量SLE组和对照组血清apo M含量,并同时 检测两组人群血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、载脂蛋白A1(apo Al)、低密度脂蛋白(LDL)、 载脂蛋白B(apo B)和抗dsDNA抗体,观察SLEDAI和抗dsDNA抗体同apo M的相关性。结果：和健康对照组相比,SLE 组的apo M和HDL显著降低,抗dsDNA抗体、TG和apo B均显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);SLE轻度、中 度、重度活动组三组相比,apo M血清水平呈下降趋势,但差异无统计学意义(均P>0.05);SLE患者血清apo M水平与 SLEDAI和抗dsDNA抗体表达呈显著负相关(分别r=−0.551,−0.562,均P<0.01)。结论：SLE患者的血清apo M含量相比 于健康对照组显著下降,且与SLE疾病活动度有关,可作为监测SLE疾病活动度的一种指标。     

中国莱姆病螺旋体PD_(91)重组外膜蛋白C抗原性初步研究

目的　研究中国莱姆病螺旋体 PD91 重组外膜蛋白 C(r Osp C)检测莱姆病特异性抗体Ig M的效果 ,为莱姆病的早期特异性诊断提供依据。方法　 r Osp C经纯化、定量后 ,用于酶联免疫吸附试验 (EL ISA) ,检测早期莱姆病患者和莱姆病疫区工人血清 Ig M,并与其他检测方法比较检测效果。结果　用 r Osp C EL ISA和全菌蛋白 Western blotting方法检测了 12例早期莱姆病患者血清 Ig M,其阳性率分别为 75 %和 6 6 .7% (P>0 .0 5 ) ;r Osp C EL ISA、全菌蛋白 EL ISA检测 98份健康人血清 Ig M,特异度分别为 10 0 %和 96 .94 % (P>0 .0 5 ) ;用 r Osp C EL ISA、全菌蛋白 EL ISA和 IFA检测 2 10例莱姆病疫区工人血清 ,其阳性率分别为 5 .2 4 %、8.5 7%和 7.6 2 % ,3种检测方法间无统计学差异 (P>0 .0 5 )。结论　 r Osp C具有较好的灵敏度和特异性 ,其用于我国早期莱姆病患者的临床检测和莱姆病流行病学调查上有一定的应用价值。     

血清glactin-3、HMGB-1和TSGF联合检测在甲状腺癌诊断中的价值

目的:探讨血清半乳糖血凝素-3(glactin-3)、高迁移率族蛋白(HMGB-1)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在甲状腺癌诊断中的价值.方法:选取甲状腺癌病人60例、甲状腺腺瘤病人60例作为研究对象,另选取同期甲状腺组织正常的健康体检者60名作为对照组.采用 ELISA 法检测3组血清中glactin-3、HMGB-1和TSGF水平,比较三项指标单独检测和联合检测对甲状腺癌的诊断率.结果:甲状腺癌组病人血清glactin-3、HMGB-1和TSGF水平均明显高于甲状腺腺瘤组和对照组(P<0.01),而甲状腺腺瘤组三项指标水平亦均明显高于对照组(P<0.01).甲状腺癌组glactin-3、HMGB-1和TSGF检测阳性率均明显高于甲状腺腺瘤组(P<0.01),甲状腺癌组三项指标联合检测阳性率亦明显高于甲状腺腺瘤组(P<0.01).与单项检测相比,血清glactin-3、HMGB-1和TSGF联合检测诊断甲状腺癌效果最佳,其受试者工作特征曲线下面积和灵敏度、特异度分别为0.86和93.3%、91.7%.结论:血清glactin-3、HMGB-1和TSGF联合检测对甲状腺癌诊断率较高,敏感性较好.     

侵袭性念珠菌感染者IgA抗体检测的临床意义

目的采用ELISA法检测血清中白色念珠菌IgA抗体,评价其肿瘤患者临床应用价值。方法以ELISA法和1-3-β-D-葡聚糖法对培养阳性确诊患者28例、培养阳性非确诊患者60例和健康体检者30人分别进行检测分析。结果白色念珠菌培养阳性确诊患者和培养阳性非确诊患者及健康对照者3组ELISA法检测IgA抗体检出率分别为：100.0%（28/28）、3.3%（2/60）和0.0%（0/30）;1-3-β-D-葡聚糖法IgA抗体检出率分别为：100.0%（28/28）、1.7%（1/60）和0.0%（0/30）。ELISA法的灵敏度和特异性分别为100.0%和97.8%,与1-3-β-D-葡聚糖法的100.0%和98.9%比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论对怀疑侵袭性念珠菌感染的患者,检测血清中IgA抗体是一种有应用前景的诊断方法。     

血清和唾液抗核小体抗体在系统性红斑狼疮中的诊断意义

目的:检测血清和唾液抗核小体抗体(AnuA)对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的敏感性和特异性,探讨二者关系及其与SLE活动性和SLE机体损伤机制的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法定量检测72例SLE组、30例疾病对照组和24例正常组血清AnuA水平,并检测42例SLE患者和20例正常人唾液AnuA水平,记录SLE患者的各种临床表现及实验室指标,并分析它们之间的关系。结果:血清AnuA在SLE检测中的敏感性和特异性分别为56.94%和98.15%。血清AnuA和抗双链DNA抗体水平呈正相关(r=0.55,P<0.01),且与系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDAI)记分正相关(r=0.629,P<0.001)。唾液AnuA水平与血清AnuA水平正相关(r=0.380,P<0.01)。结论:血清AnuA对SLE诊断的敏感性高、特异性强,可作为判断疾病活动性的指标;唾液AnuA水平与血清AnuA水平正相关,对SLE的诊断和疾病活动性的判断有一定意义。