反复自然流产患者外周血孕激素诱导阻断因子及Th1/Th2型细胞因子表达的研究

目的探讨反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者血清中孕激素诱导阻断因子(PIBF)及Th1/Th2型细胞因子的异常表达及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测94例RSA患者血清中PIBF和Th1(IL-2、TNF-α、IFN-γ)/Th2(IL-10)型细胞因子水平,同时以72例正常未孕妇女及92例正常健康早孕妇女作为对照。结果3组研究对象外周血血清中各细胞因子的表达水平组间比较均有显著性差异,RSA组血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平显著高于正常健康早孕组,差异有统计学意义(P<0.05),而PIBF、IL-10水平显著低于正常健康早孕组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RSA患者血清中PIBF表达水平降低可导致反复自然流产,可作为预测反复自然流产的检测指标;Th1/Th2型细胞因子间平衡的改变与反复自然流产有关,而PIBF在调节Th1/Th2型细胞因子的平衡中起重要的作用。     

反复自然流产患者NO与Th1/Th2型细胞因子水平的变化

目的　探讨NO与Th1/Th2型细胞因子的水平在反复自然流产发病中的作用及相互关系。方法　应用硝酸还原酶法测定 3 0例非孕妇女、97例正常妊娠妇女、3 0例人工流产组、10 1例反复自然流产患者血清及胎盘中NO的含量。同时采用酶联免疫吸附试验测定血清中TNF、IL 6、IL 10的水平变化。结果　反复自然流产患者TNF、IL 6、NO的含量明显高于正常对照组 (P <0 0 5 >,IL 10的水平明显低于正常对照组 (P <0 0 1>,且NO的含量与IL 10呈负相关 (r =- 0 5 2 ,P <0 0 5 >,而与TNF的含量呈正相关 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论　正常水平的NO维持正常妊娠的生理变化 ,含量过高可导致反复自然流产 ;Th1/Th2型细胞因子与反复自然流产有关 ,两型因子间的平衡受多种因素的调控 ,其中NO在调节Th1/Th2型细胞因子的平衡中起重要的作用     

Th1/Th2型细胞因子与反复自然流产的研究进展

近年研究发现,Th1/Th2平衡与妊娠结局有很大关系,正常妊娠表现为一种特殊的Th2现象,Th1处于抑制状态,当Th1型细胞因子过度表达时,将导致流产的发生[1].妊娠中母体内Th1、Th2型细胞因子的改变和新的动态平衡的建立,有利于受精卵的着床和胎儿的发育,使妊娠正常进行.在人类胎盘蜕膜的研究中发现一些非免疫细胞产生Th1/Th2型细胞因子[2].现将其相关研究综述如下.     

Th2型细胞因子与反复自然流产的关系

目的 探讨反复自然流产患者血清Ｔｈ２细胞因子的变化。方法 采用酶联免疫吸附法检测５６例反复自然流产妇女血清中ＩＬ－６、ＩＬ－１０的含量。流产患者分为两组：早期流产和晚期流产。选择正常早孕妇女及非孕妇女各２０例为对照。结果 反复自然流产患者血清ＩＬ－６的含量明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）；与ＩＬ－１０呈负相关（ｒ＝－０．５４，Ｐ〈０．０５）。流产患者血甭中ＩＬ－１０的水平降低。结论 孕妇血清中Ｔｈ２     

外周血淋巴细胞亚群及其细胞因子在反复自然流产患者的变化及临床意义

目的探讨反复自然流产患者外周血中Th1/Th2亚群水平及其细胞因子的变化,研究在反复自然流产患者中的意义。方法采用流式细胞仪检测和用酶联免疫吸附法检测30例反复自然流产患者血液中的Th1/Th2亚群水平,并以30例正常健康早孕组为对照。结果反复自然流产患者Th1和IFN-γ高于对照组,Th2和IL-10低于对照组数据比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论反复自然流产患者的Th1/Th2和细胞因子失衡可能是反复自然流产的原因,需加以重视。     

干预协同刺激信号对反复自然流产患者Th1/Th2转换影响的体外研究

目的 探讨干预协同刺激信号对反复自然流产患者Th1／Th2转换的影响。方法 用人绒毛膜癌细胞株JEG-3制备滋养细胞抗原;用该抗原刺激反复自然流产患者外周血单个核细胞,并分为两组：实验组加入细胞毒性T细胞相关抗导4（CTLA4Ig,10μg／mL组和1μg／mL组）,对照组加IgG（10μg／mL组和1μg／mL组）,培养72h,分别取24h和72h上清液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测上清液中白介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）和白介索4（IL-4）的水平。结果 与同质量浓度的对照组相比,CTLA4Ig组产生的IL-4水平明显高于对照组（P〈0．05）,而产生的IL-2水平明显低于对照组（P〈0．05）,IFN-γ水平两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。与CTLA4Ig1μg／mL组相比,CTLA4Ig10μg／mL组产生的IL-4水平明显升高（P〈0．05）,IL-2水平明显降低（P〈0．05）,IFN-γ水平两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 CTLA4Ig能通过阻断CD80／CD86共刺激信号,使反复自然流产患者Th1／Th2细胞因子向Th2型细胞因子偏移。     

上皮性卵巢癌患者外周血Th1／Th2细胞因子表达水平的变化

目的:探讨上皮性卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平.方法:用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,流式细胞仪检测特异性细胞因子表达水平.结果:上皮性卵巢癌患者Th1型细胞因子IL-2,IFN-γ表达水平依次为(9.47±3.56)ng/L,(10.12±2.51)ng/L,而正常对照组依次为(12.20±2.48)ng/L,(13.38±2.89)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);而Th2型细胞因子IL-4,IL-10表达水平依次为(4.56±0.78)ng/L,(5.26±2.27)ng/L,而正常对照组依次为(1.24±0.39)ng/L,(1.46±0.52)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论:卵巢癌患者Th1/Th2失调,Th1型反应弱,Th2型反应优,可使肿瘤细胞发生免疫逃逸.     

HLA-G与Th1/Th2型细胞因子平衡

HLA-G属非经典的MHC-I类分子,具有限制性的组织分布及有限的多态性,主要表达于绒毛膜外细胞滋养层细胞及某些肿瘤细胞,与免疫耐受关系密切。在正常妊娠、移植后移植物存活时间长者及恶性肿瘤Th1/Th2型细胞因子平衡向Th2漂移,而异常妊娠、移植后移植物存活时间短及良性肿瘤则向Th1漂移。已有大量研究证实,HLA-G的表达与Th1/Th2型细胞因子平衡向Th2偏离关系密切,但其确切关系及机制以及HLA-G是否能诱导免疫耐受仍有待进一步的研究。     

对肠易激综合征患者外周血Th1、Th2型细胞因子失衡的探究

目的：研究肠易激综合征（ms）患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）产生Th1、Th2型细胞因子的水平变化。方法：采用ELISA法检测IBS患者外周血PBMC体外培养上清液中Thl型细胞因子IL-12、IFN-1及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平。结果：（1）IBS组IFN-1、IL-12水平与正常组比较有升高趋势，但无显著差异（P〉0．051；与正常组比较，IBS组IL-4及IL-10水平均显著降低（P〈O．05）。②同正常组比较，pIBS组IFN-1水平较正常组显著升高（P〈0．05）；pIBS组IL-4、IL-10水平较正常对照组显著降低（P〈0．01）。同正常组比较，非DIBS组Th1型、Th2型细胞因子均无显著性差异P〉0．05。结论：腹泻型IBS患者外周血Thl、Th2型细胞因子产生了失衡，呈Th1优势反应；感染因素影响了Th1／Th2失衡；腹泻型IBS患者焦虑状态亦可能影响了Th1/Trh2失衡；抑郁状态与Th1／Th2反应关系不大。     

喉癌患者外周血Th1／Th2细胞因子的表达及其临床意义

目的 探讨喉癌患者外周血CD3T细胞分泌细胞因子的水平变化,分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫活动。为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法采用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测相应的细胞因子的方法进行研究。结果喉癌患者Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低,Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α（TNF—α）表达水平较正常对照组升高,差异有显著性。喉癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态。结论肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

Th1/Th2细胞因子失衡致复发性流产的机制及治疗

复发性流产的发生机制错综复杂,近年来其与Th1/Th2细胞因子失衡的关系研究成为热点,Th1型细胞因子过度表达,对滋养层细胞产生细胞毒作用而形成免疫损伤,直接或间接影响胚胎着床及发育,而Th2型细胞因子维持母胎界面的免疫耐受作用受到抑制,致妊娠丢失,Th1/Th2型细胞因子平衡向Th1偏移与复发性流产密切相关。复发性流产的西医治疗主要有主动免疫治疗和被动免疫治疗,中医药治疗重视整体调理,辨证施治,可双向调节人体免疫功能,治疗的风险及不良反应少。     

可溶性Tim-3对原因不明性复发性流产患者Th1／Th2分化的免疫调节作用及其机制

目的：观察可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（sTim-3）在原因不明性复发性流产（URSA）患者血清中表达水平的变化及其对Th1/Th2细胞分化的调节,探讨sTim-3在URSA病理过程中的免疫机制。方法：选择52例URSA患者作为URSA组,选取同期正常妊娠孕妇20人作为正常妊娠组,育龄非孕者20人为健康对照组。采用ELISA法检测3组研究对象血清sTim-3和半乳糖结合蛋白9（Galectin-9）水平;双抗体夹心ELISA法检测血清中Th1型细胞因子干扰素γ（IFN-γ）和白细胞价素2（IL-2）、Th2型细胞因子IL-4和IL-10水平。结果：与健康对照组比较,URSA组患者血清sTim-3（t=7.34,P<0.05）及Galectin-9水平（t=4.86,P<0.05）均升高;URSA组患者血清sTim-3水平明显高于正常妊娠组（t=5.63,P<0.05）,而Galectin-9水平则低于正常妊娠组（t=2.76,P<0.05）。正常妊娠组（t=2.81,P<0.05;t=2.84,P<0.05）和URSA组（t=3.66,P<0.05;t=2.91,P<0.05）研究对象血清IFN-γ及IL-2水平低于健康对照组;URSA组患者血清IFN-γ和IL-2水平明显高于正常妊娠组（t=6.11,P<0.05;t=5.95,P<0.05）。与健康对照组比较,正常妊娠组和URSA组研究对象血清IL-4和IL-10水平升高（t=2.53,P<0.05;t=2.52,P<0.05;t=2.69,P<0.05;t=2.33,P<0.05）;URSA组患者血清IL-4和IL-10水平明显低于正常妊娠组（t=6.48,P<0.05;t=7.76,P<0.05）。结论：sTim-3表达增加和Th1/Th2稳态调节失衡可能是导致URSA患者反复流产的关键免疫机制之一。     

孕激素诱导阻断因子在反复自然流产患者血清中的表达

目的:通过测定反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者血清中孕激素诱导阻断因子(progesterone-induced blocking factor,PIBF)的表达水平,探讨其与RSA的关系和临床意义。方法:选择RSA患者56例作为研究组,随机抽取同期的正常健康早孕妇女64例作为对照组,运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中PIBF水平,并进行对比分析。结果:RSA组PIBF水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:PIBF与RSA的发生有关系,PIBF水平降低可能是引起RSA的发病原因之一。     

TH1/TH2型细胞因子在月经周期内膜及早孕蜕膜中的表达及分析

目的:探讨TH1/TH2型细胞因子在妊娠免疫耐受中的作用及意义. 方法:采用免疫组化及原位杂交技术对43例正常育龄妇女及40例原因不明复发性流产妇女月经周期内膜及早孕蜕膜TH1型细胞因子(IL-2,TNF-α),TH2型细胞因子(IL-6,IL-10)进行标记和分析. 结果:①IL-2,IL-2 mRNA在复发性流产妇女增殖期、分泌期、早孕期子宫内膜腺上皮中的表达逐渐增高,且明显高于正常妇女组(IL-2:F=75.291, P<0.01; IL-2 mRNA:F=93.972, P<0.01). ②肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在正常与流产组月经周期内膜及早孕期蜕膜中的表达均呈现逐渐增多趋势,但两组之间TNF-α的表达均无显著性差异(F=1.071, P>0.05). ③与IL-2, IL-2 mRNA相反,IL-6, IL-10 mRNA在正常妇女月经周期内膜及早孕蜕膜中的表达均逐渐增多,且明显高于复发性流产组(IL-6:F=94.421, P<0.01; IL-10 mRNA:F=269.752, P<0.01). 结论:IL-2在妊娠中起免疫排斥作用,过量表达会导致复发性流产;TNF-α可能参与子宫内膜的增殖、生长及发育;IL-6,IL-10在正常妊娠中起着积极的免疫营养作用. 此结果提示:成功的妊娠有赖于母胎界面免疫耐受中TH1/TH2型细胞因子的平衡.     

原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞UCP2的表达及其细胞因子的分泌

目的 探讨蜕膜巨噬细胞UCP2的表达、IL10/IFNy,分泌细胞比值相互关系,及与原因不明复发性流产发病的关系.方法 应用磁珠细胞分选法从11例原因不明复发性流产患者和12例正常早孕妇女蜕膜分离巨噬细胞,采用流式细胞仪分析巨噬细胞UCP2表达,应用ELISPOT法检测细胞因子IL10和IFNy分泌.结果 与正常早孕相比,原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞UCP2表达明显下降(136±25,201±31,P＜0.01).并与IL1O/IFNy分泌细胞比值正相关(r=73,P＜0.01).结论 UCP2通过调控蜕膜巨噬细胞IL1O和IFNy的分泌,可能在维持正常妊娠免疫耐受和导致原因不明复发性流产发病中起重要作用.     

复发性流产患者T淋巴细胞及其亚群变化研究进展

复发性流产（RSA）病因复杂,半数以上患者都未能查明发病的具体原因,被称为不明原因的RSA（URSA）,且大多被认为与免疫失衡有关。近年来发现,T淋巴细胞及其亚群与RSA之间密切相关,但其导致免疫失衡的致病机制尚不完全明确,故文章对RSA疾病中T淋巴细胞变化的研究进展进行综述,探讨母胎界面免疫细胞失衡与RSA的关系。     

ET-1及受体在不明原因复发性流产绒毛中的表达及其对滋养细胞迁移的调节

目的 通过检测内皮素-1(endothelin-1, ET-1)及受体(endothelin receptors, ETR)在不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion, URSA)绒毛组织中的表达,探讨其与URSA的关系。方法不明原因复发性流产患者30例(RSA组)及正常早孕人流妇女30例(正常组,即CTL组),采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)及Western印迹法检测两组绒毛组织中ET-1、ETR-A、ETR-B mRNA及蛋白的表达。取体外培养的妊娠早期绒毛外滋养细胞Transwell迁移实验法检测ET-1、ETR-A阻断剂BQ-123及ETR-B阻断剂BQ-788受体对绒毛外滋养细胞迁移能力的影响。结果RSA组较正常组绒毛组织中ETR-B mRNA及蛋白表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而ET-1、ETR-A mRNA及蛋白在二组绒毛组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05)。ET-1促进HTR-8细胞迁移,ETR-B阻断剂阻断ET-1的促迁移作用。结论 ET-1可能通过ETR-B受体促进妊娠早期绒毛外滋养细胞迁移,URSA患者较正常组绒毛中ETR-B mRNA及蛋白表达降低可能与URSA相关。     

补肾益气方对反复自然流产患者外周血调节性T细胞的影响

 目的  探讨补肾益气方对反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者外周血调节性T细胞的影响。方法 随机选取15例健康女性（对照组）和30例RSA患者,RSA患者诊断受孕后口服中药补肾益气方,2周后流式细胞仪检测RSA患者服药前后及健康对照组调节性T细胞数量,ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNFα)、干扰素γ（interferon-γ,IFNγ)及白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10)水平变化。结果  中药治疗2周后RSA患者外周血调节性T细胞数量上升,IL-10水平上升,均明显高于服药前及健康对照组(P<0.05),Th1类细胞因子TNFα和IFNγ水平明显下降(P<0.05)。结论  补肾益气方能够上调RSA患者血调节性T细胞水平,改变母体细胞因子分泌状态,诱导母胎免疫耐受,保护胎儿不被免疫细胞排斥。