sCD40L、CD4~+CD45RA~+T细胞及CD4~+CD45RO~+T细胞在儿童ITP中的作用

目的探讨协同刺激分子可溶性CD40配体(sCD40L)及CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO亚群在儿童特发性血小板减少性紫癜中的变化。方法用ELISA法检测25例ITP患儿血浆sCD40L水平;用微量全血流式细胞术法检测ITP患儿外周血CD4+T辅助细胞CD45RA和CD45RO的表达率;并对sCD40L与血小板计数进行相关分析。结果ITP患儿血浆sCD40L浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);CITP组血浆sCD40L浓度升高更为明显,与AITP组或对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。ITP患儿CD4+CD45RA+T细胞表达率下降,CD4+CD45RO+T细胞表达率升高,差异均有显著性意义(P<0.05),而AITP和CITP之间差异无显著性(P>0.05)。血浆sCD40L与外周血小板计数无相关性(r=-0.047,P>0.05)。结论CD40L高表达导致的CD40L/CD40信号传导通路异常可能参与ITP发病;ITP患儿存在Th细胞亚群偏移,表现为Th1细胞减少,Th2细胞增多。     

sCD40L、CD4＋CD45RA＋T细胞及CD4＋CD45RO＋T细胞在儿童ITP中的作用

目的探讨协同刺激分子可溶性CD40配体（sCD40L）及CD4＋T辅助细胞CD45RA和CD45RO亚群在儿童特发性血小板减少性紫癜中的变化。方法用ELISA法检测25例ITP患儿血浆sCD40L水平;用微量全血流式细胞术法检测ITP患儿外周血CD4＋T辅助细胞CD45RA和CD45RO的表达率;并对sCD40L与血小板计数进行相关分析。结果ITP患儿血浆sCD40L浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）;CITP组血浆sCD40L浓度升高更为明显,与AITP组或对照组比较差异均有显著性（P〈0.05）。ITP患儿CD4＋CD45RA＋T细胞表达率下降,CD4＋CD45RO＋T细胞表达率升高,差异均有显著性意义（P〈0.05）,而AITP和CITP之间差异无显著性（P〉0.05）。血浆sCD40L与外周血小板计数无相关性（r=-0.047,P〉0.05）。结论CD40L高表达导致的CD40L/CD40信号传导通路异常可能参与ITP发病;ITP患儿存在Th细胞亚群偏移,表现为Th1细胞减少,Th2细胞增多。     

EB病毒感染患儿CD163表达及其临床意义

目的　通过检测EB病毒(EBV)感染患儿CD163水平, 探讨CD163在EBV相关噬血细胞综合征(HLH)的诊断、病情监测及预后中的意义。方法　将因不同感染就诊的94例患儿分为EBV阳性组(n=55)和EBV阴性组(n=39, 对照组), 进一步将EBV阳性患儿分为传染性单核细胞增多症(IM)组(n=47)和HLH组(n=8)。应用酶联免疫法检测血清可溶性CD63(sCD163)水平; 流式细胞术检测外周血单核细胞表面CD163表达率。结果　HLH患儿血清sCD163水平均>10 000 ng/mL, 其中3例>30 000 ng/mL; HLH组患儿血清sCD163水平远高于对照组和IM组(P<0.05)。EBV阳性患儿血清sCD163水平与EBV-DNA拷贝数、乳酸脱氢酶和血清铁蛋白水平呈正相关, 与白细胞计数、中性粒细胞计数、血红蛋白和血小板计数呈负相关(P<0.05)。HLH患儿sCD163水平在治疗后逐步下降, 但随病情反复又升高。结论 EBV感染患儿的CD163水平与临床严重程度密切相关, sCD163>10 000 ng/mL的EBV感染患儿需警惕并发HLH。     

血小板生成素对血小板减少性疾病的诊断意义

目的探讨血小板生成素(TPO)在血小板减少性疾病中的诊断意义。方法采用夹心酶联免疫吸附法测定30例儿童再生障碍性贫血(AA)、22例骨髓增生异常综合征(MDS)、30例特发性血小板减少性紫癜(ITP)及26名正常儿童血清TPO水平,并进行比较。结果AA组、MDS组、ITP组及正常对照组血清TPO水平分别为(1335.83±99.89)ng/L、(255.13±47.36)ng/L、(96.7±12.28)ng/L和(95.17±8.78)ng/L。AA组明显高于对照组(t=13.786 P<0.001);MDS组也高于对照组(t=3.836 P<0.001)。但MDS组增高无AA组显著,且两者比较差异有显著差异(t=8.73 P<0.001);ITP组与正常组无差异(t=0.102 P>0.05)。结论血清TPO水平明显增高反映骨髓巨核细胞增生减低,对于因骨髓巨核细胞增生状态不同所致血小板减少性疾病的鉴别诊断有较高参考价值。     

DNA甲基转移酶在儿童免疫性血小板减少症中的蛋白表达

目的通过检测DNA甲基转移酶(DNMTs)在儿童免疫性血小板减少症(ITP)外周血中蛋白水平的表达,探讨其与儿童ITP的发病机制的关系。方法收集2015年5月-2016年5月在新乡医学院第一附属医院门诊、病房就诊和治疗的60例新诊断ITP患儿(实验组)和门诊健康体检的36例儿童(对照组)为研究对象。无菌采集其空腹外周血2 mL,采取酶联免疫吸附法检测血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平。分别分析年龄、性别、血小板计数(PLT)对血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的影响,及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b三者之间的关系。结果 (1)新诊断ITP患儿PLT为(21.3±26.1)×10~9/L,明显低于健康对照组(261.2±78.4)×10~9/L,差异有显著性(t=-17.777,P=0.000)。(2)ITP患儿DNMT1、DNMT3a、DNMT3b(ug/L)的蛋白表达水平分别为(1.43±0.96)、(0.67±0.39)、(0.53±0.39),明显低于对照组(2.05±1.24)、(1.04±0.58)、(0.73±0.45),差异有显著性(t=-2.547,-3.692,-2.341;P=0.013,0.000,0.021)。经Person相关性分析,ITP患儿血小板计数与DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平无明显相关性(r=-0.062、0.161、0.079,P=0.636、0.220、0.549)。DNMT1与DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达无相关性(r=-0.025,-0.057;P=0.851、0.665),DNMT3a、3b的蛋白表达正相关性(r=0.259,P=0.046)。结论新诊断ITP患儿外周血中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平显著降低,提示DNA甲基转移酶的异常表达可能与儿童ITP的发病机制相关,推测在儿童ITP患儿DNA甲基化过程中,DNMT3a、DNMT3b起着相互协调的作用。     

血清B淋巴细胞激活因子水平对初诊特发性血小板减少性紫癜患儿疗效的预测价值

目的评价血小板减少性紫癜(ITP)患儿初诊时血清B淋巴细胞激活因子(BAFF)对其疗效的预测价值。方法采用ELISA法检测初诊37例ITP患儿与37例隐睾及腹股沟疝患儿(对照组)血清BAFF水平,分析ITP患儿血清BAFF水平与其血小板计数、治疗效果的关系。采用受试者工作曲线法(ROC)分析血清BAFF水平对治疗效果的预测价值。结果 ITP患儿血清BAFF水平较对照组增高(P=0.02),且与血小板计数呈负相关(R2=0.39,P<0.01)。初诊时血清BAFF水平较低的患儿,其治疗效果相对较好(P<0.01)。采用初诊血清BAFF水平预测患儿治疗效果,其曲线下面积(AUC)为0.85(95%CI 0.72～0.97,P<0.01),当血清BAFF值为850 ng.L-1时,预测敏感性为0.71(95%CI 0.48～0.89),特异性为0.88(95%CI 0.62～0.98)。结论初诊血清BAFF水平有助于ITP患儿最终治疗效果的预测。     

血清可溶性CD40配体在免疫性血管炎家兔中的变化及药物治疗的效果

目的 分析免疫性血管炎家兔血清可溶性CD40配体(sCD40L)水平变化,探讨其在血管炎发病机制中的意义及药物丹参酮ⅡA和阿司匹林治疗对其水平的影响.方法 日本大耳幼年家兔48只分为正常对照组、模型对照组、丹参酮ⅡA治疗组和阿司匹林治疗组.牛血清清蛋白静脉推注诱导法建立免疫性血管炎模型.检测其外周血小板数量、血小板聚集功能,采用流式细胞仪检测其血小板活性标志Annexin V,ELISA双抗体夹心法检测治疗第7天及第28天各组血清sCD40L水平.HE染色、弹力纤维染色和电镜观察其血管病变.结果 免疫性血管炎家兔急性期血清sCD40L水平较正常对照组显著升高(P<0.05),血小板数量、血小板聚集功能及Annexin V检测的血小板活性也显著增高.血清sCD40L水平与血小板数量、血小板聚集功能和血小板活性呈正相关.丹参酮ⅡA和阿司匹林治疗均可显著降低sCD40L水平,降低血小板数量和活性,并能显著改善免疫性血管炎家兔的血管病理损害.恢复期模型对照组家兔血小板数量、血小板聚集功能和活性已恢复正常,但血清sCD40L水平仍显著高于正常对照组.结论 CD40-CD40L信号系统可能参与了免疫性血管炎的发病机制,丹参酮ⅡA和阿司匹林可能通过下调sCD40L水平及降低血小板活性从而达到抗感染、抗凝作用.     

血小板生成素和巨核细胞对特发性血小板减少性紫癜患儿预后的影响

目的探讨血小板生成素(TPO)和巨核细胞计数对特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿预后的意义。方法采用夹心酶联免疫吸附法测定122例ITP患儿血清TPO水平,根据巨核细胞数分为A组(巨核细胞数≤35/6 cm2)与B组(巨核细胞数>35/6 cm2),两组进行TPO水平比较,并观察各组疗效。结果A和B组TPO水平分别为(368.33±39.47)ng/L,(141.48±11.28)ng/L。A组明显高于B组,有显著性差异(t=7.44 P<0.01)。A组治疗有效率为23.8%,明显低于B组84.2%,其差异有显著性(χ2=6.54 P<0.05)。A组有效5例TPO为(109.60±15.59)ng/L,无效16例TPO为(449.18±29.59)ng/L,其差异有显著意义(t=-6.23 P<0.01)。结论ITP患儿血清TPO水平存在较大差异,TPO水平明显增高且无巨核细胞数增高者疗效差,可能提示预后不良。     

血小板生成素和巨核细胞对特发性血小板减少性紫癜预后的影响

目的探讨血小板生成素(TPO)和巨核细胞计数对特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿预后的意义.方法采用夹心酶联免疫吸附法测定122例ITP患儿血清TPO水平,根据巨核细胞数分为A组(巨核细胞数≤35/6 cm2)与B组(巨核细胞数＞35/6 cm2),两组进行TPO水平比较,并观察各组疗效.结果 A和B组TPO水平分别为(368.33±39.47) ng/L,(141.48±11.28) ng/L.A组明显高于B组,有显著性差异(t=7.44 P＜0.01).A组治疗有效率为23.8%,明显低于B组84.2%,其差异有显著性(χ2=6.54 P＜0.05).A组有效5例TPO为(109.60±15.59) ng/L,无效16例TPO为(449.18±29.59) ng/L,其差异有显著意义(t=-6.23 P＜0.01).结论 ITP患儿血清TPO水平存在较大差异,TPO水平明显增高且无巨核细胞数增高者疗效差,可能提示预后不良.     

T淋巴细胞相关细胞因子与儿童慢性免疫性血小板减少症转归的相关性研究

目的检测儿童慢性免疫性血小板减少症(ITP)外周血各细胞因子水平,分析其在儿童慢性ITP临床预后中的意义。方法随访并选取2015年10月至2018年10月在新乡医学院第一附属医院儿内科治疗的慢性ITP患儿30例作为试验组,同期选取本院健康体检儿童40例作为健康对照组。采用流式微球阵列技术(CBA)动态检测试验组治疗前、治疗后12个月及健康对照组白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)水平,分析其与儿童慢性ITP预后的关系。结果试验组共纳入30例慢性ITP患儿,试验组治疗前IL-2、IL-17A水平分别为(7.86±3.90)ng/L、(10.45±12.35)ng/L,健康对照组IL-2、IL-17A水平分别为(3.11±2.41)ng/L、(2.97±7.04)ng/L,试验组显著高于健康对照组(t=-7.123、-5.582,均P<0.01)。试验组治疗前IL-4、IL-10水平分别为(0.38±0.25)ng/L、(1.80±1.25)ng/L,健康对照组IL-4、IL-10水平分别为(3.08±0.26)ng/L、(4.55±3.44)ng/L,试验组显著低于健康对照组(t=8.400、5.653,均P<0.01)。试验组治疗前IL-6、TNF、IFN-γ水平分别为(7.30±9.16)ng/L、(4.85±7.60)ng/L、(7.68±20.41)ng/L,健康对照组IL-6、TNF、IFN-γ水平分别为(5.44±4.18)ng/L、(1.97±0.37)ng/L、(4.81±17.71)ng/L,2组比较差异均无统计学意义(均P>0.05);试验组治疗前与治疗后12个月细胞因子水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论T淋巴细胞相关细胞因子变化与儿童慢性ITP的发病及疾病发展密切相关,慢性ITP患儿可能持续存在免疫功能紊乱,而动态检测细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-17A,特别是IL-17A,有助于判断儿童ITP的转归,可能对评估临床预后有指导意义。