Apelin通过抑制高糖介导的氧化应激保护血管内皮功能

目的探讨Apelin对高糖诱导的原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中活性氧(ROS)生成和糖尿病(DM)小鼠内皮依赖性血管功能障碍的影响。方法 (1)体外实验采用高浓度葡萄糖培养基诱导HUVECs细胞损伤,Apelin-13预处理1h后测定细胞内Apelin-13、ROS水平和Caspase-3的活性(ELISA法测定)。(2)构建1型糖尿病小鼠模型,予Apelin-13干预后,血管张力仪测定主动脉环内皮依赖性血管舒张功能和非内皮依赖性血管舒张功能。结果与对照组相比,高糖诱导后的HUVECs内Apelin-13的含量明显下降(P=0.01);高糖诱导后HUVECs中ROS生成和Caspase-3的活性增加,而Apelin干预可显著降低高糖诱导的ROS生成和Caspase-3的活性(P=0.03,P=0.04)。此外,与对照组相比,DM小鼠主动脉环内皮依赖性血管舒张功能显著下降(P=0.02),而Apelin干预可有效地减轻DM小鼠血管内皮功能障碍。结论 Apelin抑制高糖诱导的血管内皮细胞活性氧生成和细胞凋亡,减轻DM小鼠血管内皮功能障碍。     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ促原代急性髓系白血病增殖的拮抗作用及机制研究

目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂氯沙坦抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)介导的原代急性髓系白血病(AML)细胞的增殖作用及机制。方法:MTT法观察AngⅡ对原代AML细胞、正常骨髓单个核细胞增殖的影响以及氯沙坦和AT2R拮抗剂PD123319对AngⅡ促原代AML细胞增殖的拮抗作用:Elisa法检测氯沙坦对血管紧张素II作用下原代AML分泌MMP-9的影响。结果:AngII能剂量和时间依赖性促进原代AML细胞增殖(P0,05),而对正常骨髓无此作用;氯沙坦随浓度和时间依赖性阻断AngII作用下白血病细胞增殖(P《0.05);氯沙坦能明显下调AngII增加原代AML细胞MMP-9的分泌(P0.05)。结论:氯沙坦通过抑制MMP-9分泌阻断AngII/AT1R介导的白血病细胞增殖。     

血管紧张素Ⅱ对体外培养Ins-1细胞作用的研究

目的观察血管紧张素Ⅱ对体外培养的Ins-1细胞增殖及凋亡的作用。方法：将血管紧张素Ⅱ和体外培养的Ins-1细胞共培养后,应用细胞增殖试验方法测定Ins-1细胞的增殖率,用流式细胞检测方法检测Ins-1细胞的早期凋亡率。结果血管紧张素Ⅱ在和体外培养的Ins-1细胞共培养12h后,Ins-1细胞的增殖率明显下降,凋亡率明显增高,且与血管紧张素Ⅱ浓度相关。结论血管紧张素Ⅱ对体外培养的Ins-1细胞在特定浓度和时间的条件下有抑制细胞增殖,诱导凋亡增加的作用。     

血管紧张素Ⅱ对体外培养Ins-1细胞作用的研究

目的观察血管紧张素Ⅱ对体外培养的Ins-1细胞增殖及凋亡的作用。方法 :将血管紧张素Ⅱ和体外培养的Ins-1细胞共培养后,应用细胞增殖试验方法测定Ins-1细胞的增殖率,用流式细胞检测方法检测Ins-1细胞的早期凋亡率。结果血管紧张素Ⅱ在和体外培养的Ins-1细胞共培养12 h后,Ins-1细胞的增殖率明显下降,凋亡率明显增高,且与血管紧张素Ⅱ浓度相关。结论血管紧张素Ⅱ对体外培养的Ins-1细胞在特定浓度和时间的条件下有抑制细胞增殖,诱导凋亡增加的作用。     

丹参酮ⅡA对心肌细胞肥大及凋亡的影响

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大、凋亡的影响。方法:实验于2005-06/2005-09在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。实验选用Wistar乳鼠12只。胰酶消化,差数贴壁法体外分离培养大鼠心肌细胞。于心肌细胞培养的第4天,换无血清的DMEM培养基,再培养1d,随机分为4组加入不同的干预因素:对照组,血管紧张素Ⅱ(1×10-6mol/L) 丹参酮ⅡA(1×10-5mol/L),丹参酮ⅡA(1×10-5mol/L),血管紧张素Ⅱ(1×10-6mol/L)。采用相差显微镜测量细胞大小,测定心肌细胞3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标;用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,用逆转录聚合酶链式反应检测心肌细胞凋亡基因FasmRNA的表达。结果:①血管紧张素Ⅱ作用7d,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞直径明显大于对照组[(29.2±3.1),(19.9±1.8)μm;t=4.244,P<0.01];丹参酮ⅡA抑制血管紧张素Ⅱ介导的心肌细胞直径增大,与血管紧张素Ⅱ组相比差异有显著性[(21.3±2.7)μm,t=3.046,P<0.05]。②血管紧张素Ⅱ作用24h后,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞合成速率较对照组明显增加[(1951±141),(1123±121)min-1;t=7.067,P<0.01];丹参酮ⅡA对心肌细胞蛋白质合成没有影响,但能抑制血管紧张素Ⅱ刺激的心肌蛋白质合成速率的增加[(1198±123),(1951±141)min-1;t=6.378,P<0.01]。③血管紧张素Ⅱ作用48h后,心肌细胞凋亡率血管紧张素Ⅱ组较对照组明显增加[(35.4±2.6)%,(17.7±1.5)%;t=9.653,P<0.01];丹参酮ⅡA能抑制血管紧张素Ⅱ刺激的心肌凋亡率的增加[(23.2±2.4)%,t=5.456,P<0.01]。④在培养液中加入血管紧张素Ⅱ作用12h后,心肌细胞FasmRNA表达较对照组明显增加[(0.890±0.104),(0.291±0.043);t=9.112,P<0.01],预先加入丹参酮ⅡA作用30min,可阻断血管紧张素Ⅱ的作用[(0.358±0.063),(0.890±0.104);t=7.123,P<0.01]。结论:丹参酮ⅡA可以抑制由于血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞直径、心肌蛋白质合成速率及凋亡率的增加,降低凋亡基因FasmRNA的表达。     

促红细胞生成素预防人脐静脉内皮细胞凋亡的作用

目的 建立氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡模型,探讨促红细胞生成素(EPO)对ox-LDL诱导HUVECs凋亡的影响.方法 取体外培养3～6代的HUVECs用于实验.实验分为两组:一组细胞予以不同浓度(6.25、50、100 kU/L)重组人促红细胞生成素(rhEPO)预处理24 h,再加入100 mg/L ox-LDL孵育48 h;另一组细胞加入反式或顺式LOX-1 mRNA预处理24 h,再加入 100 mg/L 的ox-LDL孵育12 h.采用存活率、凋亡率和Bcl-2/Bax比值评价细胞凋亡情况.结果 与ox-LDL组比较,随rhEPO浓度的递增,细胞存活率增高,细胞凋亡率降低,凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值增高(P均<0.05),呈剂量依赖性.反式LOX-1 mRNA(0.5 μmol/L)预处理组凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值较ox-LDL组明显增高(P<0.05);顺式LOX-1 mRNA(0.5 μmol/L)预处理组Bcl-2/Bax比值与ox-LDL组则无明显差异.结论 ox-LDL可以诱导HUVECs凋亡,并且通过LOX-1 mRNA来调节,rhEPO可增高Bcl-2/Bax比值,抑制ox-LDL诱导的HUVECs凋亡.     

血管紧张素Ⅱ对白血病HL-60细胞株骨桥蛋白表达的影响及机制

目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对白血病HL-60骨桥蛋白表达的影响及机制。方法:体外培养HL-60细胞株,予Ang II(终浓度10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L)刺激24 h或予AngⅡ(终浓度10-7 mol/L)刺激12h、24 h、48 h;先经PI3K/AKT抑制剂LY294002(40 umol/L)预处理1 h,再予10-7 mol/L Ang II刺激24 h,收集细胞,采用western-blot法检测OPN表达情况。结果:AngⅡ促进HL-60细胞表达OPN,在一定浓度及时间内,其表达量随着AngⅡ浓度和时间的增加而增加,呈剂量和时间依赖性关系;经LY294002预处理再予AngⅡ刺激的HL-60细胞,与对照组比较,OPN表达明显抑制(P0.05)。结论 :AngⅡ经PI3K/AKT信号通路诱导OPN的表达。     

血管紧张素II及去甲肾上腺素在心肌细胞增殖分化中的生物学意义

目的:探讨血管紧张素II(angiotensinⅡ,AngII)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对心肌细胞增殖、胚胎基因心钠素及转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)表达的影响及其生物学意义。方法:体外培养的乳鼠心肌细胞,分别以AngII(1×10-6mol/L)、NE(1×10-6mol/L)刺激后,采用流式细胞计数仪检测心肌细胞DNA合成、细胞周期分布;免疫细胞化学检测心肌细胞内TGF-β1表达水平,放射免疫学检测细胞上清心钠素浓度。结果:与对照组相比,AngII,NE刺激24h后,心肌细胞心钠素表达增加,G0/G1,G2/M期DNA合成增强,同时伴有TGF-β1蛋白表达上调(P均<0.05),但二者不改变心肌细胞的细胞周期分布,细胞仍主要处于G0/G1期。结论:AngII,NE能诱导心肌细胞异常增生,但不能刺激细胞增殖。这可能与AngII,NE诱导心肌细胞TGF-β1表达增加有关。     

灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的灯盏花素对肺癌A549细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法利用MTT法研究不同浓度(0 mM、1 mM、3. 125 mM、6. 25 mM、12. 5 mM、25 mM、50 mM、100 mM)灯盏花素对肺癌A549细胞的生长抑制作用并计算半数抑制浓度(IC50)值;用半数抑制浓度的灯盏花素处理肺癌A549细胞12 h、24 h、48 h后,通过Annexin V-FITC形态学染色法和流式细胞术分析细胞死亡类型和细胞周期变化; Western blot方法检测细胞内p-53/p53、p21、cyclin B1、p-cdc2/cdc2、Bcl-2/Bad和cleaved-caspase-3蛋白表达变化。结果 MTT检测发现灯盏花素处理后的A549细胞生长受到显著抑制(IC50为25. 03 mM),且表现出明显的剂量依赖性(P 0. 05);形态学染色和流式细胞术表明灯盏花素能够诱导肺癌A549细胞时间依赖性凋亡(P 0. 05),并发生G2/M细胞周期阻滞; Western blot结果显示与细胞周期相关蛋白p-p53、p21、p-pcdc2随着灯盏花素作用时间的增加,表达量显著提高(P 0. 05),而cyclin B1的表达明显受到抑制(P0. 05);凋亡相关蛋白分析发现:促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3的表达显著增加,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达明显降低(P 0. 05)。结论灯盏花素能够使肺癌A549细胞发生G2/M期阻滞,上调细胞周期相关蛋白表达,改变细胞周期,抑制细胞增殖;同时通过调控Bcl-2和caspase家族蛋白诱导并执行肺癌A549细胞凋亡。     

丹参酮ⅡA对心肌细胞肥大的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大及原癌基因c-fosmRNA表达的影响。方法:实验于2005-09/12在十堰市人民医院临床研究所完成。①将100只出生后1周内乳鼠心肌细胞原代培养24h后,按随机数字表法分为6组:对照组:心肌细胞培养液中未加入任何药物;血管紧张素Ⅱ组:心肌细胞培养液中加入1×10-6mol/L血管紧张素Ⅱ;血管紧张素Ⅱ 丹参酮ⅡA组:心肌细胞培养液中预先加入1×10-5mol/L丹参酮ⅡA作用30min后,再加入1×10-6mol/L血管紧张素Ⅱ(中国药品生物制品检定所提供,批号0766-200010);血管紧张素Ⅱ 缬沙坦组:心肌细胞培养液中预先加入1×10-6mol/L缬沙坦后,再加入1×10-6mol/L血管紧张素Ⅱ;丹参酮ⅡA组:心肌细胞培养液中加入1×10-5mol/L丹参酮ⅡA;缬沙坦组:心肌细胞培养液中加入1×10-6mol/L缬沙坦。所有实验均重复3次。②持续加药作用7d后采用流式细胞仪检测心肌细胞总蛋白含量。采用3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率。采用反转录聚合酶链式反应检测心肌细胞原癌基因c-fosmRNA表达。③计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:①血管紧张素Ⅱ可以使心肌细胞蛋白总量增多(P<0.01),预先加入丹参酮ⅡA或缬沙坦作用30min,可阻断血管紧张素Ⅱ的作用(P<0.01)。②血管紧张素Ⅱ作用24h后,血管紧张素Ⅱ组心肌细胞合成速率明显高于对照组[(1900±97),(1205±75)min-1,P<0.01],丹参酮ⅡA和缬沙坦本身对心肌细胞蛋白质的合成没有影响,但能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞蛋白质合成速率的增加(P<0.01)。③在培养液中加入血管紧张素Ⅱ作用30min后,c-fosmRNA的表达显著增强(P<0.01),预先加入丹参酮ⅡA或缬沙坦作用30min,可阻断血管紧张素Ⅱ的作用(P<0.01),而丹参酮ⅡA和缬沙坦本身对原癌基因c-fosmRNA的表达无影响。结论:丹参酮ⅡA可以抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,这与其抑制了原癌基因c-fos的表达有关。     

烟曲霉感染对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的观察烟曲霉菌丝感染后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的凋亡情况。方法建立烟曲霉菌丝感染HUVEC的体外模型。实验分3组:①空白对照组,细胞不予任何刺激;②烟曲霉菌丝组Ⅰ(浓度10~5CFU/mL);③烟曲霉菌丝组Ⅱ(浓度10~6 CFU/mL)。流式细胞术分别于2、4和8 h 3个时相点检测HUVEC凋亡率。结果与2 h比较,暴露于不同浓度烟曲霉菌丝的HUVEC凋亡率在4和8 h逐渐增加(P<0.05);与空白对照组相应时间点比较,烟曲霉菌丝组Ⅰ和烟曲霉菌丝组Ⅱ的HUVEC凋亡率均明显增加(P<0.01),且烟曲霉菌丝组Ⅱ高于烟曲霉菌丝组Ⅰ(P<0.05)。结论烟曲霉菌丝可诱导HUVEC凋亡;一定时间内,随HUVEC接触菌丝时间的延长,凋亡率增加;相同时间点,烟曲霉菌丝浓度越高,HUVEC凋亡率越高。     

汉防己甲素预防K562细胞获得性耐药机制的研究

本研究从MDR1基因转录调控和细胞凋亡两方面探讨汉防己甲素(TTD)预防K562细胞阿霉素(ADM)诱导性多药耐药(MDR)产生的作用机制。本实验分3组,第1组为K562细胞空白对照组;第2组用ADM作用K562细胞24小时诱导细胞耐药;第3组采用TTD预处理K562细胞24小时后,再用ADM诱导耐药。采用RT-PCR检测各组细胞转录因子c-Jun、YB-1及Survivin的mRNA表达水平;Western blot法检测c-Jun、YB-1的核内蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞的凋亡程度。结果表明,0.6μg/ml阿霉素作用后K562细胞MDR1基因转录上调;与空白对照组(第1组)相比,ADM诱导的耐药细胞组(第2组)c-Jun mRNA和蛋白表达减低(p均<0.05),YB-1 mRNA和蛋白表达明显上调(p均<0.05);Survivin mRNA表达无明显差异(p>0.05);细胞凋亡率(8.31%)比空白对照组(0.75%)稍有增加;TTD预处理后再用ADM诱导组(第3组)与ADM作用组相比,c-Jun mRNA和蛋白表达增加(p均<0.05);YB-1 mRNA和蛋白表达下调(p均<0.05);Survivin mRNA表达明显减少(p<0.05),细胞凋亡率(97.2%)明显增加。结论:TTD预防白血病细胞耐药形成的机制可能与其下调YB-1基因和蛋白的表达、上调c-Jun基因和蛋白的表达,从而下调MDR1基因表达有关,另外,TTD与ADM联合作用还能抑制Survivin的表达,增加白血病细胞的凋亡。     

ADMA对人脐静脉内皮细胞粘附功能影响的体外研究

目的观察非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)粘附功能的影响。方法原代获取HUVECs,分别加入ADMA5μmol/L和10μmol/L培养48小时。测定细胞的数目、粘附和产生一氧化氮的能力。流式细胞仪检测细胞表面粘附分子的表达。结果与对照组相比,不同浓度的ADMA可显著抑制HU-VECs产生NO和粘附的能力、增强细胞表面ICAM-1和VCAM-1的表达。结论ADMA可抑制体外培养的HUVECs粘附功能。     

活性氧在荆花牡荆素诱导人肺癌A549细胞凋亡中的作用

目的 探讨紫花牡荆素(CAS)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制.方法 体外培养A549细胞.MTT法测定CAS对A549细胞增殖的抑制;Annexin V/PI双染色分析细胞凋亡率;H2DCFH-DA探针流式细胞术分析活性氧(ROS)生成.结果 CAS能抑制人肺癌A549细胞增殖,呈浓度依赖性.Annexin V/PI法检测结果显示10 μmol/L的CAS作用A549细胞12 h、24 h、48 h后,其凋亡率分别为22.39%、38.66%、64.82%.H2DCFH-DA探针流式细胞术分析表明,完全培养基组、溶媒(0.1% DMSO)组对A459细胞作用0 h;CAS(10 μmol/L)对A549细胞作用3 h、6 h、12 h;N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,10 mmol/L)+CAS(10 μmol/L)组对A549细胞作用6 h的ROS生成水平分别为8.47、15.26、66.2、74.1、82.2、67.3,随着CAS作用时间延长,细胞内ROS水平增加.NAC对细胞凋亡有抑制作用.结论 CAS可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与提高细胞内ROS产生增加有关.     

辛伐他汀和普罗布考对TNF-α诱导的内皮细胞凋亡的影响

【目的】探讨辛伐他汀和普罗布考对TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的影响及其影响的量效关系和时效关系。【方法】体外培养HUVES,取对数生长期的细胞分为四个组：①TNF-α干预的浓度依赖性组（Ac组）[按浓度分为Acl（Ong／mL）,Ac2（1ng／mL）,Ac3（10ng／mL）,Ac4（25ng／mL）];②TNF-α干预的时间依赖性组（At组）[按时间分为Atl（Oh）,At2（12h）,At3（24h）,At4（48h）];③10ng／mLTNF_a＋不同浓度辛伐他汀干预组（B组）[浓度分为B1（O μmol／L）,B2（O．01 μmol／L。）,B3（O．1 μmol／L。）,B4（1．0t μmol／L）];④1O ng／mL TNF-a不同浓度普罗布考干预组（c组）[浓度分为C1 （0 μmol／L。）,C2（20 μmol／L）,c3（40 μmol／L）,C4（80 μmol／L）]。以上四组均干预12h后,用流式细胞术检测各组凋亡率。【结果】①Ac组凋亡率分别为：Acl（O．81±0．25％）,Ac2（2．35±0．04％）,Ac3（4．54±0．32％）,Ac4（6．17±0．28％）,各组之间存在统计学差异（P〈0．01）。②At组凋亡率分别为,Atl（0．87±o．35％）,At2（4．53±0．32％）,At3（7．45±1．97％）,At4（10．92±1．27％）,各组间存在统计学差异（P〈O．01）。③B组凋亡率分别为,B1（4．46±0．53％）,B2（1．38±0．12％）,B3（2．89±0．27％）,B4（3．65±0．08％）,各干预组与对照组之间存在统计学差异（P〈O．01）。④C组细胞凋亡率分别为,C1（4．60±0．64％）,C2（2．61±0．18％）,C3（2．21±0．22％）,c4（1．28±0．34％）,各干预组与对照组之间存在统计学差异（P〈0．01）。【结论】①TNF-α可以诱导内皮细胞凋亡,且存在浓度依赖性和时．：良赖性。②辛伐他汀可以抑制TNF-α口诱导的内皮细胞凋亡,但无浓度依赖性。③普罗布考可以抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡,但无浓度依赖性。     

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞氧化应激及其损伤的影响

【目的】研究丹参酮ⅡA对腹膜透析液（PDF）诱导人腹膜间皮细胞（HPMCs）氧化应激及其损伤的影响。【方法】体外培养的HPMCs同步后分为五组：A组即对照组（DMEM培养基＋完全培养基）;B组即腹膜透析液组（含4．25％PDF的完全培养基）;C组即丹参酮组（含100μmmol／L丹参酮的完全培养基）;C1组即丹参酮1组（含50μmol／L丹参酮ⅡA的PDF）、C2组即丹参酮2组（含100μmol／I。丹参酮ⅡA的PDF）,干预72h后（其中B组、C1、C2组为加热的PDF）,流式细胞仪及荧光显微镜检测线粒体膜电位的变化;荧光显微镜检测胞内钙离子浓度的变化。采用活性氧捕获剂二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH—DA）孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧水平。并检测上清液中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、和丙二醛含量;不同浓度丹参酮ⅡA干预48h后,MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA干预下细胞增殖活力。【结果】B组上清液丙二醛含量、胞内钙离子、细胞内活性氧水平较对照组及C1、C2组显著增加（P〈0．01）,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及线粒体膜电位水平显著降低（P〈0．01）。不同浓度丹参酮ⅡA组HPMCs的增殖活性显著高于B组（P〈0．01）,丹参酮ⅡA不同浓度间无显著差异（P〉0．05）。【结论】丹参酮ⅡA可以通过降低PDF干预下丙二醛含量、减轻钙离子负荷、维持线粒体膜电位的水平、保护抗氧化还原酶的活性来拮抗商业性PDF对HPMCs的氧化应激及其损伤。     

烟酸和普罗布考联合应用对巨噬细胞胆固醇流出的影响

【目的】探讨烟酸、普罗布考单独及联合作用对巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制。【方法】巨噬细胞264．7分别给予烟酸（1．0mM）、普罗布考（50μM）、烟酸加普罗布考（1．0mM＋50μM）干预24h后,收集细胞,反转录聚合酶链反应测定巨噬细胞B族清道夫受体I（SR-BI）、三磷酸腺苷结合盒转运A1（ABCAl）和三磷酸腺苷结合盒转运体G1（ABCGl）mRNA表达,采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出情况。【结果】与对照组比较,烟酸和普罗布考单独作用及联合应用均促进巨噬细胞胆固醇流出,但联合作用组与单独作用组之间效果差异无显著性（P〉0．05）。烟酸及普罗布考对巨噬细胞SR-BI mRNA的表达无影响;对ABCA1 mRNA的表达有相反作用;二者均增加巨噬细胞ABCG1 mRNA的表达,并促进其介导的胆固醇流出。【结论】烟酸和普罗布考联合应用可促进巨噬细胞胆固醇流出;ABCG1-HDL途径在胆固醇流出中占有更重要的地位,这可能为解释烟酸和普罗布考抗动脉粥样硬化的机制提供有用的线索。     

右美托咪啶对大鼠缺氧缺糖海马神经元凋亡的影响

目的:探讨右旋美托咪啶(DEX)在大鼠海马神经元细胞中对缺氧缺糖(OGD)损伤导致的细胞凋亡的影响。方法:取培养8 d的原代新生大鼠海马神经元细胞随机分为4组:正常对照组、OGD模型组、DEX对照组和DEX处理组。建立大鼠原代海马神经元缺氧缺糖/复氧复糖损伤模型,JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化,DCFH-DA染色检测细胞内活性氧(ROS)水平变化。结果:与对照组相比,OGD损伤可明显降低细胞内MMP水平,而右旋美托咪啶预处理可抑制MMP的降低,并可抑制OGD介导的ROS生成。结论:右美托咪啶对大鼠海马神经元OGD损伤具有保护作用,其机制与抑制ROS生成和抑制MMP下降相关。     

ROS在FTY720诱导U266细胞死亡中的作用机制研究

本研究探讨活性氧（ROS）在FTY720诱导多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡及自噬中的作用。不同浓度FTY720处理U266细胞24 h后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,应用Western blot检测LC3B的表达。结果显示：应用FTY720可引起U266细胞发生凋亡及自噬,自噬的发生可促进细胞死亡。自噬抑制剂Bafilomycin A1可降低FTY720导致的细胞生存率下降。应用ROS抑制剂NAC或Tiron后,FTY720引起的细胞凋亡减轻,联合应用NAC或Tiron和FTY720后LC3B-Ⅱ表达较单用FTY720明显下降。结论：FTY720可诱导U266细胞发生凋亡及自噬,ROS是FTY720引起的多发性骨髓瘤细胞凋亡及自噬的共同调节剂。     

过氧化物酶增殖物激活受体α激动剂降低高糖诱导的黏附因子的表达

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)α激动剂对高糖条件下人血管内皮细胞细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和血管黏附因子-1(VCAM-1)表达的影响及相关机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞和HL-60细胞,酶联免疫吸附试验(ELISA)、HL-60细胞黏附试验及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ICAM-1和VCAM-1的表达,Western blotting和共聚焦显微镜方法探讨NF-κB通路IκB、磷酸化-IκB蛋白水平及p65亚基的移位,流式细胞仪和共聚焦显微镜方法检测细胞内活性氧离子(ROS)水平,化学发光法测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的活性。结果 (1)高糖(33 mmol/L)干预24 h能够显著增加内皮细胞ICAM-1和VCAM-1的表达;(2)PPARα激动剂非诺贝特、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)和NADPH氧化酶抑制剂二联苯碘(DPI)显著抑制高糖诱导的ICAM-1和VCAM-1的表达;(3)高糖能够诱导内皮细胞IκBα的降解、磷酸化-IκBα蛋白水平的增加;另外,高糖可以显著增加内皮细胞NADPH氧化酶活性和细胞内ROS水平;非诺贝特则呈浓度依赖性的逆转高糖引起的上述效应。结论 PPARα激动剂非诺贝特通过抑制NF-κB通路和NADPH氧化酶的激活降低高糖诱导的人血管内皮细胞炎症因子ICAM-1和VCAM-1的表达。