NMDA受体NR1亚单位与学习记忆

谷氨酸（Glu）是脊椎动物中枢神经系统中的主要兴奋性神经递质，其受体可分为代谢型和离子型两大类。离子型受体由三种组成：AMPA受体（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazoepionate receptor，AMPAR），KA受体（kanieacid，KAR）及NMDA受体（N-methyl-D-Aspartic acid receptor，NMDAR）。其中NMDA受体被认为是突触可塑性及皮质和海马神经元长时程增强效应（Long-term potentiation，LTP）的主要调控者，     

大鼠海马NMDA受体NR1亚单位蛋白的基础表达量与学习记忆相关

目的 :探讨大鼠海马 N-甲基 - D-门冬氨酸 (NMDA)受体 NR1亚单位蛋白表达水平与学习记忆的关系。方法 :用新事物识别模型 (novel object recognize model)和 Morris水迷宫 ,分析 SD大鼠的新事物探究能力和空间学习能力 ,根据指标最强的 2 0 %和最弱的 2 0 % ,分别选取新事物探究能力强和弱 2组 ,以及空间学习能力强和弱 2组。分离制备上述各组大鼠海马的膜蛋白 ,用 NR1亚单位特异性抗体作免疫印迹分析 ,测定 NR1亚单位蛋白的含量。结果 :新事物探究能力强组大鼠海马的 NR1亚单位蛋白含量比弱组高 6 0 % (P<0 .0 1) ,空间学习能力强组大鼠海马 NR1亚单位蛋白含量比弱组高 4 5 .4 % (P<0 .0 5 )。结论 :大鼠海马 NMDA受体 NR1亚单位蛋白的基础表达量与新事物探究能力和空间学习能力相关。     

早期干预对未成熟大鼠脑损伤学习记忆及NMDA受体NR1亚单位表达的影响

目的 探讨早期干预对未成熟大鼠脑损伤后学习记忆及NMDA受体NR1亚单位表达的影响.方法 选2日龄SD大鼠制作未成熟大鼠脑损伤模型,随机分为丰富环境(EE)组、贫瘠环境(IE)组、标准环境(SE)组,每组20只.另选20只2日龄SD大鼠,仅分离左侧颈总动脉,不予结扎和缺氧,作为对照组(Sham).EE组于术后第3天行触摸和丰富环境干预,总干预时间为30d.标准环境组和对照组均饲养于标准环境中,不行早期干预.干预结束后行学习记忆能力检测,同时分别于生后第7、35天取各组大鼠海马脑组织免疫细胞化学检测NR1亚单位表达.结果 生后5周龄时,EE组学习记忆能力较SE组及IE组明显改善[逃避潜伏期(ELP):4.75±2.85与12.45±3.23、8.42±2.23比较,空间探索能力:61.36±8.12与50.24±8.29、40.12±7.99比较,P<0.05];且丰富环境组海马CA1区NR1阳性反应物着色最强,与标准环境组、贫瘠环境组及对照组比较差异有统计学意义(43.2±6.6与59.5±8.1、88.5±15.5、62.3±9.5比较,P<0.01).结论 早期干预可增强未成熟大鼠脑损伤的学习记忆能力,NMDA受体NR1亚单位表达增多可能是其机制之一.     

NMDA受体亚单位NR1在离体人神经干细胞中的表达

目的研究离体培养的人海马神经干细胞（NSCs）中NMDA受体亚单位NR1的表达。方法分离培养胎龄8-12周人胚脑海马神经干细胞,对NSCs进行Nestin和分化鉴定。用免疫细胞化学、Western blot免疫印迹和RT—PCR等方法检测原代、传代1次、传代2次的人胚胎海马NSCs中NR1蛋白和mRNA的表达。结果在孕8～12周人胚脑海马分离培养的NSCs中,NMDA受体亚单位NRI免疫细胞化学反应呈阳性,该受体亚单位的蛋白和mRNA均被检测钊。结论体外培养的早期人胚胎海马NSCs能稳定表达NMDA受体亚单位NR1。     

缺氧对大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位磷酸化的影响

目的 观察缺氧模型大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位酪氨酸磷酸化的变化.方法 成年大鼠置于模拟海拔5 500 m高度的低压氧舱内,每天缺氧8 h,分别缺氧3、7、14 d和21 d.采用免疫组化、Western blot 免疫共沉淀方法检测皮层、海马NR1及其酪氨酸磷酸化的变化.结果 免疫组化显示缺氧皮层、海马NR1表达都明显高于对照组(P《0.01).Western blot检测进一步证明NR1的表达显著高于对照组(P《0.01),且随着缺氧时间的延长而增加.缺氧各组酪氨酸磷酸化水平亦显著高于对照组(P《0.01),缺氧14 d后酪氨酸磷酸化达到最高峰,而后开始下降,21 d时仍显著高于对照组(P《0.01).结论 高原缺氧条件下大鼠皮层、海马NMDA受体NR1亚单位表达及酪氨酸磷酸化水平显著增加,酪氨酸磷酸化的变化可能是影响NMDA受体功能的主要原因.     

NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B mRNA在成年大鼠海马的表达

目的 研究NMDA受体亚单位（NR1，NR2A和NR2B）mRNA在正常成年大鼠海马结构各区的表达及形态特点。方法 原位核酸分子杂交组织化学反应和图像处理与分析。结果 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常大鼠海马结构各区锥体细胞和颗粒细胞普遍表达，其中NR1mRNA的表达最强，NR2AmRNA的表达最弱，NR1mRNA在齿状回（DG）的表达水平明显强于CA1区和CA3区；NR2AmRNA在CA1区的表达水平则强于CA3区和DG；NR2BmRNA在海马各区的表达水平基本相同。结论 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常成年大鼠海马各区的表达模式不同，其中NR2AmRNA在海马CA1区以及NR1mRNA在DG高表达的分布特点可能与海马的学习，记忆等生理功能以及选择性易损现象有关。     

中枢NMDA受体NR2B亚单位与神经病理性疼痛的研究现状

中枢神经系统N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体在病理性疼痛的发生和发展中起着重要作用。近年来研究发现中枢神经系统中NMDA受体NR2B亚基与神经病理性疼痛的关系尤为密切。NR2B在疼痛的产生、中枢性痛觉敏感化形成和疼痛治疗中有着深刻的意义。本文就NR2B与神经病理性疼痛的研究现状进行综述。     

NMDA受体亚单位NR1、NR2A、NR2B在生后大鼠海马的免疫组织化学表达

目的 :观察大鼠海马NMDA受体亚单位NR1、NR2A、NR2B三种蛋白质的生后发育变化。方法 :生后不同时段的SD大鼠各 5只 ,作HE染色 ,NR1、NR2A、NR2B组化反应染色。结果 :生后各时间点海马结构各区锥体细胞及颗粒细胞胞体中均有NR1、NR2A、NR2B的表达 ,NR2B还在锥体细胞的顶树突中有较强表达。NR1与NR2B在P1d和P4d ,两者在CA3区的表达均高于CA1区 ,P1w后两者在CA1区的表达则高于CA3区 ,在P2w～P3w其表达至峰值。而NR2A在P1d、P4d时其在海马结构各区的表达较高 ,随发育时间表达下降 ,约在P4w降至谷底。整个发育过程中 ,NR1在海马各区的表达始终高于NR2A和NR2B的表达。提示生后早期中NR1、NR2A、NR2B的表达具有发育性时空差异     

NMDA受体亚单位NR1在长期培养大鼠海马脑片中的免疫活性变化

目的　研究NMDA受体亚单位NR1在长期培养大鼠海马脑片各区中免疫组织化学反应活性变化规律。方法　将新生 6～ 9天大鼠海马和齿状回切成 4 0 0 μm厚脑片 (即海马脑片 ) ,分别体外培养 1、2、3、4、5周时再作 2 0 μm厚冰冻切片 ,行NR1免疫组织化学反应和图像分析。 结果　NR1在培养各周海马脑片各区锥体细胞和颗粒细胞胞体的免疫反应均呈阳性 ,胞膜深染 ,胞质淡染。培养 1周时 ,其反应强度为CA3区 >CA1区 >齿状回(DG) ;之后则为CA1区 >CA3区 >DG ;3周时各区反应均达高峰。结论　NR1在长期培养大鼠海马脑片各区的免疫活性有时空差异 ,提示NMDA受体的结构和功能在长期海马脑片培养中可能发生变化     

电磁辐射对大鼠海马NMDA受体NR1亚单位蛋白及其mRNA表达的影响

目的 探讨2000 μW/cm2电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体NR1亚单位蛋白及其mRNA水平表达的影响,揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制.方法 实验分为空白对照组,假辐射组,1 h/d、2h/d、3 h/d辐射组.将辐射组大鼠固定体位,头部接受功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d.通过Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组化法和Western-Blot法检测大鼠海马组织NR1蛋白表达的变化,RT-PCR法检测大鼠海马组织NR1 mRNA表达的变化.结果 各辐射组大鼠在水迷宫检测第4天寻找安全平台的逃避潜伏期分别为1 h/d[(12.29±1.36)s]、2 h/d[(17.99±2.25)s]、3 h/d[(24.66±5.56)s],均明显长于空白对照组[(8.8±1.66)s](P＜0.05);1 h/d、2 h/d和3 h/d辐射组大鼠海马神经元均排列紊乱,NR1阳性细胞比率明显低于空白对照组,海马组织NR1蛋白[分别为(0.122±0.026)、(0.102±0.023)、(0.060±0.009)]及其mRNA[分别为(0.46±0.07)、(0.35±0.05)、(0.12±0.02)]表达水平较空白对照组[(10.70±0.11)、(0.68±0.11)]均明显降低(P＜0.05).而假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无显著差异(P＞0.05).结论 2000μW/cm2电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与大鼠海马组织NR1蛋白及其mRNA的表达降低有关.

Abstract：

Objective To evaluate the effects of electromagnetic irradiation of 2000 μW/cm2 exposure on mRNA and protein expression levels of immunoreactive protein and mRNA of NMDAR1 in rats hippocampal,and to explore the impaired mechanism of electromagnetic irradiation on learning and memory.Methods Rats were randomly divided into normal control group, sham-radiated group, and 1 h/d, 2 h/d, and 3 h/d radiation groups.The rats in the radiation groups were fixed and recieved microwave exposure of 2000 μW/cm2, then their learning and memory abilities were tested by Morris water maze experiment, the change of NR1 protein in hippocampal neurons of each group of rats was measured with immunohistochmistry and western blot techniques, and the expression of NR1 mRNA in hippocampus was determined by RT-PCR.Results In the water maze test,compared with the normal control group (8.8 ± 1.66 ), the escape latency of three radiated groups rats ( 1 h/d ( 12.29 ±1.36) s,2 h/d ( 17.99 ±2.25) s,and 3 h/d (24.66 ±5.56) s) were significantly longer (P＜0.05).In the radiation group,the hippocampal neurons of rats showed evident reduction in the ratio of NR1 positive cells,irregular,and arrayed in disorder.Moreover,compared with the normal control group ( (0.70 ±0.11 ), (0.68 ±0.11 ) ) ,the expession of NR1 protein ( 1 h/d (0.122 ±0.026) ,2 h/d (0.102 ±0.023) ,and 3 h/d (0.060 ± 0.009) ) and its mRNA ( 1 h/d (0.46 ±0.07) ,2 h/d (0.35 ±0.05) ,and 3 h/d (0.12 ±0.02) ) in hippocampal neurons was significantly decreased (P＜0.05).Among the indicators, there was no significant difference between sham-radiated group and normal control group.Conclusions Electromagnetic irradiation of 2000 μW/cm2 exposure can impair the learning and memory abilities of rats possibly through a mechanism correlated with the lower expression of NR1 protein and its mRNA in hippocampus.     

NMDA受体与学习记忆关系的研究进展

突触传递长时程增强（LTP）是神经元可塑性的反映,也是学习和记忆的神经生物学基础.目前,关于其形成机制的研究主要集中于N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体.三种不同亚基NR1、NR2、NR3组合成NMDAR,并在其功能中发挥不同作用.该文就NMDA受体在学习记忆机制中的作用作一综述.     

NMDA受体与学习记忆关系的研究进展

突触传递长时程增强（LTP）是神经元可塑性的反映,也是学习和记忆的神经生物学基础。目前,关于其形成机制的研究主要集中于N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体。三种不同亚基NR1、NR2、NR3组合成NMDAR,并在其功能中发挥不同作用。该文就NMDA受体在学习记忆机制中的作用作一综述。     

离体培养神经干细胞中NMDA受体亚单位NR2B的表达

目的研究离体培养的大鼠神经干细胞（NSCs）中N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体亚单位NR2B的表达。方法从孕18～19天胎鼠海马中分离、培养、传代、鉴定NSCs，用免疫细胞化学、Western blot免疫印迹检测传代1次NSCs中NMDA受体亚单位NR2B的表达。结果源自孕18～19天胎鼠海马的NSCs，即可以表达NMDA受体亚单位NR2B。结论体外培养的NSCs能表达NMDA受体亚单位NR2B。     

NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体的制备及人胚脑 …

目的：制备ＮＭＤＡ受体ＮＲ２Ｂ亚单位特异性单克隆抗体，对人胚脑皮层ＮＲ２Ｂ的表达作免疫印迹分析。方法：制备ＮＲ２ＢＣ末端９３４－１４５７氨基酸与ＧＳＴ的融合蛋白，并以此作为免疫的，经常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。用该抗体对不同周的人胚脑皮层的ＮＲ２Ｂ蛋白作免疫印迹分析，结果：本研究制备的ＮＲ２Ｂ单克隆抗体能特异地识别１８０ｋＤａ的ＮＲ２Ｂ蛋白，并首次发现人胚脑皮层ＮＲ２Ｂ亚单位蛋白的表达。结论：成     

缺血性内脏痛模型大鼠脊髓背角NMDA受体NR2B亚单位的表达

目的探讨大鼠内脏缺血刺激后行为学反应及脊髓背角NMDA受体NR2B亚单位的表达变化。方法 36只SD大鼠随机分为假手术组(S组,n=18)和造模组(C组,n=18)。各组在手术后30、60、120、180min、第2d、第3d共6个时间段分别进行内脏疼痛强度的行为学评分。分别于术后3、7、14d随机取6只大鼠用免疫组织化学方法测定脊髓L4～5背角处的NMDA受体NR2B亚单位表达。结果造模组大鼠在结扎结肠系膜血管后60min均达到疼痛评分的最大值,与假手术组比较,造模组所有时间点疼痛行为评分明显升高(P<0.05);在脊髓L4～5节段NMDA受体NR2B亚单位的免疫阳性产物主要出现在背角深层和中央管周围。造模组大鼠3d的脊髓NMDA受体NR2B亚基的表达与假手术组差别无统计学意义(P>0.05);造模组大鼠7、14d的脊髓NMDA受体NR2B亚基的表达明显高于假手术组(P<0.05)。同组比较,7d组蛋白表达高于3d组和14d组(P均<0.05)。结论 NMDA受体NR2B亚基在肠管缺血引起的内脏痛形成机制中起重要作用;缺血性内脏痛模型大鼠可用于相关内脏痛发生机制的研究。     

大鼠海马脑片长期培养中NMDA受体亚单位NR2A和NR2B的表达变化

目的 研究在长期培养大鼠海马脑片各区中N-甲基-D-门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体亚单位NR2A，NR2B表达的变化规律。方法 400μm厚大鼠海马脑片，体外培养1，2，3，4，5周，再作20μm厚冰冻切片，行NR2A，NR2B免疫组织化学反应和图像分析。结果 NR2A，NR2B在培养各周海马脑片各区锥体细胞和颗粒细胞体均有表达，NR2B还在CA1区锥体细胞顶树突明显着色。1周时，NR2A的表达较弱；4周时升至高峰，在CA3区，NR2B的表达1周时即达高峰；但在CA1区其表达至3周时始达高峰。结论 长期培养大鼠海马脑片各区中NR2A，NR2B的表达有时空变化，且二者的表达模式不同，提示此间NMDA受体的结构和功能可能也有改变。     

NMDA受体对学习记忆影响的双向性

N-甲基-D-天冬氨酸(N methyl-D-asparticacid,NMDA)受体,是一种特殊的离子通道蛋白,分布在突触后膜上,既受突触电压的调控也受神经递质如谷氨酸(glutamicacid,Glu)、甘氨酸(glycine,Gly)、NMDA的控制,是学习记忆的关键物质[1]。Glu是哺乳动物脑内含量最高的一种氨基酸,并作为主要的中枢兴奋性氨基酸递质介导一系列高级神经活动,其作用是通过兴奋性氨基酸受体而实现的。目前根据受体特异性激动剂将兴奋性氨基酸受体分为NMDA受体、海人藻酸(kainicac id,KA)受体、α氨基3羧基5甲基异口恶唑4丙酸(alpha amino3hydroxy5methylisoxazole…     

局灶性脑缺血后脑室下区NMDA受体亚单位NR2B的表达变化

目的 观察局灶性脑缺血后侧脑室脑室下区N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2B的表达变化.方法 44只雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组和脑缺血再灌注组,线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)90 min再灌注模型,术后分3、7、14、21、28天5个时间点取脑,连续石蜡切片,免疫组化反应、图像分析系统行NR2B阳性细胞灰度值测量.结果 脑缺血后,缺血侧NR2B的表达在再灌注后3天开始增加,7天达到高峰(P<0.05),28天降至正常水平(P>0.05);缺血对侧的变化趋势同缺血侧,但表达变化的幅度明显减小.结论 局灶性脑缺血后,SVZ区NR2B表达增加,可能参与该区的神经发生.     

NMDA受体NR2A亚单位C末端突变体在HEK293细胞的共表达研究

目的：研究N—甲基—D—天冬氨酸(NMDA)受体NR2A亚单位的细胞内羧基端在受体装配和表面表达中的作用。方法：构建N末端GFP标记、C末端不同区域缺失的NR2A亚单位表达载体GFP—NR2A△C1～GFP—NR2A△C5，其C末端缺失区依次分别为897L—1017S、1024D—1142P、1149D—1347G、1354S—1464V和897L—1464V。将它们单独转染或与NR1亚单位共转染到HEK293细胞，用抗GFP多克隆抗体和Cy3荧光素交联的二抗作活细胞表面受体染色。结果：成功构建了5个C末端不同区域缺失的GFP—NR2A表达质粒GFP—NR2A△C1～GFP—NR2A△C5。将这些载体分别单独转染HEK293细胞，均不能获得达细胞膜表面表达。而将这些质粒分别与NR1—1a共转染HEK293细胞，发现它们均能与NR1—1a表达于细胞膜表面。结论：NR1—1a与NR2A的共表达是形成NR1—1a／NR2A亚型NMDA受体并获得细胞表面表达的必要条件。NR2AC末端897L下游并未找到直接与NR1—1a C1盒中内质网滞留基序相互作用的某一特定区域，也不含有决定NR2A亚单位本身细胞内滞留的区域。     

血管性痴呆大鼠NMDA受体与学习记忆的研究

N-甲基天疼氨酸（NMDA）受体是中枢神经系统中一类重要的兴奋性氨基酸受体,具有配体、电压双重门控特性,并对Ca^2＋有高通透性,但静息状态下Mg^2＋结合在通道内,阻止Ca^2＋内流。其至少存在7个亚单位,即NR1亚单位、4种NR2亚单位（分为NR2A、NR2B、NR2C和NR2D）以及两种NR3亚单位（NR3A和NR3B）。NRl为功能性亚基,是组成NMDA受体通道的必需配件;NR2是修饰蛋白,与NRl构成异寡聚体,形成有高度功能活性的NMDA受体通道;NR3主要发挥抑制作用。由不同亚单位组成的受体往往表现出不同的生理学和药理学特性,从而参与机体各种状态下的病理生理过程。NMDA受体广泛分布于哺乳动物的大脑皮层到脊髓等中枢部位,尤以在与学习记忆有关的大脑皮层和海马结构等的密度最高,奠定了NMDA受体参与学习记忆的物质基础。