糖尿病大鼠肾脏PAI-1、TIMP-1表达的变化

目的:动态观察纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在糖尿病大鼠肾脏中的表达,探讨PAI-1及TIMP-1在糖尿病肾病(DN)肾纤维化发生、发展过程中的作用.方法:链脲菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病肾病,免疫组织化学的方法动态观察糖尿病.肾病发生、发展过程中大鼠肾脏PAI-1、TIMP-1及纤维连接蛋白(FN)表达.结果:PAI.1、TIMP.1及FN表达从糖尿病2周起较正常对照组明显增多(P<0.01),PAI-1和TIMP-1阳性表达主要位于肾小管上皮细胞胞浆内,FN阳性表达主要位于肾小管间质和肾小球,且随着糖尿病进展有逐渐增加的趋势.结论:PAI-1和TIMP-1在肾小管上皮细胞的高表达可能参与了糖尿病肾病过程中肾纤维化的形成.     

PAI-1在糖尿病肾病患者中的变化

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）患者血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）和组织型纤溶酶原激活物（t-PA）活性水平的变化及其与糖尿病肾病（DN）的关系.方法 选择133例T2DM患者,根据尿蛋白排泄率（UAER）分为无DN组67例、DN微量白蛋白尿组51例、DN临床蛋白尿组15例,正常对照组27例.测定其血浆t-PA、PAI-1的活性水平.结果 T2DM各组患者血浆PAI-1水平均显著高于正常对照组,且随着UAER的增高而递增（P＜0.05,P＜0.01）;DN患者血浆PAI-1活性与UAER、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、空腹胰岛素（FINS）、胆固醇（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、甘油三酯（TC）、体重指数（BMI）呈显著正相关;t-PA活性在各组间差异无显著性.结论 DN患者血浆PAI-1活性增高;胰岛素抵抗、高TG、高LDL、高TC血症及肥胖等因素可能与PAI-1活性增高有关.     

橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中PAI-1蛋白表达的影响

目的 探讨橙皮苷对IgA肾病大鼠纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为正常组,模型组和橙皮苷治疗组,每组20只,模型建立成功后给予相应药物治疗,于治疗4、8周后处死大鼠各半,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾脏病理学,同时半定量PCR和Western Blot测定PAI-1蛋白和mRNA表达水平.结果 造模期间模型组、治疗组与正常组相比,大鼠第6周末开始出现镜下血尿(P<0.05),橙皮苷治疗后,有一定下降(P<0.05);与正常组相比,模型组血清24 h UP、Scr、BUN、IL-2和PAF明显升高(P<0.05),治疗组治疗4周后明显下降(P<0.05),治疗8周后进一步降低;PLT和PT在治疗前后没有明显变化;与正常组相比,模型组APTT明显降低(P<0.05),治疗4周后明显升高(P<0.05),治疗8周后进一步升高;光镜下正常组大鼠肾小球形态正常,模型组肾小球系膜细胞和系膜基质中重度增生,橙皮苷治疗后肾小球系膜细胞和系膜基质增生得到明显缓解;与正常组相比,模型组PAI-1蛋白和mRNA表达明显降低,橙皮苷治疗4周后明显升高(P<0.05),治疗8周后基本和治疗4周后一致.结论 橙皮苷可明显减少血尿、减轻病理改变,改善肾功能,其机制可能是橙皮苷通过增加PAI-1的产生而发挥作用的.     

2型糖尿病小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1表达

目的探讨2型糖尿病动物模型KKAy小鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)和组织纤溶酶原激活物(tPA)mRNA表达与肾脏细胞外基质蓄积的关系.方法选取8周龄雄性KKAy小鼠和C57BL-J小鼠,分别于16、20和24周处死.采用发色底物法检测不同周龄的KKAy小鼠及参照组C57BL/J小鼠的血浆PAI-1活性,RT-PCR法检测小鼠肾皮质tPA mRNA表达,原位杂交法检测肾皮质PAI-1 mRNA水平,免疫组织化学和免疫印迹法检测肾皮质层粘连蛋白表达.结果不同周龄KKAy小鼠肾皮质层粘连蛋白表达均高于同龄对照组(P＜0.05).2型糖尿病KKAy小鼠与C57BL/J小鼠血浆PAI-1活性的差异没有显著性(P＞0.05);但肾皮质tPA mRNA水平却显著降低,以16周时最为显著,仅为C57BL/J小鼠的47%,随周龄的增加,其差异逐渐减小.原位杂交显示KKAy小鼠PAI-1mRNA可在肾脏多部位表达,并以近端小管上皮细胞内的表达为主,且明显高于同龄C57BL小鼠.结论2型糖尿病KKAy小鼠早期肾病时,细胞外基质蛋白的蓄积可能和tPA mRNA表达下调及PAI-1 mRNA表达上调所致的纤溶酶降解细胞外基质作用降低有关.     

螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1表达的抑制作用

目的 观察醛固酮拮抗剂--螺内酯对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响.方法 采用正常糖(NG)、高糖(HG)及HG+不同浓度螺内酯体外培养大鼠系膜细胞.以RT-PCR检测PAI-1、醛固酮受体(MR)和保护其配体特异性的11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)的mRNA表达,采用ELISA检测培养细胞上清中PAI-1蛋白的浓度.结果肾小球系膜细胞表达MR和11β-HSD2 mRNA;高糖刺激系膜细胞后PAI-1 mRNA表达明显升高,培养上清液蛋白浓度增加,加入螺内酯干预后系膜细胞PAI-1 mRNA和蛋白表达明显下降,且随螺内酯浓度增大,作用更明显.结论 螺内酯可能通过降低高糖对系膜细胞PAI-1表达的刺激作用而发挥其肾脏保护作用.     

水蛭对肺纤维化大鼠PAI-1的影响

目的:观察水蛭对肺纤维化大鼠纤溶酶原激活物抑制因子-1(Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)的作用,并探讨其机制。方法:采用气管内注入博莱霉素(BLM)制作大鼠肺纤维化模型,造模后随机分为模型组(MD组,生理盐水6 ml/d灌胃),水蛭组[HD组,水蛭粉4 g/(kg.d)灌胃],另设鼠龄、体重相匹配的正常对照组(NC组),每组8只;28 d后ELISA法测定血浆PAI-1含量及活性,同时检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量。结果:NC组PAI-1含量(0.469 2±0.081 3)μg/L,活性(0.363 4±0.047 0)Au/ml,明显低于MD组和HD组(P<0.01);MD组PAI-1含量(8.920 5±1.094 8)μg/L,活性(2.066 7±0.598 6)Au/ml,高于HD组(3.479 8±0.487 2)μg/L、(1.225 3±0.199 4)Au/ml(P<0.01);NC组、HD组HYP低于MD组(P<0.01)。结论:水蛭可能通过减少凝血酶在肺内的表达,抑制PAI-1生成及活性,使重组尿激酶型纤溶酶原激活物(Urokinase plasmino-gen activator,uPA)活性升高,减少纤维蛋白沉积,对肺纤维化大鼠肺组织具有保护作用。     

糖尿病大鼠肾脏蛋白表达的双向电泳分析

目的:观察糖尿病大鼠肾脏的蛋白质组,进一步探讨糖尿病引起肾脏病变的可能机制.方法:采用链脲菌素(STZ)诱发Wistar大鼠产生高血糖,建立1型糖尿病大鼠模型.用固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分离糖尿病大鼠与正常大鼠肾脏的蛋白质.考马斯亮蓝染色凝胶后,用ImageMaster 2D Platinum计算机软件进行图像分析.结果:图像分析测得2块大胶的匹配率达64%,在等电点3～10、分子量14.4～97.4 kD分离得到实验组大鼠肾脏的蛋白质点约1 073个,对照组大鼠的蛋白质点约1 059个,其中至少70个蛋白点在两组肾脏间有2倍以上量变.结论:实验组大鼠肾脏蛋白质表达发生变化,差异蛋白质点的进一步研究有助于探讨糖尿病肾病的发病机制.     

PAI-1在2型糖尿病大鼠血浆及肾组织活性及蛋白表达研究

目的 研究纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）在2型糖尿病大鼠血浆及肾组织中的活性及蛋白表达。方法 雌性SD大鼠20只,分为两组,A组（8只）为正常对照组,B组（12只）为糖尿病组,以高糖高脂饮食及小剂量链脲佐菌素（30mg/kg）制备2型糖尿病大鼠模型,大鼠饲养24周后,用发色底物法测定血浆及肾组织PAI-1及t-PA活性,并用免疫组化半定量分析PAI-1在肾组织中的蛋白表达。结果 糖尿病组大鼠血浆及肾组织t-PA活性较正常对照组明显下降,PAI-1活性明显升高,肾组织PAI-1蛋白表达也较正常对照组升高。 结论 PAI-1在糖尿病大鼠中的活性及蛋白表达增加,说明PA与PAI-1在糖尿病肾小球硬化中起一定作用。     

PAI-1在2型糖尿病大鼠血浆及肾组织中的活性及蛋白表达

目的 研究纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)在2型糖尿病大鼠血浆及肾组织中的活性及蛋白表达.方法 雌性SD大鼠20只,分为两组,正常对照组8只,糖尿病组12只,以高糖高脂饮食及小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)制备2型糖尿病大鼠模型.大鼠饲养24周后,用发色底物法测定血浆及肾组织PAI-l及t-PA活性,并用免疫组化半定量分析PAI-l在肾组织中的蛋白表达.结果 糖尿病组大鼠血浆及肾组织t-PA活性较正常对照组明显下降,PAI-1活性明显升高,肾组织PAI-1蛋白表达也较正常对照组升高.结论 PAI-1在糖尿病大鼠中的活性及蛋白表达增加,说明PA与PAI-1在糖尿病肾小球硬化中起一定作用.     

粉红胶霉菌对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1、TIMP-1及PAI-1表达的影响

目的    探讨粉红胶霉菌对糖尿病大鼠肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达水平的调节及其与糖尿病肾脏病变的关系。方法    将24只正常雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组（N组）8只,糖尿病模型组(M组)8只,粉红胶霉菌治疗组(G组)8只,其中M组、G组应用链尿佐菌素（STZ）6.5mg/100g腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。G组成模后给予粉红胶霉菌0.05g/100g·d灌胃,M组与N组给予等量生理盐水灌胃,每4周末监测血糖, 8周后观察24h尿蛋白定量及血尿素氮（BUN）、血肌酐(SCr)在血清中的浓度水平,同时行HE、PAS和MASSON染色观察肾脏病理变化,采用实时荧光定量RT PCR法检测肾脏TGF-β1、TIMP-1及PAI 1 mRNA的表达。结果    M组和G组SCr、BUN水平及24h尿蛋白定量明显高于N组(P<0.01),M组上述指标显著升高,与G组比较亦有统计学意义（P<0.01）。肾组织病理学观察N组无明显异常,M组出现肾小球肥大,肾小球内细胞外基质蓄积,基底膜增厚,系膜细胞增生指标明显高于N组(P<0.01),G组病变轻于M组。G组TGF-β1、TIMP-1及PAI 1 mRNA的表达均明显低于M组,但高于N组(P<0.01)。结论    粉红胶霉菌对STZ诱导的糖尿病大鼠早期肾损伤有一定保护作用及抗肾小球纤维化作用,其机制可能是通过下调TGF-β1、TIMP-1和PAI-1mRNA的表达、减少细胞外基质、减少尿蛋白来实现的。     

慢性糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤时纤溶酶原激活物及其抑制剂mRNA表达的动态变化

目的　观察正常和糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤时t PA、u PA、PAI 1和神经丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达的差异 ,探讨糖尿病加重脑缺血损伤的可能机制。方法　糖尿病大鼠和正常大鼠各 3 8只 ,随机分为脑缺血1h再灌注 1、2、5、11、2 3h组 (均n =6)、假手术组和非手术组 (均n =4 )。用RT PCR方法检测t PA、u PA、PAI 1和NSPmRNA表达。结果　糖尿病和正常大鼠脑缺血后t PA、u PA、PAI 1和NSPmRNA表达均增高 ;但糖尿病大鼠再灌注 2、11、2 3h时 ,缺血脑组织的NSPmRNA表达明显低于正常大鼠。结论　正常和糖尿病大鼠在脑缺血再灌注后存在纤溶酶原激活作用的增强 ,但NSPmRMA表达存在差异     

血栓调节蛋白和纤溶酶原激活物抑制物-1在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)常见而严重的并发症之一,其病理特征为肾小球基底膜增厚、系膜内玻璃样物质增生、内皮细胞损伤与激活。DN患者肾脏局部纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达增多,抑制了肾小球和肾小管间质细胞外基质(ECM)的降解,导致ECM进行性堆积,肾小球基底膜增厚,肾小球硬化。DM并发微血管病变尤其是DN时,血浆血栓调节蛋白(PTM)水平显著升高。内皮损伤伴随DN的整个发展过程,它的出现甚至早于DN微量白蛋白尿的出现。测定PAI-1、TM水平对早期诊断、早期治疗DN有重要临床意义。     

激动素通过抑制纤溶酶原激活物抑制因子1减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

目的研究激动素对博莱霉素A5（BLM-A5）诱导的大鼠肺纤维化的干预作用。方法雌性Wistar大鼠60只随机分为对照组、模型组和治疗组,每组20只。模型组与治疗组大鼠经穿刺向气管内注入BLM-A5（5mg／kg）,对照组在相同条件下注入等体积生理盐水。治疗组于灌注BLM-A5的第1d开始腹腔注入0．5％激动素（0．5mL／100g）,每日1次。分别于第3、7、14、28d处死大鼠,取肺组织病理切片行HE及Masson染色观察肺部炎症和纤维化情况,ELISA方法检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织和血浆中尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）、组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、PAl．1含量。结果模型组第7d肺泡炎最明显,到28d时肺纤维化最严重;治疗组肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组显著减轻,但仍较对照组严重（P〈0．05）。模型组第7d时HYP含量开始升高,28d最高;各组变化趋势与肺纤维化变化相一致。模型组肺组织u-PA在第3d开始下降,至7d时最低,14d仍显著低于其他两组（P〈0．05）,28d时三组间无明显差异（P〉0．05）。模型组血浆u-PA水平在第3d开始下降,至7d时最低,与其他两组比较有显著差异（P〈0．05）,14d后三组之间无明显差异（P〉0．05）。三组t-PA在肺组织和血浆中的含量变化与u-PA基本一致,但在14d时模型组血浆t-PA含量仍较对照组显著降低（P〈0．05）。模型组肺组织PAI-1在第3d开始升高,至7d时最高,14d时仍显著高于其他两组（P〈0．05）,28d时三组之间无明显差异（P〉0．05）;治疗组肺组织PAI-1水平较模型组下降（P〈0．05）,但仍高于对照组（P〈0。05）,至14d时无显著差异（P〉0．05）。模型组血浆PAI-1在第3d开始升高,至7d时最高,显著高于其他两组（P〈0．05）,但14d后三组间无明显差异（P〉0．05）。结论激动素通过抑制肺组织PAI-1生成,使u-PA、t-PA含量升高,减轻了博莱霉素A5所致的大鼠肺纤维化。     

Western blot法检测人脑胶质瘤中组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂-1的表达

目的:研究人脑胶质瘤组织中组织型纤维蛋白溶解酶原激活剂(tPA)及其抑制剂-1(PAI-1)的表达,旨在了解其与人脑胶质瘤恶性生物学行为间关系,探讨其在人脑胶质瘤中的作用及其临床意义。方法:采用增强化学发光蛋白印迹法,测定人脑胶质瘤手术切除标本41例和颅脑外伤10例正常脑组织标本中的tPA及PAI-1蛋白表达水平。结果:tPA蛋白在高级别脑胶质瘤中呈低表达,在低级别的人脑胶质瘤中呈高表达,而正常脑组织中亦有表达。正常脑组织和低、高级别脑胶质瘤组间表达的差异无统计学意义(P>0.05)。tPA蛋白表达与脑胶质瘤病理级别间无明显相关性(P>0.05)。PAI-1蛋白则随着脑胶质瘤级别升高表达水平逐渐升高,而在正常脑组织中水平极低甚至不表达。正常脑组织组、低级别组脑胶质瘤及高级别组间表达差异有统计学意义(P<0.05);PAI-1蛋白表达水平与脑胶质瘤病理级别间呈正相关(P<0.05)。结论:PAI-1蛋白的高表达反映脑胶质瘤恶性生物学行为;tPA蛋白高表达可能是人胶质瘤组织分化良好的表现。     

vWF、PAI-1与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病发生时,体内凝血及纤溶功能会发生一系列变化。血管性假性血友病因子(vWF)作为凝血功能的指标,是血管内皮细胞损伤的标志物。纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的水平能反映纤溶活性。糖尿病并发微血管病变尤其是糖尿病肾病时,两者的水平显著升高。vWF、PAI-1与糖尿病肾病关系的研究对于认识糖尿病肾病的发生机制及对糖尿病肾病的诊断和治疗有重要的临床意义。     

冠心病患者血浆纤溶指标的临床检测

目的:观察不同类型冠心病患者血浆纤溶活性水平的变化,并探讨其临床意义.方法: 回顾性分析本院222例冠心病患者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平.患者分3组:①稳定型心绞痛(SA组)65例;②不稳定型心绞痛(UA组)42例;③急性心肌梗死(AMI组)115例.另选90例健康体检者为对照组.纤溶指标测定采用酶联免疫分析方法.结果:①血浆t-PA抗原浓度:AMI组t-PA浓度中位数(3.28ng/mL)分别显著高于对照组(2.29 ng/mL,P=0.000)、SA组(2.47 ng/mL,P=0.002)和UA组(2.57 ng/mL,P=0.006).SA组、UA组、对照组之间两两比较差异无统计学意义(P均＞0.1).②血浆PAI-1活性水平:AMI组(38.06 U/mL)和UA组(55.61 U/mL)均显著高于对照组(24.63 U/mL)和SA组(30.33 U/mL),P均＝0.000;UA组高于AMI组(P=0.048);SA组与对照组差异无统计学意义(P=0.433).③血浆PAI-1/t-PA比值:UA组(21.47)显著高于对照组(9.07)、SA组(10.90)和AMI组(12.48),P均=0.000;AMI组明显高于对照组(P=0.001),但与SA组比较差异无统计学意义(P=0.091);SA组与对照组差异无统计学意义(P=0.338).结论:PAI-1升高导致的纤溶活性下降是急性冠状动脉综合征(ACS)患者血栓形成的一个重要因素,测定血浆PAI-1和t-PA,并计算P/T比值,有助于判断患者纤溶功能状态、甄别ACS和不同类型冠心病.     

t-PA,PAI-1在脑梗死、脑出血病患者中的检测及临床意义

目的研究纤溶指标组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶激活物抑制物-1（PAI-1）抗原含量在脑梗死（CI）、脑出血（CH）患者血浆中治疗前后的变化及其临床意义。方法：用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）分别检测30例CI、20例CH患者血浆t—PAPAI—1的抗原含量水平治疗前后的含量变化。结果①与对照组比较：CI患者组t-PA．PAI—1抗原含量水平均高于对照组（P〈0．05）；CH组t—PA高于对照组（P〈0．05），PAI-1低于对照组（P〈0．05）。②治疗后的比较：血浆t-PA水平在CI和CH两组治疗前、后的变化均无统计学意义（P〉0．05）；血浆PAI-1抗原含量在CI组患者治疗后明显低于治疗前（P〈0．05），而在CH组患者治疗后是增高的（P〈0．05），治疗后两组的PAI-1抗原含量水平均与对照组无差异。结论t-PA抗原含量水平在脑梗死组、脑出血组患者均升高。PAI-1抗原含量水平在脑梗死组患者升高，在脑出血组降低，可作为判断病情严重程度、预后与复发及判断病程、病期的参考指标。     

川芎嗪对土三七诱导的肝小静脉闭塞病小鼠肝组织中PAI-1表达的影响

 目的 探讨川芎嗪对土三七诱导的肝小静脉闭塞病小鼠肝组织中纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）表达的影响。方法 115只昆明小鼠随机分为土三七组(A组,30只) 、低剂量川芎嗪干预组(B组,30只)、高剂量川芎嗪干预组(C组,30只）和正常对照组 (D组,25只)。A组给予土三七浓缩煎液灌胃(30 gkg-1d-1),B组给予土三七浓缩煎液(30gkg-1d-1)+川芎嗪(100 mgkg-1d-1)灌胃,C组给予土三七浓缩煎液(30 gkg-1d-1)+川芎嗪(200 mgkg-1d-1)灌胃,D组给予PBS( 30 mLkg-1d-1)灌胃,30 d后处死小鼠。留取肝组织行HE和Masson染色并检测血清中ALT、AST、ALB、TBIL、DBIL的水平。采用免疫组化法检测肝组织中PAI-1蛋白的表达。结果 土三七组中有24只小鼠成模,其肝功能（ALT、AST、TBIL、DBIL、ALB）较正常对照组有明显异常（P<0.05）,PAI-1蛋白表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）;不同剂量川芎嗪干预组小鼠肝功能（ALT、AST、TBIL、DBIL、ALB）较土三七组均有所改善, 其差异有统计学意义（P<0.05）,PAI-1蛋白表达水平显著低于模型组（P<0.05）,其中以高剂量干预组改善较为明显（P<0.05）结论 川芎嗪干预能有效防治肝小静脉闭塞病（HVOD）,以高剂量（200 mgkg-1d-1）疗效更为确切。其可能的机制是通过下调PAI-1表达,阻止凝血系统活化,从而有效防治HVOD。