气虚血瘀型肺间质纤维化大鼠模型建立及HGF和CTGF的动态表达

目的:探索气虚血瘀型肺间质纤维化(PIF)大鼠模型的建立方法和评价体系,并观察肝细胞生长因子(HGF)和结缔组织生长因子(CTGF)的动态表达。方法:采用力竭游泳+高脂饮食+气管内推注博来霉素(空白组常规饲养+气管内推注生理盐水),选取SPF级Wistar大鼠80只,雌雄各半,随机抽取15只为空白组,剩余65只进行证候造模。通过证候评分选取45只造模成功大鼠,给予气管内推注博来霉素,并随机分为3组(7天组、14天组和28天组)。观察模型大鼠一般情况、肺系数及HE、Masson染色等方面的变化,并通过ELISA、荧光定量PCR法检测大鼠血清及肺组织中HGF、CTGF的表达。结果:气虚血瘀型大鼠造模各时间段模型组大鼠均出现不同程度的气虚血瘀症状,且程度随造模时间延长而逐渐加重,较空白组差异显著(P 0. 01),其中模型组大鼠第10天气虚血瘀评分为Ⅰ度;第20天评分为Ⅱ度;第30天评分为Ⅲ度。肺组织病理损伤及肺纤维化程度较同期对照组评分均明显增高(P 0. 01)。与对照组比较,同期气虚血瘀PIF模型组大鼠血清及肺组织HGF的表达明显降低(P 0. 01),且与纤维化程度成正比,模型组HGF的表达逐渐降低,其中模型28天与模型7天比较,有统计学差异(P 0. 05)。与对照组比较,同期气虚血瘀PIF模型组大鼠肺系数、血清及肺组织CTGF的表达明显增高(P 0. 01,P 0. 05),且与纤维化程度成反比。结论:力竭游泳+高脂饮食+气管内推注博来霉素法建立气虚血瘀型PIF大鼠模型方法可行,HGF的表达与纤维化程度呈正相关,而CTGF则反之。     

芪术合剂对肺纤维化大鼠TGF-β1表达及肺组织形态的影响

目的:观察芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的干预作用及其机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗3、7、21天分批处死各组大鼠,每次每组6只。观察肺组织TGF-β1的表达和病理变化。结果:模型组在不同时段TGF-β1表达较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂组和强的松组经干预后肺泡炎和肺纤维化有所减轻。结论:中药芪术合剂具有显著抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用,抑制TGF-β1的表达是其可能的机制之一。     

芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化白介素-8和转化生长因子-β1的影响

目的探讨中药芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组,经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗后第3、7、21日分批处死大鼠,每组每次6只;用免疫组化法观察肺组织转化生长因子-β1的表达,并测定支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞和白介素-8的水平。结果在第3、7、21日模型组IL-8和TGF-β1表达均较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂第3日组高于同期强的松组,而第7、21日则明显低于强的松组。结论早期应用芪术合剂可抑制IL-8和TGF-β1的产生,从而预防和阻止实验性大鼠肺纤维化的形成。     

气虚血瘀证卵巢癌大鼠的预后及其与肿瘤新生血管形成的相关性

目的探讨气虚血瘀证卵巢癌大鼠的预后与肿瘤新生血管形成的关系。方法以DMBA卵巢埋线法建立大鼠卵巢癌模型50只为对照组,以大黄芒硝合剂小剂量间断灌胃结合DMBA建立气虚血瘀证卵巢癌模型50只。在造模35周后剖腹,观察肿瘤形成率、腹腔转移率、腹水发生率。取卵巢癌组织,以免疫组化方法检测VEGF、MVD表达。结果气虚血瘀组卵巢癌大鼠的腹水率显著高于对照组(P<0.05),肿瘤形成率及转移率也高于对照组,但无统计学差异。气虚血瘀组大鼠的VEGF、MVD表达均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且有腹水发生及转移者的表达显著增强。结论气虚血瘀证卵巢癌大鼠较普通模型大鼠的腹水发生率增加,预后不良,可能与气虚血瘀证的形成导致缺氧,促进了大鼠的肿瘤血管生成有关。     

慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型的建立

[目的】采用病证结合的造模方法建立慢性阻塞性肺疾病（以下简称慢阻肺）痰瘀阻肺证大鼠模型。【方法】利用强迫游泳、烟熏、低氧环境耗伤肺气,使其肺气虚,引起痰饮瘀血内停,建立慢阻肺痰瘀阻肺证大鼠模型。4周后测大鼠肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察。[结果】模型大鼠的症状、肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察符合慢阻肺痰瘀阻肺证的表现。[结论】实验采用复合因素造模方法复制的慢阻肺痰瘀阻肺证模型符合中医学和现代医学原理,具有时间短、易复制、可操作性强的特点,亦符合临床的实际情况。     

慢性心衰气虚血瘀证大鼠模型的研究初探

目的该研究旨在探索慢性心衰气虚血瘀证大鼠模型。方法选择Wistar雄性大鼠100只,开胸行左冠脉主干结扎术后缝合。将造模成功大鼠20只设为模型组,第2周开始减食喂养,每天让大鼠游泳1次;正常组为10只大鼠。4周后观察一般状态,测左室心功能和肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血栓素B2(TXB2)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)及心脏结构的变化。结果动物一般状况观察:模型组倦怠,黄白色口唇,舌质黯、瘀斑,呼吸、心率加快。心功能和血液指标测定:模型组与正常组比较,P<0.01。心肌组织形态学观察:模型组心肌细胞核固缩,异染色质呈块团状,可见核仁,肌原纤维排列紊乱、断裂及缺失,各带难以分辨,肿胀,空泡化,闰盘间隙增宽,紧密连接及桥粘连接消失。结论慢性心衰气虚血瘀证模型大鼠符合中医气虚血瘀证。     

鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血CTGF表达的影响

目的：探讨鳖甲煎丸对肺纤维化模型大鼠外周血结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：SD大鼠50只随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、鳖甲煎丸中剂量组、鳖甲煎丸高剂量组,采用博莱霉素气管内注入制备肺纤维化模型,造模后各组分别用生理盐水、西药、中药灌胃,第3、14、28天乙醚麻醉后毛细玻管眼眶静脉丛采血,ELISA法检测CTGF表达明显减少,与模型对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。结果：模型对照组外周血中CTGF表达明显增加,第14天鳖甲煎丸中、高剂量组外周血CTGF的表达。结论：鳖甲煎丸可抑制肺纤维化模型大鼠外周血CTGF的表达,可能是抗肺纤维化作用的机制之一。     

参芎颗粒对脑缺血大鼠海马神经再生及空间学习记忆的影响

[目的]建立气虚血瘀型脑缺血大鼠模型,观察具有益气活血功效的参芎颗粒对模型大鼠海马齿状回区神经细胞的增殖、分化、存活及空间学习记忆能力的影响。【方法】将大鼠分为假手术组、脑缺血（气虚血瘀证）模型对照组、参芎组、人参组、川芎组,每组20只,运用BrdU掺人法、免疫组织化学、Morris水迷宫测试法来观察参芎颗粒对脑缺血大鼠神经细胞增殖、分化、存活和空间学习记忆的影响。【结果】脑缺血可使海马齿状回颗粒下层新生细胞增多,参芎颗粒不能促进脑缺血大鼠新生细胞的增殖（P〉0．05）。但与脑缺血组比较,可以明显提高新生细胞的存活率,增加新生神经元数目（P〈O．01）,显著缩短模型大鼠找到水下平台的潜伏期（P〈0.01）,并优于人参组和川芎组（P〈0．01）。【结论】参芎颗粒（益气活血法）可促进气虚血瘀型脑缺血大鼠新生神经细胞的存活和向神经元定向分化,进而改善空间记忆功能,效果优于人参颗粒（益气法）和川芎颗粒（活血法）。     

活血药对肺纤维化模型大鼠肺组织超氧化物歧化酶和谷胱甘肽表达的影响

目的:探讨活血化瘀类中药对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型肺组织病理变化及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)表达水平的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠32只,随机数字表法分为四组:对照组、模型组、中药组、泼尼松组,采用气管内滴入博来霉素的方法制作肺纤维化模型。造模后第2天起,对照组及模型组予以生理盐水灌胃,中药组以丹参、川芎水煎液灌胃,泼尼松组以泼尼松混悬液灌胃。28 d后处死各组大鼠,光镜下观察各组大鼠肺组织病理变化,化学荧光法测定大鼠血清中SOD、GSH表达水平。结果:模型组大鼠血清SOD含量较其他组明显降低(P0.01),中药组较对照组略低(P0.05),中药组较泼尼松组无明显差异;模型组大鼠血清GSH水平较其他三组明显降低(P0.01);中药组、泼尼松组较对照组GSH水平偏低(P0.01)。结论:活血化瘀中药丹参和川芎可以提高肺纤维化模型大鼠血清SOD、GSH,减轻博莱霉素诱导的肺泡炎症和肺纤维化程度。     

从血液流变学看多因素复合制作气虚血瘀脑缺血动物模型

目的:研究多因素复合对气虚血瘀脑缺血动物模型血液流变学的影响。方法:采用饥饿、游泳、寒湿、高脂饮食等方法进行中医造模及运用西医解剖学理论造模,将大鼠随机分为三组:正常组、假手术组、模型组。结果表明:本实验结果表明运用多因素复合制作气虚血瘀脑缺血动物模型确实能使模型组动物的血液粘度异常增高(P<0.05)。     

痹祺胶囊治疗血栓性浅静脉炎34例临床观察

【目的】研究痹祺胶囊治疗血栓性浅静脉炎的临床效果。【方法】选取病例共计34例，中医辨证分为湿热、血瘀、气虚血瘀3型，均服用痹祺胶囊。【结果】湿热型中痊愈例数较多，占63．6％；血瘀型、气虚血瘀型则起效较慢，痊愈例数较少。【结论】痹祺胶囊治疗血栓性浅静脉炎疗效较高，用药安全，值得进一步观察使用。     

少腹逐瘀汤对寒凝血瘀型原发性痛经大鼠活血作用研究

[目的]以少腹逐瘀汤全方及其中活血化瘀、温经止痛组分为研究对象,考察少腹逐瘀汤组方配伍对寒凝血瘀型原发性痛经大鼠的活血作用。[方法]制备寒凝血瘀型原发性痛经大鼠模型,分为空白组、模型组、阿司匹林组、少腹逐瘀汤全方组(全方组)、少腹逐瘀汤活血化瘀组(活血组)、少腹逐瘀汤温经止痛组(温经组),连续给药7 d,检测各组大鼠子宫血流量、血液流变学(血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞电泳指数、红细胞变形指数)、凝血功能[凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)]、血栓素(TXA2)、前列环素(PGI2)水平,评价组方配伍的合理性。[结果]与模型组比较,全方组、活血组、温经组大鼠子宫血流量显著降低,血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞电泳指数、红细胞变形指数均降低,PT、TT、APTT均延长,FIB降低,TXA2降低,PGI2升高。[结论]少腹逐瘀汤对寒凝血瘀型原发性痛经大鼠有显著的治疗作用,活血组分和温经组分有显著的协同作用。     

消岩汤剂拆方配伍对MCF-7乳腺癌细胞生长及凋亡机制研究

[目的]观察消岩汤和各拆方组药物对MCF-7乳腺癌细胞增殖活性,促进凋亡的作用,与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合应用的效果。[方法]消岩汤全方和根据功效拆分的清热解毒组、活血化瘀组、解毒祛瘀组(清热解毒组+活血化瘀组)、益气扶正组和全方组。以噻唑蓝法(MTT)检测MCF-7乳腺癌细胞的细胞增殖活性,与5-Fu化疗药物联合作用的效果,用Hoechst33258法检测细胞的凋亡情况。[结果]各组均有不同程度地抑制细胞活性和促进凋亡,清热解毒组优于全方组优于解毒祛瘀组优于活血化瘀组优于益气扶正组,与5-Fu化疗药物合用表现出协同和相加作用。[结论]消岩汤在体外实验中能够抑制MCF-7乳腺癌细胞生长,促进凋亡,与5-Fu化疗药物合用有一定的化疗增效作用,清热解毒组药物在抑瘤和增效作用方面,与全方接近,提示清热解毒组中药为体外实验中全方抗肿瘤作用及化疗增效作用的有效组分。     

扎里奴思方对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠宏观表征、血液流变学及神经细胞凋亡相关机制的影响

目的:通过建立气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠模型,探讨回药扎里奴思方对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠宏观表征、血液流变学及神经细胞凋亡等相关机制的影响。方法:将170只SD大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,尼莫地平组,扎里奴思方高、中、低剂量组(29.2,14.6,7.3 g·kg-1);正常组、假手术组各10只,其余各组根据时间点分为3,7 d组,每组15只;除正常组外,其余各组均采用饥饿、疲劳、寒湿、惊恐及高脂饮食等多因素制备气虚血瘀型大鼠模型,于4周证候模型完成,给予大鼠ig给药4 d(正常组、假手术组及模型组给予等体积的生理盐水),复制局灶性脑缺血(MCAO)再灌注模型,观察各组大鼠的神经精神状况、体重、进食、舌质变化及排便情况;心脏取血进行血液流变学检测;原位末端转移酶标记法(TUNEL)法检测脑组织皮质区神经细胞凋亡情况。结果:与正常组比较,假手术组通过宏观表征的观察及血液流变学指标的检测,出现明显的气虚血瘀证候,说明证候模型复制成功;与假手术组比较,模型组在气虚血瘀的基础上出现明显的偏瘫样症状,神经功能评分显著升高(P0.01),全血黏度明显升高(P0.05,P0.01),红细胞变形性指数明显降低(P0.05)及红细胞聚集性指数和红细胞压积显著升高(P0.01),大鼠神经细胞凋亡较显著(P0.01);与模型组比较,扎里奴思方可显著改善气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠宏观表征,降低模型大鼠全血黏度、血红细胞压积、红细胞聚集性,提高红细胞变形性,并抑制脑组织细胞凋亡,尤以扎里奴思方高剂量7 d组作用显著(P0.05,P0.01)。结论:扎里奴思方对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠损伤具有良好的保护作用,其机制可能与改善模型大鼠血液流变学、抑制脑组织神经细胞凋亡密切相关。     

体外高频热疗联合中医辨证治疗气虚毒瘀型晚期非小细胞肺癌的临床研究

[目的]观察体外高频热疗联合消岩汤对气虚毒瘀型晚期非小细胞肺癌(ⅢB期、Ⅳ期)患者生活质量的影响。[方法]将40例气虚毒瘀型晚期非小细胞肺癌患者,随机分为联合治疗组(接受体外高频热疗联合口服消岩汤治疗)、中药治疗组(单纯接受口服消岩汤治疗),两组均连续治疗60 d。治疗前后评定中医证候、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、癌症患者生存质量测定量表(EORTCQLQ-LC43)及癌症治疗功能性量表(FACT-L)评分。[结果]两组间治疗后比较,联合治疗组的中医症候评分提高水平较中药治疗组明显(P<0.05),联合治疗组在EORTCQLQ-LC43量表中的躯体领域、情感领域的改善程度上较中药治疗组改善明显(P<0.01),在疼痛改善情况上较中药治疗组明显(P<0.01)。而联合治疗组在FACT-L量表中的躯体状况、社会/家庭情况、功能情况、量表总分均较中药治疗组明显提高(P<0.01)。[结论]体外高频热疗联合中医药治疗能提高气虚毒瘀型晚期非小细胞肺癌患者中医症状及生存质量,在躯体、情感、疼痛症状的改善程度方面有明显优势。     

慢性丙肝不同肝纤维化程度中医证候相关分析

[目的]探讨不同肝纤维化程度的慢性丙型肝炎(CHC)患者中医证候表现及中医证素特点。[方法]对452例CHC患者进行中医证候调查,同时行瞬时弹性成像检测获取肝硬度值(LSM),评估患者肝纤维化程度。以LSM7.3～14.6 kPa为界分成3组:LSM7.3 kPa为无或轻微纤维化组;LSM 7.3～14.6 kPa为明显纤维化组;LSM14.6 kPa为严重纤维化组,用SPSS 19.0进行统计学分析。计量资料组间比较采用t检验、χ~2检验;计数资料组间比较采用秩和检验;中医症状、体征采取聚类分析法。[结果]纳入本研究患者390例,其中LSM7.3 kPa 244例;LSM 7.3～14.6 kPa75例;LSM14.6 kPa 71例。LSM7.3 kPa的CHC中医证候主要为肝郁脾虚;LSM 7.3～14.6 kPa的CHC中医证候除肝郁脾虚外,尚有血瘀肾虚;LSM14.6 kPa的CHC中医证候主要为气虚血瘀、肝肾阴虚。[结论]CHC轻度肝纤维化中医证候以肝郁脾虚为主;显著肝纤维化者中医证候以气虚血瘀及肝肾阴虚为主。     

芪参益气滴丸治疗心肌桥伴心绞痛患者的有效性研究

[目的]观察常规西药联合芪参益气滴丸治疗孤立性心肌桥伴心绞痛(气虚血瘀型)的临床疗效。[方法]将60例孤立性心肌桥伴心绞痛(气虚血瘀型)患者随机分为两组,分别给予常规西药治疗(对照组)、西药联合芪参益气滴丸治疗(观察组)各30例。治疗8周后,比较两组心绞痛症状改善、西雅图心绞痛量表(SAQ)评分、气虚血瘀证积分和动态心电图结果。[结果]观察组心绞痛症状改善总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组西雅图心绞痛量表评分升高,气虚血瘀证积分下降,与自身治疗前及对照组治疗后比较均有统计学差异(均达到P0.05)。观察组动态心电图检查显示缺血型ST段变化的次数、最长持续时间、心肌缺血总负荷均下降,与自身治疗前及对照组治疗后比较均有统计学差异(均达到P0.05)。[结论]芪参益气滴丸能提高孤立性心肌桥伴心绞痛(气虚血瘀型)患者的临床疗效。     

基于因子分析的高血压患者中医证候探讨

[目的]探讨高血压患者的中医常见证型、证候要素及复合证型的分布情况。[方法]采用问卷调查的形式,搜集不同地区的高血压患者,经数据清洗后得到787例有效问卷,经统计患者的症状出现频次,将53个全身症状和舌象、脉象的四诊信息进行因子分析,得出高血压患者的证候要素、病位、舌脉等信息。结合两者的情况进行复合证型的判断,总结出患者的实际证型分布及常见复合证型的特征。[结果]四诊信息出现频次大于50%的有18个。因子分析提取16个公因子后,分析高血压患者证候要素,病性包括:火热、痰湿、瘀血等。病位以肝为主,涉及肾、心、脾胃等脏腑。中医证型主要以肝阳上亢证、肝肾阴虚证、气虚血瘀证等为主。复合证型多为虚实夹杂,兼夹痰浊、瘀血等。[结论]高血压患者以阴虚阳亢证、气虚血瘀证、肝火上炎证为主,与肝肾有密切关系。     

促排合剂对肾阳虚排卵障碍模型大鼠生殖调控机制研究

[目的] 探讨促排合剂对肾阳虚排卵障碍模型大鼠生殖内分泌功能影响的作用机制。[方法] 本实验以60只雌性SD健康大鼠为研究对象,选择目前应用最多的肌注氢化可的松的方法来制备肾阳虚排卵障碍大鼠模型,模型制备成功后,按照随机数字表法随机分为6组,每组10只,分别建立空白对照组、模型对照组、氯米芬阳性组、促排合剂低、中（正常）、高剂量组。空白对照组每日灌服生理盐水1 mg/100 g,促排合剂组按等效剂量0.5、1、2倍作为低、中、高剂量组给药剂量标准给药15 d,氯米芬阳性组大鼠剂量为4.5 mg/kg,模拟人的月经周期,在15 d的治疗期（3个性周期）,每个性周期的前2 d给药,后3 d停药。各组干预15 d后,动情期处死大鼠。处死前观察并记录大鼠动情周期变化,测定不同组大鼠体质量及脏器质量系数,检测下丘脑-垂体-卵巢轴（HPO轴）、下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）相关激素和氧化应激反应相关因子水平变化。[结果] 氯米芬阳性组、促排合剂低、中、高剂量组大鼠体质量均显著高于模型对照组水平（P<0.05）;氯米芬阳性组、促排合剂低、中、高剂量组大鼠各脏器质量系数均显著高于模型对照组水平（P<0.05）;氯米芬阳性组、促排合剂低、中、高剂量组大鼠血清孕酮（P）、促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和血清雌二醇（E2）含量水平均显著低于空白对照组水平,而均显著高于模型对照组水平（P<0.05）;氯米芬阳性组、促排合剂低、中、高剂量组大鼠血清肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质醇（COR）含量水平均显著低于空白对照组水平,然而均显著高于模型对照组水平（P<0.05）;氯米芬阳性组、促排合剂低、中、高剂量组大鼠血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）含量水平均显著低于空白对照组水平,丙二醛（MDA）含量水平显著高于空白对照组水平,然而T-SOD和CAT含量水平均显著高于模型对照组水平,且MDA含量水平显著高于模型对照组水平（P<0.05）。[结论] 促排合剂可通过改善下丘脑-垂体-靶腺轴调节功能和缓解氧化应激反应的相关机制,促进肾阳虚大鼠生殖功能的改善和生殖器官的发育,为该制剂的临床推广提供了一定的药理学依据。