槐果碱对CCI致神经病理性疼痛小鼠氧化应激水平及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的:探讨槐果碱缓解坐骨神经慢性缩窄性损伤(Chronic constriction injury,CCI)致神经病理性疼痛的抗氧化应激和抗凋亡机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为:假手术组(sham)、神经病理性疼痛模型组(CCI)、普瑞巴林阳性药对照组(CCI+Pre10 mg/kg)及槐果碱组(CCI+SC 40、20、10 mg/kg),共6组,每组10只小鼠。采用CCI法建立小鼠神经病理性疼痛动物模型,于术前d1、术后d7(给药前d1)及给药后1、3、5、7 d测定小鼠热刺激缩足反应潜伏期及冷缩足反射次数;采用生化法测定槐果碱对CCI小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC及MDA水平的影响;采用RT-PCR和Western blot法检测槐果碱对CCI小鼠脊髓组织Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响。结果:与假手术组比较,CCI模型组小鼠术后PWTL显著缩短,CWT明显增多;小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC水平降低、MDA含量增多、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达上调、Bcl-2 mRNA及蛋白表达下调;与CCI模型组比较,槐果碱40 mg/kg组小鼠PWTL延长,CWT减少;小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC水平升高、MDA含量减少、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达下调、Bcl-2 mRNA及蛋白表达上调。结论:槐果碱对CCI致小鼠神经病理性疼痛具有较好的缓解作用,其机制可能与其抗过氧化应激和抗神经元凋亡有关。     

苦参碱对神经病理性疼痛小鼠疼痛行为学的影响

目的:研究苦参碱对坐骨神经缩窄性损伤(CCI)诱导的神经病理性疼痛的镇痛作用。方法:建立慢性坐骨神经缩窄性损伤神经病理性疼痛模型,用Von Frey纤维丝、辐射热测痛仪、冷板法、运动协调和自主活动实验的方法测定不同剂量(7.5、15、30mg/kg)的苦参碱对CCI小鼠的机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射潜伏期(TWL)、抬足次数、在棒时间和自主活动次数的影响。结果:CCI小鼠从术后7d开始到本实验观察的14d表现出明显的机械性痛觉超敏、热痛觉过敏及冷痛觉超敏,与CCI组相比,ip给予苦参碱30和15mg/kg可提高小鼠损伤侧后足的机械缩足反射阈值;苦参碱30,15和7.5mg/kg可延长小鼠损伤侧后足的热缩足反射潜伏期,并呈现一定的剂量依赖性;苦参碱30,15和7.5mg/kg可减少小鼠损伤侧后足的冷缩足反射次数,并呈现一定的剂量依赖性;苦参碱30,15和7.5mg/kg对自主活动次数和在棒时间没有明显影响。结论:苦参碱对CCI诱发的神经病理性疼痛有良好的镇痛作用。     

氧化苦参碱对神经痛小鼠坐骨神经功能的修复作用研究

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对神经性疼痛小鼠坐骨神经功能的修护作用。方法:将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组(慢性坐骨神经结扎)和氧化苦参碱组;氧化苦参碱组小鼠腹腔注射OMT,150 mg/kg,给药7 d,假手术组和模型组小鼠腹腔注射生理盐水;Von Frey纤毛笔检测各组小鼠的机械缩足反射阈值;计算坐骨神经功能指数并测定其传导速度观测坐骨神经功能恢复情况;qRT-PCR法检测各组小鼠坐骨神经IL-1βmRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA的表达;ELISA法检测各组小鼠坐骨神经IL-1β、IL-6和TNF-α炎性因子的含量。结果:氧化苦参碱组小鼠机械缩足反射阈值、坐骨神经功能指数及其传导速度均明显高于模型组;氧化苦参碱组小鼠坐骨神经IL-1βmRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA表达及蛋白含量均显著低于模型组。结论:氧化苦参碱对慢性坐骨神经结扎小鼠坐骨神经的功能损伤有一定的修护作用,其作用机制可能为减轻炎症反应所致坐骨神经损伤。     

槐果碱通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路缓解完全弗氏佐剂致大鼠炎性痛作用机制

目的:探讨槐果碱缓解完全弗氏佐剂致大鼠炎性痛的PI3K/Akt/NF-κB信号通路机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组、炎性痛模型组、阳性药对照组(地塞米松0.3mg/kg)及槐果碱组(30、15、7.5 mg/kg)。于造模前1 d、造模后2 d(给药前1d)及给药后1、4、7 d,采用热辐射和Von Frey法分别测定大鼠热刺激缩足反射潜伏期(Paw withdrawal thermal latency,PWTL)与机械刺激缩足反射阈值(Paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);末次给药后24 h,取大鼠炎症部位组织,采用RT-PCR法检测PI3K、Akt及NF-κB mRNA表达水平,采用Western blot法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及NF-κB蛋白表达水平。结果:与模型组比较,给予槐果碱30 mg/kg后第4、7 d,使致炎性痛大鼠热刺激缩足反射潜伏期显著延长,机械刺激缩足反射阈值显著升高,可下调大鼠炎症部位组织PI3K、Akt及NF-κB mRNA和蛋白表达水平,降低p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平。结论:槐果碱对CFA所致炎性痛具有一定的缓解作用,其机制与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。     

升降散治疗大鼠神经病理性疼痛过程中p38 MAPK的变化

目的:本文主要探讨p38 MAPK通路在升降散治疗大鼠神经病理性疼痛中的作用。方法:将SPF雄性大鼠随机分为6组,分别为正常组、假手术组、模型组、升降散5.4g/kg、10.8g/kg、21.6g/kg剂量组,每组24只。建立大鼠右侧改良坐骨神经慢性缩窄性损伤模型,自术后第1d始,分别给予术后大鼠相应药物或生理盐水灌胃。于治疗第1天、第7天、第14天和第21天从各组随机取6只大鼠进行自发疼痛行为学评分、机械疼痛阈值测定及热痛阈值测定。随后处死大鼠,采用Western Blot检测脊髓组织中p38蛋白水平及磷酸化水平。结果:大鼠右侧改良坐骨神经慢性缩窄性损伤处理大鼠自发疼痛行为学评分显著高于正常组,热痛阈值和机械痛阈值显著降低,脊髓组织p38蛋白水平及磷酸化水平显著升高。说明大鼠右侧改良坐骨神经慢性缩窄性损伤模型构建成功,升降散随剂量依赖地降低自发疼痛行为学评分,提高热痛阈值和机械痛阈值,降低磷酸化P38蛋白水平,尤以21.6g/kg最显著。经归一化处理发现,升降散各组呈剂量依赖地降低p38磷酸化水平。结论:升降散能通过抑制p38 MAPK的磷酸化水平治疗大鼠神经病理性疼痛。     

槐果碱的镇痛抗炎作用研究

目的 对槐果碱的镇痛抗炎作用进行研究.方法 通过热板法和扭体法观察槐果碱的镇痛作用;采用二甲苯诱导小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致大鼠足肿胀法观察槐果碱的抗炎作用.结果 槐果碱能提高小鼠对热刺激的痛阈值,抑制醋酸所致的小鼠疼痛,表明其有镇痛作用;槐果碱能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀,表明其有抗炎作用.结论 槐果碱具有一定的中枢和外周镇痛作用,同时具有抗急性炎症作用.     

细辛水提物与尼莫地平合用的镇痛作用及其机制研究

目的 研究细辛水提物和钙通道拮抗剂尼莫地平合用的镇痛作用及其机制。方法 40只健康Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、细辛组、尼莫地平组和联合用药组,除对照组外其他各组大鼠均进行结扎坐骨神经制备神经病理性疼痛模型。各组大鼠手术后ig给药2周,细辛组大鼠给予细辛水提物（200 mg/kg,相当于细辛药材2 g/kg）,尼莫地平组大鼠给予尼莫地平（40 mg/kg）,联合给药组大鼠给予尼莫地平（40 mg/kg）30 min后给予细辛水提物（200 mg/kg）,对照组和模型组给予生理盐水。各组大鼠分别于手术前1 d及手术后第1、3、5、9、14 天给药30 min后分别测量热缩足潜伏期以及机械刺激缩足反射阈值。结果 各组大鼠手术前的热缩足潜伏期以及机械刺激缩足反射阈值的差异无统计学意义(P＞0.05),手术后各时间点模型组大鼠的热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均较对照组显著降低（P＜0.05、0.01）,细辛组和尼莫地平组大鼠的热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均从术后第5天起较模型组大鼠显著升高（P＜0.05、0.01）,联合用药组大鼠热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值从手术后第3天起均较模型组大鼠显著升高（P＜0.05、0.01）,从手术后第5天起均较细辛组和尼莫地平组高（P＜0.05、0.01）。联合用药组的镇痛作用强于细辛水提物和尼莫地平。结论 细辛水提物和尼莫地平合用具有镇痛作用。     

1-甲氧基钩吻碱抗慢性疼痛作用

目的 1-甲氧基钩吻碱对福尔马林足底注射所致炎性痛及小鼠坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛的作用.方法 建立小鼠福尔马林炎性疼痛模型,以注射福尔马林后l h内小鼠舔足时间为指标.观察1-甲氧基钩吻碱对炎性痛第二相痛反应的影响;建立小鼠CCI模型,于术后第3天至术后第9天sc 1-甲氧基钩吻碱,每天2次,连续7 d,以双足热痛缩足潜伏期比值为指标,观察1一甲氧基钩吻碱对小鼠足底热痛缩足潜伏期的影响.结果 1-甲氧基钩吻碱具有显著对抗小鼠福尔马林致炎性疼痛第二相痛反应作用,作用争剂量依赖性,ED50为4.59 mg/kg.1-甲氧基钩吻碱具有显著的抗CCI小鼠热辐射痛敏的作用,镇痛效应呈剂量依赖性;高剂量组小鼠给药后2 d显效,镇痛疗效持续至停药后36 h;术后第9天,1-甲氧基钩吻碱镇痛效应ED50为3.84 mg/kg.结论 1-甲氧基钩吻碱具有抗炎性疼痛作用与抗神经病理性疼痛作用.     

槐果碱及氧化槐果碱对小鼠的急性毒性

目的:探讨槐果碱及氧化槐果碱对昆明小鼠的急性毒性反应.方法:通过向昆明小鼠尾静脉注射不同浓度的槐果碱及氧化槐果碱溶液,观察并记录槐果碱及氧化槐果碱对小鼠的毒性反应.利用SPSS13.0统计学软件计算其对小鼠的半数致死量( LD50).结果:昆明小鼠对槐果碱及氧化槐果碱单次尾静脉注射LD50分别为63.94,250.37 mg·kg -1,二者95％可信区间分别为56.49～73.08 mg· kg-1,219.05～288.02 mg·kg-1.结论:槐果碱和氧化槐果碱单次尾静脉注射对昆明小鼠有一定的毒性,槐果碱的氧化产物毒性明显降低.     

槐胺碱镇痛抗炎作用及其机制研究

目的:研究槐胺碱(sophoramine,SA)的镇痛作用部位及机制。方法:采用小鼠醋酸扭体法、甩尾法和热板法及进一步观察CaCl_2和维拉帕米对槐胺碱镇痛作用的影响,观察用药后扭体反应数、甩尾潜伏期以及舔后足潜伏期的变化。采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察槐胺碱抗炎作用效果。结果:槐胺碱中高剂量组(30 mg/kg、60 mg/kg)均能显著减少小鼠冰醋酸致扭体次数,(P<0.01);槐胺碱中高剂量组(30 mg/kg、60 mg/kg)在0.5 h和1 h时小鼠甩尾的痛阈与其基础痛阈相比,有显著性差异(P<0.01);2 h痛阈与其基础痛阈相比,存在差异(P<0.05);热板实验,槐胺碱中高剂量组(30 mg/kg、60 mg/kg)15 min和30 min时均能显著提高小鼠舔后足潜伏期(P<0.05,P<0.01),最大的痛阈值出现在给药后45 min,与对照组比较差异显著(P<0.01)。槐胺碱中高剂量组(30 mg/kg、60 mg/kg)对二甲苯致小鼠耳肿胀都有明显抑制作用(P<0.01)。槐胺碱延长小鼠热板反应舔后足潜伏期的作用可被CaCl_2拮抗,而被维拉帕米增强。结论:槐胺碱具有镇痛抗炎作用,其镇痛作用机制可能与Ca~(2+)有关。