白首乌C-21甾体总苷对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与凋亡的影响

该研究旨在探讨白首乌C-21甾体总苷(TCSG)对人肝癌Hep G2细胞体外增殖、侵袭与凋亡的抑制作用及相关分子机制。实验分为空白对照组,TCSG 25,60,150 mg·L~(-1)组,阳性药物顺铂(DDP 1.33 mg·L~(-1))组。经过不同质量浓度的TCSG处理细胞后,采用CCK-8法检测TCSG对人肝细胞L-02与肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及线粒体膜电位的变化;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态的变化;Transwell小室模型分析TCSG对细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot法检测Hep G2细胞中Bcl-2,Bax,caspase 3,cleaved caspase 3及Cyt C(线粒体外)蛋白表达。与对照组相比,TCSG作用Hep G2细胞48 h后能显著抑制Hep G2细胞增殖,且呈浓度依赖性(P0.01),但对L-02肝细胞的增殖没有影响;经TCSG处理Hep G2细胞48 h后,细胞产生核皱缩,碎裂并呈半月形或圆形等凋亡形态;经TCSG处理后,Hep G2细胞迁移与侵袭能力显著下降,细胞G0/G1期阻滞(P0.01),线粒体膜通透性升高,线粒体膜电位显著降低(P0.01),凋亡率明显增高(P0.01);Western blot结果显示,TCSG处理Hep G2细胞48 h后,细胞内Bax,caspase 3,cleaved caspase 3,Cyt C蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达显著下降(P0.05,P0.01),Bax/Bcl-2比值逐渐增大(P0.01)。结果表明TCSG能明显抑制Hep G2细胞的增殖,迁移与侵袭,诱导Hep G2细胞凋亡,这可能与阻滞细胞周期进程,激活线粒体途径进而调控凋亡相关蛋白的表达有关。     

野艾蒿提取物对肝癌细胞系HepG2增殖的影响

目的探讨野艾蒿提取物对肝癌细胞系Hep G2增殖的影响及对肝癌细胞系Hep G2细胞内Bcl-2、Bax及Caspase-3基因表达的影响。方法给予不同浓度的野艾蒿提取物(0,200,400,800μg/m L)处理肝癌细胞系Hep G2 24,48,72 h,采用MTT法检测不同浓度的野艾蒿提取物对肝癌Hep G2细胞增殖的影响;用RT-PCR法检测肝癌细胞Hep G2中Bax、Bcl-2以及Caspases-3基因的表达情况。结果给予野艾蒿提取物400,800μg/m L处理72h后,Bax表达水平明显低于0μg/m L浓度(P<0.05);给予野艾蒿提取物800μg/m L处理24,48,72 h后,Bcl-2、Caspases-3基因表达水平均明显低于0μg/m L浓度(P均<0.05)。结论野艾蒿提取物对肝癌细胞系Hep G2的增殖有一定的抑制作用,其机制是野艾蒿提取物可抑制Bcl-2基因表达,上调Bax、Caspases-3基因的表达。     

肉桂醛诱导食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞凋亡作用及机制研究

目的探究肉桂醛对食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞增殖活性及凋亡的作用,并探讨其机制。方法 MTS实验检测不同质量浓度(1.88、3.75、7.50、15.00、30.00μg/m L)肉桂醛对Eca109细胞增殖活性的影响;倒置相差显微镜观察Eca109细胞形态学变化;流式细胞术检测不同质量浓度肉桂醛对Eca109细胞周期分布和凋亡的影响;Westernblotting检测不同质量浓度肉桂醛作用24h对Eca109细胞凋亡相关蛋白Caspase-3/Caspase-9、促凋亡蛋白Bax以及抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表达水平的影响。结果质量浓度为15.00、30.00μg/m L的肉桂醛作用Eca109细胞24 h后,与对照组相比,肉桂醛组细胞增殖活性显著降低(P0.05);经肉桂醛作用后,Eca109细胞呈现明显的凋亡形态学变化;经不同质量浓度肉桂醛处理Eca109细胞24 h后,G0/G1期细胞比例明显下降(P0.05),而G2/M期细胞比例明显增加(P0.05);肉桂醛处理Eca109细胞24h后,细胞凋亡率明显上升(P0.05);与对照组相比,经不同质量浓度肉桂醛处理24 h后,Eca109细胞中凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9出现明显的裂解片段(P0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表达水平显著降低(P0.05),而促凋亡蛋白Bax表达明显上调(P0.05)。结论肉桂醛可抑制食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与上调凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、促凋亡蛋白Bax表达,以及下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1表达有关。     

黄芪提取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制研究

目的:研究黄芪提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用不同浓度的黄芪提取物干预人胃癌SGC-7901细胞。MTT比色法观察黄芪提取物对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位;分光光度法检测细胞Caspase-3和Caspase-9活性;电泳法检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:黄芪提取物(25、50、100 mg/L)以剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞增殖,诱导其凋亡,并且降低线粒体膜电位;增加Caspase-3和Caspase-9活性,上调Bax蛋白表达的同时下调Bcl-2蛋白表达。结论:黄芪提取物可抑制人胃癌SGC-7901细胞体外增殖且通过线粒体途径诱导其凋亡。     

丹酚酸B对HaCaT细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的通过考察丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对人永生化细胞(HaCaT)增殖、凋亡及细胞周期的影响,探讨丹酚酸B治疗皮肤疣可能的作用机制。方法丹酚酸B给药不同浓度(3.125、6.25、12.5μmol·L~(-1))后,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期并量化凋亡细胞,Hoechst 33258 DNA染色,Western Blot检测Caspase3、Caspase9、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组相比,6.25、12.5μmol·L~(-1)Sal B组给药24、48 h能明显抑制细胞增殖(P0.01);6.25、12.5μmol·L~(-1)Sal B组给药24 h,能阻滞细胞停留于G0/G1期,且能诱导细胞凋亡(P0.01);3.125、6.25、12.5μmol·L~(-1)Sal B组明显上调Caspase3、Caspase9、Bax蛋白表达量、下调Bcl-2蛋白表达量(P0.05,P0.01)。结论丹酚酸B治疗皮肤疣的机制之一可能是抑制异常增生细胞增殖并诱导其凋亡,其作用可能与影响凋亡蛋白表达有关。     

西红花酸对阿霉素诱导大鼠心肌细胞损伤的影响

目的观察西红花酸对阿霉素诱导的大鼠心肌细胞损伤的影响,从线粒体角度探讨其作用机制。方法培养H9c2大鼠心肌细胞,阿霉素诱导建立心肌细胞损伤模型。细胞分为正常组、模型组(阿霉素10μmol/L)、西红花酸高剂量组(阿霉素10μmol/L+西红花酸20μmol/L)、西红花酸低剂量组(阿霉素10μmol/L+西红花酸10μmol/L),给药6 h后CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达,免疫荧光检测Caspase-8蛋白表达。结果与正常组比较,模型组H9c2细胞存活率降低(P0.01),细胞内ROS水平升高(P0.001),线粒体膜电位降低(P0.001),细胞凋亡率升高(P0.001),cleaved Caspase-3蛋白表达升高,cleavedCaspase-3/proCaspase-3比值升高(P0.01),Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,Bcl-2/Bax比值显著降低(P0.001),Caspase-8蛋白表达明显升高(P0.001);与模型组比较,西红花酸高、低剂量组H9c2细胞存活率显著升高(P0.01,P0.05),ROS水平显著降低(P0.001),线粒体膜电位升高(P0.001),细胞凋亡率降低(P0.01),cleaved Caspase-3蛋白表达降低,cleaved Caspase-3/pro Caspase-3比值降低(P0.001,P0.05),Caspase-8蛋白表达显著降低(P0.001),西红花酸高剂量组Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低,Bcl-2/Bax比值显著升高(P0.01)。结论西红花酸可保护阿霉素致心肌细胞损伤,其机制可能与保护线粒体、抑制细胞凋亡相关。     

黄连含药血清联合顺铂对人肝癌HepG2细胞增殖与线粒体凋亡途径的影响

目的:观察黄连配方颗粒含药血清单用及与顺铂联用对人肝癌Hep G2细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:制备含药血清,MTT法筛选黄连血清抑制Hep G2细胞增殖的最佳作用浓度,最佳浓度血清与不同浓度的顺铂配伍,观察抑制增殖的协同作用;在此基础上,采用高内涵分析(high content screening assays,HCS)技术检测两药联合应用后线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP)、细胞膜通透性、细胞核的变化,反映细胞凋亡情况,Western blot法检测线粒体凋亡通路相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果:黄连血清可降低Hep G2细胞存活率,且呈现一定的浓度依赖性,20%血清为最佳浓度血清;配伍顺铂后,抑制增殖作用较单用黄连、顺铂显著增强。0. 6 g/kg 20%黄连血清、96μmol/L顺铂及两药合用均可显著降低MMP、提高细胞膜通透性、并可使核固缩及核荧光强度增强、细胞数量下降,并可显著下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax及Caspase-3蛋白表达;且配伍应用组上述各指标较黄连血清组单用组相比改变更显著,配伍应用组MMP、膜通透性、细胞数量、Bcl-2蛋白表达水平与顺铂组相比改变更显著。结论:黄连血清能抑制Hep G2细胞增殖并且诱导细胞凋亡,与顺铂联用具有协同作用,其机制可能与激活线粒体凋亡通路有关。     

桂枝茯苓胶囊及其主要成分组合物抗子宫肌瘤细胞作用及其机制研究

目的:研究桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物(15个成分)对子宫肌瘤细胞抑制作用及其机制。方法:对子宫肌瘤细胞进行原代、传代培养及细胞鉴定。CCK-8法分析桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对人子宫肌瘤细胞抑制作用;检测细胞凋亡、线粒体膜电位、caspase-3活性,采用Western Blot法检测Bcl-2蛋白表达情况。结果:桂枝茯苓胶囊(212μg/ml)及活性成分组合物(48、24μg/ml)对子宫肌瘤细胞增殖有抑制作用。桂枝茯苓胶囊及组合物可诱导人子宫肌瘤细胞凋亡、引起人子宫肌瘤细胞线粒体膜电位的下降、子宫肌瘤细胞中Caspase-3活性明显升高,诱导人子宫肌瘤细胞中Bcl-2下调、Bax上调,Bcl-2/Bax比例下降。结论:桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对子宫肌瘤细胞有明显的抑制作用,其作用机制与诱导人子宫肌瘤细胞凋亡有关,该凋亡诱导作用与线粒体信号通路(膜电位下降、Bcl-2/Bax比率降低、Caspase-3活性增强)有关。     

人参皂苷CK抑制人结肠癌SW480细胞增殖的机制研究

目的研究人参皂苷CK对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法采用CCK-8法检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Hoechst染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C(CytC)释放以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3等的表达。结果人参皂苷CK对SW480细胞的增殖有显著抑制作用。人参皂苷CK诱导SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞发生早期凋亡。人参皂苷CK可以显著增加细胞内ROS水平,降低MMP水平;人参皂苷CK促进Bax和cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。此外,人参皂苷CK使SW480细胞内CytC大量释放。结论人参皂苷CK对SW480细胞的增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能是通过促进线粒体超氧化物升高,导致胞内ROS水平显著增加和MMP显著下降,进而导致CytC释放,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,最终导致细胞发生凋亡。     

参麦注射液对乳鼠心肌细胞线粒体凋亡通路的影响

目的:探讨参麦注射液对心肌细胞凋亡通路的影响。方法:原代培养心肌细胞,AngⅡ诱导凋亡。MTT法检测线粒体活性,流式细胞仪检测凋亡率及线粒体膜电位,免疫组化染色检测细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果:参麦注射液明显降低细胞凋亡率,增高线粒体活性和膜电位,升高Bcl-2蛋白表达,降低Bax、Caspase-3蛋白表达。结论:参麦注射液可抑制心肌细胞凋亡,其机制与线粒体凋亡通路密切相关。     

浅谈中医对睡眠呼吸障碍的认识及治疗

目的：唤醒广大中医工作者对睡眠呼吸障碍性疾病的认识和重视，从而投入到睡眠呼吸障碍性疾病的研究中来。方法：笔者将自己对该病的参悟，结合近十年来中医文献对于该病的概念、病因病机和治则治法等进行探讨。结论：中医研究睡眠呼吸障碍刚刚起步，尚存在很大的发展空间，中医临床工作者对此应予以关注，探索出更为有效的治疗方案来。     

论正胰腺脏位 还十二指肠腑名

长期以来,大凡认真研读过《黄帝内经》(以下简称《内经》)脏腑理论的中医学者,都会因文中既提"十二藏",又述"五藏六府",以及将一个不具备"藏而不泄"之"脏"功能的"心包"列于脏位。将无"满而不能实","传化物而不藏"之"腑"功能的"三焦"给以腑名,而时有困惑。近年来,随着糖尿病患者,胰腺癌患者及十二指肠球部溃疡等患者的大量涌现。胰腺和十二指肠作为脏腑功能的显现,越来越受到重视。笔者根据《内经》,关于脏与腑功能的界定标准,及现代解剖学,生化学所见,结合长期的临床实践之需求,提出了将人体"胰腺"取代无脏功能的"心包"以正其脏位。并将与胰腺有密切生理关系的十二指肠取代三焦,作为与胰腺相表里的腑。这样就将"五藏六府",正式升级为"六脏六腑"。即:肺与大肠、胰与十二指肠、心与小肠、脾与胃、肝与胆、肾与膀胱,以合《内经》"十二藏"之说。经过如此传承精华与守正创新,则可使《内经》的脏腑理论得以进一步完善。既符合了人体内客观真实的脏腑生理结构状况,而且对中医临床的脏腑辨证论治,提供了理论依据。     

宫颈阴道分泌液中IL-8、铜、锌含量与胎膜早破关系的研究

目的：对胎膜早破（PROM）孕妇宫颈阴道分泌液中基质金属白介素-8（IL-8）、微量元素（铜、锌）的含量与PROM的关系进行探讨。方法：选择足月初产胎膜早破孕妇40例（PROM组）和正常足月初产孕妇未破膜者40例（对照组）,分别用双抗体夹心ELISA法和溶出电极法测定阴道分泌液中IL-8和铜、锌的含量。结果：PROM组阴道分泌液中IL-8水平平均为657．20±83．33μg／ml,明显高于对照组421．54±22．35pg／ml,差异有显著性（P〈0．01）;PROM阴道分泌液中铜、锌的含量分别为2．18±1．57μg／L,0．45±0．17μg／L,均明显低于对照组3．67±2．07μg／L,0．72±0．36μg／L,差异有显著性（P〈0．01）。结论：PROM组孕妇阴道分泌液中IL-8含量明显升高,而铜、锌含量明显降低,对胎膜早破的早期诊断有一定帮助。     

探讨临床护理管理的任务、特点及意义

护理管理学是管理学科中的具体应用,属于专业领域管理学,是以提高护理质量和工作效率为主要目的的活动过程。世界卫生组织（WHO）指出：“护理管理是为了提高人们的健康水平,系统利用护士的潜在能力和有关人员、设备及社会活动的过程。”护理管理过程包括：资料收集、规划、组织人事管理、领导与控制的能力,在有效时间内做最经济有效的运用,为病人提供最优质的护理。护理管理可分为护理行政管理、护理业务管理和护理教育管理三个部分。     

从现代生殖医学角度探讨“肾藏精主生殖”理论

"肾藏精、主生殖"理论是祖国医学藏象学说的重要组成部分,是对人体生殖功能的基本认识。从现代辅助生殖医学理论角度出发,通过"人体生殖能力由肾精、天癸所主导;卵细胞的发生以肾精为基础,卵细胞的排出有赖于肾阳之鼓动;精子的发生以肾精为基础,精子的动力源于肾阳;子宫内膜容受性受肾精主控;胚胎质量及发育潜能由肾精决定"5个方面探讨了"肾藏精、主生殖"的理论,并为今后中医学生殖理论的研究拓展思路和空间。     

剖宫产术后的护理

剖宫产是指采用硬膜外或脊髓麻醉,切开产妇的腹壁及子宫壁取出胎儿、胎盘及附属物的手术,是解除孕产妇及胎儿危急状态的有效方法,它能降低孕产妇及围生儿的病死率,但剖宫产手术伤口大、创面范围广,容易发生产后并发症.所以术后护理就特别重要,不仅可以及时有效地促进患者的康复,还能减少并发症的发生.     

预防产后出血的措施及体会

目的：探讨产后出血的预防措施及体会。方法：回顾性分析我院1995．1-1999．1（3071例）和2000．1-2009．1（3071例）两组住院产妇的临床病例资料,统计产后出血的人数和发生率等数据并进行预防措施的比较。结果：前者产后出血人数39人,发生率为0．65％。后者产后出血人数39人,发生率为0．65％。结论：恰当的预防产后出血的措施是必要而有效的。     

刍议胸痹的命名、病位、病性、病机及治疗

胸痹为临床常见病、多发病,古今医者对其论述颇多。笔者温习经典,查阅今文,验于临床,再谈胸痹的命名、病位、病性、病机及治疗,以就正于方家。 1 命名 “胸痹”一词始见于《灵枢·本脏》:“肺大则多饮,善病胸痹、喉痹、逆气”,然对其内涵并无明确启示。迨至汉·张仲景在《金匮要略·胸痹心痛短气病脉证治》篇中始指出:“胸痹之病,喘息咳唾,胸背痛,短气,寸口脉沉而迟,关上小紧数”,并指出其病机为“阳微阴弦,即胸痹而痛”。然据其所述脉证与病机,与现代医学所称“冠心病”却不尽吻合。若冠心病患者,不合并慢性