平目汤含药血清对Graves眼病眼眶脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4蛋白表达的影响

目的研究平目汤对Graves眼病眼眶脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4蛋白表达的影响,探讨眼眶成熟脂肪细胞凋亡的机制。方法体外培养Graves眼病患者眼眶前脂肪细胞,传代并诱导其分化为成熟脂肪细胞。平目汤含药血清,配成终浓度分别为5%、10%、20%的平目汤低、中、高剂量组。采用MTT法检测前脂肪细胞增殖情况。Western blotting法检测平目汤对眼眶成熟脂肪细胞FAS、FAS L、CHOP及CASPASE-4蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,平目汤低、中、高剂量组的生长曲线显著下移,其中平目汤中剂量组活性下降趋势最明显。地塞米松组与空白对照组差异无统计学意义(P0.05)。相同的时间点与空白对照组比较,平目汤各组OD值均减小,其中以平目汤中剂量组降低最为明显,差异有统计学意义(P0.05)。(2)Western blotting结果显示:与空白对照组比较,除地塞米松组外,各组FAS、FAS L蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P0.05),其中FAS蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为低剂量组,FAS L蛋白表达以平目汤高剂量组最高,其次为中剂量组,但二者比较差异无统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,除地塞米松组外,平目汤各组CHOP、CASPASE-4蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P0.05),其中平目汤各组组间比较CHOP蛋白表达以高剂量组最高,其次为中剂量组;CASPASE-4蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为低剂量组。结论平目汤通过死亡受体途径和内质网途径诱导FAS、FAS L、CHOP、CASPASE-4活化,促进成熟脂肪细胞凋亡,进而减少眼眶脂肪细胞积聚,发挥治疗效果。     

平目汤用药大鼠血清介导Graves眼病眼眶脂肪细胞凋亡途径的研究

目的:通过原代培养人眼眶前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,研究平目汤促进眼眶脂肪细胞凋亡的作用及分子机制,探讨平目汤治疗非活动期Graves眼病发挥药效的可能作用靶点。方法:收集非活动期Graves眼病患者眼眶球后脂肪组织,共4例4只眼。通过组织块法对人眼眶前脂肪细胞进行分离和培养,观察细胞的形态,采用间接免疫荧光染色鉴定。诱导前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,油红O染色鉴定。制备平目汤含药血清,配成终浓度分别为5%、10%、20%的平目汤低、中、高剂量组。油红O染色观察平目汤对前脂肪细胞诱导分化的影响;MTT法检测平目汤对眼眶前脂肪细胞活力的影响;流式细胞术测定平目汤对眼眶成熟脂肪细胞凋亡率的影响;检测平目汤对眼眶成熟脂肪细胞fas、fas L基因和蛋白表达的影响。结果:(1)采用组织块法培养的细胞呈梭形,增殖旺盛,间接免疫荧光检测证实为前脂肪细胞,可诱导分化为成熟脂肪细胞。(2)MTT结果显示,平目汤各组均可降低前脂肪细胞活力,其中作用显著的是平目汤中剂量组,呈时间依赖性地降低细胞活力。(3)流式细胞术结果表明,与空白对照组比较,平目汤各组细胞凋亡率均升高(P0.05),其中平目汤中剂量组早期凋亡率和总凋亡率最高,其次为平目汤低剂量组。(4)与空白对照组相比,除地塞米松组外,平目汤各组对眼眶脂肪细胞的fas、fas L基因和蛋白的相对表达量较空白对照组均有一定程度的升高,其中平目汤中剂量组fas、fas L mRNA表达水平与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),Fas蛋白表达以平目汤中剂量组最高,其次为平目汤低剂量组,Fas L蛋白表达以平目汤高剂量组最高,其次为平目汤中剂量组,但二者比较差异无统计学意义。结论:平目汤降低眼眶前脂肪细胞的活力,抑制前脂肪细胞向脂肪细胞的分化能力,可能通过死亡受体信号途径诱导fas、fas L活化,促进成熟脂肪细胞凋亡,进而减少眼眶脂肪细胞积聚而发挥疗效。     

平目汤含药血清对非活动期Graves眼病眼眶脂肪细胞fas/fas L表达的影响

目的:通过观察平目汤含药血清对Graves眼病眼眶脂肪细胞fas/fas L表达的影响,探讨平目汤治疗非活动期Graves眼病的可能作用机制。方法:SD大鼠给予平目汤灌胃,2次/d,连续给药3 d后制备平目汤含药血清。体外常规培养眼眶脂肪细胞,实验分为空白对照组,地塞米松组(30μg/mL),平目汤低剂量组(5%)、平目汤中剂量组(10%)、平目汤高剂量组(20%)。干预12 h后采用RT-qPCR检测各组细胞的fas/fasL mRNA表达,干预48 h后Western Blot法检测各组细胞的fas/fasL蛋白表达。结果:与空白对照组比较,平目汤中剂量组fas mRNA的表达量升高(P0.05),平目汤各组fas L mRNA的表达量均升高(P0.05),地塞米松组无统计学差异(P0.05);与空白对照组相比,平目汤各组fas、fas L蛋白表达均上调,差异有统计学意义(P0.05),地塞米松组则无统计学差异(P0.05)。结论:平目汤治疗非活动期Graves眼病的作用可能与上调眼眶脂肪细胞fas/fas L的mRNA和蛋白表达有关。     

健心颗粒及拆方对心力衰竭大鼠细胞凋亡的影响

目的:探讨健心颗粒及拆方对慢性心力衰竭(CHF)心肌细胞凋亡的影响,为分析此方中医药组方原理和临床应用提供实验依据。方法:以老龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)的CHF模型作为研究对象,根据中医治法将健心颗粒拆分为益气组、活血组、温阳组和利水组,观察全方及各拆方组对CHF大鼠左室压力上升和下降最大速率(±dp/dtmax)、血管紧张素Ⅱ和凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果:健心颗粒全方及各拆方组均可以改善CHF大鼠心功能和下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达(P0.05或P0.01),全方组优于各拆方组;各拆方组间比较,益气组、利水组改善±dp/dtmax、抑制AngⅡ作用优于温阳组、活血组(P0.05);益气组、活血组下调Bax、上调Bcl-2蛋白表达作用优于温阳组、利水组(P0.05)。结论:在改善心功能、抑制AngⅡ水平和抑制心肌细胞凋亡方面,健心颗粒各拆方组作用略有侧重,而健心颗粒全方作用最全面、显著,说明益气、温阳、活血、利水四种治法配伍有协同作用。     

平目汤对格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞凋亡的影响

目的探讨平目汤对格雷夫斯眼病小鼠模型眼球后脂肪细胞凋亡的影响及作用机制。方法 BALB/c雌性小鼠随机分为模型组和平目汤低、中、高剂量组,每组15只。采用hTSHR重组质粒免疫BALB/c雌性小鼠建立格雷夫斯眼病小鼠模型。造模成功后,平目汤低、中、高剂量组分别按照7.75 g·kg~(-1)·d~(-1 )、15.5 g·kg~(-1)·d~(-1 )、31 g·kg~(-1)·d~(-1 )生药量灌胃干预,共灌胃8周。观察小鼠眼球后脂肪细胞凋亡情况,以及眼球后脂肪细胞Bax、Bcl-2、Fas、Fasl、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达情况。结果与模型组比较,平目汤各组眼球后脂肪细胞凋亡率均升高(P0.05);除平目汤高剂量组Caspase-12 mRNA外,其余各组Bax、FasL、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均升高(P0.05),以平目汤中剂量组更为明显。结论平目汤可有效促进格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞的凋亡,其凋亡途径可能为线粒体途径、死亡受体途径与内质网途径共同作用。     

健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达的影响

目的:观察健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-x L(B-cell lymphoma/leukemia-x L,Bcl-x L)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响。方法:建立裸鼠肠癌原位瘤模型,分为模型组,健脾益气组(15 g·kg-1),化瘀解毒组(15 g·kg-1),健脾消癌方组(全方组,15 g·kg-1),5-氟尿嘧啶组(5-Fu,20 mg·kg-1),共5组。分别予以相应药物干预4周,观察裸鼠体重、瘤体抑制率、转移率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3,Bcl-x L,Bax蛋白表达。结果:健脾益气组、全方组体重下降低于模型组(P0.05),化瘀解毒组体重下降高于模型组(P0.05);健脾益气组对瘤体的抑制与模型组比较无统计学差异,与空白组比较,化瘀解毒组、全方组对瘤体均有较好抑制作用(P0.05);各组均出现不同程度地转移,其中模型组、健脾益气组总体转移率达90%,化瘀解毒组、全方组转移率分别为70%,60%,低于模型组(P0.05);与模型组比较,化瘀解毒组及全方组能够上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3,Bcl-x L蛋白表达(P0.01)。结论:健脾消癌方中健脾益气组优势在于稳定体重,化瘀解毒组优势在于抑制肿瘤,抑制转移;全方组能够稳定体质量,抑制肿瘤,抑制转移,全方配伍疗效最优,其抗肿瘤机制可能是上调凋亡相关蛋白Bax及下调Caspase-3,Bcl-x L,诱导肿瘤细胞凋亡。     

眼血散及其拆方对兔积血导致增殖性玻璃体视网膜病变防治作用的比较研究

目的:观察比较以祛瘀化痰法组方的眼血散及其拆方防治积血所致增殖性玻璃体视网膜病变的作用及其作用机理。方法:采用玻璃体注血法造成双眼玻璃体积血模型,并随机分成模型对照组、眼血散全方(祛瘀化痰)治疗组、眼血散拆方(祛瘀、化痰)治疗组,观察各组玻璃体积血情况,检测玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果:祛瘀化痰(眼血散全方)组及祛瘀组、化痰组(眼血散拆方组)与模型组比较,玻璃体积血明显减轻,bFGF、IL-6含量亦明显降低,尤以眼血散全方组效果显著。结论:眼血散全方及其拆方均能有效清除玻璃体积血,降低玻璃体中bFGF、IL-6的浓度可能是其作用机制之一,全方组比拆方组效果更好。     

眼血散方对实验性玻璃体积血模型抗增殖作用的拆方研究

目的:观察眼血散方及其拆方防治积血所致增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的作用机理.方法:将24只日本大耳白兔随机抽取4只(8只眼)作为空白对照组,另20只(40只眼)造成双眼玻璃体积血模型,并随机分成模型对照组、眼血散全方(祛瘀化痰)治疗组、眼血散拆方(祛瘀)治疗组及拆方(化痰)治疗组,每组5只(10只眼).连续灌胃6周后,观察玻璃体积血情况,检测玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白细胞介素-6(IL-6)的含量.结果:祛瘀化痰组(眼血散全方)及祛瘀组(拆方)、化痰组(拆方)与模型组比较,玻璃体积血明显减轻;bFGF、IL-6含量亦明显降低,尤以眼血散全方组效果显著.结论:眼血散全方及其拆方均能有效清除玻璃体积血,降低玻璃体中bFGF、IL-6的浓度,对PVR的形成和发展具有抑制作用,而眼血散全方组比拆方组效果更好.     

回阳生肌散对糖尿病皮肤溃疡大鼠创面血管生成相关因子的影响

目的探讨回阳生肌散促进糖尿病皮肤溃疡大鼠创面愈合的可能作用机制。方法 56只SD大鼠随机分为对照组8只、模型组12只、全方组12只、温阳组12只和活血组12只。除对照组外其余各组采用"腹腔注射链脲佐菌素(STZ)-激素干预-皮肤缺损-塑料环埋置"方法制备糖尿病皮肤溃疡动物模型。对照组和模型组给予黄凡士林纱条,全方组给予回阳生肌散全方药纱条,将回阳生肌散方拆方为温阳益气方和活血生肌方,温阳组给予温阳益气方药纱条,活血组给予活血生肌方药纱条。各组每天给药1次,15天后检测创面新生肉芽组织中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达水平。结果模型组肉芽组织中VEGF、VEGFR-2、eNOS表达水平均明显低于对照组(P0.01),全方组VEGF表达水平明显高于模型组和活血组(P0.01),全方组VEGFR-2、eNOS表达水平明显高于模型组、温阳组和活血组(P0.01)。结论回阳生肌散可能通过提高创面肉芽组织中VEGF、VEGFR-2、eNOS的表达水平,促进创面愈合。     

眼血散方及其拆方对兔PVR玻璃体中IL-1β浓度的影响

目的观察比较以祛瘀化痰法组方的眼血散方及其拆方对兔眼积血的玻璃体中IL-1β的影响,探讨眼血散方防治玻璃体积血所致PVR的作用及其机理。方法用兔自体血注入玻璃体造成兔双眼玻璃体积血模型,设空白对照组、模型组、眼血散全方（祛瘀化痰）治疗组、眼血散拆方祛瘀治疗组及拆方化痰治疗组,6周后,观察玻璃体积血情况,检测玻璃体中白细胞介素-1β（IL-1β）的含量。结果祛瘀化痰组及祛瘀组、化痰组与模型组比较,玻璃体积血均明显减轻,IL-1β含量亦明显降低,尤以眼血散全方组效果显著。结论眼血散全方及其拆方均能有效清除兔眼玻璃体积血,降低玻璃体中IL-1β的浓度,对PVR的形成和发展具有抑制作用,而眼血散全方组比拆方组效果更好。     

早期针刺对颅脑损伤大鼠神经功能和Cleaved Caspases-3的影响

目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织Cleaved Caspases-3表达、脑组织病理形态和运动、感觉等神经功能的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组,各10只。模型组和针刺组应用PCI3000打击器撞击硬脑膜制备TBI模型;假手术组仅开颅暴露硬脑膜,不进行打击;空白组不做处理。造模后即对针刺组进行针刺治疗,每日1次,干预7 d。在治疗第2、4、7天应用改良神经功能评分(mNSS)和Rotarod test检测大鼠运动、感觉等神经功能损伤程度。第7天治疗结束后利用HE染色法观察脑组织病理形态改变,Western blotting法检测脑组织Cleaved Caspases-3蛋白表达。结果治疗第2、4、7天时与假手术组相比,模型组mNSS评分明显升高(均P <0.01),Rotarod test评分显著下降(P <0.01,P <0.01,P <0.05)。治疗第4、7天时,与模型组相比,电针组大鼠mNSS评分降低(均P <0.05),Rotarod test评分升高(P <0.05或P <0.01)。HE染色显示针刺组可观察到正常神经元,组织疏松和紊乱轻于模型组,整体情况好于模型组。模型组大鼠Cleaved Caspases-3蛋白表达量显著高于假手术组(P <0.01),针刺组表达量低于模型组(P <0.01)。结论针刺可以通过抑制脑组织内Cleaved Caspases-3的表达,减轻细胞凋亡达到修复脑组织和保护神经功能的疗效。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。