骨碎补对骨性关节炎家兔作用的实验研究

目的:观察骨碎补对骨性关节炎(OA)模型家兔的关节滑膜组织基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞组织形态以及细胞凋亡的影响,分析骨碎补在骨性关节炎治疗中的价值以及作用机制,从而为临床应用骨碎补治疗骨性关节炎提供依据。方法:将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补治疗组、硫酸氨基葡萄糖对照组,每组6只。用左后肢伸直位管型石膏固定的方法(固定6周),造成家兔膝骨性关节炎模型。造模后,骨碎补组按1.5 g/(kg·d)的剂量灌喂给予骨碎补,硫酸氨基葡萄糖组按70 mg/(kg·d)的剂量灌喂给予硫酸氨基葡萄糖,正常对照组和模型对照组同等剂量给予生理盐水。连续治疗4周后,检测MMP-3、TNF-α、IL-6、SOD、MDA。结果:骨碎补组和硫酸氨基葡萄糖组MMP-3mRNA、TNF-αmRNA、IL-6mRNA、SOD活力、MDA含量与模型组比较,表达水平明显下降,有统计学意义(P0.01)。骨碎补组和硫酸氨基葡萄糖组比较,有明显的差异(P0.01)。骨碎补组和硫酸氨基葡萄糖组滑膜细胞数均较多,高于正常组(P0.01),却明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。骨碎补组、硫酸氨基葡萄糖组的组间比较,差异有显著性(P0.01)。结论:骨碎补对膝骨性关节炎有比较明显的防治作用,其治疗效果优于硫酸氨基葡萄糖。     

骨碎补对实验性骨性关节炎的治疗作用

用形态学观察骨碎补对160只骨性关节炎模型大鼠的治疗作用。结果表明:骨碎补具有一定的改善软骨细胞的功能、推迟细胞退行性变、降低骨关节病病变率的治疗作用。     

骨碎补对模型兔膝骨关节炎关节滑膜细胞因子TNF-α影响的实验研究

目的:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测方法观察细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-αmRNA)的含量,探讨膝骨关节炎的发病机制,研究单味中药骨碎补通过治疗膝骨关节炎的作用机理,并加以讨论、分析。方法:将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为4组,空白组6只,模型组6只,治疗组(骨碎补组)6只,对照组(维固力组)6只。兔左后肢伸直位管型石膏固定6周后得到兔膝骨关节炎的模型。通过灌胃给药单味中药骨碎的补水煎浓缩液以及西药维固力的浓缩液4周。采用耳缘静脉空气栓塞方法处死各组动物,通过外科手术取下其患肢股骨髁(大小约1 cm×1 cm),并分离关节软骨,保留其滑膜,用Trizol液浸泡,4℃冷藏保存,用于RTPCR的检测。本实验结果采用SPSS 13.0软件包进行相关分析,P<0.05有统计学意义。结果:单味中药骨碎补能够影响兔膝骨关节炎模型关节滑膜中的细胞因子的表达,给药组滑膜中TNF-α的表达明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:单味中药骨碎补可通过降低关节滑膜中TNF-α的表达,从而保护关节软骨免受损伤以及破坏,说明骨碎补对膝骨关节炎有比较显著的防治效果。     

类风湿关节炎滑膜细胞凋亡研究进展

<正>类风湿关节炎(RA)是一种主要累及小关节的慢性自身免疫性疾病。主要表现为对称性多关节肿胀、疼痛、晨僵,体质量减轻以及全身多系统的受累。病理特征是遗传与环境等多因素相互作用而导致的滑膜组织炎症,血管翳形成及随后的关节损坏,同时伴有纤维沉淀、细胞增殖、分化及凋亡异常     

骨性关节炎滑膜细胞的病理变化

骨性关节炎（Osteoarthritis OA）是影响人类健康最常见的关节疾病之一，人群发病率约为2％。6％，是导致50岁以上人群功能残疾、造成经济损失和影响社会发展的主要疾病之一。近几年来随着对OA的深入认识，人们注意到OA不仪仅是关节软骨的病变，滑膜也参与了OA的整个病变过程。本文对滑膜细胞的主要病理变化作一综述。     

益肾活血方治疗兔膝骨性关节炎的实验研究

目的：观察益肾活血方对家兔膝骨性关节炎模型的疗效及作用机制。方法：将30只新西兰大耳兔随机分成3组,用制动法复制膝骨性关节炎模型。造模1周后,正常组和模型组用生理盐水,药物组用益肾活血方灌胃。于灌胃第6周后,对组织病理学,关节液中IL-1、TNF-α和MMP-3含量的影响进行观察。结果：病理组织学观察药物组软骨破坏减轻,与模型组比较,关节液中IL-1、TNF-α和MMP-3含量明显降低（P〈0.05）。结论：益肾活血方能缓解兔膝骨性关节炎模型关节软骨破坏,并能有效抑制炎症细胞因子（IL-1,TNF-α等）、MMP-3的释放,从而延缓对软骨的降解作用可能是其作用机制。     

补肾壮骨胶囊对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的：通过观察补肾壮骨胶囊对兔膝OA软骨细胞凋亡的影响,探讨其治疗膝OA的作用机理。方法：将40只雄性新西兰大白兔随机分为4组：A正常组、B模型组、C治疗组、D对照组,用改良Hulth法制造兔膝OA模型,C组给予补肾壮骨胶囊,D组给予壮骨关节丸。给药8周后,将兔处死后用TUNEL法观察补肾壮骨胶囊对实验性兔膝OA软骨细胞凋亡的影响,RT-PCR检测Bax、Bcl-2在mRNA水平表达的变化。结果：研究显示A组凋亡指数最小,B组凋亡指数最高,C、D组凋亡指数明显小于B组,高于A组。Bax/Bcl-2比值在B组明显高于A组,C、D组与B组比较,比值下降;C组和D组比较,比值无明显差异。结论：补肾壮骨胶囊可以抑制Bax,促进Bcl-2表达,提高Bcl-2/Bax比值,抑制关节软骨细胞的凋亡。     

复骨健步片对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的：观察复骨健步片对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响，探讨其治疗膝骨性关节炎的机制。方法：将48只家兔随机分为4组，A为正常对照组，B为模型组，C为壮骨关节丸组，D为复骨健步片组，每组12只，B、C、D组造模成功后。A、B组予生理盐水，C组予壮骨关节丸，D组予复骨健步片。第2、4、6周每组各处死4只兔，取关节软骨观察细胞凋亡及计数。结果：第2周，C、D两组凋亡显著低于B组（P〈0．01），且两组间差异无统计学意义；第4、6周，B、C、D三组凋亡显著高于A组（P〈0．01），D组显著低于B、C组（P〈0．01）。结论：复骨健步片可以明显降低骨关节炎中软骨细胞的凋亡率，从而达到保护软骨细胞，延缓发病的目的。     

药物电针刀疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的研究药物电针刀疗法对骨关节炎家兔一氧化氮(NO)及软骨细胞凋亡的影响。方法应用关节制动的方法复制骨关节炎(OA)模型,18只造模成功的中国家兔,随机分为药物电针刀组(简称 A组)、液针刀组(简称 B 组)和对照组(简称 C 组),A 组用药物电针刀加手法治疗,B 组用液针刀加手法治疗,C组仅予以手法治疗,每3日1次,疗程为1个月。用硝酸还原法检测关节滑液中 NO 含量;用流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡率。结果 A、B、C 组关节滑液中 NO 的含量分别为(33.67±17.72)μmol·L~(-1)、(58.90±22.07)μmol·L~(-1)和(83.30±16.20)μmol·L~(-1),软骨细胞的凋亡率分别为(25.27±10.82)%、(51.71±12.42)%和(74.80±9.37)%,3组间差异有显著性。结论与液针刀加手法相比较,药物电针刀疗法加手法能更显著减少关节液 NO 的含量,抑制软骨细胞的凋亡,而治疗膝骨性关节炎。     

骨碎补总黄酮的抗膝骨关节炎作用

目的：观察骨碎补总黄酮抗膝骨关节炎的作用．方法：兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成免膝骨关节炎模型；结扎大鼠双侧股静脉造成大鼠膝骨关节炎模型，结果：兔和大鼠膝骨关节炎实验模型中，骨碎补总黄酮减轻软骨病变，显著降低Mankin法软骨积分。病理检测结果表明骨碎补总黄酮组形态明显优于模型对照组。扫描电镜观察表明，骨碎补总黄酮组大鼠软骨表面光滑，似覆盖一层无定形物质，较模型对照组有明显的改善。结论：骨碎补总黄酮具有较强的抗膝骨关节炎作用.     

骨碎补总黄酮对骨关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3和TIMP-1表达的研究

目的：研究中药骨碎补总黄酮对前交叉韧带切断（ACLT）兔膝骨关节炎模型软骨中基质金属蛋白酶-1、3（MMP-1、MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法：新西兰大白兔30只,随机分为假手术组、ACLT4周组、ACLT8周组、骨碎补总黄酮4周组、骨碎补总黄酮8周组,每组6只,分别处理并给药后于实验第4、8周处死动物,对比各组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变,行常规HE染色观察其组织学形态,用反转录—聚合酶链反应监测关节软骨中MMP-1、MMP-3及TIMP-1的表达。结果：ACLT造模4周后可见软骨退变,8周时退变进一步加重,不同造模时期软骨退变大体评分有统计学意义。假手术组MMP-1、MMP-3、TIMP-1的表达较低,ACLT组较假手术组表达增高,且随着造模时间的延长表达逐渐升高;骨碎补总黄酮组较同期ACLT组表达降低。结论：MMP-1、MMP-3、TIMP-1在骨关节炎的发病过程中起重要作用,是导致组织学退变的原因之一。中药骨碎补总黄酮对上述三项指标有抑制作用,对骨关节炎的防治有积极作用。     

骨碎补的HPLC指纹图谱研究

目的对市售骨碎补进行化学成分分析并建立HPLC指纹图谱,为骨碎补的品种鉴别和质量评价提供依据。方法采用HPLC方法对购自全国各地共33批骨碎补进行指纹图谱分析,利用LC-MS指认特征色谱峰,并结合药材性状特征探讨品种鉴别方法。结果建立了33批市售骨碎补的化学成分指纹图谱,共标定了17个共有峰,指认了其中5个色谱峰。将化学组成与药材性状特征进行了关联,骨碎补药材分为4大类,其中包括正品槲蕨与常用混淆品种大叶骨碎补,另外两类药材的原植物尚待鉴定。结论建立的HPLC方法可应用于骨碎补的质量控制。     

骨碎补超微饮片的HPLC指纹图谱研究

目的研究骨碎补超微饮片的HPLC指纹图谱,考察其有效成分,为骨碎补超微饮片的质控提供可靠方法。方法色谱柱为大连依利特公司Hypersil BDS C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱;柱温为25℃;体积流量为1.0mL/min;检测波长为283nm。结果初步建立了骨碎补超微饮片的HPLC指纹图谱,标定了8个共有峰。结论利用HPLC指纹图谱可以比较全面的控制骨碎补超微饮片的内在质量。     

骨碎补脂溶性成分的研究

目的：研究骨碎补石油醚组分。方法：溶剂提取和硅胶柱层析分离,理化性质和光谱分析鉴定结构。结果：鉴定了３个化合物,为羊齿-９（１１）-烯、里白烯、环劳顿醇。结论：均为三萜类化合物。     

骨碎补对α-糖苷酶活性的影响

目的 研究骨碎补对α-糖苷酶活性的影响.方法 骨碎补提取物加入α-淀粉酶和α-麦芽糖酶不同微量反应体系中,分别用Bemfeld法、GOD法测其酶活.结果 骨碎补水提物和浸膏对α-糖苷酶中的α-麦芽糖酶活性均有明显的抑制作用,存在量效关系,呈可逆性混合型抑制类型.结论 骨碎补水提物、浸膏是对α-糖苷酶起抑制作用的主要部位.     

骨舒汤对实验性膝骨关节炎家兔软骨细胞凋亡的影响

目的观察骨舒汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的机制。方法将48只家兔随机分为4组,每组12只,分别为空白组、模型组、壮骨关节丸组、骨舒汤组,造模成功后,术后第4、6、8 W每组各处死4只兔,进行关节软骨细胞凋亡率观察。结果骨舒汤组软骨细胞凋亡指数明显低于OA模型组。结论骨舒汤可以明显抑制骨关节炎中软骨细胞的凋亡率,达到保护软骨细胞,延缓发病的目的。     

骨碎补膨化炮制实验研究

目的考察不同炮制方法对骨碎补有效成分柚皮苷及水溶性浸出物含量的影响。方法高效液相法测定骨碎补不同炮制品中柚皮苷含量;浸提法测定浸出物的含量。结果骨碎补经去毛炮制后可以提高柚皮苷及浸出物的含量。结论膨化法优于其它方法。     

超微粉碎对骨碎补理化性质的影响

目的比较骨碎补超微粉和普通粉的粉体学特征及溶出特点,为骨碎补超微粉体的粒径控制与应用提供实验依据。方法通过考察骨碎补粉体的粒径及分布、吸湿性、粉体的形貌结构等粉体学特征和体外溶出行为,研究骨碎补粉体的粒径对其粉体学特性和体外溶出行为的影响。结果骨碎补超微粉和普通粉的粉体学特征、体外溶出行为差异显著;除微粉III外,骨碎补超微粉中柚皮苷溶出的速度与程度要高于普通粉。结论适度的微粉化能促进骨碎补有效成分的溶出,超微粉碎技术应用于骨碎补具有可行性。骨碎补超微粉体粒径宜控制在61.4～23.5μm。