参麦饮含药血清对H_2O_2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:通过观察参麦饮含药血清对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,探讨参麦饮含药血清对损伤的HUVEC的保护作用及其机制。方法:15只SD大鼠随机分为3组:正常对照组及参麦饮1.1、5.4 g/kg组,每日3次灌胃给药,连续3 d。末次给药1 h后,腹主动脉取血,制备含药血清。使用不同浓度的H_2O_2诱导HUVEC细胞0.5 h,进行氧化应激损伤模型的建立,通过CCK-8法检测,明确H_2O_2的浓度为800μmo1/L时为最适的造模浓度;利用CCK-8试剂探讨含药血清作用不同时间对HUVEC细胞存活率的影响;利用CCK-8试剂进行含药血清对HUVEC细胞及H_2O_2损伤的HUVEC细胞存活率的影响;采用荧光染色法观察活性氧(ROS);利用试剂盒检测丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活力;采用Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中PI3K、AKT、BAX、BCL-2、Caspase3的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率显著降低(P<0.01),ROS生成量、MDA含量、LDH活力显著升高(P<0.01),SOD活力、NO含量显著降低(P<0.01),细胞凋亡率升高,PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值显著降低(P<0.01),BAX、Caspase3蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,参麦饮1.1 g/kg 15%含药血清使细胞活力显著升高(P<0.01),ROS生成量、MDA含量、LDH活力明显降低(P<0.05或P<0.01),SOD活力、NO含量明显降低(P<0.05或P<0.01);细胞凋亡率明显降低;PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值明显升高(P<0.05或P<0.01),BAX、Caspase3蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:参麦饮含药血清对H_2O_2诱导损伤的血管内皮具有明显保护作用。     

当归芍药散通过调控NF-κB炎性通路改善H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用

目的:研究当归芍药散(Danggui Shaoyaosan,DSS)含药血清对过氧化氢(H2O2)诱导人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)氧化应激和炎症反应的调控作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定SH-SY5Y细胞存活率构建最佳时间和最佳剂量的H2O2诱导的细胞损伤模型。实验设空白组,模型组,当归芍药散含药血清高、中、低剂量组(2.5%,5%,10%)。采用MTT比色法检测DSS干预后细胞活率,分光光度法测定抗氧化指标丙二醛(MDA),过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达水平,采用免疫荧光检测核转录因子-κB(NF-κB)p65的核移位情况。结果:H2O2浓度为250μmol·L-1干预24 h后SH-SY5Y细胞存活率约55%为最佳造模条件,DSS高、中、低剂量干预后,与模型组比较,细胞活率呈剂量依赖性上升(P<0.05),MDA明显下调(P<0.05),抗氧化指标CAT,SOD和GSH明显上升(P<0.05);H2O2能显著上调SH-SY5Y细胞炎性因子TNF-α,IL-1β和IL-6 mRNA表达水平,并介导胞质NF-κB的激活和向核移位,当归芍药散含药血清能呈剂量依赖性抑制NF-κB p65的入核并降低IL-1β,IL-6和TNF-α等细胞炎性因子的mRNA表达水平。结论:当归芍药散含药血清可以显著降低H2O2诱导的SH-SY5Y细胞的氧化损伤通过改善其抗氧化状态,同时也能降低炎症反应通过抑制NF-κB信号通路。     

人参提取物对SH-SY5Y细胞增殖及抗氧化损伤作用

目的研究人参提取物对SH-SY5Y细胞的增殖作用及对H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用。方法增殖实验以0(对照组),0.1,0.3,0.5,1.0,3.0 mg/mL的人参提取物培养SH-SY5Y细胞24 h,观察细胞形态,用MTT法测算存活率。损伤实验重取细胞并随机分为实验组、对照组、损伤模型组。实验组以0.1,0.3,0.5,1.0 mg/mL的人参提取物预培养实验组SH-SY5Y细胞24 h,观察细胞形态后,与模型组各加入H_2O_2至终浓度为150μmol/L孵育,1.5 h后观察细胞的形态,测算存活率。结果增殖实验的各组药物浓度均能促进正常SH-SY5Y细胞的增殖,且1.0 mg/mL的药物浓度能显著的促进SH-SY5Y细胞的增殖(P0.001)。损伤实验中,与损伤模型组相比,1.0 mg/mL浓度下的细胞存活率最优,接近对照组;与对照组相比,0.1,0.3,0.5 mg/mL浓度下细胞存活率均大于模型组的。结论人参提取物在一定浓度内有促进SH-SY5Y细胞增殖及抗H_2O_2诱导的氧化损伤的功效。     

金银花对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨金银花水提物对过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用H_2O_2损伤PC12细胞建立氧化损伤模型,以不同浓度金银花水提物(5、25和50μg/ml)进行研究,采用MTT法检测细胞活力,DCFH-DA检测ROS的水平,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫印迹实验检测细胞中Sirt3和凋亡相关蛋白蛋白表达。结果:不同浓度金银花水提物(5、25和50μg/ml)能够抑制H_2O_2诱导的细胞死亡并呈剂量依赖性。H_2O_2组细胞活力和凋亡率较对照组显著增加,给予金银花水提物作用48 h后,明显降低细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量,增加超氧化物歧化酶(SOD)活力,抑制H_2O_2诱导的细胞凋亡并上调Sirt3、IDH2、Bcl-2蛋白表达,下调Bax、caspase3蛋白表达。结论:金银花水提物能够抑制H_2O_2诱导的PC12细胞的氧化损伤,其保护作用可能与抑制氧化应激引起的细胞凋亡并调控ROS/Sirt3途径有关。     

山茱萸新苷对过氧化氢诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的:探究中药山茱萸提取物山茱萸新苷对SH-SY5Y细胞生长的影响及对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用。方法:体外培养的SH-SY5Y细胞与山茱萸新苷(0.3、1、3μmol/L)作用2 h后,加入过氧化氢300μmol/L作用12 h诱导SH-SY5Y细胞产生氧化损伤。显微条件下观察细胞形态;CCK8法检测细胞存活率;分光光度计法测定LDH释放率;JC-1法检测线粒体膜电位;荧光显微镜检测胞内ROS水平;Hochest 33258和AO/EB染色法检测细胞凋亡情况;分光光度计检测胞内SOD活力、GSH水平和MDA含量。结果:山茱萸新苷在0.01μmol/L～30μmol/L条件下对正常SH-SY5Y细胞不产生毒性作用;与模型对照组相比,山茱萸新苷在0.3、1和3μmol/L条件下可呈浓度依赖性地提高细胞存活率,并明显改善细胞受损形态和凋亡水平;同时山茱萸新苷0.3、1、3μmol/L能降低LDH渗漏率并升高线粒体膜电位;此外,山茱萸新苷各浓度还能提高胞内抗氧化酶水平和GSH含量,减少丙二醛的产生,在浓度为1μmol/L时效果最佳,其抗氧化损伤效果与维生素E相当。结论:山茱萸新苷对正常SH-SY5Y细胞无毒性作用,且对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有较好的保护作用,这可能与其降低细胞氧化损伤,抑制细胞凋亡相关。     

开心散含药血清对β-淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞损伤的影响

目的:研究开心散含药血清对β-淀粉样蛋白所致人神经母细胞瘤SH-SY5Y损伤的影响及其机制。方法:SD大鼠灌胃给予开心散(0.58 g/Kg,1.16 g/Kg,2.32 g/Kg),连续7天,每天2次,第8天末次给药后1 h腹主动脉取血,制备开心散含药血清,将不同浓度的开心散含药血清加入SH-SY5Y细胞孵育2 h后,加入Aβ_(25-35)(10μmol/L),共同培养24 h。采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,活性氧表达及线粒体膜电位。结果:与正常对照组细胞比较,Aβ_(25-35)(10μmol/L)可以明显降低SH-SY5Y细胞的细胞存活率,增加细胞凋亡率,升高细胞内活性氧的含量,降低线粒体膜电位;开心散含药血清可以明显抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,降低活性氧表达及提高线粒体膜电位(P0.01)。结论:开心散含药血清能减轻Aβ25-35所致的细胞损伤,可能与保护线粒体,减少细胞凋亡有关。     

木棉花提取物对H_2O_2诱导血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨木棉花提取物对过氧化氢(H_2O_2)所诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECS)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVECS,采用MTT法检测木棉花提取物对正常HUVECS细胞毒性作用;给予不同浓度木棉花提取物(15,30,60 mg/L)预处理保护HUVECS 24 h后,采用0.5 mmol/L H_2O_2诱导损伤3 h建立氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖活力,ELISA法测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)含量和谷胱甘肽-S转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性;同时检测细胞中丙二醛(MDA)的含量及过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;采用流式细胞仪检测活性氧(ROS)和细胞内钙离子含量。结果:木棉花提取物对HUVECs细胞无毒性作用;与H_2O_2损伤模型组比较,15、30、60 mg/L剂量组的木棉花提取物能明显提高H_2O_2诱导损伤HUVECs的增殖活力,提高细胞上清液NO含量和SOD、GST活性,降低LDH漏出量;能增强细胞内CAT、GSH-Px的活性,降低MDA水平;同时能减少细胞内ROS表达,下调细胞内钙离子浓度。结论:木棉花提取物对H_2O_2诱导的内皮细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与通过抑制氧化应激、抗过氧化损伤以及清除细胞内ROS,抑制细胞内钙离子介导的细胞凋亡有关。     

橄榄苦苷对H_2O_2诱导的PC12氧化应激损伤的保护作用

目的:观察橄榄苦苷(Oleuropein)对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨其分子机制。方法:实验分为空白对照组、模型组和实验组。利用H_2O_2作用PC12细胞建立氧化应激损伤模型,实验组给予50、100、200、400μmol/L的橄榄苦苷分别作用24、48、72 h,采用MTT法检测PC12细胞的活力,TUNEL法检测细胞凋亡率,ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)活性,免疫印迹法(western blot)检测胞浆细胞色素c(Cytochrome c,Cyt-c)、Caspase-3蛋白的表达。结果:橄榄苦苷能够抑制H_2O_2诱导的PC12细胞的活力下降(P0.01),降低H_2O_2诱导的PC12细胞的凋亡率(P0.05,P0.01),抑制H_2O_2诱导的PC12细胞内SOD及GSH-PX活力的降低(P0.01,P0.05),橄榄苦苷抑制H_2O_2诱导的细胞凋亡蛋白Cyt-c、Caspase-3表达的上调(P0.01,P0.05)。结论:橄榄苦苷对H_2O_2诱导的PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

异甘草素对氧糖剥夺/复糖复氧损伤SH-SY5Y细胞的保护作用

目的研究异甘草素对氧糖剥夺/复糖复氧损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法细胞SH-SY5Y建立OGD/R损伤细胞模型。NC Nrf2-siRNA、siRNA-Nrf2质粒转染SH-SY5Y细胞,并培养48 h,20μmol/L异甘草素预处理2 h后构建OGD/R损伤,24 h后继续加入20μmol/L异甘草素再培养24 h。OGD/R损伤48 h后,测定细胞活力,LDH水平,caspase-3、caspase活性,ROS、MDA、SOD、GSH水平;RT-PCR检测Bcl-2、Bax、NQO1、HO-1 mRNA表达;Western blot检测HO-1蛋白表达。结果 OGD/R诱导SH-SY5Y细胞活力降低,caspase-3、caspase活性升高,ROS、MDA水平升高,SOD、GSH-Px水平降低,Bcl-2、NQO1、HO-1 mRNA及HO-1蛋白表达降低,Bax mRNA表达增高(P<0.01);经异甘草素干预后,OGD/R SY5Y细胞活力升高,caspase-3、caspase活性降低,ROS、MDA水平降低,SOD、GSH水平及Bcl-2、NQO1、HO-1...     

脱氢卡维丁对H_2O_2处理成骨前体细胞MC3T3-E1增殖及凋亡的影响

目的:探讨脱氢卡维丁对过氧化氢(H_2O_2)诱导下MC3T3-E1细胞凋亡和氧化应激损伤的影响及其潜在作用机制。方法:取处于对数生长期的MC3T3-E1细胞,优化H_2O_2氧化损伤细胞模型的工作液浓度,采用500μmol/L H_2O_2作用MC3T3-E1细胞建立体外氧化应激损伤细胞模型,以不同浓度(0.001、0.01、0.1μmol/L)脱氢卡维丁进行干预,1 mmol/L N-乙酰半胱氨酸作阳性对照组,使用噻唑蓝(MTT)比色法检测其对于细胞活力的影响,生化法测定细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平,利用流式细胞技术检测细胞氧化损伤的凋亡程度,RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率显著降低,细胞MDA、ROS水平及Bax表达显著升高,Bcl-2表达显著降低。与模型组比较,各给药组对H_2O_2诱导的氧化应激损伤得到有效抑制,Bcl-2表达升高,Bax表达降低。结论:脱氢卡维丁能有效减弱H_2O_2诱导的MC3T3-E1细胞凋亡及氧化损伤,增强细胞清除MDA和ROS的能力,发挥抗H_2O_2氧化损伤的保护作用。     

氨基葡萄糖与铜钴镍三种金属离子的配位性能研究

目的 研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的配位性能.方法 用pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10 mol/LKNO3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的二元配合物的生成常数.结果 氨基葡萄糖pKa为7.78,配合物生成常数的对数分别为Cu2 ,5.22(110),9.38(120);Co2 ,3.19(110),5.99(120);Ni2 ,3.40(110),6.31(120).结论 氨基葡萄糖与Cu2 ,Co2 ,Ni2 配位时不解离出醇羟基质子,不同金属离子配合物生成常数的大小符合Irving-William序列.     

关于PD2、PA2、PD2＇计算方法的探讨

目的：叙述近年来关于PD2、PA2、PD2’各自含义、计算方法，以阐明其研究意义。方法：通过对药理实验方法学中有关内容的阐述，以及对近10年来相关文章的对比分析和总结，得到一些对今后的药物研究有帮助的参考性知识。结论：PD2、PA2、PD2’的测定基本上是首先通过某一药物的动物或计算机虚拟实验，然后用图解法、计算方法（包括软件计算）或者二者联用的方法三种思路求得各自具体数值。     

补骨脂乙素诱导HepG2细胞凋亡及对Bcl-2家族表达的影响

目的:观察补骨脂乙素对人肝癌细胞HepG2凋亡及其相关蛋白的影响。方法:用不同浓度补骨脂乙素(3、4、5、6和7mg/ml)处理HepG2细胞24h后,MTT法检测药物对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:补骨脂乙素4mg/ml即能抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,7mg/ml时凋亡率可达94.57%,在浓度4～7 mg/ml之间有良好的量效关系。补骨脂乙素浓度为7mg/ml时促凋亡蛋白Bax、Bid表达明显增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:补骨脂乙素4mg/ml能诱导HepG2细胞凋亡,可能与其影响Bcl-2家族蛋白的表达有关。     

Manuscript Preparation-Part 2

正1.Main Text The preferred length of an original article is no more than 8000 words,and review no more than 10000 words.Text is usuallybut not necessarily-divided into the Introduction,Methods,Results,and Discussion sections.Headings and subheadings may be used to clarify their content,especially in the Methods,Results,and Discussion(including conclusion).Every reference,figure