中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾组织Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾组织核因子NFE2相关因子(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组8只和造模组42只,造模组高脂高糖喂养,4周后按35 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分为模型组、糖肾安低剂量组、糖肾安中剂量组、糖肾安高剂量组及西药组。各给药组给予相应的剂量药物灌胃,8周后收集所有大鼠肾脏标本。采用免疫组化技术检测大鼠肾组织中Nrf2、血红素加氧酶(HO-1)表达情况,Western blot、RT-PCR技术检测大鼠肾组织中核因子κBp65(NF-κBp65)表达情况,ELISA法检测大鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组大鼠肾组织中Nrf2、HO-1、NF-κBp65表达水平均明显高于正常组(P均0.05),而SOD活性明显弱于正常组(P0.05);糖肾安中剂量组、糖肾安高剂量组及西药组大鼠肾组织中Nrf2、HO-1表达水平及SOD活性均明显高于模型组(P均0.05),而各给药组大鼠肾组织中NF-κBp65表达水平均明显低于模型组(P均0.05)。结论中药复方糖肾安可激活糖尿病大鼠肾脏Nrf2/ARE通路,抑制NF-κBp65活化,增强抗氧化酶活性,减轻糖尿病大鼠肾脏氧化应激及炎症反应,从而发挥肾脏保护作用。     

糖肾安对高糖环境下大鼠肾脏及肾系膜细胞炎性因子ICAM-1表达的影响

目的探讨糖肾安对高糖环境下大鼠肾脏及肾系膜细胞炎性因子细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达的影响。方法 1实验一:50只健康SD大鼠随机分成正常组和造模组,造模组高糖高脂喂养4周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导2型糖尿病模型,成模大鼠随机分为模型组、糖肾安高剂量组、糖肾安中剂量组、糖肾安低剂量组和西药组,各给药组给予相应药物8周后收集肾脏标本。2实验二:大鼠肾系膜细胞株解冻复苏后制成细胞悬液,将其按照实验一分组方法进行分组,各药物干预组在相应含药血清中培养24 h后收集细胞。2组实验采用Western blot、RT-PCR方法检测ICAM-1表达情况。结果 1实验一:模型组、糖肾安中剂量组、糖肾安低剂量组及西药组ICAM-1表达量均明显高于正常组(P均0.05),糖肾安各组及西药组ICAM-1表达量均明显低于模型组(P均0.05),糖肾安高剂量组ICAM-1表达量明显低于糖肾安中剂量组、糖肾安低剂量组及西药组(P均0.05)。2实验二:各药物干预组ICAM-1表达量均明显高于正常组(P均0.05),但明显低于模型组(P均0.05);糖肾安高剂量组ICAM-1表达量明显低于糖肾安中剂量组、糖肾安低剂量组(P均0.05)。结论糖肾安可抑制大鼠肾脏及肾系膜细胞炎性因子ICAM-1的表达,减轻肾脏组织病理学改变,其肾脏保护作用可能与抑制ICAM-1表达水平有关。     

雷公藤多苷片对糖尿病肾病大鼠Nrf2/Keap1/ARE信号通路的影响

目的 探讨雷公藤多苷片对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏组织的保护作用及其机制。方法 选取雄性清洁级SD大鼠42只，适应性喂养1周后随机分为正常组8只，造模组34只。正常组予以正常饲料喂养，造模组采用高脂高糖喂养+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立DN大鼠模型，除去造模过程中死亡及失败，选取造模成功的24只随机分为模型组、缬沙坦组、雷公藤多苷片(TGT)组。正常组和模型组均予等量生理盐水灌胃，缬沙坦组予缬沙坦胶囊，TGT组予TGT。灌胃6周后收集大鼠尿液，腹主动脉取血后处死取材，生化检测血清中的BUN、Scr、FBG及尿液中的24h尿蛋白总量(24h-UTP),HE染色观察肾脏病理，ELISA法检测血清中的Nrf2、HO-1、Keap1表达水平，Western Blot法检测肾组织中相关蛋白表达，PCR法检测肾组织中相关基因表达。结果 与模型组比较，TGT组大鼠24h-UTP、BUN、Scr、FBG均明显下降(P<0.01),肾小球形态基本正常、肾小管扩张减轻，血清中的Nrf2、HO-1表达增多(P<0.01)、Keap1表达减少(P<0.01),肾组织中的Nrf2、HO-...     

糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨糖络宁对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠Nrf2/ARE通路相关蛋白的影响。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和链脲佐菌素(STZ)组,STZ组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ,造模1周后,将空腹血糖浓度≥16.7 mmol/L的大鼠稳定1个月后,随机分为模型对照组、α-硫辛酸组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组,并给予相应药物12周。麻醉取大鼠坐骨神经,采用免疫组织化学方法检测大鼠坐骨神经Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、及谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱,脱髓鞘严重,坐骨神经中Keap1、Nrf2、HO-1和γ-GCS的表达增加,差异有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,糖络宁低、高剂量组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱和脱髓鞘现象得到改善,其中糖络宁低剂量组Keap1、Nrf2表达增加,糖络宁高剂量组HO-1、γ-GCS表达增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论糖络宁能够改善DPN大鼠坐骨神经的病理状态,上调Nrf2/ARE信号通路中Keap1、Nrf2、HO-1及γ-GCS的表达,增强机体抗氧化应激的能力。     

人参皂苷对波动性高血糖大鼠肾脏Nrf2及NQO1表达的影响

目的:探讨人参皂苷对波动性高血糖大鼠肾脏转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor2,Nrf2)及醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase l,NQO1)表达的影响及其机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(NC组,n=8)和糖尿病模型组(n=40)。高脂饲料喂养糖尿病模型组大鼠2周后用小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,之后随机分为稳定高糖组(SH组,n=8)和波动性高糖组(FH组,n=32),FH组错时注射葡萄糖、胰岛素制备血糖波动大鼠模型。2周后,将FH组随机分为4组,分别是低剂量组(LG组),中剂量组(MG组),高剂量组(HG组)及波动性高糖组(BG组),予人参皂苷低中高剂量(14、28、56mg/(kg·d))干预相对应的模型组8周。实验结束后切取肾脏组织,用western blot和RTPCR(Real-time Polymerase Chain Reaction)检测Nrf2和NQO1蛋白及mRNA表达。结果:与NC组相比,SH组Nrf2和NQO1的蛋白及mRNA的表达明显增加(P0.05),与SH组相比,BG组Nrf2和NQO1的蛋白及mRNA的表达明显增加(P0.05),与BG组相比,人参皂苷治疗组Nrf2和NQO1的蛋白及mRNA的表达明显增加(P0.05)。结论:人参皂苷能够进一步促进波动性高糖状态下Nrf2及NQO1蛋白及mRNA表达,通过增加NQO1的含量,提高机体的抗氧化应激能力,保护波动性高血糖所致的肾脏损伤。     

基于“肾主骨”与Nrf2/NF-κB/NFATc1通路探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠作用机制

目的 探讨益气养阴活血方通过调控核因子E2相关因子(Nrf2)/核因子κB(NF-κB)/活化T细胞核因子胞浆1型(NFATc1)信号通路对糖尿病肾病(DKD)保护机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组8只、造模组42只。造模组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DKD大鼠模型，将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、代文组、益气养阴活血方等剂量组(等剂量组)、益气养阴活血方高剂量组(高剂量组),每组8只。灌胃6周后苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾脏病理变化，生化检测各组大鼠血清ALP、Scr、BUN、FBG、Nrf2、NF-κB、NFATc1表达水平及24 h-UTP,Western blot及RT-PCR检测肾脏组织Nrf2/NF-κB/NFATc1通路相关蛋白及其mRNA表达。结果 与模型组比较，益气养阴活血方可改善DKD大鼠肾脏病理损伤，降低血清ALP、Scr、BUN、FBG、NF-κB、NFATc1及24h-UTP水平，提高血清Nrf2含量水平(P<0.01);益气养阴活血方还可提高DKD大鼠肾脏组织Nrf2蛋白及其mRNA水平，降低NF-κB p65、NFA...     

愈肾合剂对糖尿病模型大鼠肾组织血红素氧合酶-1和血红素氧合酶-2表达的影响

目的观察愈肾合剂对糖尿病模型大鼠肾脏组织血红素氧合酶(HO)-1、HO-2的影响,探讨其治疗糖尿病肾病作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、治疗组。采用皮下注射链脲佐菌素法复制模型,对照组和治疗组给予相应药物灌胃,正常组和模型组灌胃等量蒸馏水。给药8周后,收集尿液测定24 h尿蛋白(Upro)、尿肌酐(Ucr),断头取血测定一氧化碳(CO)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr),采用免疫组织化学法检测肾脏组织HO-1、HO-2的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠BUN、24 h Upro、Scr升高,肌酐清除值(Ccr)、血浆CO降低,肾脏组织的HO-1、HO-2表达明显减弱(P0.01);与模型组比较,治疗组和对照组BUN、24 h Upro、Scr明显下降,Ccr、血浆CO活性升高,肾脏组织的HO-1、HO-2表达明显增强(P0.05,P0.01);与对照组比较,治疗组24 h Upro降低,血浆CO活性升高,肾脏组织HO-1、HO-2表达明显增强(P0.05,P0.01)。结论愈肾合剂对糖尿病肾病大鼠有一定的治疗作用,可能是通过HO/CO系统实现的。     

针刺疗法对腹泻型肠易激综合征大鼠Nrf2-Keap1-ARE信号通路的影响

目的:观察针刺通过Nrf2-Keap1-ARE信号通路对IBS-D大鼠的作用机制。方法:50只Wistar大鼠随机分为5组,每组10只。大鼠实施强行应激法(CAS)刺激获得IBS-D模型;大鼠CAS刺激前1 h灌胃番木液(6 g/kg),其后实施CAS刺激获得药物致泻+CAS刺激模型;大鼠CAS刺激后,取ST25(天枢)、ST36(足三里)和LR3(太冲)针刺,获得CAS+针刺组模型;体外构建siRNA,进行鼠尾静脉注射后进行CAS刺激和针刺治疗得到CAS刺激+针刺+Nrf2 siRNA(Nrf2~(sh))模型;正常组正常饲养。检测各组5-HT、NPY、MDA、GSH/GSSG、SOD和ROS水平以及Nrf2信号通路中基因表达水平和蛋白表达水平。结果:IBS模型组、药物致泻模型+CAS刺激组和CAS+针刺+Nrf2~(sh)组的ROS和MDA水平高于CAS+针刺组(P0.01)和正常组(P0.01),GSH水平均低于CAS+针刺组(P0.01)和正常对照组(P0.01),而GSSG水平呈相反趋势(P0.01);正常组和CAS+针刺组的SOD水平均与其他组有差异(P0.01),5-HT和NPY的水平以及JNK的基因和蛋白质表达均低于其他组(P0.01),Nrf2、Keap-1和HO-1的基因和蛋白质表达均与其他组有差异(P0.01)。结论:Nrf2在IBS-D治疗中具有重要作用,针刺可上调Nrf2的表达,从而抑制肠道氧化性损伤和脂质过氧化,并能在针刺后上调HO-1的表达,为针刺疗法治疗IBS-D的分子机制做出了一定的理论基础。     

糖肾安对高糖环境下人肾系膜细胞HO-1、VEGF表达的影响

目的观察糖肾安含药血清对高糖环境下培养的人肾系膜细胞血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达的影响。方法选用SPF级雄性Wistar大鼠制备不同质量浓度的糖肾安含药血清,并在高糖环境下培养人肾系膜细胞。实验随机分6组,正常组在正常糖浓度下培养,其余5组(模型组、糖肾安低、中、高剂量组、厄贝沙坦组)在高糖浓度下培养。培养结束后进行实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time PCR, qRT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测高糖环境下人肾系膜细胞HO-1的m RNA及蛋白表达变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测高糖环境下肾系膜细胞上清液中VEGF的质量浓度。结果各给药组HO-1的m RNA及蛋白表达较模型组显著上调(P 0.01),VEGF的质量浓度显著下降(P 0.01)。结论糖肾安干预糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)的作用机制可能与上调HO-1的表达,降低VEGF质量浓度有关。     

糖肾安对高糖环境下人肾系膜细胞Nrf2/ARE通路的影响

目的:探讨糖肾安对肾脏的保护作用是否与激活核转录因子NF-E2相关因子(neclear factorerythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)通路,发挥抗氧化应激作用,减轻炎症反应有关。方法:健康雄性Wistar大鼠随机分6组,正常组、模型组、糖肾安低、中、高剂量组、厄贝沙坦组,制备含药血清;将正常组含药血清加入正常糖浓度培养的肾系膜细胞中培养,其他5组加到高糖培养的肾系膜细胞中培养;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2和谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteinesynthetase,γ-GCS)的mRNA及蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-1,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α)的含量。结果:与模型组比较,各给药组Nrf2,γ-GCS mRNA及蛋白表达显著上调(P0.01),IL-6和TNF-α的含量下降(P0.01)。结论:糖肾安能通过激活Nrf2/ARE通路,发挥抗氧化应激作用,减轻炎症反应,最终实现肾脏保护作用。     

氨基葡萄糖与铜钴镍三种金属离子的配位性能研究

目的 研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的配位性能.方法 用pH电位滴定法测定(298±0.1)K,I=0.10 mol/LKNO3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2 ,Co2 ,Ni2 的二元配合物的生成常数.结果 氨基葡萄糖pKa为7.78,配合物生成常数的对数分别为Cu2 ,5.22(110),9.38(120);Co2 ,3.19(110),5.99(120);Ni2 ,3.40(110),6.31(120).结论 氨基葡萄糖与Cu2 ,Co2 ,Ni2 配位时不解离出醇羟基质子,不同金属离子配合物生成常数的大小符合Irving-William序列.     

关于PD2、PA2、PD2＇计算方法的探讨

目的：叙述近年来关于PD2、PA2、PD2’各自含义、计算方法，以阐明其研究意义。方法：通过对药理实验方法学中有关内容的阐述，以及对近10年来相关文章的对比分析和总结，得到一些对今后的药物研究有帮助的参考性知识。结论：PD2、PA2、PD2’的测定基本上是首先通过某一药物的动物或计算机虚拟实验，然后用图解法、计算方法（包括软件计算）或者二者联用的方法三种思路求得各自具体数值。     

补骨脂乙素诱导HepG2细胞凋亡及对Bcl-2家族表达的影响

目的:观察补骨脂乙素对人肝癌细胞HepG2凋亡及其相关蛋白的影响。方法:用不同浓度补骨脂乙素(3、4、5、6和7mg/ml)处理HepG2细胞24h后,MTT法检测药物对细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:补骨脂乙素4mg/ml即能抑制HepG2细胞的增殖并诱导其凋亡,7mg/ml时凋亡率可达94.57%,在浓度4～7 mg/ml之间有良好的量效关系。补骨脂乙素浓度为7mg/ml时促凋亡蛋白Bax、Bid表达明显增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:补骨脂乙素4mg/ml能诱导HepG2细胞凋亡,可能与其影响Bcl-2家族蛋白的表达有关。     

Manuscript Preparation-Part 2

正1.Main Text The preferred length of an original article is no more than 8000 words,and review no more than 10000 words.Text is usuallybut not necessarily-divided into the Introduction,Methods,Results,and Discussion sections.Headings and subheadings may be used to clarify their content,especially in the Methods,Results,and Discussion(including conclusion).Every reference,figure