乳癌术后方对HER2阳性乳腺癌复发转移小鼠NF-κB表达的影响

目的比较乳癌术后方原方与精简方抗HER2阳性乳腺癌复发转移小鼠的疗效,探讨其对转基因小鼠复发转移过程中NF-κB表达的影响。方法选取30周龄左右HER2/neu转基因自发乳腺癌小鼠,行体表原发肿瘤切除术,术后随机分为对照组(纯净水0.2mL/d灌胃)、原方组(乳癌术后方0.2mL/d灌胃)、精简方组(乳癌术后方精简方0.2mL/d灌胃)及西药组(曲妥珠单抗1mg/kg腹腔注射,每周2次),每组15只,连续干预4个月,评价小鼠体表肿瘤再发率、再发肿瘤瘤积、生存率及肺转移发生情况,Western Blot及免疫组化法检测小鼠再发肿瘤组织中NF-κB蛋白表达情况。结果各组小鼠治疗结束时体表肿瘤再发率及生存率差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,原方组及精简方组体表再发肿瘤瘤积缩小(P0.05),精简方组、西药组p-NF-κB/NF-κB下调(P0.01),西药组NF-κB表达降低(P=0.013)。精简方组肺转移结节数最少,肺转移抑制率达81.9%,但组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论乳癌术后方精简方与原方疗效相当,其可能通过抑制NF-κB的活化,减少其在胞核内的定位发挥抗HER2阳性乳腺癌复发转移作用。     

乳癌术后方及其拆方对乳腺癌肺转移模型小鼠Foxp3、TGF-β1、CD4+的影响

  目的：观察乳癌术后方及其拆方对乳腺癌肺转移模型小鼠移植瘤生长的影响,探讨其可能的作用机制  方法：萤火虫荧光素酶标记的小鼠乳腺癌肺高转移细胞4T1(4T1-luc)接种于小鼠第二对乳房脂肪垫建立乳腺癌肺转移模型;于接种后第5 天随机分组:模型组(灌胃蒸馏水)、全方组、益气组、冲任组、解毒组,每组10只。除模型组外,其余各组以“乳癌术后方”及其拆方进行干预,共30天。计算肿瘤抑制率,以生物发光成像系统监测肿瘤细胞在体内的生长过程,通过肺转移灶定量分析观察小鼠肺转移情况,并采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测原位瘤中Foxp3、TGF-β₁、CD4⁺等蛋白的表达  结果：与模型组比较,各用药组瘤重、肺转移抑制率差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与全方组比较,益气组、冲任组瘤重、肺转移抑制率差异有统计学意义(P<0.05),而解毒组差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,各用药组原位瘤组织中Foxp3、TGF-β₁蛋白表达水平下降,CD4⁺蛋白表达水平提高,差异均有统计学意义(P<0.05 ,P<0.01);与全方组比较,益气组、冲任组Foxp3、TGF-β₁、 CD4⁺蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05),而解毒组Foxp3、TGF-β₁、 CD4⁺蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)  结论：乳癌术后方及其拆方对乳腺癌肺转移模型小鼠均有抑瘤和抗肿瘤转移作用,其机制可能与调节肿瘤微环境中Foxp3、TGF-β₁、CD4⁺作用有关。     

固本防哮饮对小鼠哮喘缓解期TLR4及TLR7的调节作用

目的:观察固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠模型Toll-样受体(TLR) 4,TLR7,核转录因子-κB p65(NF-κB p65),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的调节作用,探讨固本防哮饮治疗哮喘缓解期的机制。方法:呼吸道合胞病毒(RSV)联合鸡卵蛋白(OVA)对3周龄BALB/c小鼠制备哮喘缓解期模型,将60只小鼠分为空白组、模型组、地塞米松组(0. 001 g·kg~(-1))以及固本防哮饮低、中、高剂量(6. 5,13,26 g·kg~(-1))组,分别进行干预,共给药28 d,每天1次。给药结束后处死小鼠,苏木素-伊红(HE)染色观察哮喘小鼠肺组织病理形态学变化,并对肺部炎症情况进行评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织TLR4,TLR7,IκBα及肺组织细胞核内NF-κB p65蛋白表达水平;免疫荧光共聚焦观察NF-κB p65在细胞核表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织有明显炎症细胞浸润及支气管狭窄(P 0. 01),同时小鼠肺组织细胞核内NF-κB p65分布显著增多(P 0. 01),表达明显增高(P 0. 05),TLR4,TLR7,IκBα蛋白表达明显降低(P 0. 05);与模型组比较,固本防哮饮各剂量组能显著缓解小鼠肺组织炎症浸润(P 0. 01),降低肺组织核蛋白NF-κB p65的表达(P 0. 01),核蛋白NF-κB p65入核情况减轻(P 0. 01),同时显著增加TLR4,TLR7,IκBα蛋白的表达(P 0. 01)。结论:固本防哮饮能够缓解气道炎症,并且可能是通过调节TLR4,TLR7,NF-κB p65,IκBα实现其治疗作用。     

半夏泻心汤全方及其不同组分对幽门螺杆菌感染小鼠的作用及机制分析

目的:研究半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌(Hp)感染小鼠的疗效及其作用机制。方法:选择C57小鼠作为实验动物,随机分为对照组、模型组、干预A组、干预B组、干预C组,Hp灌胃后建立Hp感染模型,干预A组、干预B组、干预C组分别给予半夏泻心汤全方、清热解毒组分、扶正补益组分干预。干预后检测Hp根除情况、TLRs/NF-κB信号通路及下游炎症介质的表达量。结果:干预A组、干预B组、干预C组的幽门螺旋杆菌根除率均高于模型组,且干预A组的幽门螺旋杆菌根除率高于干预B组和干预C组,干预B组与干预C组间幽门螺旋杆菌的根除率无显著性差异;模型组小鼠胃黏膜中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的表达量显著高于对照组,干预A组、干预B组、干预C组小鼠胃黏膜中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的表达量显著低于模型组且干预A组小鼠胃黏膜中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的表达量显著低于干预B组、干预C组,干预B组与干预C组间胃黏膜中TLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-8的表达量无显著性差异。结论:半夏泻心汤全方及各组分均能根除Hp并抑制TLRs/NF-κB信号通路,且全方的疗效优于各组分。     

平喘方对哮喘小鼠HMGB1/TLR4/NF-κB通路及IKKs、TGF-β1的影响

目的 研究平喘方对哮喘小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)及气道重塑相关因子IκB激酶家族（IKKs）、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 将32只雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地米组、平喘方组,每组8只。采用卵清白蛋白（OVA）联合氢氧化铝腹腔注射和5%OVA雾化吸入激发的方法建立哮喘模型,当日雾化结束1 h后灌胃给药14 d。各组于最后一次给药后收集小鼠血清、肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。采用HE染色法观察小鼠肺组织病理改变,免疫组化染色法观察HMGB1、TLR4、NF-κB表达,ELISA法检测BALF及外周血中HMGB1、TLR4、TGF-β1、IKKs含量,RT-PCR检测肺组织中HMGB1、TLR4、NF-κB及IKKs mRNA表达,Western blot法检测肺组织中HMGB1、TLR4蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组气道重塑严重,HMGB1、TLR4及NF-κB表达明显增强,HMGB1、TLR4、TGF-β1及IKKs含量升高（P<0.05）,HMGB1、TLR4、NF-...     

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用

目的:研究扶正祛邪双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用。方法:将昆明种小鼠随机分为模型组、正常组、解表法代表方剂银翘散(YQS)组、固表法代表方剂玉屏风散(YPF)组、双表法代表方剂(YPS)组以及利巴韦林组。采用流感病毒滴鼻方法建立病毒感染模型,根据给药量制备相应浓度药物并灌胃给药,正常组和模型组给予同体积生理盐水。采用RT-PCR、免疫组化法检测给药后1、3、5、7天各时间点各组小鼠Toll样受体4(toll like receptors 4,TLR4)和核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白及其m RNA动态表达情况。结果:YQS、YPF及YPS在不同时点均能不同程度阻断流感小鼠肺组织中TLR4、NF-κB蛋白及其m RNA的高表达,并且YPS组表达最低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:双表法对流感病毒感染小鼠的防治作用与抑制流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路过度活化有关。     

天贝止喘汤对支气管哮喘慢性气道炎症小鼠基因蛋白的影响

目的研究天贝止喘汤对支气管哮喘慢性气道炎症小鼠模型基因蛋白的影响。方法采用OVA法诱导并建立小鼠哮喘模型,建模后取小鼠肺组织,采用Real-time PCR技术检测miR-146和TLR4的表达情况,采用Western blot技术检测TLR4和NF-κB的表达情况。结果 Real-time PCR检测miR-146、TLR4基因含量结果表明:与空白组相比,模型组miR-146、TLR4表达量显著升高(P0.05);与模型组相比,各药物治疗组miR-146、TLR4表达量显著降低(P0.05)。Western blot检测TLR4、NF-κB蛋白含量结果表明:与空白组相比,模型组TLR4、NF-κB表达量显著升高(P0.05);与模型组相比,天贝止喘汤中剂量组、天贝止喘汤高剂量组、小青龙组和地塞米松组TLR4表达量均显著降低(P0.05);与模型组相比,天贝止喘汤高剂量组和地塞米松组NF-κB表达量显著降低(P0.05)。结论天贝止喘汤可降低miR-146、TLR4基因表达,减低TLR4、NF-κB蛋白表达,为从分子生物学角度研究天贝止喘汤干预哮喘小鼠机制提供参考。     

平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用先卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝凝胶[AI(OH)3]腹腔注射致敏,采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后,采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位(p65)、NF-κB的抑制蛋白(IκBα)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润,上皮基底膜增厚,胶原纤维增多,平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维面积减小;与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度,肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平,气管中TLR4mRNA及蛋白表达水平均升高(均P<0.01),IκBα蛋白表达及mRNA水平降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低,MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调(P<0.01,P<0.05),地塞米松组IκBα蛋白表达及mRNA水平升高(均P<0.01),平喘方组IκBαmRNA水平升高(P<0.01),IκBα蛋白表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。与地塞米松组比较,平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),p65及TLR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低TLR4及MyD88活性,调控NF-κB信号通路有关。     

解毒祛瘀滋肾方对小鼠单核巨噬细胞Toll样受体9信号通路的影响

目的通过研究解毒祛瘀滋肾方对Cp G寡脱氧核苷酸(Cp G oligodeoxynucletide,Cp G ODN)刺激后小鼠单核巨噬细胞Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)信号通路的影响,探讨解毒祛瘀滋肾方治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)增效减毒的机制。方法体外培养小鼠单核巨噬细胞,随机分为空白血清组、Cp G ODN刺激组、Cp G ODN加地塞米松组及Cp G ODN加含药血清组。干预24 h后收集细胞,采用RT-PCR法检测TLR9、髓样分化因子88(My D88)、核转录因子-κB(NF-κB)及干扰素-α(IFN-α)mRNA的表达;Western blot法检测TLR9、NF-κB蛋白表达;双荧光素酶报告基因分析NF-κB转录活力的变化。结果与空白血清组比较,Cp G ODN刺激组TLR9、My D88、NF-κB、IFN-αmRNA表达、TLR9、NFκ-B蛋白表达和NF-κB转录活力均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与Cp G ODN刺激组比较,Cp G ODN加地塞米松组My D88、NF-κB、IFN-αmRNA表达、NF-κB蛋白表达和NF-κB转录活力均下降,差异有统计学意义(P0.01),Cp G ODN加含药血清组TLR9、My D88、NF-κB、IFN-αmRNA、TLR9、NFκ-B蛋白表达和NF-κB转录活力均下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论解毒祛瘀滋肾方治疗SLE所起到增效减毒的作用可能是通过调控TLR9信号通路来实现的。     

银翘散提取物对流感病毒性肺炎小鼠组织TLR4及NF-κB p65的影响

目的观察银翘散提取物对流感病毒性肺炎小鼠组织TLR4及NF-κB p65表达的影响。方法昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、银翘散组和利巴韦林组,每组10只,采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄小鼠肺炎,于感染前1天,银翘散组灌服中药提取物,利巴韦林组腹腔注射利巴韦林注射液,正常组和模型组以等体积的生理盐水灌胃。观察各组小鼠的一般状态、肺组织形态学,各组小鼠感染5天后处死,采用免疫组化染色法检测各组小鼠肺组织NFB p65和TLR4的表达。结果与正常组相比,模型组小鼠肺组织中NF-κB p65、TLR4的表达显著增高(P0.05),银翘散组NF-κB p65、TLR4的表达较模型组明显降低(P0.05)。结论 NF-κB p65、TLR4表达降低,很可能是银翘散提取物治疗流感病毒性肺炎小鼠的机理。     

4种归肺经中药对肺热证小鼠TLR2,NF-κB表达变化的研究

目的:研究麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对肺热证小鼠肺组织TLR2,NF-κB p65表达的影响,探讨这4味中药干预肺热证的作用机制。方法:将100只健康KM种小鼠随机分为正常对照组、模型组、麻黄、干姜、黄芩、桑白皮组(20,10 g·kg^-1),鼻腔滴入肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型,分别给予不同中药治疗,应用免疫组化法检测肺组织TLR2,NF-κB p65蛋白含量,Real-time PCR法检测肺组织TLR2,NF-κB p65 mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组TLR2,NF-κB p65蛋白含量升高（P<0.01）,mRNA表达上调（P<0.01或P<0.05）;与模型组比较,麻黄高、低剂量组、干姜低剂量组、黄芩高剂量组TLR2蛋白表达降低（P<0.05或P<0.01）;麻黄高、低剂量组、干姜低剂量组、黄芩高、低剂量组、桑白皮高、低剂量组NF-κB p65蛋白含量降低（P<0.05或P<0.01）;麻黄高、低剂量组、干姜高、低剂量组、黄芩高剂量组、桑白皮高剂量组TLR2 mRNA表达下调（P<0.01或P<0.05）。结论:麻黄、干姜、黄芩、桑白皮可能通过下调TLR2,NF-κB p65蛋白及mRNA表达,介导TLR2/NF-κB炎症信号通路,从而减轻小鼠肺热证肺组织损伤。     

补肾解毒通络方对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠TLR4/IκBα/NF-κB信号通路相关因子的影响

目的观察补肾解毒通络方对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠TLR4/IκBα/NF-κB信号通路相关因子的影响,探讨其抗炎作用机制。方法 32只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤组和补肾解毒通络方组,每组8只。除正常组外,其余各组均采用牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂注射制备CIA大鼠模型。模型制备成功后,各给药组分别给予相应药物干预,连续21 d。每隔7 d测量大鼠体质量、关节炎指数和左后足趾厚度,HE染色观察膝关节滑膜组织病理变化,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,Western blot检测滑膜组织Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达,RT-PCR检测滑膜组织TLR4、NF-κBp65、IκBαm RNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻,四肢关节明显肿胀,关节炎指数明显升高(P0.01),滑膜组织增生显著,大量炎性细胞浸润;血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显增加,IL-10含量明显减少(P0.01);膝关节滑膜组织TLR4、NF-κBp65蛋白和m RNA表达明显升高,IκBα蛋白和m RNA表达明显降低(P0.01)。与模型组比较,补肾解毒通络方组大鼠体质量明显增加,关节肿胀减轻,关节炎指数降低,滑膜增生改善,炎性细胞浸润减少;血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显减少,IL-10含量明显增加(P0.01);膝关节滑膜组织TLR4、NF-κBp65蛋白和m RNA表达明显降低,IκBα蛋白及m RNA表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论补肾解毒通络方可显著减轻CIA大鼠炎症反应,改善滑膜组织损伤,其机制可能与抑制TLR4/IκBα/NF-κB信号通路激活有关。     

连花清瘟胶囊对脂多糖致急性肺损伤小鼠IKK/IκB/NF-κB信号通路的影响

目的探讨连花清瘟胶囊对经气管内滴注脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤引起的肺组织炎症因子和IKK/IκB/NF-κB信号通路的蛋白表达的影响。方法将急性肺损伤的100只SPF级18~20 g雄性KM小鼠随机均分为5组,LPS组,地塞米松组,连花清瘟胶囊高、中、低剂量组,另设正常对照组(n=20)。光镜下观察实验小鼠肺组织病理变化,流式细胞术检测外周血中白介素-6(IL-6)的阳性表达率,RT-PCR法检测肺组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达,Western blot检测肺组织中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达。结果与正常对照组相比,LPS组小鼠肺组织中有大量炎性细胞渗出,外周血中IL-6,肺组织中MCP-1 mRNA,NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达均明显升高;与脂多糖组相比,外周血中IL-6的阳性表达率用药组均有所下降,肺组织中MCP-1mRNA表达用药组均改善明显,肺组织中NE、NF-κB、IκBα、IKKβ的蛋白表达为地塞米松组与高剂量组改善较明显,连花清瘟中、低剂量组也有不同程度改善。结论连花清瘟胶囊能够通过降低IKK/IκB/NF-κB信号通路的表达来减轻肺内炎症反应程度。     

清肺排毒汤对LPS诱导急性肺损伤小鼠炎症的作用

目的 探讨清肺排毒汤对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的抗炎作用及其机制。方法 小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组及清肺排毒汤低、高剂量组,除对照组外,其余各组采用气管穿刺注射LPS建立ALI模型,造模成功后给予相应药物干预7 d。记录小鼠存活率、肺湿干重比,HE染色观察肺损伤程度,吉姆萨染色法及血液分析仪分类计数肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达,ELISA法检测小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达。结果 与模型组比较,清肺排毒汤高剂量组小鼠肺水肿和损伤程度,血清、BALF中炎性细胞因子和炎性细胞数量,肺组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达和肺组织TLR4、MyD88、p-NF-κB p65,p-IκBα蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01)。结论 清肺排毒汤可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制炎症因子和介质释放,减轻LPS诱...     

乳癌术后方对HER2阳性乳腺癌复发转移中基质金属蛋白酶及其抑制因子的影响

目的 观察乳癌术后方抗HER2阳性乳腺癌复发转移的疗效,评估该方对HER2阳性乳腺癌复发转移过程中基质金属蛋白酶及其抑制因子的影响,揭示其抗复发转移的作用机制。方法 选用30周龄左右发瘤相当的人类表皮生长因子受体2（HER2/neu）转基因自发乳腺癌小鼠FVB/neu,行原发肿瘤切除术,术后随机分为空白对照组、乳癌术后方组、赫塞汀组、联合用药组(乳癌术后方加赫赛汀),给药治疗4个月,评价复发肿瘤瘤积抑制率及肺转移抑制率;Western blot法检测治疗结束后各组小鼠复发肿瘤组织中基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinase,MMP-2,9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1、2(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1,2)的表达情况。结果 治疗结束时空白对照组平均瘤积为（11.11±8.71) cm3,乳癌术后方组为(5.56±5.55)cm3,组间比较差异有统计学意义(P=0.037);空白对照组平均肺转移结节数为16个,乳癌术后方组为10个,乳癌术后方组肺转移抑制率达37.85%,但差异无统计学意义。乳癌术后方组活化的基质金属蛋白酶2(active-MMP2)表达较空白对照组、赫赛汀组及联合用药组均下调(P<0.05);3个用药组MMP9的表达水平较空白对照组下调(P<0.05),乳癌术后方组及联合用药组较赫赛汀组进一步下调(P<0.05);3个用药组TIMP-1、TIMP-2的表达均较空白对照组上调(P<0.05),其中乳癌术后方组与联合用药组TIMP-1表达的增加较赫赛汀组更为显著(P<0.05),赫赛汀组TIMP-2表达的增加较其余两个用药组更加显著,联合用药组高于乳癌术后方组(P<0.05)。结论 乳癌术后方对FVB/neu小鼠术后乳腺肿瘤复发具有抑制作用;能够减少细胞外基质的降解,增加对细胞外基质的保护作用,通过影响乳腺肿瘤细胞浸润转移的能力发挥抗复发转移作用。     

芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路分子表达的影响

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉三龙汤80.5 g/kg+顺铂3.67 mg/kg组,每组20只移植瘤小鼠。灌胃相应药物或生理盐水,联合组灌胃及腹腔注射给予,连续治疗21天,剥离瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。HE常规染色,光镜下观察肿瘤组织病理形态学。RT-qPCR、Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因和蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤具有移植瘤抑制作用,量效关系明显,与顺铂联用具有明显协同作用。光镜下观察模型组肿瘤细胞排列紊乱,周围未见坏死肿瘤细胞,而芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg组可见不同程度的坏死肿瘤细胞,其中以80.5 g/kg组最为明显。同时该复方能够下调TLR4/MyD88/NF-κB通路中TLR4、MyD88、IRAK、TRAF6、NF-κB及IκB基因和蛋白的表达水平,量效关系明显,且与顺铂联用具有明显协同作用。结论:结合前期研究基础,芪玉三龙汤的抑瘤作用可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,改善免疫功能有关。     

热毒宁注射液对LPS诱导ALI/ARDS小鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的 探讨热毒宁注射液对LPS诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)小鼠肺损伤的保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、热毒宁注射液组、地塞米松(阳性药)组，每组6只，气管注射LPS溶液制备ALI/ARDS模型，造模后3 h给予各组相应药物，连续干预7 d后，检测小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平，HE染色观察肺组织病理改变，Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),肺泡腔增大，肺泡壁增厚，肺部有大量的炎性细胞浸润；与模型组比较，热毒宁注射液组和地塞米松组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、I...     

参芪扶正注射液对免疫低下小鼠的免疫调节作用及其机制研究

目的:观察参芪扶正注射液对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用以及核因子-kappaB(NF-κB)和IκBα蛋白表达的影响。方法:将48只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型组、参芪扶正注射液低剂量组和高剂量组,每组12只。除空白对照组外,各组小鼠给予环孢素A诱导建立免疫低下模型,同时参芪扶正注射液低、高剂量组分别每天腹腔注射参芪扶正注射液15 mL/kg、30 mL/kg,连续给药14 d。第15天小鼠禁食麻醉后,取血离心取血清,采用ELISA法检测各组小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)水平。取脾脏称重计算脾脏指数,检测脾脏中IL-2、IFN-γ的表达,以及脾脏组织中NF-κB和IκBα蛋白的表达。结果:与模型组比较,参芪扶正注射液低、高剂量组脾脏指数有显著的升高(P0.05);与模型组比较,血清、脾脏中的IL-2、IFN-γ在参芪扶正注射液低、高剂量组中显著升高(P0.05);与模型组比较,参芪扶正注射液低、高剂量组脾脏细胞核内的NF-κB蛋白表达显著升高;细胞质内的IκBα蛋白表达明显降低。结论:在免疫低下小鼠模型中,参芪扶正注射液能够通过提高脾脏指数、升高IL-2、IFN-γ的表达,调节NF-κB、IκBα蛋白的表达,以达到提高机体免疫功能的目的。     

解毒化瘀方对溃疡性结肠炎大鼠TLR4、NF-κB的影响

目的通过观察解毒化瘀方对溃疡性结肠大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB表达的影响,探讨其治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用TNBS/乙醇复制溃疡性结肠炎大鼠模型,随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。治疗两周后,免疫组化法测定大鼠结肠组织中的TLR4、NF-κB的表达。结果与空白组比较,模型组中的LR4、NF-κB表达升高(P 0. 01);与模型组比较,各治疗组均能降低LR4、NF-κB的表达,其中西药治疗组与中药高剂量组作用最明显(P 0. 05)。结论解毒化瘀方可能通过降低TLR4、NF-κB的表达发挥抗炎作用。     

基于“脾为之卫”探讨历节胶囊对CIA小鼠炎症信号通路的影响

目的 观察历节胶囊对CIA小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响，探讨其治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法 将60只DBA/1小鼠随机分成3组：正常组，模型组，历节胶囊组，每组各20只。每组给药连灌21天后处死。Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达量；PCR检测TLR4、MyD88、NF-κB p65的mRNA表达水平；ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 与正常组比较，模型组MyD88、NF-κB p65及TLR4的mRNA及蛋白表达量均上升，模型组的血清TNF-α水平升高，差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较，历节胶囊组MyD88、NF-κB p65及TLR4 mRNA及蛋白表达量均下降，血清TNF-α水平下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 历节胶囊可以通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65炎症信号通路以取得疗效。