冰片增强依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠抗氧化作用研究

目的 探究冰片协同依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用的影响.方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,脑缺血再灌注组,脑缺血再灌注加依达拉奉组,脑缺血再灌注加冰片组,脑缺血再灌注加依达拉奉加冰片组.I/R模型构建后观察神经功能缺损症状,检测脑组织水肿程度和脑梗死面积,氧化因子(MDA,SOD,GSH)水平,炎性细胞因子(IL-6,TNF-α,IL-1β)水平,血脑屏障紧密连接蛋白(ZO-1,Occludin,Claudin-5)表达.结果 I/R组大鼠出现神经功能评分增加,脑水肿程度和脑梗死面积增加.依达拉奉与冰片不同程度减轻以上病理改变,但仅有依达拉奉与冰片联合使用表现改善明显.I/R组大鼠氧化因子水平增加,抗氧化因子水平降低,且炎性细胞因子水平增加,依达拉奉与冰片联合使用抗氧化与抗炎效应最强,优于药物单用.I/R降低了大鼠脑组织中血脑屏障紧密连接蛋白表达,依达拉奉与冰片能够不同程度的增加ZO-1,Occludin,Claudin-5表达,依达拉奉与冰片联合使用能够恢复这些蛋白表达水平至基线.结论 依达拉奉与冰片能不同程度改善脑缺血再灌注后病理症状.冰片能够增强依达拉奉抗氧化、抗炎作用,机制可能与协同抑制缺血后ZO-1,Occludin,Claudin-5表达下调,保护血脑屏障有关.     

冰片增强依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠抗氧化作用研究

目的 探究冰片协同依达拉奉对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用的影响.方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,脑缺血再灌注组,脑缺血再灌注加依达拉奉组,脑缺血再灌注加冰片组,脑缺血再灌注加依达拉奉加冰片组.I/R模型构建后观察神经功能缺损症状,检测脑组织水肿程度和脑梗死面积,氧化因子(MDA,SOD,GSH)水平,炎性细胞因子(IL-6,TNF-α,IL-1β)水平,血脑屏障紧密连接蛋白(ZO-1,Occludin,Claudin-5)表达.结果 I/R组大鼠出现神经功能评分增加,脑水肿程度和脑梗死面积增加.依达拉奉与冰片不同程度减轻以上病理改变,但仅有依达拉奉与冰片联合使用表现改善明显.I/R组大鼠氧化因子水平增加,抗氧化因子水平降低,且炎性细胞因子水平增加,依达拉奉与冰片联合使用抗氧化与抗炎效应最强,优于药物单用.I/R降低了大鼠脑组织中血脑屏障紧密连接蛋白表达,依达拉奉与冰片能够不同程度的增加ZO-1,Occludin,Claudin-5表达,依达拉奉与冰片联合使用能够恢复这些蛋白表达水平至基线.结论 依达拉奉与冰片能不同程度改善脑缺血再灌注后病理症状.冰片能够增强依达拉奉抗氧化、抗炎作用,机制可能与协同抑制缺血后ZO-1,Occludin,Claudin-5表达下调,保护血脑屏障有关.     

醒脑静注射液保护大鼠脑缺血-再灌注损伤及血脑屏障的作用研究

目的:对醒脑静注射液通过改善血脑屏障的通透性进而保护大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用进行研究。方法:采用大脑中动脉阻塞法(MACO)建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,以神经功能评分、脑梗死体积和脑组织形态学综合评价10、15 mL/kg醒脑静注射液腹腔注射对大脑缺血-再灌注损伤的保护效应,通过静脉注射伊文思蓝考察醒脑静注射液对大鼠血脑屏障通透性的影响,采用免疫组化和Western blot考察脑紧密连接蛋白ZO-1的表达。结果:经神经功能评分、梗死体积分析及HE染色分析脑组织形态学特征,表明以10、15 mL/kg剂量醒腹腔注射脑静注射液能显著减轻大鼠脑缺血-再灌注的损伤,对血脑屏障通透性考察发现醒脑静注射液组大鼠脑内伊文思蓝含量显著低于模型组,且脑紧密连接蛋白ZO-1表达显著高于模型组。结论:醒脑静注射液能逆转大鼠脑缺血-再灌注损伤对血脑屏障的破坏,降低血脑屏障通透性,从而减轻脑组织在缺血-再灌注中的损伤。     

冰片配伍灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤血脑屏障通透性的影响

目的:研究冰片配伍灯盏花素后对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响。方法:50只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、灯盏花素组及冰片配伍灯盏花素组。线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h进行检测。伊文思蓝法检测血脑屏障通透性,免疫印迹法检测ZO-1和Claudin-5蛋白的表达,RT-PCR法检测ZO-1和Claudin-5基因的表达。结果:冰片配伍灯盏花素能显著降低脑组织中EB浓度(9.87±1.15),提高ZO-1和Claudin-5蛋白(0.83±0.06,1.05±0.07)和mRNA(1.51±0.07,1.58±0.08)的表达。结论:冰片配伍灯盏花素对血脑屏障的保护作用可能与冰片促进灯盏花素透过血脑屏障有关。     

麝香黄芪复方滴丸对缺血再灌注损伤大鼠脑组织紧密连接蛋白表达影响

目的 旨在通过麝香黄芪复方滴丸对脑缺血大鼠模型紧密连接蛋白表达影响,探讨麝香黄芪复方滴丸对缺血再灌注大鼠血脑屏障修复的作用机制。方法 将440只大鼠随机分成假手术组、模型组、麝香黄芪复方滴丸组、依达拉奉组,每组110只。利用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型,在造模前3 d,假手术组、模型组按照15 mL/kg灌胃生理盐水,麝香黄芪复方滴丸组及依达拉奉组分别按15 mL/kg给药,1次/d。造模后继续按此标准给药至取材日期。采用Western Blot测定缺血脑组织中Occludin、Claudin-5、JAM-A及ZO-1蛋白表达。结果 (1)与假手术组相比,模型组缺血脑组织Occludin蛋白、Claudin-5蛋白、JAM-A及ZO-1蛋白表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与模型组相比,麝香黄芪复方滴丸组和依达拉奉组缺血脑组织Occludin蛋白、Claudin-5蛋白、JAM-A及ZO-1蛋白表达水平均有上升,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在造模后的1 d,依达拉奉组缺血脑组织Claudin-5蛋白表达水平上升较麝香黄芪...     

积雪草酸对脑梗死大鼠神经保护作用研究

目的 探讨积雪草酸对缺血性脑卒中(IS)大鼠神功功能的保护作用及其机制。方法 75只健康、雄性清洁级Wistar大鼠随机分为假手术组,脑缺血组,积雪草酸-L组(50 mg/kg),积雪草酸-M组(100 mg/kg),积雪草酸-H组(200 mg/kg)。各组通过大脑中动脉线栓阻塞法构建缺血性脑卒中模型后给予积雪草酸治疗。3 d后评估大鼠神经功能。循序处死大鼠,取脑组织开展梗死体积、脑水肿、血脑屏障完整性检测,免疫荧光染色与Western blot试验。结果 与脑缺血组相比,积雪草酸可明显降低缺血性脑卒中大鼠神经功能评分(P<0.05),减少伊文思蓝穿透量(P<0.05)、脑水肿程度(P<0.05)、脑梗死体积(P<0.05)。积雪草酸可增加大鼠缺血区CD31/Ki67双阳性染色(P<0.05),且脑组织中VEGFA与Ang1蛋白表达水平上调(P<0.05),Claudin-5与ZO-1表达增加(P<0.05)。结论 积雪草酸对缺血性脑卒中具有治疗作用,其机制可能是提高VEGFA与Ang1表达,促进血管内皮细胞增殖,帮助血脑屏障结构的修复。     

香椿子正丁醇提取物对脑缺血再灌注致多器官功能障碍综合征的保护作用

目的 探讨香椿子正丁醇提取物对脑缺血再灌注致大鼠多器官功能障碍综合征的保护作用.方法 大鼠随机分为正常对照组,假手术组,模型组,溶媒对照组,香椿子正丁醇提取物低、高剂量(20、30 mg/kg)组,阿司匹林(10 mg/kg)阳性对照组,各给药组每天给药1次,连续给药7d.第8天以大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,造模后,行神经行为学评分判断神经功能损伤程度,伊文思蓝法观察血脑屏障通透性,分光光度法测定胃肠组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 与模型组相比,香椿子正丁醇提取物可以改善脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤(P＜0.05)、降低血脑屏障通透性(P＜0.05);减少胃和小肠组织MDA和NO的生成(P＜0.05),抑制SOD、GSH-Px活性升高(P＜0.05).结论 香椿子正丁醇提取物通过抗氧化应激效应对脑缺血再灌注致多器官功能障碍综合征发挥保护作用.     

脉络宁对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响研究

目的研究脉络宁(玄参、牛膝、石斛、金银花等)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响,初步探讨其可能的机制。方法 72只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉对照组,脉络宁高、中和低剂量组。脑缺血再灌注大鼠模型采用线栓法阻断大脑中动脉缺血2 h后再灌注24 h的方式建立。TTC法测定脑梗死体积;伊文思蓝法检测血脑屏障通透性;Western blot法检测脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达。结果脉络宁能显著降低缺血再灌注大鼠脑梗死体积,明显降低血脑屏障通透性,可使紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达增加。结论脉络宁可降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的机制可能与上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达有关。     

参附注射液对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障的影响

目的:探讨参附注射液对局灶性脑缺血大鼠血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的影响及其机制。方法:利用线栓法制作脑缺血/再灌注模型,再灌注24h后进行神经功能评分,应用伊文思蓝法(Evans Blue,EB)观察对照组与参附注射液治疗组(SFI)BBB通透性,采用干湿重法比较脑含水量、TTC法比较脑梗死面积。蛋白印迹法检测金属硫蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK)的表达。结果:参附注射液治疗组的血脑屏障通透性、脑含水量、脑梗塞体积、神经功能缺损程度均比对照组明显降低(P0.05)。和对照组相比,SFI组的MMP-9及磷酸化ERK的蛋白表达明显降低。结论:参附注射液对大鼠脑缺血模型的血脑屏障具有保护作用,其作用机制与抑制MMP-9及ERK信号通路相关。     

大黄改善急性脑出血大鼠血脑屏障损伤的水通道蛋白-4机理研究

目的探讨大黄改善急性脑出血血脑屏障损伤的水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）机理。方法采用立体定向注射自体无肝素动脉血制作大鼠脑出血模型,对神经功能缺损、脑含水量进行观察,伊文思蓝染色观察血脑屏障紧密连接（blood-brain barrier tight junction,BBBTJ）的损害,电镜观察不同时间点BBB和神经星形胶质细胞足突改变,用RT-PCR和Western blot检测AQP-4InRNA和蛋白表达。结果脑出血后,与模型组比较,大黄可明显减轻脑水肿;伊文思蓝染色结果显示血脑屏障从12h开始明显损害;电镜结果提示出血后12h血脑屏障紧密连接被破坏,而且神经星形胶质细胞足突肿胀;大黄可有效使血脑屏障紧密连接的破坏减少、神经星形胶质细胞足突肿胀减轻。脑出血模型组大鼠AQP-4表达出现增高（P〈0．05）;脑出血后1天AQP-4mRNA和AQP-4蛋白表达增强,第3天达峰值,其后逐渐有所下降。大黄可抑制AQP-4基因特录和翻译。结论大黄可通过改善血脑屏障损伤减轻脑水肿;大黄改善血脑屏障破坏的作用可能是通过抑制AQP-4基因转录和翻译实现的。