硫化氢调节自噬改善糖尿病大鼠心肌纤维化

目的：探讨气体信号分子硫化氢(H₂S)是否通过调节细胞自噬改善糖尿病大鼠心肌细胞纤维化。 方法：链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。60 只 7 周龄SD 雄性大鼠随机分成 6 组(每组 10 只),分别为对照组、糖尿病组(STZ 组)、STZ+高浓度 H₂S 组(100 mg/kg NaHS)、STZ+中浓度 H₂S 组(60 mg/kg NaHS)、STZ+低浓度 H₂S 组(40 mg/kg NaHS)、STZ+胱硫酸 -γ- 裂合酶抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)组(30 mg/kg PPG)。糖尿病大鼠建模成功并饲养 8 周后处死大鼠,取左室心肌组织,Masson 染色观察心肌组织的心肌纤维化情况,Western blot 检测大鼠心肌组织胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ)、微管相关蛋白 1A/1B- 轻链 3(LC3)、自噬蛋白 P62 的表达水平。 结果：与对照组相比,STZ组大鼠心肌纤维化程度增加。与 STZ 组相比,STZ+H₂S 组、STZ+PP...     

桑叶多糖对糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的影响

目的观察桑叶多糖(MLP)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达的影响,探讨MLP抗肾纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、MLP高、中、低剂量(C、D、E)治疗组。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立DN大鼠模型。给予不同剂量MLP进行治疗8 w后,分别检测大鼠空腹血糖(FPG);检测尿液中微量白蛋白(mAlb)含量;测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量;通过RT-PCR法测定肾脏中TGF-β1 mRNA表达。结果 MLP能显著降低DN大鼠FPG、mAlb含量,同时能够降低血清中BUN、Cr含量(P<0.01);下调TGF-β1 mRNA表达(P<0.01)。结论 MLP对DN具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过下调TGF-β1 mRNA表达来实现。     

衰老对大鼠肠道组织形态及自噬水平的影响

目的研究老龄大鼠肠道组织衰老与自噬水平变化规律及其内在联系。方法选取体重一致的老龄(24月龄)雄性SD大鼠为老龄组,青年(5月龄)雄性SD大鼠为青年组,分析两组肠道组织形态变化,测定肠道组织微管相关蛋白1轻链(LC3)-Ⅱ的浓度变化。结果老龄组十二指肠、回肠和结肠绒毛高度较青年组显著萎缩变短,十二指肠与结肠隐窝深度显著缩短,回肠和结肠的绒毛高度与隐窝深度比值显著变小(均P0.05),老龄组肠道组织LC3-Ⅱ表达量较青年组显著升高(P0.05)。结论衰老过程中,大鼠肠道组织萎缩,LC3-Ⅱ显著上调,自噬流受阻可能是加剧肠道衰老的原因。     

糖尿病大鼠主动脉自噬水平的变化及雷帕霉素的干预作用

目的观察糖尿病大鼠主动脉自噬水平的变化及雷帕霉素的干预作用,探讨雷帕霉素是否通过调节自噬、内质网应激和细胞凋亡对糖尿病大鼠主动脉产生保护作用。方法雄性SD大鼠用随机数字表法分为正常对照组、糖尿病组和雷帕霉素干预组。采用链脲佐菌素制备1型糖尿病大鼠模型。雷帕霉素干预组给予雷帕霉素2mg/(kg·d)灌胃。于实验第8周留取血标本,用于血生物化学指标和脂联素水平检测,然后处死动物并迅速取出胸主动脉和腹主动脉,测定主动脉Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Caspase-12、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠血清脂联素水平显著降低(P0.05),主动脉壁增厚,内皮严重受损,主动脉Beclin1、LC3的mRNA和蛋白表达水平及Bcl-2mRNA表达水平显著降低(P 0. 05),主动脉p62、CHOP、Caspase-12和GRP78的mRNA和蛋白表达水平及Bax mRNA表达水平显著升高(P0.05)。与糖尿病组比较,雷帕霉素干预组大鼠血清脂联素水平显著升高(P0.05),主动脉组织病理改变显著减轻,主动脉Beclin1、LC3的mRNA和蛋白表达水平及Bcl-2 mRNA表达水平显著升高(P0.05),主动脉p62、CHOP、Caspase-12和GRP78的mRNA和蛋白表达水平及Bax mRNA表达水平显著降低(P0.05)。结论糖尿病大鼠主动脉组织自噬水平降低,雷帕霉素可能通过激活自噬和减轻内质网应激和细胞凋亡水平对糖尿病大鼠主动脉产生保护作用。     

西格列汀通过调控自噬对2型糖尿病大鼠肝纤维化保护作用的研究

目的研究磷酸西格列汀对T2DM大鼠肝细胞自噬的影响。方法采用高脂、高糖饮食配合45mg/kg STZ饲喂法建立T2DM大鼠模型。建模成功后将大鼠随机分组,分别用10m/kg西格列汀灌胃(SGT组)、PBS灌胃(T2DM组)及10IU/(kg·d)胰岛素腹腔注射(ISL组)。PBS灌胃的正常大鼠作为正常对照组(NC)。12周后测定血糖水平。HE、Masson染色评估肝纤维化程度;TUNEL法检测肝细胞损伤状况;采用RT-PCR测定ATG3、ATG12、p62与Beclin1mRNA的表达;采用半定量Western blot测定ATG3、ATG12、p62,Beclin1和LC3B的蛋白水平。结果西格列汀治疗12周后,与T2DM组比较,SGT组血糖降低(P0.05)。HE、Masson染色结果表明,SGT组肝纤维化程度改善。与NC组比较,T2DM组肝组织中自噬相关基因变化差异无统计学意义;T2DM组中ATG3、ATG12、p62、Beclin1的mRNA的表达量分别为(0.82±0.12)、(0.66±0.03)、(0.12±0.01)和(0.52±0.02);SGT组中各基因表达量分别为(1.62±0.11)、(0.89±0.03)、(1.35±0.06)和(0.87±0.11),组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。半定量Western blot结果显示,SGT组肝组织中ATG3、ATG12、p62、Beclin1和LC3B蛋白的表达水平均增加。结论磷酸西格列汀可能通过促进肝组织自噬水平来减轻T2DM大鼠肝纤维化程度。     

糖尿病肾脏疾病发病机制中自噬的研究进展

DKD是终末期肾病的主要病因,是全球严重公共卫生问题。DKD发病机制涉及多种途径。将胞质成分传递到溶酶体进行降解的分解代谢过程,称为自噬。自噬在正常血糖水平下,是包括足细胞、近端小管细胞、系膜细胞和内皮细胞在内的肾上皮细胞的重要保护机制。本文综述DKD发病机制中自噬的研究进展。     

自噬与糖尿病肾病肾脏固有细胞的损伤

糖尿病肾病是慢性肾脏病主要原因之一,目前仍缺乏行之有效的治疗靶点。自噬是一种以自我消化的方式清除细胞内长寿命蛋白质和受损细胞器的生理、病理过程,大多时候被认为是细胞的一种自我保护机制,但是过度的自噬也将会导致细胞损伤。自噬受损可能是糖尿病肾病发病原因,本文通过复习糖尿病肾病时肾脏固有细胞(包括肾小球足细胞、内皮细胞、系膜细胞、近曲小管内上皮细胞)的体内及体外研究相关文献,发现自噬在糖尿病肾病中主要起到保护作用;自噬可能成为糖尿病肾病治疗新靶点。     

胰岛素对高血压大鼠肾脏处理钠的影响

文献报道高血压病患者和动物模型中,血浆胰岛素水平升高,而降糖作用减弱。在高血压状态下,胰岛素对肾钠重吸收影响的报道目前尚不多,而这一点对确认胰岛素在高血压形成或发展中的作用至关重要。作者研究了自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压的Wistar-Kyoto大鼠(WKY),接受胰岛素处理后,肾脏尿钠排泄的变化,并对两系大鼠进行了比较。实验中,将SHR和WKY大鼠分别分为3组。第1组为小剂量胰岛素组,先给予胰岛     

糖尿病大鼠肾脏纤维化与CTGF表达的相关性

目的 探讨糖尿病大鼠肾脏纤维化与结缔组织生长因子（CTGF）表达的关系.方法 应用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法诱导糖尿病大鼠模型,共成功造模23只,其中18只按照饲养时间随机分为3组;4周（n=6）、12周（n=6）、24周（n=6）],同时设置18只大鼠作为对照组,分别饲养4周（n=6）,12周（n=6）和24周（n=6）,在相应时间点采用免疫组织化学法检测肾脏CTGF含量,同时进行肾脏病理检测并进行组间比较.结果 糖尿病模型组CTGF蛋白表达在各时间点,随病程的进展,表达逐渐增高.第4周分别为（0.88±0.05）×10^3/μm^2vs.（0.41±0.06）×10^3/μm^2第12周分别为（0.29±0.05）×10^3/μm^2vs.（0.60±0.05）×10^3/μm^2第24周分别为（3.13±0.08）×10^3/μm^2vs.（1.50±0.05）×10^3/μm^2差异均有统计学意义（P＜0.05）.且CTGF的含量与肾脏间质血管周围胶原面积（PVCA）（r=0.89）、肾小球胶原沉积评分（GCDS）（r=0.87）、肾小管间质病变评分（TIDS）（r=0.76）、肾小球系膜基质指数（Ms/Gs）（r=0.82）（P＜0.05）均呈正相关.结论 糖尿病大鼠CTGF的高表达,可能与肾脏纤维化有关,检测肾脏CTGF含量可考虑作为评价肾脏纤维化的方法.     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

自噬在肾脏结石大鼠发病中的作用机制

目的探讨自噬在肾脏结石发病中的作用机制。方法建立腺嘌呤摄入过量引发的肾结石小鼠模型,通过对小鼠血液、尿液、肾脏组织样本收集,运用分子生物学方法检测小鼠血液中肌苷酸含量、小鼠体重、肾比重、一昼夜尿液量、小鼠尿液中微量蛋白含量及肾脏组织自噬基因mRNA和自噬相关蛋白的表达情况,并运用生物统计学进行数统计。结果腺嘌呤模型小鼠体重下降,肾比重和一昼夜排尿量比对照组较高,酶联免疫吸附(ELISA)结果显示腺嘌呤模型小鼠血液中肌苷酸的含量,尿液中微量蛋白的含量与对照组相比升高,同时PCR及蛋白免疫印迹结果证明自噬相关mRNA和蛋白表达量的变化,自噬抑制剂处理小鼠后,肾结石症状稍有缓解,自噬相关mRNA和蛋白表达量的也发生调整。结论证明2,8二羟基腺嘌呤结石的积累可以引起肾组织自噬发生,导致肾结石相关症状。     

胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠肝脂质含量及胰岛素抵抗的影响

目的探讨胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠肝内脂质含量及胰岛素抵抗的影响。方法尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(2 5 mg/kg) 高热量饮食建立2型糖尿病大鼠模型,根据口服葡萄糖耐量试验(OGTT) 和胰岛素分泌试验(IST)结果将其分为糖尿病非治疗(DC)组和糖尿病胰岛素治疗(DI)组,并设立正常对照(N C)组。胰岛素和等渗盐水干预4周后再行OGTT和IST,并检测各组大鼠的血脂、肝脂质及肝组织学改变。采用胰岛素敏感性指数(ISI)来评价胰岛素抵抗。结果D C组血脂、肝脂质含量明显高于NC 组(t值为2.59～1 5.77,P<0.05),而ISI则低于NC组(t=3.1 6,P<0.05),并且肝组织切片中出现明显的脂肪滴;与DC组相比,D I组血脂降低,而肝脂质显著增加(甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸分别增加55.70%,19.87%,22.20%),病理组织学检查显示脂肪滴增大融合,但是ISI变化不明显。结论2型糖尿病大鼠胰岛素治疗纠正血糖的同时增加了肝细胞内脂质的含量,但对胰岛素抵抗的影响不明显。     

黄芩对糖尿病大鼠肾脏病变的影响

目的　探讨中药黄芩对实验性糖尿病大鼠肾脏病变的影响及可能机制。　方法　诱导大鼠糖尿病后 ,随机分为苯拉普利对照组及黄芩治疗组 ,比较各组大鼠的自由基代谢状况、尿白蛋白(Alb)排泄量、肌酐清除率 (Ccr)及肾脏病理改变。　结果　黄芩治疗组肾脏超氧化物歧化酶 (SOD )和过氧化氢酶 (CAT)活性 [分别为 (11.3 9± 1.57)U /mg (pr)和 (1.41± 0 .11)U/g(ww )·min- 1]较对照组 [分别为 (8.69± 1.65)U /mg (pr)和 (1.2 6± 0 .0 8)U·g- 1(ww )·min- 1]明显增高 (P <0 0 5) ,肾脏和尿脂质过氧化物丙二醛 (MDA)水平 [分别为 (2 85± 2 2 )nmol/ g(ww)和 (62 1± 113 )mmol/ 2 4h]较对照组 [分别为 (3 3 0± 2 2 )nmol/ g(ww)和 (989± 2 0 5)mmol/ 2 4h]明显降低 (P <0 0 5)。黄芩治疗组尿Alb排泄量显著减少 ,系膜基质增生和肾脏体积增大明显减轻 ,与苯那普利治疗组无显著差异。　结论　黄芩可通过减轻肾脏自由基代谢紊乱、抑制肾小球高滤过等机制来改善糖尿病大鼠的肾脏病变状况     

金雀异黄素对糖尿病大鼠糖脂代谢及肾脏的影响

目的探讨金雀异黄素(又称染料木黄酮,genistein,Gen)对糖尿病(DM)大鼠血糖、胰岛素敏感性、血脂、肾功能等代谢指标以及肾脏病理的影响。方法雄性SD大鼠45只,分为正常对照组(10只,普通饲料自由饮食)、DM组(4周组,9只;8周组,8只;普通饲料自由饮食)、DM Gen组(4周组,10只;8周组,8只;普通饲料自由饮食 Gen 30 mg.kg-1.d-1)。DM组及DM Gen组均按60 mg/kg的剂量腹腔内注射STZ建立DM模型。于实验4周、8周末禁食12 h,处死部分大鼠取动脉血检测FBG、FIns、血脂及BUN、Cr;取肾脏制作组织切片行HE染色。结果DM 8周大鼠FBG、ISI、TC、TG、BUN、Cr分别为35.2±1.8 mmol/L、-5.83±0.20、2.50±0.61 mmol/L、1.26±0.30 mmol/L、18.4±0.7 mmol/L、70.2±7.8μmol/L,相应DM Gen 8周组的结果分别为18.8±3.4 mmol/L、-5.27±0.47、1.43±0.19 mmol/L、1.11±0.34 mmol/L、10.0±1.7 mmol/L、51.7±4.5μmol/L。Gen可减轻肾小球肥大、肾小管扩张。结论Gen可改善DM大鼠的糖脂代谢紊乱,减轻肾脏组织病理变化,改善肾功能,延缓糖尿病肾病的进展。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠一氧化氮系统及肾脏的影响

目的　研究伊贝沙坦对糖尿病大鼠一氧化氮 (NO)系统及肾脏的影响。　方法　随机将 4 0只Wistar大鼠分为 4组 ,每组 10只 ,分别为正常对照组、糖尿病组、伊贝沙坦组和开搏通组。病程 12周时处死大鼠 ,取血、尿和肾脏标本 ,测定尿量、体重、肾重 /体重比值、血糖、糖化血红蛋白(HbA1c) ;测定血清、尿液和肾组织的NO水平 ,通过免疫组化方法 ,检测肾脏组织诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)蛋白的合成 ,并通过光镜和电镜观察肾脏的病理结构变化。　结果　治疗 12周后 ,糖尿病各组大鼠的尿量、肾重 /体重比值、血糖、HbA1c、血清、尿液和肾脏组织的NO水平、肾脏组织iNOS蛋白的合成、肾小球体积和肾小球基底膜厚度明显高于或大于正常组 ,体重明显低于正常组 (P <0 .0 1) ;伊贝沙坦组大鼠的血清、尿液和肾脏组织的NO水平、肾脏组织iNOS蛋白的合成、肾小球体积和肾小球基底膜厚度比糖尿病组明显减少 (P <0 .0 5 ) ;血清、尿液和肾组织NO水平与肾小球体积和肾小球基底膜厚度呈正相关。　结论　伊贝沙坦能延缓糖尿病大鼠肾脏功能损害的进展 ,其机制可能与伊贝沙坦不同程度地抑制糖尿病大鼠NO的产生有关。     

投氟对大鼠胰岛素水平的影响

目的观察给以不同剂量氟的大鼠胰岛素水平的变化。方法经灌胃给氟复制氟中毒模型。利用Siemens ADVIA Centaur XP全自动化学发光免疫分析仪检测大鼠血清胰岛素水平,酶联免疫吸附法分析糖化血红蛋白水平,使用贝克曼全自动生化分析仪检测血脂。结果胰岛素和糖化血红蛋白水平的变化显示出低剂量和高剂量的氟都能够诱导胰岛素分泌,其高剂量氟组大鼠胰岛素水平更高。高剂量氟对胰岛素耐受影响不大,而低剂氟组大鼠胰岛素耐受能力下降,联合胰岛功能受损,进一步降低了大鼠对胰岛素的敏感性。结论一定剂量的氟刺激大鼠胰岛素的分泌,且对胰岛素的分泌成剂量-效应关系。此外,氟能够影响大鼠对胰岛素的敏感性,甚至降低其敏感性。     

糖尿病烫伤大鼠胰岛素强化治疗对生长激素轴的影响

本实验将30只糖尿病烫伤大鼠随机分为胰岛素强化治疗组和常规治疗组，测定各组血清生长激素（GH）和胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）浓度，并观察死亡率。结果表明，胰岛素强化治疗使血糖控制在3．9～5．6mmol／L，能明显改善糖尿病烫伤大鼠GH—IGF-I轴紊乱，并显著降低死亡率。     

褪黑素对糖尿病大鼠肾脏抗氧化物酶的影响

与正常大鼠比较,STZ诱发的糖尿病大鼠肾与血清的丙二醛水平升高,以及抗氧化物酶活性降低,在褪黑素治疗后均见明显改善,同时伴随出现尿白蛋白排泄率、血尿酸、血脂谱以及肾重对体重的比值等的降低。     

穿心莲内酯对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响

目的研究穿心莲内酯（AP）对实验性糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤方面的影响,为其临床应用提供依据。方法 SD大鼠高脂高糖饲料喂养4周后,分两次每次腹腔注射链尿佐菌素（30 mg/kg）制备糖尿病大鼠模型。治疗组分别用2.5%二甲双胍、0.5%和1%的AP灌胃8周,结束时测定肥胖指数、肾重指数、血糖、血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白、肌酐清除率;肾脏组织制备匀浆测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱苷肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）等指标。结果 1%的AP组与糖尿病组比较,空腹血糖、肥胖指数、肾重指数、血肌酐2、4 h尿蛋白、肌酐清除率下降;肾脏组织MDA含量降低,GSH-PX活性升高（P均〈0.05）。结论 AP具有减轻糖尿病大鼠肾脏氧化应激损伤的作用,并改善大鼠一般情况,可能增加长期存活率。