1,25二羟基维生素D_3对HepG_2细胞内甘油三酯含量及其机制的研究

目的观察1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)_2D_3]对HepG_2细胞内TG含量及其代谢途径中相关基因脂联素受体2(AdipoR2)、p38丝分裂素激活蛋白激酶(p38MAPK)、脂蛋白脂(LPL)表达的影响,揭示1,25(OH)_2D_3在调控HepG_2细胞内TG代谢中的作用,并探讨1,25(OH)_2D_3调控TG代谢的可能机制。方法将HepG_2细胞分为Con组、溶剂组、MK886组、VitD组及VitD+MK886组。检测各组肝细胞内AdipoR2、p38MAPK、LPL基因、蛋白表达水平及肝细胞内TG含量。结果 Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目标基因及蛋白含量、TG含量差异均无统计学意义(P0.05);MK886组与Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目标基因及蛋白含量降低(P0.05),而TG含量升高[(841.26±60.1)vs(432.17±58.23)vs(427.18±57.85)vs(429.36±57.96)mg/g,P0.05];VitD组与Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目的基因及蛋白含量升高(P0.05),而TG含量降低[(231.72±40.83)vs(432.17±58.23)vs(427.18±57.85)vs(429.36±57.96)mg/g,P0.05];VitD组与MK886组比较,3种目的基因及蛋白含量升高(P0.05),而TG含量降低[(231.72±40.83)vs(841.26±60.13)mg/g,P0.05]。结论 1,25(OH)_2D_3可能是通过上调AdipoR2、p38MAPK、LPL的表达来降低肝细胞内TG含量。     

1,25(OH)_2D_3干预IL-17通路抑制大鼠肝纤维化作用机制研究

目的通过检测1,25(OH)_2D_3对大鼠肝组织中IL-17及其相关蛋白表达的影响,探讨1,25(OH)_2D_3抑制肝纤维化形成的作用机制。方法将60只大鼠随机分为四组:对照组、模型组(DMN盐溶液)、药物溶剂组(DMN盐溶液+花生油灌胃)、治疗组(DMN盐溶液+1,25(OH)_2D_3油溶液灌胃),8周后对各组大鼠肝脏行Masson染色,观察其病理学变化,并行纤维化程度分级;免疫组化法(IHC)观察各肝组织中IL-17的蛋白表达;Western blotting法定量检测各组肝脏中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白表达;Real time-PCR法分析各组肝脏中IL-17、RORγt和MIP3αmRNA表达量。结果模型组及药物溶剂组大鼠肝脏呈显著纤维化改变,1,25(OH)_2D_3治疗组肝脏纤维化程度较溶剂组明显减轻;模型组和药物溶剂组肝组织中IL-17、RORγt、MIP3α蛋白及mRNA表达量较对照组明显升高,而治疗组中三者蛋白及mRNA表达量较溶剂组显著降低,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论1,25(OH)_2D_3抑制肝纤维化发生、发展;1,25(OH)_2D_3可抑制肝组织中IL-17、RORγt及MIP3α蛋白和mRNA表达,从而减轻肝纤维化,提示1,25(OH)_2D_3可能通过干预肝脏IL-17信号通路抑制纤维化进程。     

糖尿病大鼠肝脏组织中维生素D受体表达与血清25-羟维生素D相关性研究

目的检测T2DM大鼠肝脏中维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达,探讨T2DM大鼠肝脏VDR表达及血清25-羟维生素D[25(OH)D]与代谢指标的相关性。方法取60只健康雄性Wistar大鼠,随机分成T2DM组(n=30)和正常对照(NC)组(n=30)。T2DM组予高脂高胆固醇饲料喂养4周后,禁食16 h,按30 mg/kg单次腹腔注射STZ,72 h后尾静脉采血测血糖,以血糖浓度16.7mmol/L作为糖尿病模型造模成功的标准。ELISA测定血清25(OH)D水平,RT-PCR和Western blot分别检测两组肝脏组织中VDR mRNA及蛋白表达。Spearman相关分析T2DM组血清25(OH)D与FPG、F1ns、FFA、TG、TC、HOMA-IR的关系。结果与NC组比较,T2DM组肝脏中VDR mRNA及蛋白表达增高[(2.15±0.25)vs(8.26±2.23),(0.317±0.085)vs(0.542±0.135)],血清25(OH)D水平降低[(43.6±12.3)vs(21.3±6.7)ng/ml],血清FFA、TG、TC、LDL-C、FIns、HOMA-IR增高(P0.05)。相关性分析显示,血清25(OH)D与FFA、TG、FIns、HOMA-IR呈负相关,与HDL-C呈正相关(P0.05)。结论 T2DM大鼠肝脏组织中VDR mRNA及蛋白表达增加,而血清25(OH)D降低。血清25(OH)D降低可能会反馈性促进肝脏VDR表达,并可能进一步导致肝脏IR及糖脂代谢异常。     

甲状旁腺功能减退症、垂体生长素瘤及垂体泌乳素瘤患者血1,25-(OH)_2D_3水平

本文报道用不需高压液相层析的1,25-双羟维生素D[1,25-(OH)_2D_3]放射受体测定法检测甲旁减患者用1α-羟维生素D_3(1α-OHD_3)治疗前后、垂体生长素瘤及垂体泌乳素瘤患者血清1,25-(OH)_2D_3水平的结果,及1,25-(OH)_2D_3与某些激素关系的初步探讨。     

1,25-二羟维生素D3对肝纤维化大鼠肝组织HIF-1α和TREM-1表达的影响

目的通过研究1,25-二羟维生素D3【1,25(OH)_2D_3】对肝纤维化大鼠肝组织缺氧诱导因子(HIF-1α)和髓系细胞触发受体-1(TREM-1)表达的影响,探讨1,25(OH)_2D_3抑制肝纤维化进程的作用机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为TREM-1基因敲除组、模型组、1,25(OH)_2D_3干预组和对照组。采用i RNA法对其中一组大鼠进行TREM-1基因敲除。采用0.5%二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射连续8周,诱导大鼠肝纤维化模型。其中1组在制备肝损伤模型的同日,给予1,25(OH)_2D_3花生油溶液灌胃,模型组和对照组给予等量的花生油灌胃。8周后行肝组织学检查,采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测肝组织HIF-1α和TREM-1蛋白表达及其m RNA水平。结果在第8 w末,模型组大鼠肝纤维化程度明显重于对照组,而TREM-1基因敲除组和1,25(OH)_2D_3干预组大鼠肝纤维化计分(4.216±0.328、6.301±1.625)明显低于模型组(14.417±3.019,P0.05),差异有统计学意义;TREM-1基因敲除组和1,25(OH)_2D_3干预组肝组织HIF-1α蛋白表达水平(146.183±6.913、132.804±6.281)显著低于模型组(105.226±5.374,P0.05);TREM-1基因敲除组肝组织无TREM-1蛋白表达,而1,25(OH)_2D_3干预组肝组织TREM-1表达量(127.386±6.021)显著低于模型组(113.093±5.257,P0.05),差异均有统计学意义;TREM-1基因敲除组和1,25(OH)_2D_3干预组肝组织HIF-1αm RNA水平(0.813±0.097、0.824±0.101)显著低于模型组(1.136±0.142,P0.05);1,25(OH)_2D_3干预组肝组织TREM-1 m RNA水平(0.986±0.124)明显低于模型组(1.319±0.343,P0.05),差异均有统计学意义。结论 TREM-1参与肝纤维化的发生发展,而1,25(OH)_2D_3可能通过抑制HIF-1α和TREM-1的表达而起到抗肝纤维化的作用。     

1,25(OH)_2D_3对PM2.5在体染毒慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症的作用

目的探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)_2D_3]对PM2.5在体染毒慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症的作用。方法 72只雄性Wistar大鼠随机分成正常组、COPD组、1,25(OH)_2D_3+COPD组(合并组),每组24只,对三组大鼠气管滴注PM2.5染毒,每天染毒1次,连续3 d,在最后一次染毒24 h后处死动物,分析肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-8、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。结果 PM2.5对正常组、COPD组、合并组大鼠均产生急性毒性,且存在剂量反应关系,COPD组肺泡灌洗液中IL-8、TNF-α浓度明显高于正常组(P<0.05),经1,25(OH)_2D_3干预COPD组IL-8、TNF-α浓度低于COPD组,但仍高于正常组(P<0.05)。结论 COPD大鼠比正常大鼠对PM2.5更加易感,PM2.5可加重COPD的气道炎症。1,25(OH)_2D_3可减轻COPD气道炎症及损伤,在PM2.5染毒情况下补充1,25(OH)_2D_3对COPD的气道炎症仍具有改善作用。     

25羟基维生素D3与2型糖尿病合并慢性牙周炎关系的研究

目的探讨25羟基维生素D3[25(OH)D_3]及炎症因子与T2DM合并慢性牙周炎(CP)的关系。方法选取2018年3～9月于山东大学齐鲁医院内分泌科就诊的T2DM合并CP患者(T2DM+CP组)40例,同期于山东大学口腔医院就诊的单纯CP患者(CP组)40例及20名健康人群为正常对照组(NC)。ELISA法检测血清与龈沟液(GCF)中25(OH)D_3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1(IL-1)、IL-6、骨保护蛋白(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的水平。结果 NC、CP、T2DM+CP组GCF中25(OH)D_3水平依次降低(P0.01)。与NC组比较,CP、T2DM+CP组血清、GCF中炎症因子水平升高,且T2DM+CP组高于CP组(P0.05)。Pearson相关分析显示,HbA_1c与GCF中25(OH)D_3水平呈负相关(P0.01)。GCF中25(OH)D_3水平与OPG/RANKL呈正相关(P0.01)。结论维生素D与炎症因子水平及机体组织健康相关,糖尿病合并CP患者25(OH)D_3水平明显降低,在发病过程中起一定作用,T2DM进一步降低局部25(OH)D_3水平并加重机体炎症状况。     

老年非肥胖2型糖尿病病人维生素D水平与血糖和炎性标志物的关系

正2型糖尿病(T2DM)是老年常见的慢性代谢性疾病,预计到2035年全球罹患T2DM人数将增加至5. 8亿人[1]。近年来有文献报道维生素D可能影响体内葡萄糖稳态,在T2DM发病及进展中起到相关作用[2]。体外实验也显示1,25羟基维生素D3[1,25(OH) D3]可通过上调维生素受体表达及减少炎性因子增加组织胰岛素敏感性[3]。由于肥胖本身可导致维生素D缺乏及体     

1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨组织成骨细胞、骨细胞凋亡的影响

目的观察1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨组织中成骨细胞、骨细胞凋亡的影响。方法 36只雌性SD大鼠随机分成四组,对尼尔雌醇组和1,25(OH)_2D_3组分别给予尼尔雌醇(0.1mg/kg)和1,25(OH)_2D_3(0.05μg/kg)治疗12周。12周后,以DXA法测定大鼠全身的骨密度;放射免疫法测定各组大鼠血清中骨钙素及雌二醇的水平;处死各组大鼠,采用3′-OH末端DNA原位标记技术和透射电镜检测骨细胞、成骨细胞凋亡。结果 12周后,去卵巢组大鼠的骨密度和血清雌二醇水平明显降低,骨钙素含量升高,与假手术组相比,差异有显著性(P0.05)。1,25(OH)_2D_3可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度和血清骨钙素含量(P0.05),但是不增加血清雌二醇的水平(P0.05)。1,25(OH)_2D_3可以抑制骨细胞、成骨细胞凋亡,与去卵巢组相比差异有显著性(P0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨质疏松症具有防治作用,其部分机制可能为1,25(0H)_2D_3抑制了骨细胞、成骨细胞凋亡,从而调节骨重建。     

活性维生素D3下调核因子κB炎症通路对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用的研究

目的探讨活性维生素D3(Vit D_3)对T2DM大鼠肝脏的保护作用及作用机制。方法SD雄性大鼠分为正常对照(NC)组、T2DM组和活性Vit D_3干预组(Vit D_3组),Vit D_3组予骨化三醇灌胃,NC、T2DM组予花生油灌胃,8周后处死各组大鼠,测量血清血糖、TC、TG、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;HE染色观察肝脏组织的形态学改变;免疫组织化学法、荧光定量RT-PCR检测肝脏核因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白及mRNA表达水平。结果 Vit D_3组血清TG、ALT、AST水平低于T2DM组(P0.05)。Vit D_3组肝脏病理组织形态学,尤其是组织结构完整性优于T2DM组。Vit D_3组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TGF-β1的蛋白和mRNA表达水平低于T2DM组(P0.05)。NF-κB的mRNA表达水平与MCP-1、ICAM-1、TGF-β1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.711、0.734、0.698,P0.01)。结论活性Vit D_3可能通过NF-κB介导的炎症途径对T2DM大鼠肝脏发挥保护作用。     

维生素D_3代谢物和氢化可的松对人胎成骨细胞生长、碱性磷酸酶活性及骨钙蛋白合成的影响

我们使用人胎成骨细胞(OB)作为体外模型,观察了1,25-双羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]、24,25-双羟维生素D_3[24.25(OH)_2D_3]和氢化可的松对OB生长和代谢的影响。结果证实:1,25(OH)_2D_3在浓度为10~(-8)mol/L时,刺激OB的碱性磷酸酶(AKP)活性、增加骨钙蛋白(BGP)的合成,但抑制OB的生长。24,25(OH)_2D_3在10~(-8)mol/L时无上述作用。氢化可的松在10~(-6)mol/L浓度可抑制1,25(OH)_2D_3刺激BGP合成的功能。     

活性维生素D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量、维生素D代谢物水平及肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响

目的 研究活性维生素D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量25(OH)D3和1,25(OH)2D3水平及肾脏VDR mRNA表达的影响,为临床防治骨质疏松提供依据.方法 36只八月龄健康雌性SD大鼠随机分为3组,即模型组(Model),假手术组(Sham),活性维生素D3治疗组(Treatment),每组12只,对照治疗三月后全部处死,用双能X线骨密度仪及生物力学技术评估模型的骨密度及骨质量,采用酶联免疫吸附方法检测血清或组织中25(OH)D3和1,25(OH):D3含量,用FQ-PCR方法检测肾脏组织中VDR mRNA的表达情况.结果 (1)模型大鼠股骨头及粗隆部的BMD及骨生物力学指标(最大载荷和最大压应变)均明显下降(P<0.05);(2)活性维生素D3治疗组与模型组比较,血清、肝脏和肾脏组织中25(OH)D3和1,25(OH)2D3的含量明显提高(P<0.05),与假手术组比较无统计学意义;(3)模型组大鼠肾脏VDR mRNA的表达显著低于活性维生素D3治疗组(P=0.004).结论 本实验结果提示适当补充活性维生素D3可有效的防治去卵巢大鼠骨量丢失和骨质量下降,为临床活性维生素D应用提供实验依据.     

1,25-(OH)_2D_3对阿霉素肾病模型大鼠足细胞损伤及podocin表达缺失的影响

目的研究活性维生素D3[1,25-(OH)_2D_3]对阿霉素(ADR)肾病模型大鼠足细胞的作用及对podocin表达的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机选取30只作为对照组,其余60只被一次性尾静脉注射ADR 7.5 mg/kg。建模成功后,随机均分为ADR组、治疗组,治疗组每日给予1,25-(OH)_2D_3 0.25μg/kg灌胃,对照组及ADR组每日给予等量的花生油灌胃。于治疗第2、4、6、8、10周末收集24 h尿,进行生化分析;取肾组织进行后续的组织学观察和分子水平检测。结果与对照组相比,ADR组24 h尿蛋白显著增加(P0.05),1,25-(OH)_2D_3显著减少24 h尿蛋白含量(P0.05)。苏木素-伊红(HE)染色结果显示,对照组肾小球形态完好,ADR组肾小球基底膜增厚、肾间质纤维化、大量炎性细胞浸润,1,25-(OH)_2D_3治疗减轻了肾小球损伤。电镜观察显示:与对照组比较,模型组足细胞超微结构发生改变,出现细胞空腔、细胞核畸形,基底膜呈节段性增厚、足突被压扁且融合;1,25-(OH)_2D_3治疗后,足细胞损伤减轻。免疫组织化学检测显示:podocin主要定位于细胞膜,在正常肾小球中高表达,而ADR组表达较低(P0.05);1,25-(OH)_2D_3治疗后,podocin的表达显著增高(P0.05)。荧光定量PCR和Western印迹结果显示:podocin mRNA和蛋白水平具有高度的一致性,与对照组相比,ADR组表达显著降低(P0.05);1,25-(OH)_2D_3治疗后,podocin表达有所恢复。结论 1,25-(OH)_2D_3能够改善ADR肾病模型大鼠肾脏足细胞损伤,逆转podocin蛋白表达缺失,从而减少24 h尿蛋白,发挥重要的肾脏保护作用。     

血清1,25-(OH)_2D_3水平与老年维持性血液透析患者炎症反应及血脂水平的相关性

目的探讨血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]水平与老年维持性血液透析患者炎症反应及血脂水平的相关性。方法选取2018年5月至2019年5月在石家庄市第三医院血液净化中心进行维持性血液透析且病情稳定的105老年患者,设为A组,选取同期在石家庄市第三医院进行体检的健康志愿者50例,设为B组。两组均进行血清1,25-(OH)_2D_3水平检测,依据检测结果将A组分为维生素(Vit)D缺乏组、VitD不足组、VitD适宜组及VitD过量组,同时接受炎症因子及血脂水平检测,分析血清1,25-(OH)_2D_3水平与炎症反应及血脂水平的相关性。结果 A组1,25-(OH)_2D_3水平明显低于B组(P0.05);与B组比较,VitD缺乏组、VitD不足组、VitD适宜组及VitD过量组的肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白(Apo)A、ApoB及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均较高,脂蛋白(Lp)A及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);经Pearson相关性分析,1,25-(OH)_2D_3与TNF-α、IL-6、hs-CRP及LDL-C呈显著负相关(P0.05)。结论 VitD在维持性血液透析中发挥着重要作用,通过监测1,25-(OH)_2D_3变化情况,有助于临床及时改善患者微炎症状态及血脂异常。     

老年2型糖尿病患者血清维生素D水平与同型半胱氨酸及胰岛素敏感性的相关性研究

正该文探讨老年2型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)患者血清维生素D[25(OH)D_3]水平与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)及胰岛素敏感的相关性。方法:选取T2DM患者122例,按25(OH)D_3值分为正常组[25(OH)D_3≥30μg/L]、不足组     

1,25—双羟胆钙化醇对大鼠体内TRH诱导的TSH释放的影响

本文为第一篇研究1,25-(OH)_2D_3对TRH诱导的TSH释放作用的报道。 垂体激素的分泌与维生素D内分泌系统之间存在着相互作用。已经发现催乳素(PRL)和生长激素(GH)都促进肾脏将25-OHD_3转变成1,25—(OH)_2D_3。然而TSH却具有相反的作用,至少大鼠肾脏的体外实验证明如此。另一方面,在大鼠垂体及克隆的大鼠垂体瘤细胞GH_3(该细胞分泌PRL和GH)中都发现有1,25-(OH)_2D_3的受体。有人报道1,25-(OH)_2D_3抑制GH_3细胞释放PRL和GH。1,25-(OH)_2D_3对TSH合成与分     

维生素D缺乏抑制胰岛素分泌

维生素D(V.D)的主要功能是维持机体钙磷代谢平衡,作用的活性形式是1,25—二羟胆钙化酶(l,25—[OH]_2D_3)及24,25—二羟胆钙化醇(24,25—(OH)_2D_3)。其促肠道钙吸收的机理类似于类固醇激素的作用原理。 已经证实,甲状旁腺、肾、骨细胞存在1,25—(OH)_2D_3受体,可接受其作用。近年来,作者用放射免疫法测定小鸡骨、肾、肠和胰脏中的钙结合蛋白(CaBP),意外地发现胰脏也存在CaBP及     

同时限制蛋白和磷对于重度慢性肾衰竭患者1,25-二羟维生素D_3和甲状旁腺素的影响

限制饮食中磷含量可使正常人和中等度慢性肾衰竭(CRF)病人1,25-二羟维生素 D_3[1,25(OH)_(23)]D增高,重度 CRF 患者降低血磷可导致甲状旁腺素(PTH)降低,但血磷下降对1,25(OH)_2D_3的影响尚不了解。本组终末期 CRF 病人,给予蛋白和磷含量极低的饮食,辅以必需氨基酸(EAA)和成酮氨基酸(KAA),以观察重度 CRF 时1,25(OH)_2D_3的调节     

2型糖尿病伴特发性甲状旁腺功能减退症一例

对一例T2DM伴严重低钙血症患者行甲状旁腺素(PTH),降钙素,1,25二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3],24 h尿钙、磷检测及头颅CT检查。其24 h尿磷偏低,血PTH和1,25(OH)_2D_3下降,头颅CT示小脑和基底节区的双侧多发对称性钙化,明确诊断为特发性甲状旁腺功能减退症,经补充钙剂、骨化三醇、钾镁盐及其他综合治疗,患者症状改善,代谢指标控制良好。     

不需高效液相层析的1,25-双羟维生素D的放射受体测定法

本文报道我们建立的以小牛胸腺1,25-双羟维生素D受体作为结合蛋白的不需高效液相层析的1,25-(OH)_2D放射受体测定法。并以本法测出血中1, 25-(OH)_2D_3的成人正常值和部分病理值。