二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织色素上皮衍生因子表达影响的研究

目的观察二甲双胍(MET)对T2DM模型大鼠肾组织色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响,探讨MET对DKD的保护机制。方法高脂饲料喂养结合腹腔注射小剂量STZ建立T2DM大鼠模型并随机分为糖尿病模型(T2DM)组、MET组[MET,300 mg/(kg·d)]和格列本脲(GLY)组[GLY,5 mg/(kg·d)],并设正常对照组(NC)。检测各组FPG、HbA_1c,UAlb、尿肌酐(Ucr)、尿PEDF水平和肾小球基底膜厚度(GBMT);免疫组织化学法检测肾组织PEDF蛋白表达,Western blot法检测肾组织PEDF蛋白水平;荧光定量PCR检测肾组织PEDF mRNA表达。结果与NC组比较,T2DM组PEDF的mRNA、蛋白相对表达量降低[(7.11±0.30)vs(0.33±0.03)、(1.07±0.01)vs(0.40±0.01),P0.05],FPG、HbA_1c、UACR、PEDF/Ucr(UPCR)和GBMT升高(P0.05)。与T2DM组比较,MET组PEDF的mRNA、蛋白相对表达量升高[(0.33±0.03)vs(3.10±0.67)、(0.40±0.01)vs(0.80±0.04),P0.05],UACR、UPCR和GBMT降低(P0.05);与GLY组比较,MET组PEDF的mRNA和蛋白相对表达量升高[(1.76±0.67)vs(3.10±0.67)、(0.61±0.15)vs(0.80±0.04),P0.05],UACR、UPCR、GBMT降低(P0.05)。结论 MET可增加T2DM大鼠肾组织PEDF表达,降低尿蛋白排泄,改善肾脏病理结构,其机制可能与肾脏保护作用有关。     

2型糖尿病患者外周血microRNA-155、细胞核因子-κB和可溶性细胞间黏附分子-1的表达及其与血管并发症的关系研究

目的观察T2DM患者外周血microRNA-155(miR-155)、细胞核因子-κB(NF-κB)和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的表达情况,探讨miR-155在T2DM合并血管病变中的作用。方法选取T2DM患者165例和健康体检者(NC)60名,分为无血管病变组、有血管病变组,有血管病变组进一步分为微血管病变组、大血管病变组、微血管病变+大血管病变组;依据24hUAlb水平分为尿白蛋白正常(NAU)组、微量白蛋白尿(MAU)组、大量白蛋白尿(MAAU)组。RT-PCR检测外周血miR-155、NF-κB和sICAM-1的表达变化。结果与NC组比较,T2DM组miR-155、NF-κB、sICAM-1表达升高[(1.00±0.12)vs(1.82±0.71),(1.04±0.33)vs(2.28±0.66),(1.03±0.30)vs(1.88±0.80)](P0.05);与无血管病变组比较,有血管病变组miR-155、NF-κB、sICAM-1表达升高[(1.34±0.29)vs(1.95±0.73),(1.65±0.16)vs(2.40±0.65),(1.07±0.41)vs(2.01±0.77)](P0.05);微血管病变+大血管病变组miR-155表达高于大血管病变组[(2.36±0.61)vs(1.77±0.59)](P0.05),NF-κB也高于微血管病变组和大血管病变组(P0.05);与NAU组比较,MAU组和MAAU组miR-155表达升高,且MAAU组高于MAU组[(1.04±0.20)vs(1.41±0.49)vs(2.64±0.52)](P0.05),NF-κB、sICAM-1也高于NAU组(P0.05)。Pearson相关分析显示,miR-155与NF-κB、sICAM-1呈正相关(t=4.235、9.728,P0.01)。结论 T2DM患者及不同血管并发症组miR-155表达升高,且与NF-κB、sICAM-1升高趋势一致,提示miR-155的炎症调控机制可能参与糖尿病慢性血管病变的发生发展。     

低氧和复氧对大鼠糖脂代谢的影响及其作用靶点的研究

目的探讨慢性持续性低氧和复氧对大鼠糖脂代谢和不同组织中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、核转录因子κB(NF-κB)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)mRNA表达的影响。方法建立慢性低氧大鼠模型,随机分为7组:常氧3周、6周、12周对照组,低氧3周、6周组和复氧6周、12周组,每组各8只。比较各组血糖、血脂水平和不同组织中HIF-1α、NF-κB和AMPK的表达情况。结果 (1)低氧6周组FPG低于常氧6周组[(3.52±0.59)vs(8.80±1.64)mmol/L,P0.01];复氧6周组FPG高于低氧6周组[(7.20±2.2)vs(3.52±0.59)mmol/L,P0.05],与常氧6周组比较,差异无统计学意义。(2)低氧组TC、TG、HDL-C水平低于常氧组(P0.01),复氧后TC和HDL-C可恢复至常氧水平。低氧组LDL-C、FFA水平高于常氧组(P0.01),且在复氧后可完全恢复至常氧水平。(3)低氧组皮下脂肪组织中HIF-1α、NF-κB和AMPK mRNA表达水平高于常氧组[(276.87±2.77)vs(100±4.03),(184.41±2.17)vs(100±1.56),(259.88±3.03)vs(100±2.95),P0.05]。结论慢性持续性低氧可导致大鼠血糖、血脂的改变,复氧可使其恢复至正常水平。大鼠皮下脂肪组织中HIF-1α、NF-κB和AMPK等基因的表达可能在上述过程中发挥了一定的作用。     

不同糖耐量人群血浆25-羟维生素D与葡萄糖转运子4及胆固醇调节元件结合蛋白1C表达关系的研究

目的探讨不同糖耐量人群血浆25-羟维生素D[25(OH)D]与葡萄糖转运子4(GluT-4)及胆固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)表达的关系。方法随机分为T2DM组、IGR组及正常对照(NGT)组。检测血糖、血脂、HbA1 c等,电化学发光法测定25(OH)D和FIns。Western blot检测GluT-4及SREBP-1C蛋白的表达,RT-PCR检测GluT-4和SREBP-1C mRNA的表达。结果T2DM组、IGR组25(OH)D低于NGT组[(8.77±4.52)vs(18.35±5.90)vs(30.67±5.47)ng/ml,P0.05],T2DM组低于IGR组(P0.05)。T2DM组、IGR组血浆GluT-4 mRNA及蛋白表达低于NGT组[(0.235±0.412)vs(3.386±0.698)vs(6.325±0.959),(1.235±0.092)vs(2.430±0.153)vs(4.843±0.299),P0.05],T2DM组较IGR组降低(P0.05)。T2DM组、IGR组血浆中SREBP-1C mRNA及蛋白表达水平高于NGT组[(7.570±1.233)vs(5.561±0.820)vs(2.880±0.483),(8.340±1.092)vs(5.279±0.798)vs(2.340±0.135),P0.05],T2DM组较IGR组升高(P0.05)。Pearson相关性分析显示,25(OH)D与血浆中GluT-4 mRNA、蛋白表达呈正相关(P0.05),与HbA_1 c、HOMA-IR、FIns、FPG、2 hPG、TG及SREBP-1C mRNA、SREBP-1C蛋白表达呈负相关(P0.05)。血浆中GluT-4表达与SREBP-1C表达呈负相关(P0.05)。结论血浆25(OH)D降低可引发糖耐量异常,甚至导致糖尿病,其机制可能与血浆中GluT-4表达降低及SREBP-1C表达升高有关。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响研究

目的观察二甲双胍对T2DM大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其对DKD的保护机制及与降糖效应的相关性。方法SD大鼠高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射建立T2DM模型,成模后随机分为T2DM组(n=10)、二甲双胍组[300mg/(kg·d),MET,n=8]和格列本脲组[5mg/(kg·d),GLY,n=8],设置正常对照组(NC,n=9)。干预8周后,检测各组FPG、HbA_1c,UAlb、尿肌酐(Ucr)、尿TGF-β1水平以及肾组织中TGF-β1mRNA和蛋白的表达,电镜观察肾小球基底膜厚度(GBMT)。结果8周末,与NC组比较,T2DM组TGF-β1 mRNA[(7.10±0.20)vs(1.00±0.07)]、TGF-β1光密度值(IOD)[(44.66±5.57)vs(14.08±1.98)]、尿TGF-β1与Ucr比值(UTCR)[(187.54±10.14)vs(34.51±4.67)ng/g]、FPG[(15.60±1.56)vs(4.45±1.07)mmol/L]、HbA_1c[(12.41±0.61)%vs(4.13±0.89)%]、GBMT[(266.58±21.68)vs(106±10.23)nm]、UACR[(136.31±6.84)vs(34.09±2.92)mg/g]升高(P0.05);与T2DM组比较,MET组TGF-β1 mRNA[(2.60±0.09)vs(7.10±0.20)]、TGF-β1 IOD[(21.85±6.54)vs(44.66±5.57)]、UTCR[(63.74±5.29)vs(187.54±10.14)ng/g]、GBMT[(150.98±17.25)vs(266.58±21.68)nm]、UACR[(98.92±5.40)vs(136.31±6.84)mg/g]降低(P0.05);与GLY组比较,MET组TGF-β1mRNA[(2.60±0.09)vs(4.69±0.12)]、TGF-β1 IOD[(21.85±6.54)vs(37.43±3.14)]、GBMT[(150.98±17.25)vs(203.67±23.32)nm]、UTCR[(63.74±5.29)vs(86.49±6.61)ng/g]、UACR[(98.92±5.40)vs(110.10±6.76)mg/g]降低(P0.05),两组FPG和HbA_1c比较,差异无统计学意义。结论二甲双胍降低糖尿病肾组织中TGF-β1水平,发挥肾脏保护作用,可能部分依赖于其降糖之外的作用。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织蛋白激酶C-β表达的影响

目的观察二甲双胍(MET)对T2DM模型SD大鼠肾组织蛋白激酶C-β(PKC-β)mRNA和蛋白表达的影响,探讨MET对糖尿病肾脏疾病(DKD)肾损害的保护机制。方法高脂饲料喂养合并从腹腔注射小剂量STZ建立T2DM大鼠模型。随机分为正常对照组(NC,n=10)及模型组(DM组,n=32)。27只大鼠造模成功后再将其随机分成二甲双胍治疗组(MET,n=8)、格列本脲治疗组(GLY,n=9)及糖尿病对照组(T2DM,n=10)。给药8周后,观察各组HbA_1c、FBG、BUN尿白蛋白排泄和基底膜厚度(GBMT)情况;同时检测肾小球PKC-β蛋白表达和肾组织PKC-β_(mRNA)表达情况。结果 8周末,与NC组比较,T2DM组FBG[(4.45±1.07)vs(15.6±1.56)mmol/L]和HbA_1c[(4.13±0.89)%vs(12.41±0.61)%]升高(P0.05),PKC-β_(IOD)[(22.24±2.39)vs(42.00±4.90)]和PKC-β_(mRNA)[(1.00±0.04)vs(2.16±0.13)]升高(P0.05);与T2DM组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(42.00±4.90)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(2.16±0.13)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05);与GLY组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(30.73±1.95)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(1.75±0.02)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05)。结论 MET可减轻PKC-β在T2DM大鼠肾组织的高表达,该作用可能是其肾脏保护机制之一。     

老年2型糖尿病合并肌少症患者血清25羟维生素D与外周血单个核细胞血红素加氧酶1 mRNA的表达水平及意义

目的探讨老年T2DM合并肌少症(SP)患者血清25羟维生素D[25(OH)D]与外周血单个核细胞(PBMC)血红素加氧酶1(HO-1)mRNA的表达水平及意义。方法选取2018年11月至2019年4月于我院内分泌科收治的120例门诊及住院老年患者,分为单纯SP组(SP组)、单纯T2DM组(T2DM组)、T2DM合并SP组(T2DM+SP组),每组各40例。另选取40名同期我院老年健康体检者为正常对照组(NC组)。采用双能X线吸收测量法测定四肢骨骼肌质量指数(SMI),RT-PCR测定各组PBMC中HO-1 mRNA的表达水平。Pearson相关分析SMI与其他指标的相关性;Logistic回归分析老年T2DM患者合并SP的影响因素。结果与NC组比较,SP、T2DM组HO-1mRNA表达升高[(24.28±11.9)vs(49.53±12.3)vs(51.45±12.1),P0.05],25(OH)D降低[(26.27±5.45)vs(16.27±3.53)vs(15.17±2.48),P0.05];T2DM+SP组HO-1 mRNA较NC组升高[(24.28±11.9)vs(63.59±12.5),P0.05],25(OH)D降低[(26.27±5.45)vs(8.23±1.57),P0.05];与T2DM+SP组比较,SP、T2DM组HO-1 mRNA表达降低[(63.59±12.5)vs(49.53±12.3)vs(51.45±12.1),P0.05],25(OH)D升高[(8.23±1.57)vs(16.27±3.53)vs(15.17±2.48),P0.05]。Pearson相关分析显示,SMI与HO-1 mRNA表达呈正相关(r=0.546,P=0.012),与25(OH)D呈负相关(r=―0.554,P=0.024)。Logistic回归分析结果显示,HbA_1c、TG、HO-1 mRNA及25(OH)D均为老年T2DM患者合并SP的影响因素。结论 25(OH)D水平降低及HO-1 mRNA表达升高可能通过氧化应激反应共同参与老年人群糖脂代谢紊乱和肌量流失。     

IKKε在糖尿病大鼠肝脏的表达及利拉鲁肽对其干预作用的研究

目的观察糖尿病大鼠肝脏组织IKKε、核因子κB(NF-κB)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达及利拉鲁肽对其干预的作用。方法采用高脂饮食联合STZ诱导建立T2DM大鼠模型,将成模大鼠随机分为糖尿病组(T2DM)、低剂量利拉鲁肽组(LL)、高剂量利拉鲁肽组(HL),另设正常对照组(NC),每组各10只。Western blot检测肝脏组织IKKε、NF-κB、p-Akt的蛋白表达,RT-PCR检测IKKε、NF-κB的mRNA表达。结果 T2DM组FPG、FIns、HOMA-IR、TG、白介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)较NC组、LL组、HL组高(P0.05或P0.01),HL组FPG、FIns、IL-6、MDA、HOMA-IR较LL组低(P0.05)。与NC组比较,HL组、LL组、T2DM组IKKε、NF-κB的蛋白表达依次升高(P0.05或P0.01),p-Akt的蛋白表达依次降低[(0.762±0.112)vs(0.598±0.085)vs(0.476±0.112)vs(0.342±0.097),P0.05或P0.01]。结论肝脏组织IKKε表达升高可能参与了糖尿病的发生,利拉鲁肽呈浓度依赖下调肝脏组织IKKε的表达,可能是其改善IR、糖代谢的部分机制。     

脂联素对2型糖尿病大鼠主动脉内皮功能影响的研究

目的观察APN对T2DM大鼠主动脉内皮功能的影响。方法采用高脂饮食加腹腔注射STZ建立T2DM大鼠模型。造模成功后随机分为DM组9只和APN组8只,另设正常对照(NC)组10只。APN组给予尾静脉注射腺病毒重组APN(0.71×109 IU/只),DM组和NC组给予同等剂量生理盐水注射。测定各组胸主动脉内皮功能,核因子-κB(NF-κB)表达及一氧化氮(NO)水平。结果与DM组相比,APN组高敏C反应蛋白(hsC-RP)[(1.85±0.56)vs(3.13±0.38)mg/L]和丙二醛水平[(2.44±0.28)vs(4.80±0.59)mg/L]降低,APN水平[(273.50±21.20)vs(94.97±25.12)μg/L]升高(P0.01)。NC组主动脉环最大舒张率高于其他两组[(81.7±5.2)%vs(65.9±9.9)%vs(36.0±8.9)%,P0.05]。DM组主动脉NF-κB表达高于APN组和NC组,且APN组表达高于NC组(P0.05)。NC组器官池中NO水平高于DM组和APN组[(125.6±17.7)vs(103.5±20.3)vs(72.5±9.1)μmol/g,P0.05]。结论 APN能改善T2DM大鼠主动脉内皮功能,其机理可能与通过减少氧化应激和炎症反应,增加NO的产生有关。     

糖尿病周围神经病变患者颈动脉内-中膜厚度、颈动脉僵硬度与糖化血红蛋白的相关性研究

目的探讨DPN患者颈动脉内-中膜厚度(CIMT)、颈动脉僵硬度与HbA1c的关系。方法选取T2DM组60例、DPN组100例及健康体检者(NC)60名,测定HbA1c水平、CIMT和颈动脉僵硬度。结果 DPN组HbA1c[(8.62±2.71)%vs(4.20±0.47)%,(7.59±1.98)%],CIMT[(1.01±0.11)vs(0.70±0.07),(0.81±0.09)mm]和颈动脉硬度[(827.6±123.7)vs(521.2±89.3),(629.3±113.5)]高于NC、T2DM组(P0.05);DPN组病程高于T2DM组(P0.05);DPN组HbA1c≥10.0%亚组CIMT[(1.11±0.09)vs(0.94±0.07),(0.73±0.06)mm]和颈动脉僵硬度[(901.5±241.5)vs(724.5±159.9),(574.1±145.3)]高于8.0%≤HbA1c10.0%亚组和7.0%≤HbA1c8.0%亚组(P0.05);相关分析结果显示,HbA1c与CIMT、颈动脉僵硬度呈正相关(r=0.107、0.213,P0.05)。结论 DPN患者CIMT、颈动脉僵硬度与HbA1c呈正相关,且HbA1c是CIMT和颈动脉僵硬度的危险因素。     

胰岛素联合贝那普利下调高迁移率核小体蛋白1/Toll样受体4的表达改善糖尿病肾组织炎症的研究

目的探讨胰岛素联合贝那普利对糖尿病小鼠肾脏病变的影响及其相关机制。方法 8周龄C57BL/6健康小鼠25只,选取5只作为正常对照组(NC组),余20只腹腔注射150mg/kg的STZ诱导建立T1DM模型后随机平均分为单纯糖尿病(DM)组、胰岛素治疗(INS)组、贝那普利治疗(BEN)组及胰岛素联合贝那普利治疗(INS+BEN)组。8周后检测各组血糖、肾重/体重(KW/BW)和尿白蛋白/肌酐比值(UACR),观察肾组织形态学变化,检测肾组织高迁移率核小体蛋白1(HMGN1)、Toll样受体4(TLR4)的表达。结果与NC组比较,DM组血糖、KW/BW及UACR升高[(8.571±0.701)vs(24.280±1.944)mmol/L,(1.438±0.022)vs(1.698±0.088),(97.691±10.680)vs(697.673±168.781)μg/mg,P0.01],可见肾小管间质炎性细胞浸润,系膜扩增改变,HMGN1和TLR4的mRNA、蛋白表达增加;与DM组比较,INS+BEN组KW/BW无明显改变[(1.698±0.088)vs(1.489±0.065),P0.05],而血糖和UACR下降[(24.280±1.944)vs(12.150±1.150)mmol/L,(697.673±168.781)vs(148.570±28.935)μg/mg,P0.05],肾脏组织病变减轻,HMGN1和TLR4的mRNA、蛋白表达降低,且上述变化较BEN组、INS组改善明显。Pearson相关性分析显示,HMGN1和TLR4在肾组织中的表达呈正相关,且两者表达量的变化与肾脏系膜指数也呈正相关。结论胰岛素联合贝那普利可改善STZ糖尿病小鼠的肾脏病变,其机制可能与降低HMGN1和TLR4的表达有关。     

大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-2表达的影响

目的探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法实验大鼠随机分为健康对照(NC)组、糖尿病模型(DM)组及大黄素治疗(DM+Emodin)组(40mg/kg),各12只。至36周时处死所有大鼠,收集血、尿标本,检测生化指标和24hUAlb;取肾组织标本,采用RT-PCR和Western blot检测相关mRNA及蛋白。结果 36周时,与NC组比较,DM组和DM+Emodin组血糖[(6.44±0.83)vs(33.11±3.02),(32.39±2.78)mmol/L]、HbA1c[(5.6±0.6)%vs(18.0±3.2)%,(20.1±3.3)%]、SBP[(108±9)vs(131±14),(131±8)mmHg]、肾重/体重比[(5.3±0.6)vs(11.5±1.0),(10.4±1.3)]、eGFR[(5.9±1.2)vs(12.9±2.2),(11.2±1.2)ml/(min·173m2)]及UAlb[(3.3±1.8)vs(52.8±30.1),(26.6±10.5)mg/24h]升高(P0.001),DM+Emtin组肾重/体重比、eGFR及UAlb均低于DM组(P0.05或P0.01)。与DM组比较,DM+Emodin组MMP-2 mRNA[(1.43±0.36)vs(1.13±0.19),P0.05]、TIMP-2 mRNA[(1.70±0.27)vs(1.23±0.18),P0.001]上调现象被抑制,且MMP-2[(2.45±0.24)vs(2.98±0.55),P0.01]、TIMP-2[(2.07±0.30)vs(1.59±0.37),P0.001]蛋白表达水平下调。结论大黄素可以减少糖尿病大鼠肾组织中MMP-2/TIMP-2表达,减少蛋白尿,可能延缓DN进展。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌纤维化中基质金属蛋白酶通路及相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦是否对抗糖尿病大鼠心肌纤维化,探讨其对基质金属蛋白酶(MMPs)通路相关因子的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照(Con)组、糖尿病(DM)组、厄贝沙坦+糖尿病组(Ir+DM),每组10只。高糖髙脂饮食12周后,Masson染色观察心肌组织纤维化改变。ELISA测定心肌组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、组织抑制因子2(TIMP-2)含量及基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、MMP-14蛋白表达。结果与Con组比较,DM组FBG增加,心体比增大,心肌胶原纤维粗大,部分胶原沉积,ColⅠ、ColⅢ、TIMP-1、TIMP-2含量升高[(133.80±6.24)vs(262.07±9.84),(33.80±2.34)vs(71.42±2.59),(10.64±1.04)vs(38.05±1.29),(7.79±0.48)vs(23.15±0.82)ng/mg,P0.01],MMP-2、MMP-9蛋白表达降低[(1.60±0.10)vs(0.80±0.05),(0.51±0.03)vs(0.26±0.01)ng/mg,P0.01],MMP-14蛋白表达增加[(1.01±0.06)vs(1.49±0.05),P0.01]。与DM组比较,厄贝沙坦干预改善心肌组织纤维化,ColⅠ、ColⅢ含量减少,TIMP-1、TIMP-2水平降低[(262.07±9.84)vs(167.12±7.88),(71.42±2.59)vs(43.23±2.30),(38.05±1.29)vs(15.66±1.42),(23.15±0.82)vs(11.01±0.90)ng/mg,P0.01],MMP-2、MMP-9蛋白表达增加[(0.80±0.05)vs(1.30±0.05),(0.26±0.01)vs(0.43±0.02),P0.01],MMP-14蛋白表达降低[(1.49±0.05)vs(1.07±0.05),P0.01]。结论糖尿病可诱导心肌纤维化,厄贝沙坦通过调节MMPs信号通路及相关因子减轻纤维化程度。     

miR-141与2型糖尿病大鼠血糖水平的关系及其作用机制研究

目的探讨miR-141与T2DM大鼠血糖水平关系及其对蛋白激酶B(Akt)/AMP依赖的蛋白激酶α(AMPKα)通路和炎症因子释放的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)、糖尿病+miR-141抑制剂组[miR-141(-)]及糖尿病+miR-141模拟物组[miR-141(+)]。RT-PCR检测IRS2、miR-141、核因子κB p65(NF-κBp65)表达,Western blot检测Akt/AMPKα蛋白表达。结果与DM组比较,miR-141(-)组各时间点血糖水平、FPG、TNF-α、IL-1β及高级氧化蛋白产物(AOPPs)降低,miR-141(+)组上述指标升高(P0.05或P0.01)。与DM组比较,miR-141(-)组胰岛细胞凋亡降低,miR-141(+)组升高(P0.05或P0.01)。与DM组比较,miR-141(-)组miR-141、NF-κBp65 mRNA、NF-κBp65蛋白表达降低(P0.05),IRS2 mRNA、p-Akt、p-AMPKα、IRS2升高(P0.05或P0.01),miR-141(+)组NF-κBp65蛋白表达升高(P0.01)。结论 miR-141高表达导致T2DM大鼠血糖水平升高、IRS2降低,其作用机制可能与Akt/AMPKα通路蛋白磷酸化被抑制进而导致的炎症反应有关。     

二甲双胍对大鼠肾小球系膜细胞核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达及合成的影响

目的 观察二甲双胍对系膜细胞（MCs）核因子-κB（NF-κB）,单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达合成的影响,并探讨其肾脏保护机制. 方法 体外培养MCs,随机分为正常（Con）组、高糖（HG）组及高糖十不同浓度二甲双胍（M1、M2、M3）组.48 h后收集各组细胞及上清液,采用荧光实时定量RT-PCR检测细胞NF-κB,MCP-1 mRNA含量,Western blot检测NF-κBp65蛋白水平,ELISA检测上清MCP-1蛋白浓度. 结果 （1）与Con组比较,HG组NF-κB mRNA和MCP-1 mRNA的表达增加（P＜0.05）;NF-κBp65的相对表达量增加[（1.04±0.01） vs （0.51±0.15）,P＜0.05],上清MCP-1水平增高[（561.99±23.24）vs（480.73±35.40） pg/ml,P＜0.05];（2）二甲双胍干预后,NF-κB mRNA、MCP-1mRNA表达及NF-κBp65蛋白、上清MCP-1含量均下降（P＜0.05）. 结论 二甲双胍可抑制MCs NF-κB和MCP-1的表达合成,可能与其肾脏保护作用有关.     

硫辛酰胺对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的观察硫辛酰胺(ALM)对db/db小鼠肝损伤的保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组(DM)和ALM组,C57BL/6J小鼠为正常对照组(NC),每组各6只。ALM组于第9周时予ALM[100 mg/(kg·d)]进行灌胃干预,干预8周后处死小鼠,检测生化指标及肝组织谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醇(MDA)表达量,油红O、HE染色观察肝脏病理学改变,Western blot法检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。结果与NC组比较,DM组体重、TG、TC、FBG升高,MDA含量升高[(0.73±0.04)vs(0.92±0.17)nmol/mg,P<0.05],CAT活性降低[(1.08±0.18)vs(0.52±0.14)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性升高[(16.85±3.84)vs(22.42±4.56)U/g,(6.07±1.91)vs(8.19±1.51)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1的表达升高[(0.33±0.25)vs(1.81±0.34),(0.29±0.13)vs(1.25±0.19),P<0.05]。与DM组比较,ALM组体重、TG、TC降低,MDA降低[(0.92±0.17)vs(0.56±0.11)nmol/mg,P<0.05],CAT活性升高[(0.52±0.14)vs(0.91±0.20)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性降低[(22.42±4.56)vs(17.08±5.08)U/g,(8.19±1.51)vs(5.10±0.46)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1表达降低[(1.81±0.34)vs(1.01±0.30),(1.25±0.19)vs(0.52±0.17),P<0.05]。结论ALM可抑制T2DM小鼠肝损伤的发生发展,其机制可能是通过改善肝组织脂质沉积、抑制氧化应激,调节Nrf2、HO-1蛋白表达以实现。     

有氧运动联合抗阻力运动对糖尿病大鼠血管内皮功能的作用及其对磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶通路的影响

目的探讨有氧运动联合抗阻力运动对糖尿病大鼠血管内皮功能及对磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)通路的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)、单纯有氧运动训练组(AE)、单纯抗阻力运动训练组(RE)及有氧运动+抗阻力运动训练组(ARE),检测各组内皮功能指标、PI3K/Akt/eNOS通路基因及蛋白表达情况。结果乙酰胆碱(Ach)浓度在3×10~(-5) mol/L时,ARE组舒张率高于AE组和RE组(P0.05)。ARE组VEGF、一氧化氮(NO)表达量高于DM组[(21.45±3.48)vs(8.23±1.14)pg/ml,(25.67±3.19)vs(8.89±1.56)μmol/L,P0.05]。ARE组PI3K、Akt及eNOS基因相对表达量高于DM组[(4.08±0.83)vs(0.27±0.11),(2.75±0.69)vs(0.26±0.09),(4.25±0.74)vs(0.59±0.19),P0.05]。ARE组PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)及磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白相对表达量高于DM组[(0.78±0.21)vs(0.20±0.09),(1.21±0.38)vs(0.54±0.19),(0.59±0.23)vs(0.16±0.08),P0.05]。结论有氧运动联合抗阻力运动能改善糖尿病大鼠血管舒张功能,促进VEGF、NO的释放,作用与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路有关。     

Homer在2型糖尿病大鼠海马中的表达及意义的研究

目的评价Homer蛋白在T2DM大鼠海马中的表达及意义,并分析其与T2DM大鼠认知障碍间的关系。方法糖尿病大鼠模型组(T2DM组)、对照(Con)组大鼠各13只。取T2DM组及Con组各8只大鼠的海马组织,采用RT-qPCR法检测大鼠海马组织中Homer1c、Homer2、Homer3mRNA的表达。取两组另外各5只大鼠海马组织,Western blot法检测上述基因蛋白表达是否存在差异。结果T2DM组海马组织Homerlc[(29.99±5.11)vs(19.91±4.08)]、Homer2[(26.62±4.14)vs(15.79±2.58)]和Homer3[(35.08±3.27)vs(16.16±2.49)]的mRNA水平高于Con组(P0.05或P0.01);T2DM组海马组织Homerlc[(8.4±0.9)vs(3.2±0.5)]、Homer2[(6.8±0.6)vs(1.5±0.3)]和Homer3[(2.4±0.3)vs(0.9±0.2)]蛋白水平高于Con组(P0.05)。结论Homerlc、Homer2和Homer3可能参与T2DM认知障碍,为糖尿病脑病提供新的实验依据和潜在的治疗靶点。     

运动抑制转化生长因子β1/smad信号通路对糖尿病大鼠心肌纤维化影响的研究

目的观察运动对T2DM大鼠模型心肌纤维化的改善作用,探讨TGF-β1/smad信号通路的作用。方法腹腔注射STZ和高脂饮食建立T2DM大鼠模型,分为正常对照组(NC)、T2DM组和T2DM运动组(T2DME)。NC组和T2DM组安静饲养8周,T2DME组进行8周的跑台训练。运动结束后测体重、血糖。天狼星红染色观察心肌组织胶原蛋白水平,通过计算胶原容积分数(CVF)得出心肌纤维化程度。免疫荧光染色观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量。Western blot测定心肌TGF-β1、smad2、p-smad2、smad3和p-smad3的含量。结果与NC组比较,T2DM组体重降低[(528±71)vs(362±33)g,P0.05],血糖升高[(6.4±3.8)vs(26.0±7.5)mmol/L,P0.01],心肌CVF升高[(2.2±0.31)%vs(5.8±0.45)%,P0.01],心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、TGF-β1、p-smad2和p-smad3蛋白表达升高(P0.05或P0.01)。与T2DM组比较,T2DME组血糖降低[(26.0±7.5)vs(21.0±6.8)mmol/L,P0.05],心肌CVF降低[(5.80±0.40)%vs(3.60±0.33)%,P0.05],心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白降低(P0.05),TGF-β1及p-smad2和p-smad3蛋白表达下调(P0.05或P0.01)。结论运动改善T2DM大鼠心肌纤维化,抑制TGF-β1的表达和smad2/3的磷酸化,TGF-β1/smad可能是运动抑制T2DM大鼠心肌纤维化的重要信号通路。     

2型糖尿病合并抑郁患者炎性因子和胰岛素抵抗指数的变化及其临床意义

目的探讨T2DM合并抑郁患者炎性因子和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的变化。方法选择单纯抑郁组44例,单纯T2DM组(T2DM)124例,T2DM合并抑郁组48例,另选正常体检人群(NC)40名,分别测定各组汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分得分、FPG、HbA1c、FIns、FC-P、高敏C反应蛋白(hsC-RP)、IL-2、IL-10、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)等指标。结果与NC、单纯抑郁组及T2DM组相比,T2DM合并抑郁组FPG[(5.11±0.25),(5.18±0.22),(9.47±3.46)vs(11.51±2.05)mmol/L]、HbA1c[(5.53±0.32)%,(5.36±0.34)%,(8.89±2.21)%vs(10.28±2.12)%]、hsC-RP[(1.10±0.36),(4.02±1.96),(3.54±2.05)vs(9.20±2.11)mg/L]、IL-2[(122.00±4.01),(144.10±9.90),(142.64±15.36)vs(166.86±22.81)pg/ml]、HOMA-IR[(1.14±0.24),(1.58±0.21),(2.70±1.54)vs(3.78±1.08)升高(P0.05);IL-10[4.72(3.94,5.98),3.44(3.13,4.35),4.00(3.39,4.11)vs 2.10(1.99,3.84)pg/ml]、胰岛素敏感指数(ISI)[(-3.92±0.60),(-3.57±0.13),(-3.22±0.22)vs(-4.41±0.27)]、IGF-1[(169.18±46.14),(166.20±32.79),(224.33±20.74)vs(80.15±39.26)pg/ml]降低(P0.05)。相关分析显示,HAMD评分与hsC-RP、IL-2呈正相关,与IL-10、IGF-1呈负相关;多元逐步回归分析显示,hsC-RP、IGF-1是HAMD评分的影响因素;Logistic回归分析表明,hsC-RP是T2DM并发抑郁的危险因素。结论 T2DM合并抑郁患者炎性反应及IR更严重,hsC-RP与T2DM患者发生抑郁相关。