利拉鲁肽对血糖控制不佳的2型糖尿病患者胰岛β细胞功能及血糖波动的影响

目的 观察应用胰岛素联合口服降糖药物(OADs)治疗血糖控制不佳的T2DM患者加用利拉鲁肽后,胰岛β细胞功能及血糖波动的变化. 方法 40例T2DM患者(HbA1 c＞7.0％)在胰岛素联用OADs的基础上加用利拉鲁肽治疗12周,观察治疗前后血糖、HbA1c、胰岛β细胞功能指数(HO-MA-β)及血糖波动的变化. 结果 加用利拉鲁肽治疗12周后,HbA1c[(8.21±2.65)％ vs(7.16±0.8)％]、平均血糖波动幅度(MAGE) [(3.98±0.52) vs(1.52±0.27) mmol/L]、日间血糖平均绝对差(MODD)[(1.29±0.34)vs(0.45±0.13) mmol/L]下降(P＜0.05);FC-P[(1.16±0.75) vs(2.87±1.02)ng/ml]、2 hC-P[(2.28±1.23)vs(4.16±0.98) ng/ml]及HOMA-β[(3.6±0.7)vs(4.8±0.9)]升高(P＜0.05). 结论 对于胰岛素联合OADs血糖控制不佳的T2DM患者,加用利拉鲁肽可有效降糖、平稳降糖,改善胰岛β细胞功能.     

二肽基肽酶4抑制剂西格列汀对胰岛基质细胞衍生因子1α降解及胰岛β细胞再生的影响

目的探讨二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂西格列汀对基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)降解及胰岛β细胞再生的影响。方法将高脂-小剂量STZ糖尿病模型大鼠分为糖尿病模型组与西格列汀组,正常大鼠为健康对照(NC)组,给药12周后测量FPG、FIns、胰腺DPP-4、SDF-1α、胰岛β细胞增殖、细胞骨髓瘤(C-myc)mRNA和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA。结果治疗后与NC组比较,糖尿病模型组FPG[(5.0±0.4)vs(26.8±3.6)mmol/L]、DPP-4[(14.63±2.19)vs(17.51±2.11)]、SDF-Iα[(2.84±1.97)vs(6.23±1.85)]升高,FIns[(24.9±7.4)vs(9.1±3.2)mU/L]降低(P0.05);与糖尿病模型组比较,西格列汀组FPG[(26.8±3.6)vs(10.8±5.4)mmol/L]、DPP-4[(17.51±2.11)vs(9.33±2.21)]降低,FIns[(9.1±3.2)讲(16.7±6.5)mU/L]、SDF-1α[(6.23±1.85)vs(11.38±2.02)]增高(P0.05);NC组增殖细胞核抗原(PCNA)弱表达,糖尿病模型组PCNA弱阳性表达,西格列汀组PCNA强阳性表达;与NC组比较,糖尿病模型组和西格列汀组C-myc mRNA[(I.0±0.2)讲(1.5±0.6)vs(3.7±1.1)]和CyclinD1 mRNA[(1.0±0.3)vs(1.7±0.5)vs(4.0±0.7)]均升高(P0.05)。结论DPP-4抑制剂西格列汀可抑制DPP-4酶活性而阻滞SDF-1α降解,提高WNT信号通路靶基因C-myc与Cyclin D1 mRNA表达,促使胰岛β细胞增殖再生。     

脂毒性对大鼠胰岛细胞凋亡的作用

目的　探讨脂毒性引起胰岛细胞凋亡在 β细胞功能异常中的作用。 　方法　 8周龄雄性SD大鼠随机分为两组 ,分别予总热量相同的正常脂肪含量饲料 (脂肪占总热量的 13% )和高脂饲料 (脂肪占总热量的 5 9% )饲养。 2 8周后 ,透射电镜观察胰岛细胞超微结构 ;进行胰岛素免疫组化染色光镜下定位 β细胞 ,图像分析测定平均每个胰岛内胰岛素的表达量 ;TUNEL法观察胰岛细胞凋亡情况并计数每个胰岛中 β细胞凋亡率 ,以Ki6 7单克隆抗体染色观察胰岛细胞的增生情况。 　结果　高脂饲养组 (HF组 )胰岛细胞内可见明显脂质沉积 ,胰腺免疫组化染色图像分析显示平均每个胰岛内胰岛素染色阳性细胞面积和积分下光密度HF组均显著低于正常饲养组 (NC组 ) (HF :2 5 2 2 μm2vsNC :5 0 10 μm2 ,P =0 0 0 ;HF :12 10vsNC :2 4 4 7,P =0 0 0 )。HF组β细胞凋亡率明显高于NC组[(2 6± 8) %vs15± 5 ) % ,P <0 0 1]。两组增生的胰岛细胞数差异无显著意义 (0 5 0个 /胰岛vs 0 5 4个 /胰岛 ,P >0 0 5 )。　结论　高脂饲养对大鼠胰岛细胞的复制无明显改变 ,β细胞凋亡的增加可能是长期高脂饲养后大鼠胰岛功能改变的机制之一。     

酰基化Ghrelin在体外拮抗巨噬细胞介导的炎症反应对胰岛β细胞功能影响的研究

目的 采用Transwell小室构建的小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7共培养系统,探讨酰基化Ghrelin能否保护胰岛β细胞免遭巨噬细胞介导的炎症损伤. 方法 实验分为单独RAW264.7巨噬细胞组、单独MIN6胰岛细胞组、共培养组和Ghrelin干预组.RT-PCR和Western blot 检测巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β、TNF-α的浓度,以及葡萄糖刺激后MIN6细胞上清液的胰岛素浓度. 结果 (1)共培养系统中,巨噬细胞TLR4[mRNA及蛋白水平分别为(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±o.01)]的表达],细胞上清液IL-1β[(10.47±1.11) pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09) pg/ml]蛋白水平较单独RAW264.7巨噬细胞组高(P＜0.05);(2)高糖刺激下,共培养系统中胰岛β细胞的胰岛素分泌水平较单独MIN6胰岛细胞组低(P＜0.05);(3)与共培养组比较,酰基化Ghrelin干预后共培养,巨噬细胞TLR4表达水平和TNF-α均降低(P＜0.05),且呈剂量依赖性,但胰岛β细胞的胰岛素分泌水平与共培养组比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,炎症通路活化,炎症因子释放,胰岛β细胞的胰岛素分泌功能受损;酰基化Ghrelin可剂量依赖性削弱巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,但不能完全阻止胰岛β细胞胰岛素分泌功能的降低.     

条件性敲除胰岛β细胞蛋白磷酸酶2Acα对小鼠糖代谢影响机制的探讨

目的探讨条件性敲除胰岛β细胞蛋白磷酸酶2Acα(PP2Acα)对小鼠血糖水平影响的机制。方法选取4月龄条件性敲除胰岛β细胞PP2Acα(KO组)及对照组(Con,与KO组同窝别、性别匹配)各24只。行腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT),测定0、30、60和120min小鼠血糖及胰岛素分泌水平;新鲜分离胰岛,用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验(GSIS)评价小鼠胰岛β细胞对葡萄糖反应性。结果IPGTT结果显示,KO组葡萄糖负荷后30min血糖[(23.1±5.1)vs(17.5±5.7)mmol/L]和60min血糖[(20.5±6.8)vs(13.5±5.1)mmol/L]高于Con组(P0.05);KO组葡萄糖负荷后30min血清胰岛素水平较Con组下降[(2.16±0.92)vs(1.07±0.42)μg/L](P0.05);GSIS显示高糖刺激下KO组胰岛素分泌较Con组减少[(0.82±0.15)vs(0.42±0.24)μIU/L](P0.05)。结论条件性失活胰岛β细胞PP2Acα小鼠糖耐量受损可能与胰岛素一相分泌受损相关。     

小檗碱对2型糖尿病地鼠脂肪组织肝X受体通路表达的影响

目的观察小檗碱对T2DM地鼠脂肪组织肝X受体(LXR)及其靶基因表达的影响。方法以高脂饮食结合小剂量STZ的方法建立IR及T2DM地鼠模型。成模后随机分成正常对照(Con)组、IR组、T2DM组、小檗碱治疗(BBR)组,治疗9周。结果与T2DM组相比,BBR组FPG[(13.10±0.93)vs(6.19±0.84)mmol/L]、OGTT 2hPG[(15.49±1.31)vs(8.83±1.28)mmol/L]、HOMA-IR[(14.80±2.10)vs(7.40±1.40)]降低(P0.05);RT-PCR结果提示,LXRα[(-5.56±-1.23)vs(3.29±0.68)]、LXRβ[(3.09±0.45)vs(-5.49±-0.95)]基因表达上调,并伴随着LXR靶基因表达的改变(P0.05);Western blot结果提示,LXRα[(0.11±0.03)vs(0.68±0.12)]、LXRβ[(0.13±0.03)vs(0.70±0.14)]蛋白表达上调(P0.05)。结论 LXR及其靶基因参与小檗碱治疗T2DM地鼠脂诱性脂肪组织IR的分子机制。     

胰岛素治疗超重或肥胖2型糖尿病患者加用利拉鲁肽的临床疗效观察

目的观察经胰岛素治疗但血糖控制不佳的超重或肥胖T2DM患者加用利拉鲁肽的疗效及安全性。方法选取经胰岛素治疗但血糖控制不佳的超重或肥胖T2DM患者62例,分为利拉鲁肽治疗组30例和胰岛素治疗组32例。利拉鲁肽组在加用利拉鲁肽时,胰岛素剂量暂减30%,后根据血糖水平调整胰岛素和利拉鲁肽剂量。胰岛素组根据血糖水平调整胰岛素剂量。检测两组治疗前后体重、FPG、HbA1c、FC-P和胰岛素日用量等指标,记录低血糖发生情况及其他不良反应。结果利拉鲁肽组和胰岛素组体重、FC-P和胰岛素日用量差值比较差异有统计学意义[(4.7±6.4)vs(1.0±2.1)kg;(0.80±0.30)vs(0.16±0.08)ng/ml;(25.9±12.7)vs(12.1±5.7)U/d,P<0.05或P<0.01],FPG、HbA1c差值比较差异无统计学意义[(2.5±1.1)vs(2.9±1.6)mmol/L;(1.8±1.2)%vs(1.7±1.3)%,P>0.05]。结论对超重或肥胖T2DM患者,胰岛素联合利拉鲁肽与胰岛素加量降糖疗效相当,但利拉鲁肽可降低体重,改善胰岛细胞功能。     

长期高脂饲养大鼠胰岛形态功能改变与外周胰岛素抵抗的关系

目的观察高脂高热量饲料长期饲养对大鼠胰岛形态功能的影响,探讨其与外周胰岛素抵抗的关系。方法8周龄雄性Wistar大鼠30只,分为正常对照组(NC,n=15)和高脂饲养组(HF,n=15),分别给予普通饲料和高脂高热量饲料饲养,采用高胰岛素-正常血糖钳夹技术测定外周胰岛素抵抗程度；以静脉胰岛素释放试验观察胰岛分泌功能；作胰岛素和胰高血糖素双重免疫组化染色,进行胰岛形态学及量化分析；RT-PCR观察胰岛素原mRNA水平的变化。结果HF组的葡萄糖输注率(GIR)显著低于NC组[(5．83±0．79)mg·kg~(-1)·min~(-1)vs(7．60±1．29)mg·kg~(-1)·min~(-1),P＜0．05]。胰岛的免疫组化结果显示HF组单个胰岛的体积增大[(15168±1327)μm~2 vs(6264±1840)μm~2,P＜0．01],β细胞相对于α细胞比率下降[(4．68±1．01)vs(11．84±3．82),P＜0．05],β细胞的胰岛素相对浓度降低[(-5．15±0．03) vs(-4．81±0．17),P＜0．01]。HF组胰岛素分泌高峰明显延迟至10min,NC组达峰时间为5min,HF组胰岛素曲线下面积在10～60min则显著增高[(152．51±34．53)mIU·L~(-1)·min~(-1)vs(86．40±21．21)mIU·L~(-1)·min~(-1),P＜0．01],60 min胰岛素仍在基础水平之上,胰岛素原mRNA差异无统计学意义。结论长期高脂高热量饮食不仅诱导出显著的胰岛素抵抗,胰岛的形态和功能已经出现了早期的损害,提示在2型糖尿病发生发展的前期阶段胰岛的代偿能力已经受损。     

白藜芦醇对db/db小鼠胰岛β细胞功能的影响

目的观察白藜芦醇对db/db小鼠胰岛β细胞的作用并探讨其可能机制。方法取12只db/db小鼠,随机分为糖尿病(DM)组和白藜芦醇干预组,每组各6只,另设对照(Con)组小鼠6只。干预4周后,比较各组OGTT后血糖水平,免疫组织化学分析胰岛中3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK-1)蛋白表达量的改变。体外培养小鼠胰岛细胞株MIN6细胞并分为正常葡萄糖(NG)组、高糖(HG)组、高糖+白藜芦醇(HG+Res)组、高糖+白藜芦醇+PI3K特异性抑制剂Wortmannin(HG+Res+Wo)组。Western blot测定4组细胞PDK-1、磷酸化蛋白激酶B(p-AKt)水平,CCK-8法和流式细胞仪检测MIN6细胞增殖、凋亡率;ELISA测定上清液中胰岛素水平。结果与DM组比较,白藜芦醇干预组OGTT血糖曲线下面积下降(P0.05)、胰岛细胞PDK-1蛋白表达增加[阳性率(0.57±0.32)%vs(1.74±0.47)%,P0.01];与HG组比较,白藜芦醇干预后MIN6细胞中PDK-1、p-Akt蛋白增加、上清液中胰岛素水平增加[(124.95±5.37)vs(181.19±30.77)pmol/L]、细胞增殖(D值)增加[(0.71±0.10)vs(1.02±0.09)]、凋亡率下降[(19.3±2.1)%vs(11.2±1.4)%](P0.01);与HG+Res组比较,HG+Res+Wo组MIN6细胞PDK-1表达、Akt磷酸化水平减低,上清液中胰岛素水平及细胞增殖下降、凋亡率增加(P0.05)。结论白藜芦醇可能通过激活胰岛β细胞PDK-1/Akt通路、改善胰岛β细胞功能。     

不同糖化血红蛋白水平的新诊断2型糖尿病患者胰岛功能的临床观察

目的比较不同HbA1c水平的新诊断T2DM患者胰岛功能的变化。方法将165例新诊断T2DM患者根据HbA1c水平分为A、B、C组,A组54例,6.0%≤HbA1c7.0%;B组53例,7.0%≤HbA1c9.0%;C组58例,HbA1c≥9.0%。采用标准餐试验联合胰岛素释放试验检测0、30、60、120min血糖和胰岛素,胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)、ΔI30/ΔG30、AUCI60~120/G60~120评估胰岛功能,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评估IR,Matsuda指数(ISIM)评估IS,处置指数(DI30、DI60~120)评价校正IS后的胰岛功能。结果随HbA1c升高,A、B、C组FPG[(7.7±0.8)vs(9.0±1.9)vs(13.4±3.2)mmol/L]、2hPG[(12.03±1.23)vs(16.08±2.67)vs(23.58±3.99)mmol/L]、G0[(7.10±0.86)vs(8.93±1.59)vs(13.80±3.35)mmol/L]、G30[(10.16±1.86)vs(12.19±2.50)vs(16.98±3.78)mmol/L]、G60[(12.57±1.81)vs(15.03±2.72)vs(20.11±4.08)mmol/L]和G120[(11.49±2.48)vs(14.78±3.53)vs(21.05±4.43)mmol/L]逐渐升高;I0[(20.09±12.76)vs(18.74±7.88)vs(15.30±11.71)mIU/L]、I30[(38.92±12.59)vs(34.27±20.56)vs(23.95±16.55)mIU/L]、I60[(72.80±39.38)vs(52.96±32.48)vs(36.16±27.22)mIU/L]、I120[(106.62±61.09)vs(64.57±40.75)vs(43.09±23.08)mIU/L]、HOMA-β[(130.58±107.33)vs(74.68±38.34)vs(42.66±35.70)]、AUCI60~120/G60~120[(58.06±33.85)vs(28.90±18.90)vs(14.31±9.78)]和DI60~120[(458.22±174.30)vs(239.27±113.05)vs(89.91±49.93)]逐渐降低(P0.05)。C组TG[(3.40±1.44)vs(1.89±0.88),(2.29±1.23)mmol/L]、HOMA-IR[(11.66±7.13)vs(6.30±3.66),(7.47±3.58)]较A、B组高,年龄[(45.10±9.30)vs(51.40±7.80),(49.70±8.80)岁]、ΔI30/ΔG30[(2.44±1.50)vs(8.27±6.33),(6.77±5.16)]和DI30[(13.86±7.23)vs(58.21±18.14),(45.31±17.99)]较A、B组低(P0.05)。Spearman相关性分析结果显示,HbA1c与HOMA-IR呈正相关,与HOMA-β、ΔI30/ΔG30、AUCI60~120/G60~120、DI30和DI60~120呈负相关。多元线性回归分析结果显示,DI60~120、HOMA-IR、HOMA-β为HbA1c的影响因素。结论随HbA1c水平升高,新诊断T2DM患者糖代谢紊乱加重,胰岛素分泌功能逐步减退,在HbA1c≥9.0%患者中尤为明显。     

不同糖耐量状态孕妇血清成纤维细胞生长因子21水平与胰岛β细胞功能的相关性研究

目的探讨不同糖耐量状态孕妇血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)水平与胰岛β细胞功能的关系。方法选取妊娠24~28周于我院接受50 g糖负荷试验(GCT)阳性的孕妇441例,1周后再行75 g OGTT,根据结果分为GDM组228例、妊娠期IGT(GIGT)组122例及妊娠期NGT(GNGT)组91名。ELISA检测血清FGF21水平,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),胰岛素敏感指数(Matsuda指数),胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),第1、2时相胰岛素分泌指数及胰岛β细胞代偿胰岛素抵抗的分泌能力(ISSI)评估胰岛β细胞功能。FGF21与胰岛β细胞功能的相关性采用Pearson相关分析。结果 (1)GDM组和GIGT组BMI,0、1、2、3hPG及1、2、3 hIns均高于GNGT组和GIGT组(P0.05或P0.01)。GDM组SBP、DBP、0 hIns和HbA_1c高于GNGT组和GIGT组(P0.05或P0.01);(2)GNGT组、GIGT组及GDM组FGF21水平[(101.74±20.40)vs(137.93±25.52)vs(185.69±31.61)ng/L]和HOMA-IR依次升高[1.74(0.91,2.85)vs2.39(1.31,4.87)vs3.38(2.19,6.75)],Matsuda指数[(58.74±15.68)vs(41.62±15.65)vs(39.73±18.98)]和HOMA-β[(157.69±88.41)vs(144.35±78.98)vs(107.30±87.23)]及ISSI[(72253.55±15167.53)vs(42313.91±7112.47)vs(30032.50±11500.24)]依次降低(P0.05或P0.01)。GDM组第1、2时相胰岛素分泌指数低于GNGT组和GIGT组(P0.01),但GNGT组与GIGT组比较,差异无统计学意义(P0.05);(3)Pearson相关分析显示,FGF21与HOMA-IR呈正相关(r=0.255,P=0.030),与Matsuda指数、HOMA-β、第1、2时相胰岛素分泌指数及ISSI呈负相关(r=0.289、-0.256、-0.224、-0.230、-0.277,P=0.019、0.037、0.045、0.040、0.023)。结论随着糖代谢受损逐渐加重,FGF21水平升高,且与胰岛β细胞功能相关,可能与GDM的发生发展有关。     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织蛋白激酶C-β表达的影响

目的观察二甲双胍(MET)对T2DM模型SD大鼠肾组织蛋白激酶C-β(PKC-β)mRNA和蛋白表达的影响,探讨MET对糖尿病肾脏疾病(DKD)肾损害的保护机制。方法高脂饲料喂养合并从腹腔注射小剂量STZ建立T2DM大鼠模型。随机分为正常对照组(NC,n=10)及模型组(DM组,n=32)。27只大鼠造模成功后再将其随机分成二甲双胍治疗组(MET,n=8)、格列本脲治疗组(GLY,n=9)及糖尿病对照组(T2DM,n=10)。给药8周后,观察各组HbA_1c、FBG、BUN尿白蛋白排泄和基底膜厚度(GBMT)情况;同时检测肾小球PKC-β蛋白表达和肾组织PKC-β_(mRNA)表达情况。结果 8周末,与NC组比较,T2DM组FBG[(4.45±1.07)vs(15.6±1.56)mmol/L]和HbA_1c[(4.13±0.89)%vs(12.41±0.61)%]升高(P0.05),PKC-β_(IOD)[(22.24±2.39)vs(42.00±4.90)]和PKC-β_(mRNA)[(1.00±0.04)vs(2.16±0.13)]升高(P0.05);与T2DM组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(42.00±4.90)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(2.16±0.13)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05);与GLY组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(30.73±1.95)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(1.75±0.02)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05)。结论 MET可减轻PKC-β在T2DM大鼠肾组织的高表达,该作用可能是其肾脏保护机制之一。     

长期应用利拉鲁肽对2型糖尿病患者颈动脉斑块逆转作用的研究

目的观察评价长期应用利拉鲁肽治疗T2DM患者的疗效及血糖、血脂、血压及颈动脉粥样硬化斑块大小的影响。方法血糖控制不佳的T2DM患者97例,随机分为利拉鲁肽(LIR)组(n=49)和胰岛素(Ins)组(n=48)。LIR组应用地特胰岛素联合利拉鲁肽皮下注射;Ins组应用诺和锐联合地特胰岛素皮下注射,比较治疗前后两组血糖、血脂、C-P、BMI、BP、颈动脉粥样硬化斑块大小等指标。结果治疗3.2年后,两组FPG、2hPG、HbA1c比较,差异无统计学意义(P0.05);LIR组BMI降低,Ins组升高。LIR组FC-P[(4.73±2.39)vs(2.72±1.57)ng/ml,P0.01]、2hC-P[(13.33±3.39)vs(6.93±2.2)ng/ml,P0.01]高于Ins组。LIR组TC[(4.19±0.48)vs(5.11±1.51)mmol/L,P0.01]、LDL-C[(2.55±0.64)vs(3.13±0.73)mmol/L,P0.01]、SBP[(126.55±10.08)vs(137.22±27.42)mmHg,P0.01]、DBP[(78.22±6.45)vs(85.60±9.54)mmHg,P0.05]低于Ins组。LIR组治疗后颈动脉斑块大小较治疗前降低[(0.57±0.26)vs(0.22±0.10)cm,P0.01],Ins组则升高[(0.52±0.27)vs(0.83±0.34)cm,P0.01]。结论利拉鲁肽联合地特胰岛素能降低FPG、2hPG,改善胰岛细胞功能、血脂、血压;利拉鲁肽能够促使糖尿病患者颈动脉粥样硬化斑块厚度减低,具有逆转动脉粥样硬化斑块的作用。     

吡格列酮联合胰高血糖素样肽-1治疗对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞的影响

目的 评价胰高血糖素样肽类似物利拉鲁肽与胰岛素增敏剂吡格列酮联合治疗db/db小鼠糖尿病的效果.方法 35只8周龄,体重(35.3±2.5)g的雄性db/db小鼠分为(1)对照组(n=8):给予生理盐水0.1 ml,2次/d;(2)吡格列酮组(n=9):给予吡格列酮(饲料中含0.02%吡格列酮)+生理盐水0.1 ml,2次/d;(3)利拉鲁肽组(n=9):给予利拉鲁肽300 mg/kg,2次/d;(4)联合治疗组(n=9):给予吡格列酮(饲料中含0.02%吡格列酮)+利拉鲁肽300mg/kg,2次/d.利拉鲁肽用灭菌生理盐水稀释后皮下注射,每天8:00和16:00给药,持续4周.行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT),评价胰岛β细胞的增殖.采用单因素方差分析进行数据统计分析.结果 干预4周后,联合治疗组糖化血红蛋白(4.5±0.6)%,糖耐量试验血糖曲线下面积(1814±91)mmol·min·L-1,游离脂肪酸(202.0±20.4)μmol/L,TG(0.81±0.28)mmol/L均明显低于对照组[(7.3±0.4)%,(4042±183)mmol·min·L-1,(272.5±21.7)μmol/L,(1.35±0.21)mmol/L],P值均＜0.05;胰岛素曲线下面积(1639±372)μg·min·L-1,脂联素(16.7±2.0)mg/L,胰岛组织切片胰岛素阳性面积(59.5±1.5)%和胰岛新生β细胞比例(2.4±0.5)%均显著高于对照组[(834±201)μg·min·L-1,(10.2±1.8)mg/L,(22.4±1.5)%和(0.8±0.3)%],P值均＜0.05.且联合治疗组上述指标均低于或高于单药治疗组.联合治疗显著改善胰岛β细胞和α细胞分布,恢复正常的胰岛形态.结论 吡格列酮联合利拉鲁肽治疗相比单药更好地改善db/db小鼠糖脂代谢,保护胰岛β细胞功能并促进其增殖.

Abstract：

ObjectivesTo evaluate the effect of combination of liraglutide,a glucagon-like peptide-1 analogue and pioglitazone,an insulin sensitizer,on diabetic db/db mice.Methods Thirty-five 8-week old male db/db mice were divided into control group (n = 8 ),pioglitazone group (n =9 ),liraglutide group (n =9) and combined therapeutic group (n =9),which was given normal saline 0.1 ml,2/d,pioglitazone 24 mg· kg-1 · d-1 (feed contained 0.02％ pioglitazone) + normal saline 0.1 ml,2/d,liraglutide 300 mg/kg,2/d,and pioglitazone 20 mg · kg-1 · d -1 ( feed contained 0.02％ pioglitazone) +liraglutide 300 mg/kg,2/d,respectively.Liraglutide were given at 8:00 and 16:00 via subcutaneous injection after having been diluted with sterilized normal saline.Effect on glucose,lipid metabolism and islet β-cell preservation were assessed after 4 weeks.Oneway ANOVA was adopted for statistical analysis.Results Combination therapy displayed promising anti-hyperglycemic[glycosylated hemoglobin Alc: (4.5 ± 0.6)％vs.(7.3 ±0.4)％,P ＜ 0.001].Glucose tolerance were improved assessed by area under curve(AUC) of glucose by intraperitoneal glucose tolerance test (IPGTT)[(1814 ±91 ) mmol · min · L-1 vs.(4042 ±183) mmol · min · L-1,P ＜0.001];insulin release response to glucose were also preserved as AUC of insulin by IPGTT was higher[( 1639 ±372) μg · min · L-1 vs.(834 ±201 )μg · min · L-1].Combination therapy also reduced circulated free fatty acids and TG[( 202.0 ± 20.4 ) μmol/L vs.( 272.5 ± 21.7 )μmol/L,(0.81 ± 0.28) mmol/L vs.( 1.35 ± 0.21 ) mmol/L],and increased plasma adiponectin [(16.7±2.0)mg/L vs.(10.2±1.8)mg/L].All P value ＜0.05.Islet immunohistochemistry showed that combination therapy significantly increased insulin positive area were[( 59.5 ± 1.5 ) ％ vs.( 22.4 ±1.5) ％]and ratio of Brdu positive β-cells was three folds than vehicle-treated mice[( 2.4 ± 0.5 ) ％ vs.(0.8 ±0.3)％],both greater than each single treatment.Combined therapy significantly improved islet β cell/α cell distribution,which led to islet recovery.Conclusions Combined therapy improves glucose and lipid metabolism,preserves islet β-cell function and stimulates β-cell proliferation,greater than either liraglutide or pioglitazone treatment alone.     

一种多功能营养复合物对四氧嘧啶诱导的实验性高血糖小鼠血糖及胰腺组织病理形态的影响

目的观察一种多功能营养复合物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖及胰腺组织病理形态的影响。方法将造模成功的昆明小鼠分为模型(MOD)组,高(HC)、中(MC)、低剂量(LC)复合物组和二甲双胍(MEL)组,同时选取正常昆明小鼠分为正常对照(Con)组和高剂量复合物对照(Hcon)组。灌胃45d后检测各组体重、FPG和血糖曲线下面积(AUCg)的变化,并测定血清胰岛素水平,观察胰腺组织病理形态。结果与Con组比较,Hcon组FPG[(5.88±0.52)vs(5.94±0.21)mmol/L]、AUCg[(14.23±1.85)vs(15.35±0.26)mmol/L]和血清胰岛素水平[(15.62±0.54)vs(15.01±0.99)mU/L]差异均无统计学意义(P0.05)。与MOD组比较,HC、MC、LC组和MEL组FPG[(20.16±1.66)vs(11.78±1.25)vs(13.00±1.89)vs(13.79±1.37)vs(12.24±1.36)mmol/L,P0.05)]和AUCg[(44.01±1.52)vs(32.49±2.73)vs(35.62±2.09)vs(37.39±1.88)vs(33.06±1.71),P0.05)]降低,血清胰岛素含量增加[(8.99±0.68)vs(13.37±0.88)vs(12.86±0.63)vs(11.92±0.48)vs(14.29±0.78)mU/L,P0.05)],高剂量复合物胰岛素敏感指数提高[(-5.50±0.21)vs(-4.91±0.13),P0.05)]。胰腺组织切片染色结果显示,高、中、低剂量复合物和二甲双胍能够修复受损的胰岛组织,并且胰岛素表达量积分光密度值与MOD组比较升高[(77460±4849)vs(200400±11790)vs(127300±11750)vs(109900±19400)vs(194300±19400),P0.05)]。结论该复合物能降低糖尿病小鼠FPG和AUCg,增加血清胰岛素含量,提高IS,可能主要是通过促进受损的胰岛β细胞修复实现的。     

利拉鲁肽治疗不同2型糖尿病病程肥胖/超重患者的临床疗效及安全性观察

目的评价利拉鲁肽治疗不同T2DM病程肥胖/超重患者的临床疗效及其安全性。方法入选口服降糖药物(OADs)血糖控制不佳的肥胖/超重T2DM患者78例,分为病程≤5年组和病程5年组。两组在原治疗方案的基础上加用利拉鲁肽,治疗14周,比较两组临床疗效和不良反应。结果与治疗前相比,两组HbA_1c[病程≤5年组:(8.61±0.76)%vs(7.21±0.58)%;病程5年组:(8.84±1.07)%vs(7.81±1.05)%]、FPG[病程≤5年组:(8.93±0.84)vs(6.81±1.16)mmol/L;病程5年组:(9.16±1.02)vs(8.08±1.44)mmol/L]、2hPG[病程≤5年组:(14.09±3.36)vs(10.67±1.54)mmol/L;病程5年组:(15.29±3.46)vs(11.26±2.05)mmol/L]、BMI[病程≤5年组:(28.62±2.81)vs(26.73±2.83)kg/m~2;病程5年组:(27.88±2.14)vs(27.05±2.47)kg/m~2]下降;稳态模型胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)[病程≤5年组:(33.77±8.04)vs(51.63±13.26);病程5年组:(28.24±6.24)vs(37.10±10.41)]升高(P0.01)。病程≤5年组HOMA-IR[(3.59±0.81)vs(2.59±1.27)]降低、胰岛素敏感性指数(ISI)[(-4.36±0.24)vs(-3.94±0.51)]升高(P0.01)。与病程5年组比较,病程≤5年组FPG、HbA_1c、HOMA-IR降低,HOMA-β升高(P0.01)。两组低血糖发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论利拉鲁肽治疗不同T2DM糖尿病病程的肥胖/超重患者均可降低血糖、减轻体重,并改善胰岛β细胞功能;在糖尿病早期开始应用利拉鲁肽,血糖下降和胰岛β细胞功能改善更为明显。     

雌激素对胰腺大部分切除模型小鼠胰岛β细胞功能影响的研究

目的观察雌激素干预C57BL/6小鼠大部分胰腺切除后胰岛功能的变化,探讨雌激素对胰岛β细胞的影响。方法 60只小鼠随机分成4组:对照假手术组(Sham)、胰腺切除模型组(Px)、雌激素干预组(E2)和雌激素阻断剂组(E2+ICI),每组15只。ELISA检测血浆胰岛素水平;小鼠处死前进行葡萄糖耐量实验(GTT);处死后荧光染色胰岛,计算胰岛数量和体积,并进行葡萄糖刺激胰岛素分泌实验(GSIS);RT-PCR检测Ins-1、Ins-2和PDX-1基因的表达水平。结果胰腺切除手术后7 d,E2组血糖较Px组下降[(162±18)vs(225±11)mg/dl),P0.05]。GTT结果显示,服糖120 min后,E2组与Px组比较,血糖回落到基线水平[(145.5±24.5)vs(235.0±21.3)mg/dl,P0.05]。胰岛荧光染色结果表明,各手术组的胰岛体积明显增大(P0.05),尤其是E2组胰岛体积增大最为明显。GSIS结果发现,雌激素能显著增加胰岛素释放及胰岛素含量。RT-PCR结果提示,雌激素能增加胰岛Ins-2基因的表达。结论雌激素干预可降低糖尿病小鼠血糖水平,增加胰岛体积和胰岛素分泌,并对胰岛素基因的表达产生影响。     

强化胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的 观察强化胰岛素治疗对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响.方法 将36只Wistar大鼠随机分为正常对照组和高脂组,正常对照组给予基础饲料喂养,高脂组给予脂肪乳灌胃+基础饲料喂养10 d,然后给高脂组大鼠腹腔注射链脲佐菌素,3 d后再将高脂组大鼠随机分为2个亚组,即糖尿病对照组和糖尿病胰岛素治疗组,治疗4 w.脂肪乳灌胃第10天、注射STZ第3天和治疗4 w末测大鼠各项指标;实验结束时采用TUNEL技术和流式细胞术检测胰岛β细胞的凋亡.结果 大鼠在强化胰岛素治疗4 w末,分别采用TUNEL和流式细胞术检测凋亡,与糖尿病对照组比较,糖尿病胰岛素治疗组胰岛β细胞凋亡率明显下降,分别为(0.73±0.02)% vs (0.19±0.04)%和(13.50±0.12)% vs (3.56±0.71)%,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 强化胰岛素治疗可减轻2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡.     

短期强化降糖序贯胰升血糖素样肽1对新诊断2型糖尿病患者胰岛β细胞功能第一时相分泌的影响

目的探讨胰岛素联合二甲双胍短期强化降糖序贯胰升血糖素样肽1(GLP-1)对新诊断T2DM患者胰岛β细胞功能第一时相分泌的影响。方法 60例新诊断T2DM患者予胰岛素联合二甲双胍强化降糖,使血糖短期内达标(FPG6.1mmol/L,2hPG8.0mmol/L)。继续巩固2周后随机分为饮食运动组(n=30)和利拉鲁肽组(n=30)。经过10周的饮食运动及利拉鲁肽干预,比较干预前后胰岛β细胞功能第一时相分泌的变化。结果与饮食运动组比较,利拉鲁肽组FPG水平下降(P0.05);两组胰岛素、C-P分泌水平升高(P0.05),但利拉鲁肽组升高更明显,且于4~6min出现峰值(P0.05);两组胰岛素曲线下面积(AUCIns 0~10min)、C-P曲线下面积(AUCC-P 0~10min)均增加(P0.05)。结论胰岛素联合二甲双胍短期强化降糖序贯GLP-1可改善T2DM患者胰岛β细胞功能第一时相分泌。     

持续皮下胰岛素注射后延长胰岛素治疗时间对胰岛功能影响的临床观察

目的观察持续皮下胰岛素注射后延长胰岛素治疗时间对伴高血糖的新诊断T2DM患者胰岛β细胞功能的影响。方法根据胰岛素治疗时间,将90例新诊断T2DM患者随机分成2周、3月及5月组,各30例,检测并比较各组治疗前后及治疗结束1年后胰岛β细胞功能。结果各组治疗后血糖均下降,胰岛β细胞功能改善,3月组和5月组△I_(30)/△G_(30)高于2周组[(1.87±0.44)vs(1.95±0.49)vs(1.63±0.51),P0.01]。治疗结束1年后,3月组和5月组缓解率高于2周组(53.3%vs63.3%vs 40.0%,P0.05),5月组高于3月组(P0.01);与非缓解组相比,缓解组HbA在c控制更好[(5.57±0.27)%vs(7.76±0.55)%,P0.05],△I_(30)/△G_(30)增加[(1.39±0.78)vs(1.82±0.29),P0.05],胰岛β细胞分泌功能下降更少[(303.71±46.12)vs(200.69±29.42),P0.05]。结论胰岛素强化治疗可改善新诊断T2DM患者胰岛β细胞功能,治疗延长至3~5个月可更好地延缓胰岛β细胞功能减退。