HPLC-MS测定人血浆中氟哌噻吨及生物等效性研究

目的建立测定人血浆中氟哌噻吨浓度的高效液相色谱-质谱联用法,用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究。方法采用高效液相色谱-质谱法,血浆样品用乙酸乙酯萃取后,用Thermo C18色谱柱,以50 mmol.L-1乙酸铵溶液(pH=4.0)-甲醇-乙腈(45∶36∶19)为流动相分离,电喷雾电离法,选择离子监测(SI M)。结果氟哌噻吨在0.03~2.0μg.L-1线性关系良好,平均回收率为99.79%,日内RSD≤10.30%,日间RSD≤7.85%。结论该方法准确、灵敏度高,适用于含氟哌噻吨制剂的人体药动学和生物等效性研究。     

HPLC-MS法测定人血浆中酮康唑浓度及其生物等效性研究

目的:建立人血浆中酮康唑的高效液相色谱-质谱测定方法.研究受试制剂酮康唑片在人体内的药代动力学特征,评价其相对生物利用度和生物等效性.方法:20 名男性健康受试者随机分成2组,进行双交叉试验,受试及参比制剂剂量均为200 mg.采用高效液相色谱-质谱法测定血药浓度.结果:志愿者口服受试和参比制剂后,酮康唑的药动学参数如下:峰浓度分别为(4.77±1.63)μg·mL-1和(5.09±1.64)μg·mL-1,达峰时间分别为(1.37±0.71) h和(1.19±0.61)h,消除半衰期分别为(1.89±0.80) h和(2.13±0.91)h,平均驻留时间分别为(3.02±0.81) h和(3.04±0.81)h,AUC0-24分别为(13.03±5.65)μg·h·mL-1和(13.99±6.54)μg·h·mL-1;相对生物利用度为95.6%±12.5%.结论:建立的分析方法准确、灵敏、可靠、简便,统计结果表明受试制剂和参比制剂生物等效.     

LC-MS/MS测定人血浆中罗红霉素的浓度及其在生物等效性研究中的应用

目的建立LC-MS/MS测定人血浆中罗红霉素浓度的方法,并研究其制剂的生物等效性。方法以克拉霉素为内标,色谱柱:Alltech Alltima(2.1 mm×100 mm,3.5μm);流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈(45∶55);流速:0.2 mL·min-1;柱温:30℃。采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源,正离子模式检测,以选择反应监测(SRM)方式进行检测,罗红霉素母离子[M+H]+m/z 837.5,子离子m/z 679.2,内标克拉霉素母离子[M+H]+m/z 748.5,子离子m/z 590.2。结果罗红霉素线性范围为0.10～20.00μg·mL-1,最低检测限为0.01μg·mL-1,3种浓度的相对回收率为100.8%～103.1%,日内、日间RSD均<5.9%(n=5)。生物等效性研究表明受试制剂和参比制剂生物等效,受试制剂相对生物利用度为(100.655±9.552)%(P=0.5%)。结论该方法专属、灵敏、快速,适用于罗红霉素制剂的生物等效性研究。     

HPLC-MS测定人血浆中美利曲辛及其在生物等效性研究中的应用

目的 建立测定人血浆中美利曲辛浓度的高效液相色谱-质谱联用法,并用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究.方法 血浆样品用乙酸乙酯萃取,采用Thermo Hypersil-HyPURITY C13色谱柱(150 mm×2.1mm,5μm)分离,以50 mmol·L-1乙酸铵溶液(pH=4.0)-甲醇-乙腈(45∶36∶19)为流动相,流速为0.22 mL·min-1.采用高效液相色谱-质谱电喷雾电离法,选择离子监测(SIM).结果 美利曲辛在0.4～50.0 μg·L-1线性关系良好,平均回收率为98.6％,日内RSD≤7.8％,日间RSD≤6.0％.结论 该方法准确、灵敏度高,适用于含美利曲辛制剂的人体药动学和生物等效性研究.     

HPLC-MS-MS法测定人血浆中芬太尼浓度及其生物等效性研究

目的:建立液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS-MS)测定人血浆中芬太尼的浓度。方法:以D5-芬太尼为内标,采用正己烷处理血浆样品。色谱柱为Thermo Hypurity C18(150mm×2.1mm,5μm),流动相为甲醇∶水(含0.1%甲酸)=(85∶15,V/V),流速为0.3mL/min,柱温40℃;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),检测方式为正离子方式、多离子反应监测(MRM),用于定量分析的离子为芬太尼m/z 337.1→188.1,D5-芬太尼m/z 341.9→187.9。结果:芬太尼血药浓度在19.53～5000pg/mL范围内线性关系良好,定量下限为19.53pg/mL,日内和日间变异均小于5.16%,提取回收率均在90%以上;应用此方法研究了24名健康男性受试者使用两种芬太尼透皮贴剂的药代动力学特点,受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(94.0±19.5)%。结论:本法具有快速、简便、灵敏、准确等特点,适合人血浆中芬太尼浓度测定。两种制剂生物等效。     

HPLC-MS测定人血浆中罗红霉素的浓度

目的:建立人血浆中罗红霉素的高压液相/质谱(HPLC-MS)测定方法。方法:采用Diamon- sil-C 18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇(10mmol/L)醋酸铵缓冲液(pH=3.5)80:20,流速为1.0ml/min。用含内标(克拉霉素)的乙腈液沉淀蛋白,离心后取上清液进样,以质谱为检测手段,按内标法定量。结果:本法在0.05～10.0μg/mL范围内线性关系良好,批内RSD<1.96%,批间RSD<2.50%,批内RE<4.96%,批间RE<5.54%。结论:该方法灵敏度高,精密度和准确度好,适用于罗红霉素血药浓度的测定。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中阿德福韦及阿德福韦酯胶囊的相对生物利用度研究

目的建立人血浆中阿德福韦的HPLC-MS/MS测定法,研究阿德福韦酯胶囊与普通片剂在中国健康男性志愿者的相对生物利用度,评价两者的生物等效性。方法以阿昔洛韦为内标,血浆样品经甲醇蛋白沉淀,HederaODS-2 C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离后,以HPLC-MS/MS法检测。18名健康男性志愿者采用双周期随机交叉试验设计,分别单剂量口服阿德福韦酯胶囊与普通片剂10 mg后于不同时间点取血,以建立的方法测定血浆中阿德福韦的浓度,计算药动学参数,评价两制剂的生物等效性。结果阿德福韦与内标分离良好,内源性杂质不干扰测定,在0.5~100 ng.mL-1(r=0.998 6)阿德福韦浓度与峰面积比的线性关系良好,定量下限为0.5 ng.mL-1,萃取回收率为71.2%~72.8%(n=5),日内精密度RSD为4.3%~7.7%(n=5),日间精密度RSD为2.9%~8.0%(n=15)。单次口服10 mg阿德福韦酯胶囊和普通片剂后的AUC0~t分别为(416.0±106.8)和(410.8±105.9)ng.h.mL-1;AUC0~∞分别为(425.5±107.1)和(422.1±106.5)ng.h.mL-1;Cmax分别为(35.23±9.6)和(34.31±8.6)ng.mL-1;tmax分别为(1.7±0.5)和(1.6±0.8)h;t1/2分别为(8.1±1.2)和(8.5±1.3)h。与普通片剂相比,阿德福韦酯胶囊的相对生物利用度为(103.7±24.5)%。结论该方法准确度高,灵敏度好,可用于阿德福韦酯胶囊体内过程的研究。两制剂的体内过程无显著性差别,为生物等效性制剂。     

国产与进口罗红霉素片的人体生物等效性研究

目的:研究国产与进口罗红霉素片的人体生物等效性。方法:20名健康男性受试者随机交叉单剂量口服国产或进口罗红霉素片150mg后,采用色谱-质谱联用法测定血浆中的罗红霉素浓度。结果:国产及进口罗红霉素片的AUC0～72分别为(72.81±23.85)、(72.63±20.86)(mg·h)/L,AUC0～∞分别为(74.41±24.45)、(74.42±24.45)(mg·h)/L,Cmax分别为(6.46±1.51)、(6.58±1.55)mg/L,tmax分别为(1.9±0.5)、(1.8±0.5)h,t1/2分别为(13.56±1.35)、(14.18±1.50)h,国产制剂相对于进口制剂的人体生物利用度为(99.8±11.2)%。结论:国产与进口罗红霉素片具有生物等效性。     

HPLC-MS法测定人血浆中盐酸洛美利嗪浓度

目的建立人血浆中盐酸洛美利嗪浓度HPLC-MS测定方法。方法LC-ESI-MS选择性离子监测方法测定人血浆中盐酸洛美利嗪浓度。色谱柱为LichrospherC18柱,流动相为0.01mol/L醋酸铵缓冲液(乙酸调pH3.5)甲醇=2278,流速为1.0mL/min。结果盐酸洛美利嗪在0.10~10.02ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9993),最低检测浓度为0.10ng/mL。高、中、低三种浓度的批内和批间变异均小于8.59%;绝对回收率在85.58%~92.03%;相对回收率在100.2%~105.9%。20名男性健康志愿者单剂量随机交叉口服盐酸洛美利嗪胶囊(10mg)和参比制剂盐酸洛美利嗪片(10mg),经HPLC-MS法测定盐酸洛美利嗪的血药浓度,受试制剂的相对生物利用度为103.4%±15.6%。结论本法具有快速、简便、灵敏、准确等特点,适合人血浆中盐酸洛美利嗪浓度测定。     

罗红霉素胶囊的人体生物等效性

目的:评价2种罗红霉素胶囊的生物等效性。方法:20名健康受试者单剂量随机交叉口服2种罗红霉素胶囊150 mg,采用HPLC-MS法测定血药浓度。结果:2种罗红霉素制剂的T1／2分别为(13.18±2.01),(13.31±2.45)h,tmax分别为(1.8±1.2),(2.2±1.1)h;cmax分别为(6.14±1.76),(6.47±2.42)nag·L-1,AUC0→72h分别为(71.81±28.40),(73.12±31.77)mg·h·L-1,受试制剂的相对生物利用度为(100.6±11.4)％。结论:2种制剂具有生物等效性。     

HPLC-MS/MS法测定伏立康唑的血药浓度及其在生物等效性研究中的应用

目的建立测定人血浆中伏立康唑的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）,研究2种伏立康唑片的相对生物利用度。方法血浆样品经酸化后用甲醇沉淀蛋白,经Waters Atlantis C18柱分离,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸水溶液（内含20 mmol.L-1醋酸铵）（60∶40,v/v）,流速为0.2 mL.min-1;选择多反应离子检测（MRM）方式进行定量分析,用于监测的离子为质荷比m/z350.9→281.4（伏立康唑）和m/z307.9→220.3（内标氟康唑）。18名健康志愿者以随机交叉方式分别单次口服伏立康唑分散片T或伏立康唑片R 0.2 g后于不同时间点取血,样品以新建立的HPLC-MS/MS法测定,研究比较两制剂的药动学及相对生物利用度。结果伏立康唑与血浆中内源性杂质分离度好,伏立康唑浓度在27.35~3 500 ng.mL-1与峰面积比线性良好,最低定量浓度为27.35ng.mL-1。蛋白沉淀绝对回收率为86.2%~88.8%,相对回收率为97.9%~105.7%,日内精密度（RSD）〈9.8%,日间精密度（RSD）〈9.4%。单剂量口服伏立康唑分散片T和伏立康唑片R 0.2 g后2种制剂的Cmax为（717.9±325.1）、（671.8±243.3）μg.L-1;tmax为（1.1±0.5）、（1.1±0.4）h;AUC0~24为（3 729.1±1 887.7）、（3 811.2±1 836.6）μg.h.L-1;t1/2为（6.7±1.9）、（6.7±1.7）h。与R相比,T制剂相对生物利用度为（97.3±13.0）%。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于伏立康唑的体内过程研究。方差分析表明伏立康唑分散片T与伏立康唑片R中伏立康唑的主要药动学参数之间均无明显差异,双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。     

小鼠血清及组织中阿奇霉素的HPLC-MS测定

建立了HPLC-MS法测定小鼠血清及组织中阿奇霉素的含量。以罗红霉素为内标，采用C8柱，流动相为乙腈-5mmol／L甲酸铵溶液（含0．3％三乙胺）（75：25）。HPLC-ESI-MS法选择离子检测模式，选择检测的离子为m／z748．8（阿奇霉素，[M＋H]^＋）和858．7（罗红霉素，[M＋Na]^＋），碎片电压分别为150V和130V。阿奇霉素在5～3200ng／ml浓度范围内线性关系良好，提取回收率均在70％以上。     

人血浆中非那雄胺的HPLC-MS法测定

目的建立人血浆中非那雄胺的HPLC-MS测定法,以测定志愿者口服非那雄胺片剂后的血药浓度,并对供试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价。方法血样经0.1 mol·L^-1NaOH碱化后用重蒸乙酸乙酯提取,进行HPLC-MS分析,色谱柱为Hypersil ODS （5 μm,250 mm×4.6 mm）,流动相为甲醇-水 (85∶15),内标为甲地孕酮,检测离子为m/z 395（非那雄胺）、m/z 407(内标),裂解电压为120 V。20名健康志愿者交叉口服供试片和参比片,计算主要药代动力学参数及相对生物利用度,以判断生物等效性。在1～200 μg·L^-1非那雄胺与内标峰面积比值与浓度线性关系良好（R=0.998 6）, 检测限为0.05　μg·L^-1,回收率为85.9%～98.7%。以AUC_0-24计算的非那雄胺片剂的相对生物利用度为(100±13)%。结论建立的分析方法灵敏、准确、简便。统计学结果表明两种制剂生物等效。     

RP-HPLC法测定罗红霉素片中罗红霉素的含量

目的建立罗红霉素片含量测定的高效液相色谱法,并与微生物检定法、紫外分光光度法的测定结果进行比较。方法采用Agilent-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;0.067 mol·L^-1磷酸二氢铵（三乙胺调节pH6.5）-乙腈（3∶2）,加入1%的三乙胺,用磷酸调节pH7.2为流动相;流速1.0 ml·min^-1;检测波长211 nm;柱温30℃。结果罗红霉素在2.14～42.80 mg·L^-1的浓度范围内有良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为97.8%,RSD为0.78%（n=5）。结论三种含量测定方法的结果相近,均可用于罗红霉素片的含量测定。     

HPLC-MS法测定人血浆中阿奇霉素浓度及其药动学

目的　建立人血浆中阿奇霉素的HPLC MS测定法,用其测定了志愿者口服阿奇霉素片剂(5 0 0mg)后的血药浓度,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法　血浆样品经直接沉淀酸化后进行HPLC MS分析。2 0名健康志愿者交叉口服受试制剂或参比制剂5 0 0mg。计算主要药动学参数及相对生物利用度,以判断生物等效性。结果　在1 0～16 2 7 2 μg·L-1范围内阿奇霉素峰面积与内标峰面积的比值与阿奇霉素的浓度之间呈良好线性关系,最低定量限为1 0 μg·L-1。受试制剂和参比制剂的T1/ 2 分别为(38 .5±3 .8)、(39. 0±4 . 5 )h ,tmax分别为(2 . 5±1. 0 )、(2 . 6±0 . 9)h ,cmax分别为(5. 18 8±2. 39 9)、(5 13. 6±2 31. 9) μg·L-1。以AUC0 . 14 4 计算的受试片剂的相对生物利用度为(99 .7±12. 6 ) %。两制剂的药动学主要参数无显著性差异。结论　2种制剂具有生物等效性。     

罗红霉素胶囊的药动学与生物等效性

目的研究2种罗红霉素胶囊在健康志愿者体内的药动学与相对生物利用度,评价其生物等效性。方法采用双交叉、自身对照的方法,20名健康志愿者分成2组,分别单剂量口服受试胶囊和参比胶囊各300 mg,于规定时间点取血,以HPLC法测定血药浓度。结果受试胶囊和参比胶囊的ρmax分别为:(8.71±3.07)和(8.74±3.66)mg.L-1;tmax为(1.68±0.59)和(1.75±0.34)h;t12为(14.46±3.55)和(14.30±2.82)h;AUC0→t为(101.91±38.34)和(100.52±36.91)mg.h.L-1;AUC0→∞为(111.60±40.16)和(109.79±37.85)mg.h.L-1。结论方差分析及双单侧t检验表明,受试制剂与参比制剂生物等效。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中匹伐他汀钙的浓度及应用

目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中匹伐他汀钙的浓度,评价2种匹伐他汀钙片在人体内的生物等效性。方法血浆中加入内标瑞舒伐他汀后,甲基叔丁基醚萃取,选用Venusil MP-C18（150 mm×2.1 mm,5μm,Agela）色谱柱,流动相为30 mmol·L-1乙酸铵（含0.1%甲酸）-甲醇（25：75）,流速0.4 mL·min-1,进样体积为20μL,柱温为40℃。以多重离子反应监测模式进行检测：m/z421.9→m/z290.1（匹伐他汀）,m/z482.2→m/z258.2（瑞舒伐他汀）。结果匹伐他汀钙的线性范围为0.110～56.0μg·L-1,本方法灵敏、稳定、特异性高,可应用于生物等效性研究。结论该方法重复性好,可以准确测量人血浆中匹伐他汀钙的浓度,适用于临床匹伐他汀的生物等效性研究。