孕妇感染巨细胞病毒对胎儿,新生儿的影响

巨细胞病毒引起胎儿、新生儿先天性感染,近年来已引起人们的关注。本文就孕妇感染巨细胞病毒及对胎儿、新生儿的影响、实验室诊断以及防治等问题加以详细阐述。着重叙述先天性巨细胞病毒感染的早期诊断方法,以求做到优生及优育,并能降低围产儿死亡率。     

人巨细胞病毒活动性感染对绒毛细胞增殖活性的影响

人巨细胞病毒是引起胎儿宫内感染的最主要病原体 ,能导致死胎、畸形、胎儿生长受限 (ＦＧＲ)、智力发育落后等严重后果[1] 。我们曾研究发现孕早期人巨细胞病毒宫内感染可引起孕妇生殖内分泌激素的变化[2 ] 。由此推想 ,人巨细胞病毒感染也可能引起孕早期绒毛组织细胞某些功能的改变。增殖细胞核抗原 (ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ ,ＰＣＮＡ)ｍＲＮＡ表达水平是细胞增殖状态的标志。本研究通过对孕早期绒毛组织中ＰＣＮＡｍＲＮＡ表达的定量分析 ,旨在探讨人巨细胞病毒活动性感染对绒毛组织细胞增殖活…     

PP67-mRNA对孕妇及胎儿活动性人巨细胞病毒感染的诊断价值

目的 探讨PP67-mRNA检测对诊断孕妇及胎儿活动性巨细胞病毒(HCMV)感染的价值.方法 用NAS-BA法检测2005年1月至2006年12月中山大学附属第一医院60例原发性HCMV感染孕妇外周血及其胎儿脐带血PP67-mRNA.结果 60例原发性HCMV感染孕妇中,有34例(56.7%)PP67-mRNA检测阳性(活动性感染),其中,20例胎儿脐血PP67-mRNA阳性,14例脐血阴性,阳性率58.8%;PP67-mRNA检测阴性(非活动性感染)26例,1例胎儿脐血PP67-mRNA阳性,25例PP67-mRNA阴性,阳性率3.8%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).有15例(71.4%)PP67-mRNA阳性的胎儿发生围生期并发症,PP67-mRNA阴性的胎儿有20例(51.3%)有围生期并发症.结论 HCMV活动状态与宫内感染密切相关,PP67-mRNA检测有助于确诊孕妇活动性HCMV感染并用于预测胎儿感染及预后.     

人巨细胞病毒宫内感染的研究进展

人巨细胞病毒是引起胎儿宫内感染最常见的病毒 ,可影响妊娠结局 ,降低出生人口素质。近年 ,国内外对人巨细胞病毒进行了深入的研究。现就人巨细胞病毒宫内感染的发病机制、诊断及防治等做一综述。     

巨细胞病毒宫内感染与预后

巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)属疱疹病毒科,乙组疱疹亚科。病毒直径约200nm,是最大的动物病毒之一,宿主受染细胞的典型病理变化是细胞增大,细胞核及细胞浆内出现包涵体,故称之为巨细胞病毒。它是一种潜伏病毒,初次感染为原发性感染,病毒进入宿主机体后可终身潜伏,一旦妊娠或免疫功能低下时,潜伏病毒激活为复发感染,但两种感染皆可导致胎儿宫内感染。CMV是宫内感染中最主要的病原体之一,而且越来越多的证据证明,妇女在妊娠初期受CMV原发感染是引起胎儿宫内感染和发育缺损的重要原因。目前认为,CMV在致畸方面比风疹更为严重。因此,C…     

一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的关系

目的　探讨一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的关系。方法　选取既往有自然流产、死胎、胎儿畸形、胎儿生长受限等异常妊娠史并行人工流产术的早孕妇女 81例 ,应用逆转录 聚合酶链反应技术检测其胎盘绒毛组织HCMV mRNA的表达 ;酶联免疫吸附试验法测定其血清HCMV IgM ;原位杂交法检测其蜕膜巨噬细胞诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) mRNA的表达并行定量分析。结果　 (1) 81例孕妇中有 6例胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性 ,14例血清HCMV IgM阳性 ,阳性率为 17 3 % (14/ 81)。依据HCMV mRNA与HCMV IgM检测结果 ,81例孕妇分为 3组 :Ⅰ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阳性 5例 ,其宫内传播率为 3 5 7% (5 / 14) ;Ⅱ组 :HCMV mRNA阴性而HCMV IgM阳性 9例 ;Ⅲ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阴性 66例。另有 1例HCMV IgM阴性者其胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性。 (2 )Ⅰ组患者蜕膜iNOS mRNA呈强表达 ,其吸光度值为 0 412±0 0 19,明显高于Ⅱ组的 0 172± 0 0 3 3与Ⅲ组的 0 167± 0 0 3 3 ,Ⅰ组与Ⅱ组及Ⅲ组比较 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ;Ⅱ组与Ⅲ组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。 1例HCMV IgM阴性而胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性者 ,蜕膜iNOS mRNA也呈强表达 ,其吸光度值为 0 40 3。结论　一氧化氮可     

逆转录聚合酶链反应技术用于产前诊断人巨细胞病毒宫内活动性感染的临床价值

目的　探讨逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术用于产前诊断人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的临床价值。方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、RT PCR及血浆套式聚合酶链反应 (N PCR)法 ,检测 2 0 9例孕妇外周血HCMVmRNA、HCMVIgM及HCMVDNA ,其中任意 2项阳性为HCMV活动性感染 (99例 ,观察组 )、任意 2项均阴性为非活动性感染 (110例 ,对照组 )。应用RT PCR和N PCR技术 ,检测两组孕妇从宫内采集的孕早期绒毛共 78例、孕中期脐血和羊水共 131例 ,并追踪胎儿生长发育及出生后情况。结果　 (1)观察组绒毛、脐血HCMV感染率分别为 5 3 3% (16 30 )、4 7 8% (33 6 9) ;对照组分别为 8 3% (4 4 8)、9 7% (6 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。观察组绒毛、脐血HCMV活动性感染率分别为 30 0 % (9 30 )和 2 9 0 % (2 0 6 9) ;显著高于对照组的 4 2 %(2 4 8)和 4 8% (3 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。 (2 )HCMVDNA阳性胎儿中 ,HCMVmRNA阳性胎儿的流 (早 )产率为 4 1 2 % (14 34) ,显著高于HCMVmRNA阴性胎儿的 8 0 % (2 2 5 )。HCMV活动性感染胎儿中 ,有 10例因胎儿生长发育异常而行终止妊娠术。结论　应用RT PCR技术产前诊断HCMV宫内活动性感染安全可靠 ,对于活动性感     

应用套式聚合酶链反应技术检测孕妇与胎儿巨细胞病毒 …

评价套式聚合酶链反应中限制酶分析在孕妇与胎儿人巨细胞病毒感染倘 的应用价值。方法应用ＮＴ－ＰＣＲ及限制酶分析，病毒分离，电镜观察和特异性抗体测定，对各孕期孕妇３６７例的外周血，部分孕妇脐血及死胎组织进行ＨＣＭＶ检测。     

母鼠人巨细胞病毒感染致胎鼠脑、肺和肝脏的损害

目的 探讨母鼠人巨细胞病毒(HCMV)感染对胎鼠脑、肺和肝脏的损害情况.方法 将30只10周龄健康昆明鼠按雌雄比1:1配对,分为感染组(20只)和对照组(10只),均雌雄各半.感染组雌鼠妊娠前3 d腹腔内接种1×106半数组织培养感染量病毒悬液0.5 ml,对照组雌鼠分别接种等量的人胚成纤维细胞培养上清液.然后交配受孕并于孕19 d剖宫取出胎鼠.感染组共获胎鼠15只;对照组获得健康胎鼠36只,随机抽取15只纳入本研究.检测胎鼠脑、肺、肝脏组织HC-MV DNA和病理改变并进行病毒分离.两组间计数资料比较用χ2检验.结果 感染组胎鼠病毒分离阳性率分别为:脑73.3%(11/15)、肝脏53.3%(8/15)、肺脏60.0%(9/15);对照组3种组织病毒分离阳性率均为0(P<0.05).感染组胎鼠HCMV DNA阳性率分别为:脑93.3%(14/15)、肝脏93.3%(14/15)、肺脏86.7%(13/15);对照组HCMV DNA阳性率均为0(P<0.05).病理检测结果显示感染组胎鼠的脑、肺、肝脏组织结构损伤严重,可见病毒颗粒.结论 母鼠HCMV感染可以发生垂直传播,导致子鼠脑、肺、肝脏等易感器官损伤.     

Diagnosis of human cytomegalovirus intrauterine infection using fetal cells from maternal blood.

OBJECTIVE: The sensitivity and specificity for the noninvasive prenatal diagnosis of human cytomegalovirus intrauterine infection were estimated by using isolating single fetal cells from maternal peripheral blood. METHODS: Micromanipulation techniques were employed to isolate single fetal nucleated erythroblasts from 273 maternal blood samples. SRY gene and HCMV-DNA in single fetal cells were detected by multiple primed in situ labeling (PRINS) from 76 HCMV-DNA positive samples of maternal peripheral blood. 273 samples of maternal peripheral blood were tested for SRY gene and HCMV-DNA in single fetal cells by primed extension preamplification (PEP) and polymerase chain reaction (PCR). RESULTS: The detection rate of fetal cells from maternal blood was 100% with micromanipulation techniques. The sensitivity of PRINS for SRY gene detection was 97.56% and its specificity was 100%. The sensitivity and specificity of PEP and PCR for SRY gene detection were 97.39% and 99.17%, respectively. The sensitivity of PRINS for HCMV-DNA detection was 92.68% and the specificity was 100%. The sensitivity and specificity of PEP and PCR for HCMV-DNA detection were 95.12%and 100%, respectively. CONCLUSION: The technique for noninvasive prenatal detection of intrauterine infection of HCMV using single fetal cells from maternal peripheral blood by using PRINS and PEP and PCR is more reliable than the CMV-DNA detection in peripheral maternal blood, amniocentesis or percutaneous umbilical blood sampling.     

活动性巨细胞病毒感染孕妇免疫功能及免疫治疗的研究

目的：研究活动性巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染孕妇红细胞免疫功能和ＮＫ细胞活性,观察特异性转移因子（ＳＴＦ）和非特异性转移因子（ＮＳＴＦ）的治疗效果。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＣＭＶ 特异性ＩｇＭ 和ＩｇＡ,用免疫粘附试验检测红细胞免疫粘附（ＲＣＩＡ）功能及调节因子,用ＭＴＴ比色法测定ＮＫ细胞活性,分别给予３８ 例ＨＣＭＶ 感染孕妇ＳＴＦ和ＮＳＴＦ治疗。结果：ＨＣＭＶ 感染组的ＲＣＩＡ 是１６．６３％ ±２．９６％ ,明显低于非感染组的１８．６９％ ±３．２８％ 和未孕组的２０．６８％ ±２．９５％ ;感染组的ＮＫ细胞活性为４２．７９％ ±１１．９８％ ,也显著低于非感染组的４８．７２％ ±１１．３２％ 和未孕组的５５．４６％ ±１２．４７％ ;感染组的红细胞免疫粘附抑制率（ＲＦＩＲ）为２１．１０％ ±４．４６％ ,明显高于非感染组的１８．７３％ ±４．６７％ 和未孕组的１６．７３％ ±３．８３％ ;不同孕期感染孕妇的各项免疫指标差异无显著性;免疫治疗观察,ＳＴＦ的转阴率为６３．２％ ,明显高于ＮＳＴＦ的２６．３％ ,两种转移因子均能使ＮＫ细胞活性增高。结论：ＨＣＭＶ感染孕妇的免疫功能降低,转移因子治疗可以提高ＮＫ细?     

豚鼠胎仔肾脏巨细胞病毒感染的实验研究

目的　探讨豚鼠胎仔肾脏巨细胞病毒感染与妊娠结局的关系。方法　随机选择孕早期豚鼠 2 0只 ,腹腔接种巨细胞病毒 ,观察其妊娠结局 ,分娩后 2 4h内处死新生豚鼠。用地高辛标记的巨细胞病毒晚期mRNA三相探针进行原位杂交 ,检测豚鼠胎仔肾脏内巨细胞病毒负荷量及分布情况。结果　 2 0只母豚鼠共妊娠 6 3只胎仔 ,其中足月活产并存活到 2 4h以上的胎仔 4 2只 ,流产等异常胎仔 2 1只。原位杂交检测正常胎仔巨细胞病毒感染率 7 1% (3/ 4 2 )、平均吸光度 (A)为 0 10 5±0 0 5 2 ,异常胎仔巨细胞病毒感染率 2 8 6 % (6 / 2 1)、平均A为 0 15 8± 0 0 4 7,两者平均A比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。杂交阳性信号主要分布在肾小管和集合管上皮细胞。结论　巨细胞病毒晚期mRNA主要在肾小管和集合管上皮细胞中表达 ,其表达水平与异常妊娠结局相关。     

母血中单个胎儿有核红细胞基因分析诊断巨细胞病毒宫内感染

目的:探讨利用母血中单个胎儿有核红细胞的基因分析产前诊断巨细胞病毒(HCMV)宫内感染的科学性和可行性。方法:从273例母体血标本中分离出单个胎儿有核红细胞,用引物延伸预扩增方法对其基因组预扩增,再用PCR方法检测HCMV-DNA。结果:41例证实为HCMV-DNA阳性标本中该产前诊断方法检测出39例,该方法对232例HCMV-DNA阴性标本诊断均为阴性。该方法的敏感性为95.12％,特异性为100％,符合率为99.27％。结论:该无创性产前诊断方法具有较好的科学性和可行性,是适合临床应用的较好方法。     

乙型肝炎病毒宫内感染机理的研究

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)宫内感染的可能机理。方法　应用PCR技术检测 5 9例乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)阳性孕妇的羊水、阴道分泌物及其新生儿脐血清中HBVDNA(研究组 ) ,10例乙型肝炎病毒标志物 (HBVM )阴性的正常孕妇及其新生儿为对照组。采用免疫组化ABC染色法检测两组孕妇胎盘组织中的HBsAg及乙型肝炎核心抗原 (HBcAg)的阳性率。 结果　 ( 1)研究组孕妇的羊水、阴道分泌物、新生儿脐血清中HBVDNA阳性率分别为 4 7 5 % ( 2 8/ 5 9)、5 2 5 % ( 31/5 9)、4 5 8% ( 2 7/ 5 9) ;对照组孕妇的羊水、阴道分泌物、新生儿脐血清中均未检出HBVDNA。 ( 2 )研究组孕妇胎盘组织中HBsAg及HBcAg的阳性率 ,呈现出由蜕膜细胞 ( 76 3%及 5 9 3% )、滋养层细胞 ( 72 9%及 5 5 9% )、绒毛间质细胞 ( 6 2 7%及 5 0 8% )至绒毛毛细血管内皮细胞 ( 5 2 5 %及 4 4 1% )依次递减的趋势 ;但其中有 4例孕妇胎盘组织中HBsAg及HBcAg的分布与上述特点相反。研究组孕妇有 32例羊膜细胞中检出HBsAg及HBcAg。对照组孕妇胎盘组织中的HBsAg及HBcAg检出率为零。结论　孕妇血中HBV主要是通过感染胎盘导致胎儿感染 ;但也可能存在胎盘以外的感染途径。     

孕期中药治疗对巨细胞病毒感染孕妇子代生长发育的影响

目的 探讨孕期中药治疗对巨细胞病毒(CMV)活动性感染孕妇子代生长发育的影响。方法 1996年1月至2002年6月,采用前瞻性随机对照研究方法,从有异常妊娠史的孕妇中筛查出CMV活动性感染孕妇240例,随机分组。观察组122例给予中药治疗,对照组118例不给予治疗,比较两组孕妇转阴率、胎盘和胎儿感染率以及子代生长发育情况。结果 观察组孕妇CMV IgM和CMV nRNA转阴率77.05％(94/122)、胎盘感染率48.98％(48/98)、宫内传播率21.74％(10/46),对照组分别为38.14％(45/118)、67.50％(54/80)和52.63％(20/38),两组差异均具有统计学意义(P均<0.01)。观察组子代出生时35例正常,11例异常;对照组20例正常,18例异常(P<0.01)。观察组6月龄婴儿智力发育指数和精神运动发育指数均高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 孕期中药治疗在改善CMV活动性感染孕妇子代生长发育方面具有一定的意义。