bFGF对体外培养的新生鼠隔区和中脑神经前体细胞的作用

本研究使用浓度为30ng/ml的bFGF,在不同的培养时间,观察其对新生大鼠隔区和中脑腹侧的神经前体细胞和神经元的影响,为克隆神经前体细胞探索最佳培养时间.实验分别在培养2天和5天时用MTT法测定细胞的OD值,并观察其形态变化.结果显示,在这2个时间点,所测的隔区和中脑的实验组OD值均明显高于对照组,而且实验组的OD值在培养第5天时也明显高于培养2天时间点,但对照组的结果则刚好相反.光镜观察到在培养5天时实验组的细胞集落数及体积不但比对照组的多和大,而且也比培养2天的多和大.本实验提示选用培养5天的集落作神经前体细胞的克隆较好.     

恶性肿瘤胸腹水中TIL生物学活性研究

从卵巢癌腹水和肺癌胸水中分离出肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），用ｒＩＬ－２诱导培养，观察其增殖活性。同时观察了ＰＪ－ＣＷ、ＰＯＧＰ、ＰＨＡ等对其杀伤活性的调节作用。结果表明，在培养５～１０天时ＴＩＬ增殖较快，其表面产生的ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、Ｔａｃ等抗原，随培养时间的延长，表达量增加，尤以ＣＤ８增加较明显，ＣＤ４／ＣＤ８比值逐降。其表面产生的ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原，在培养１５天内有增加表现，以后下降。其杀伤活性在培养５～１０天较高，其后活性下降。在培养系统中加入ＰＪ－ＣＷ、ＰＯＧＰ、ＰＨＡ等后，培养５天时，ＴＩＬ杀伤活性分别为８２．７０％，８５．５０％，８４．３５％（对照组为内保持较高的杀伤活性。     

FOS在大鼠小脑生前,生后及成年期的表达

本文用免疫组化方法观察ＦＯＳ在大鼠小脑生前，生后及成年期的表达，结果显示：胚胎１６．５天时，菱形唇神经上皮和套层出现许多染色很浓的ＦＯＳ阳性细胞胚胎１８．５天时，神经上皮层和套层的ＦＯＳ阳性细胞减少，但此时边缘层的ＦＯＳ阳性细胞对增多，胚２０．５天时，神经上皮，套层及边缘层已见不到ＦＯＳ阳性细胞，生后１４天内，小脑外颗粒细胞层细胞显示较弱的ＦＯＳ表达，着色较淡，生后１４天，内颗粒细胞层开始出现ＦＯ     

碱性成纤维细胞生长因子对胚鼠海列神经前体细胞的增殖和分化作用

为观察碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的神经前体细胞的增殖和分化作用,本实验取胚胎１８ｄ大鼠海马神经细胞,加入２５ｍｇ／ｍｌ碱性成纤维细胞生长因子置无血清培养基中进行培养。于培养第４ｄ和８ｄ,用四唑盐比色法测定细胞活性,并用免疫组化方法定性、定量分析神经前体细胞的分裂和分化为神经元及神经胶质细胞的状态。结果显示,培养第４ｄ和第８ｄ,实验组的ＯＤ值均增高,分别是对照组的１．５倍和１．８倍。免疫组化细     

NGF对新生大鼠隔神经元的神经营养作用

本实验观察了神经生长因子（ＮＧＦ，２．５ｓ）对无血清培养新生大鼠隔神经元生长发育的作用。结果证明，ＮＧＦ能促进新生大鼠隔神经元的存活，增加神经元胞体面积和直径，增加隔培养神经元中ＡＣｈＥ阳性神经元的数目。流式细胞分析显示，ＮＧＦ使神经元平均蛋白含量增加。以上结果表明：ＮＧＦ对新生大鼠隔神经元的生长发育具有促进作用。Ｐ＜０．０１３．ＮＧＦ增加隔培养神经元胞体面积、最长径和最短径图像分析结果可见：在前７ｄ，在神经元胞体面积、最长径和最短径等方面两组之间无明显差别，但在培养１４、２１和３０ｄ时，ＮＧＦ组培养神经元的平均胞体面积、最长径和最短径均大于对照组，经统计学处理有显著意义（表２）。表２对隔培养神经元胞体面积、最长径和最短径的影响（ｘ±ｓ）注：Ｎ＝３０与同时期对照组相比＊Ｐ＜０．０５Ｐ＜０．０１４．ＮＧＦ促进新生大鼠隔细胞的总量白合成用ＦＡＣＳ４４０流式细胞仪测定隔细胞的平均蛋白含量，结果表明：在培养３、７、１４和２１ｄ时，ＮＧＦ组培养细胞的平均蛋白含量均显著高于对照组（表３，Ｆｉｇ．１）。表３ＮＧＦ对隔神经元蛋白合成的影响（ｘ±ｓ）往：Ｎ＝５与同时期对照组相比　＊Ｐ＜０．０５５．ＮＧＦ提高隔神经元的ＡＣｈＥ?     

成纤维细胞转录BDNF基因后的条件培养液在体外培养中对神经突起生长 …

将带有ＢＤＮＦ基因的成纤维细胞（ＮＩＨ／３Ｔ３）冻存－７０℃，６个月后将虎工程细胞复苏，放在３７℃、５％ＣＯ２培养箱中培养扩增，观察形态学并同时收集其培养液，对新生ＳＤ大鼠的脊神经节、脊髓和大脑皮层中的神经元进行条件２并设对照组。脊神经节植块培养２天后显示ＢＤＮＦ转基因成纤维细胞的条件培养液对促进神经元突起的生长具有良好的活性在脑皮层中神经元分别进行分散原代培养，１５天后，其突起长度作图像分析并分     

恶性肿瘤胸腺水中TIL生物学活性研究

从卵巢癌腹水和肺癌胸水中分离出肿瘤浸润淋巴细胞，用ｒＩＬ－２诱导培养，观察其增殖活性。同时观察了ＰＪ－ＣＷ，ＰＯＧＰ，ＰＨＡ等对其杀伤活性的调节作用。结果表明，在培养５－１０天时ＴＩＬ增殖较快，其表面产生的ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８，Ｔａｃ等抗原，随培养时间的处长，表达量增加，尤以ＣＤ８增加较明显，ＣＤ４／ＣＤ８比值逐降。     

植块联合培养法探讨备用背根猫脊髓背核组织对鸡胚背根节神经突出…

５只单侧备用背根猫，于术后第５ｄ分别切取手术侧、非手术侧脊髓Ｌ３节段背核组织植块，与Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ ３５期鸡胚背根节（ＤＲＧ）进行植块联合悬滴培养，以单独ＤＲＧ培养作为参照，于培养２４ｈ，４８ｈ观察ＤＲＧ神经突出的生长情况并测量其长度。结果发现：１．所有ＤＲＧ从培养２４ｈ到４８ｈ其神经突出起都有明显增长，２：同一观察时间内，参照组与对照组（ＤＲＧ与非手术侧背核植块联合培养组）神经突起的生长状况     

α-2b干扰素治疗不同基因型丙肝疗效与免疫指标的关系

根据Ｏｋａｍｏｔｏ基因分型法对２８例丙肝患者的病毒基因进行了分型，１８例为ＨＣＶ－Ⅱ型，１０例为ＨＣＶ－Ⅲ型。重点研究了α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅲ型患者免疫功能的不同改变：在α－２ｂＩＦＮ治疗前，ＨＣＶ－Ⅱ型患者和ＨＣＶ－Ⅲ型患者之间ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＣＤ４百分比、ＣＤ８百分比及ＣＤ４／ＣＤ８比值６项指标无明显差别。α－２ｂＩＦＮ治疗８ｗ时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４／ＣＤ８比值明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者ＣＤ４／ＣＤ８比值。α－２ｂＩＦＮ治疗１个疗程（１２ｗ）时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者。α－２ｂＩＦＮ治疗１个疗程后第４周（１６ｗ）时，ＨＣＶ－Ⅲ型患者ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值仍明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者，但在整个治疗过程中，ＨＣＶ－Ⅲ型和Ⅱ型患者ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ和ＣＤ８百分比４项指标改变无显著差异。α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅲ型患者，其ＣＤ４百分比，ＣＤ４／ＣＤ８比值改变明显高于ＨＣＶ－Ⅱ型患者。这可能是α－２ｂＩＦＮ治疗ＨＣＶ－Ⅲ型患者疗效明显好于ＨＣＶ－Ⅱ型患者重要原因之一。     

植块联合培养法探讨备用背根猫脊髓背核组织对鸡胚背根节神经突起生长的影响

５只单侧备用背根猫，于术后第５ｄ分别切取手术侧、非手术侧脊髓Ｌ_３节段背核组织植块，与Ｈａｍｂｕｒｇｅｒ３５期鸡胚背根节（ＤＲＧ）进行植块联合悬滴培养，以单独ＤＲＧ培养作为参照。于培养２４ｈ、４８ｈ观察ＤＲＧ神经突起的生长情况并测量其长度。结果发现：１．所有ＤＲＧ从培养２４ｈ到４８ｈ其神经突起都有明显增长；２：同一观察时间内，参照组与对照组（ＤＲＧ与非手术侧背核植块联合培养组）神经突起的生长状况较为相似，神经突起少而短，从ＤＲＧ迁移出的细胞多。而实验组（ＤＲＧ与手术侧背核植块联合培养组）神经突起多且长，从ＤＲＧ迁移出的细胞少；３：在分别求出每批培养物的实验组、对照组ＤＲＧ神经突起平均长度与参照组者的比值及５批培养物的平均比值后，发现两个观测时间实验组的平均比值都明显大于对照组者。本研究结果提示，猫脊髓在部分腰骶背根切除后，背核组织的促神经突起生长作用增强。     

肺动脉高压大鼠外周血管多巴胺—1型受体反应性的变化

目的：观察用野百合碱诱发大鼠肺动脉高压（ＰＡＨ）形成过程中，各部位离体血管环对多巴胺－１（ｄｏｐａｍｉｎｅ－１，ＤＡ－１）受体激动剂ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ（ＦＯＤＡ）的舒张反应性变化。结果：在ＰＡＨ形成过程中，实验组大鼠各动脉对ＦＯＤＡ反应性均有不同程度的降低，但以肺动脉最为明显。第１周末肺动脉Ｅｍａｘ（％）为６０５±４１，低于对照组的９４６±９４；ＥＤ５０（μｍｏｌ／Ｌ）为８９０±７１，高于对照组的４０２±５１，Ｐ均＜００１；第４周末Ｅｍａｘ降至３２６±４２，ＥＤ５０升至１１５±２０，接近于对照组去内皮水平。肠系膜、肾动脉第１周末尚无改变，两周后随全身血气的恶化，对ＦＯＤＡ反应性亦开始下降，但程度明显低于肺动脉。结论：肺血管内皮ＤＡ－１受体介导的舒张效应降低可能是引起ＰＡＨ形成的因素之一     

新生大鼠不同脑区内神经前体细胞生物学特性比较

为了观察海马、中脑和顶叶皮质内神经前体细胞的体外生长特性及其分化后所产生的神经元的形态特征,本研究使用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)体外扩增细胞技术和克隆形成实验分析了神经前体细胞的自我更新特性;采用神经前体细胞和骨髓基质细胞共培养方式,通过免疫细胞化学染色方法,研究了神经前体细胞的分化特点。结果发现:(1)新生大鼠海马、中脑和顶叶皮质内的神经前体细胞,在体外的分裂增殖能力无明显区别;(2)新生大鼠海马、中脑和顶叶皮质内的神经前体细胞在相同的条件下,其后代细胞中,神经元和胶质细胞所占的比例基本相同,但不同脑区内神经前体细胞所产生的神经元的形态却表现出明显不同。这些结果提示新生大鼠不同脑区内神经前体细胞的分化潜能已有了一定限制。     

缺氧大鼠肺组织氧化／抗氧化平衡的变化及其与TXA_2／PGI_2平衡的关系

检测缺氧大鼠肺组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）含量以及血浆ＴＸＡ＿２和ＰＧＩ＿２浓度，以探讨氧自由基（ＯＦＲ）及ＴＸＡ＿－ＰＧＩ＿２在缺氧性肺动脉高压中的作用。结果表明：与对照组比较缺氧大鼠肺组织ＭＤＡ明显升高、ＳＯＤ、ＣＡＴ明显降低，ＶｉｔＥ可逆转ＭＤＡ和ＳＯＤ的变化；缺氧大鼠血浆ＴＸＢ＿２高于对照组，其浓度与肺组织ＭＤＡ含量呈正相关（ｒ＝０．６５．Ｐ＜０．０５）。以上结果提示，ＯＦＲ与ＴＸＡ＿２／ＰＲＩ＿２平衡失调相互作用，可能共同参与缺氧性肺动脉高压的发生。     

缬草提取物抗心肌缺血再灌注损伤的实验研究

了解缬草提取物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：大耳白种家兔２０只,分为实验组和对照组。结扎冠状动脉左室支１ｈ后松解,观察１．５ ｈ。实验组手术前１ｈ,结扎前１０ｍｉｎ给予缬草提取物１００ｍｇ／ｋｇ（体重）腹腔注射。观察体表标测心电图、心肌ＳＯＤ：ＭＤＡ、ＴＸＢ_２、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_１α、ＴＮＦ－α、ＩＬ－β等指标。结果：心电图：结扎后１ｈ,实验组Ｎ－ＳＴ、ΣＳＴ、Ｎ．Ｒ明显低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０５）;松解复灌后１．５ｈ,实验组Ｎ－ＳＴ、ΣＳＴ明显低于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）。心肌匀浆：实验组ＸＯＤ、ＭＤＡ、ＴＮＦ－α均低于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）;实验组６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_(１α)／ＴＸＢ_２高于对照组（Ｐ＜０．０５）。实验组ＩＬ－１β略低于对照组,但统计学上无显著差异。结论：缬草提取物有抗心肌缺血再灌注损伤的作用。     

反义核酸抑制血栓素合酶的基因表达

目的与方法：针对大鼠血栓素合酶基因设计并合成的三条反义寡脱氧核苷酸片段（ＯＤＮⅠ，ＯＤＮⅡ，ＯＤＮⅢ）与体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞温育２４ｈ，筛选能有效抑制血栓素合酶及ＴＸＡ２生成的片段。结果：ＯＤＮⅠ组培养基中血栓素Ａ２含量在三个浓度点（４，８，１２μｍｏｌ／Ｌ）（１０４６，９１５，８１５ｐｇ／μｇｃｅｌｐｒｏｔｅｉｎ）均较对照组（１２７０，１２８４，１２１２ｐｇ／μｇｃｅｌｐｒｏｔｅｉｎ低（Ｐ＜０．０１）。ＯＤＮⅡ，ＯＤＮⅢ组培养基中ＴＸＡ２含量与对照组相比无显著差异。细胞ＲＮＡ斑点杂交结果显示：ＯＤＮⅠ组斑点积分光密度较对照组明显降低，而ＯＤＮⅡ，ＯＤＮⅢ组斑点积分光密度与对照组相比无明显差异。结论：ＯＤＮⅠ可抑制血栓素合酶基因表达     

胚胎干细胞移植对转化生长因子β1和髓鞘碱性蛋白影响

背景:多项研究证实胚胎干细胞诱导的神经前体细胞能够促进脊髓损伤大鼠功能的恢复。目的:观察胚胎干细胞经体外诱导培养的神经前体细胞在脊髓损伤大鼠中的作用。方法:144只大鼠随机分为3组,实验组和对照组建立大鼠脊髓全横断模型,实验组造模后在椎管内损伤区上下两端注射胚胎干细胞衍生细胞;对照组于相同部位注射PBS;假手术组仅行椎板切除,不损伤脊髓,不做其他处理。结果与结论:对照组和实验组大鼠造模后21 d后,对照组脊髓损伤区域转化生长因子β1表达显著高于实验组(P0.05)。各时间点实验组大鼠脊髓中髓鞘碱性蛋白表达量显著高于对照组(P0.05)。细胞移植后各时间点实验组BBB评分明显优于对照组(P0.05)。提示胚胎干细胞培养诱导分化为神经前体细胞移植后期可降低转化生长因子β1的表达,并可以提高髓鞘碱性蛋白的表达变化,有助于大鼠全横断脊髓损伤的恢复。     

兔盲肠结扎穿孔早期一氧化氮抗肺动脉压增高和抗氧化作用

目的和方法：采用家兔盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）模型观察了ＣＬＰ前后以及一氧化氮（ＮＯ）合成抑制剂左旋硝基精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）对平均动脉血压（ＭＡＰ），肺动脉压（ＰＡＰ），入、出肺血ＮＯ、丙二醛（ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的改变。结果：兔ＣＬＰ后１～５ｈＭＡＰ明显下降，而在２、２５ｈ出现ＰＡＰ明显升高。ＣＬＰ前出肺血ＮＯ含量显著低于入肺血，ＣＬＰ后２５ｈ入肺血ＮＯ含量低于ＣＬＰ前，而出肺血ＮＯ含量与ＣＬＰ前相比无明显差异，且入、出肺血ＮＯ含量无明显差异。ＣＬＰ后２５ｈ入肺血ＭＤＡ含量比ＣＬＰ前有明显增加，出肺血无显著改变；而出肺血ＳＯＤ活性比ＣＬＰ前有明显增高，入肺血无显著改变。注入Ｌ－ＮＮＡ后入、出肺血ＮＯ含量明显降低，各时点ＰＡＰ都明显增高，５ｈ生存率降低，同时入、出肺血ＭＤＡ含量明显升高，ＳＯＤ活性明显下降。结论：肺内ＮＯ含量改变可能与氧自由基有关，在兔ＣＬＰ后早期阶段ＮＯ具抗肺动脉高压和抗氧化的作用     

SOD活性与肺癌细胞染色体异常及DNA合成关系的研究

用ＳＯＤ及其活性抑制剂分别提高和降低体外培养的Ａ５４９肺癌细胞内的ＳＯＤ活性，以达到改变细胞内自由基浓度的目的，动态地观察了ＳＯＤ活性与肺癌细胞的染色体核型、畸变率、Ｓ期细胞比率和细胞增殖指数变化之间的关系。结果，受ＳＯＤ处理的细胞其Ｓ期细胞比率由第１天的６３．４下降到第５天的３８．０，增殖指数由第１天的０．６６下降到第５天的０．４４；培养后第１６天的细胞染色体畸变率明显减少，染色体的干系范围由对照组的５６～６０条下降到４０～５５条。而受ＳＯＤ活性抑制剂处理的细胞的染色体畸变率明显增高，并表现出一定的毒性变化。结果提示，在细胞生物学水平上，提高细胞内ＳＯＤ活性可以部分地促进人肺癌细胞的某些遗传表型向正常方面转化，而降低ＳＯＤ活性则可增加细胞毒性损害作用。     

溶血与非溶血时血浆及红细胞过氧化氢诱发化学发光值比较

本实验观察了血细胞对血浆过氧化氢诱发化学发光值（Ｈ２Ｏ２－ＩＣＬ）的影响。结果表明，正常兔血浆Ｈ２Ｏ２－ＩＣＬ值明显高于全血和红细胞悬液，发生溶血后上述三组份的发光值均显著增加，其中全血和血浆的发光值分别增加１５．５和６．１倍。油酸肺损伤兔所有组份的发光值均显著高于对照兔，同时其血浆Ｈ２Ｏ２－ＩＣＬ发光值的衰变系数明显低于对照兔。以上结果提示：红细胞及其碎片显著影响血浆Ｈ２Ｏ２－ＩＣＬ值，溶血促使     

c—myb对大鼠黄体细胞孕酮和雌二醇生成的影响

本文观察了反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ对黄体细胞ｈＣＧ诱导的Ｐ和Ｅ２产生的影响,并探讨了与二丁酰ｃＡＭＰ和ｖｅｒａｐａｍｉｌ的关系。结果发现, ｃ－ｍｙｂＯＤＮ能呈剂量相关方式抑制黄体细胞ｈＣＧ诱导的Ｐ和Ｅ２的产生。同时使ｃ－ｍｙｂ蛋白染色了性的黄体细胞百分数下降,而无义ｔａｔＯＤＮ上应的作用。当１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ二丁酰ｃＡＭＰ与反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ共同作用时能明显逆转反义ｃ－ｍｙｂＯＤＮ对Ｐ、Ｅ２产生