粘附分子表达和巨噬细胞浸润在缺血皮质和基底节区分布的比较

目的:比较大脑基底节区和皮质区对大脑局部缺血/再灌流损伤反应的敏感性。方法:运用免疫组化和酶组化方法对36只SD大鼠局部脑缺血区血管内皮细胞粘附分子VCAM-1的表达和单核/巨噬细胞的浸润概况进行了比较研究。结果:大脑皮质缺血区血管内皮细胞VCAM-1的表达发生于脑缺血1h,表达高峰发生于脑缺血1h/再灌流16h;而在缺血侧基底节区,其表达高峰则发生在脑缺血1h/再灌流4h。单核/巨噬细胞的浸润,在皮质缺血区发生在脑缺血1h/再灌流8h,再灌流16h达到高峰;在缺血侧基底节区,其浸润发生在脑缺血1h,浸润高峰则在脑缺血1h/再灌流8h。结论:大脑基底节区血管内皮细胞粘附分子的表达和单核/巨噬细胞的浸润均较皮质区显著。提示基底节区对脑缺血的反应比皮质区敏感。     

TNF-α调节局部脑缺血区ICAM-1 mRNA的表达

目的：为了证实ＴＮＦ－α对局部脑缺血／再灌流区ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达的影响。方法：运用原位杂交技术对６０只雄性ＳＤ大鼠进行了研究。结果：局部脑缺血／再灌流诱导脑微血管和毛细血管以及局部炎症细胞ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达,其表达发生于脑缺血１ｈ／再灌流２ｈ,再灌流８ｈ达到高峰。ＴＮＦ－α明显的加强脑缺血区ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达,其作用在脑缺血１ｈ再灌流２ｈ至８ｈ均较明显。再灌流４ｈ,ＴＮＦ－α     

大鼠脑缺血区非特异性酯酶阳性细胞的分布和定量研究

目的　探查非特异性酯酶阳性细胞的变化和与脑缺血的病理联系。　方法　用酶组织化学方法对４０只ＳＤ大鼠脑局部缺血／再灌流损伤区非特异性酯酶阳性细胞的分布和数量进行了观查。　结果　脑缺血区非特异性酯酶阳性细胞的数量增加发生于脑缺血１ｈ 再灌流２ｈ,随后逐渐增加,在脑缺血１ｈ 再灌流１６ｈ 达到高峰。阳性细胞的增加显示明显的时间依赖关系。阳性细胞主要位于小血管和微血管的壁内及其周围。在缺血侧基底节区非特异性酯酶阳性细胞比皮质缺血区多。　结论　非特异性酯酶阳性细胞对脑缺血刺激反应敏感,在缺血侧基底节区,其反应更为强烈,此因素可能是基底节区易发生中风的原因之一。     

大鼠脑缺血区局部炎症反应的实验探查

目的:研究脑缺血区血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达和单核/巨噬细胞浸润与脑缺血的病理联系。方法:运用免疫组化染色方法和局部脑缺血/再灌流模型探查40只SD大鼠脑缺血区VCAM-1阳性血管和单核/巨噬细胞的数量变化及其变化发生的时程。结果:大鼠脑缺血区微血管内皮细胞VCAM-1表达发生在脑缺血1h,并在16h的再灌流期间,其表达逐渐增加,显示明显的时间依赖性变化。单核/巨噬细胞在脑缺血区的浸润发生在脑缺血1h/再灌流2h,并随再灌流时间的延长,其数量逐渐增加,在再灌流16h,其数量最多,其浸润也显示明显的时间依赖性变化。脑缺血区血管内皮细胞VCAM-1表达的时相与单核/巨噬细胞浸润的时相基本一致。结论:脑缺血诱导缺血性血管内皮细胞表达VCAM-1和诱导单核/巨噬细胞在脑缺血区浸润。此结果提示VCAM-1和单核/巨噬细胞可能参与缺血性脑损伤的病理过程。     

阿托品减轻大鼠脑缺血后再灌流损害机制的初步探讨

为探讨乙酰胆碱（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，Ａｃｈ）在神经元缺血性损害中的作用和机制，本实验观察了Ａｃｈ能Ｍ受体拮抗剂阿托品对大鼠脑缺血再灌注损害的影响，发现阿托品（２５ｍｇ／ｋｇ，ｂｗ，ｉｐ）可明显减轻大鼠前脑缺血后再灌流所致海马ＣＡ１区神经元迟发性损害，减小大鼠大脑中动脉阻塞后再灌流损害范围，而对局部皮质血流变化无影响，表明阿托品对缺血脑组织的保护作用不是由于改善了局部脑血流，提示Ａｃｈ参与神     

大鼠局部脑缺血区VCAM-1表达和单核/巨噬细胞浸润的研究

正常生理情况下血管内皮细胞不表达或者弱表达ＶＣＡＭ 1,但在炎症病灶区和免疫反应时产生的细胞因子可诱导血管内皮细胞ＶＣＡＭ 1的表达 ,从而导致单核 /巨噬细胞的浸润。研究证实 ,ＶＬＡ 4(ｖｅｒｙｌａｔｅａｐｐｅａｒｉｎｇａｎｔｉｇｅｎ 4)抗体能完全阻滞ＶＣＡＭ 1依赖性的细胞 细胞间的粘附。正常脑内存在少量ＥＤ2阳性单核/巨噬细胞。而在自发性高血压鼠和老龄鼠其数量增加。细胞因子ＩＬ 1(ｉｎｔｅｒ ｌｅｕｋｉｎ 1)和ＴＮＦ α(ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ α)对单核 /巨噬细胞的浸润起调节作用。本次实验 ,旨…     

氧化修饰极低密度脂蛋白对单核和巨噬细胞趋化蛋白1mRNA表…

近年来的研究发现，单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种极为强烈的单核细胞趋向因子。本研究着重观察了极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对单核细胞和巨噬ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的影响。在单核核和巨噬细胞的培养基中分别中入２５μｇ／ｍｌ的ＶＬＤＬ或ＯＸ－ＶＬＤＬ，培养２４ｈ提取单核细胞和巨噬细胞总ＲＮＡ用ＭＣＰ－１的寡核苷酸探针，进行Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ分析。结果显     

脑缺血海马CA1区5-HT变化的免疫组织化学研究

目的：观察脑缺血及缺血再灌流海马ＣＡ１区５－ＨＴ的变化，探讨脑缺血海马ＣＡ１区神经元损伤与５－ＨＴ变化的关系。方法：用免疫组织化学ＡＢＣ法及图像分析技术对沙土鼠脑缺血海马ＣＡ１区５－ＨＴ含量变化进行研究。结果：（１）脑缺血１０ｍｉｎ时，沙土鼠海马ＣＡ１区５－ＨＴ免疫反应阳必纤维的平均光密度值（ＯＤ）与对照组比较无显著性差异。而缺血３０ｍｉｎ时，ＯＤ值则下降，４ｈ时下降得更多，Ｐ〈０．０５。（２）脑     

大鼠脑缺血及再灌流对脑组织血流量、ATP和乳酸水平含量的影响

目的和方法：本研究采用大鼠可逆性阻塞大脑中动脉所致的局灶性脑缺血再灌流模型，观察缺血３ｈ再灌流３ｈ、缺血６ｈ再灌流３ｈ对脑组织脑局部血流量（ｒｅｇｉｏｎａｌｃｅｒｅｂｒａｌｂｌｏｏｄｆｌｏｗ，ｒＣＢＦ）、ＡＴＰ、乳酸及脑水含量的影响。结果：缺血３ｈｒＣＢＦ明显下降（Ｐ＜００１），再灌流３ｈ升至缺血前６５３％（Ｐ＜００１）。缺血３ｈ再灌流３ｈ与缺血６ｈ组比较，ＡＴＰ明显恢复（Ｐ＜００１），乳酸含量明显下降（Ｐ＜００１），脑水含量明显减少（Ｐ＜００５）。缺血６ｈ再灌流３ｈ与缺血９ｈ组比较，尽管ＡＴＰ明显恢复（Ｐ＜００１），乳酸含量下降（Ｐ＜００１），但脑水含量无显著差异（Ｐ＞０１）。结论：缺血３ｈ再灌流３ｈ保护“半暗带”的效果优于缺血６ｈ再灌流３ｈ。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤诱导IL-1β的表达

目的：研究脑缺血－再灌注损伤早期大鼠脑组织中ＩＬ－１β的表达及其与中性粒细胞浸润的关系。方法：应用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＩＬ－１βｍＲＮＡ,并用图象处理系统对正常、缺血及再灌注后不同时间的ＩＬ－１βｍＲＮＡ进行相对定量分析;采用ＭＴＴ和ＭＰＯ方法分别对大鼠脑组ＩＬ－１β的多肽活性及浸润的中性粒细胞进行检测。结果：单纯脑缺血ＩＬ－１β表达不增加;再灌注２ｈ,ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达量明     

小檗碱对大鼠全脑缺血后海马的保护作用

本研究室以往曾发现小檗碱具有预防脑缺血短期（７ｄ）再灌流海马ＣＡ１迟发性神经元坏死（ＤＮＤ）的作用。本研究采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ－Ｂｒｉｅｒｌｅｙ四血管阻塞（４ＶＯ）致大鼠全脑缺血模型，观察了小檗碱对脑缺血（２ｍｉｎ）长期再灌流后海马的影响，并对脑缺血经短、长期再灌流对照及用药组大鼠进行了Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫学习记忆能力检测。结果显示，小檗碱能有效的保护海马ＣＡ１区锥体细胞免于脑缺血后ＤＮＤ，经长期（３个月）再灌流后这种保护作用依然存在，细胞密度为１６８个／ｍｍ，占正常８０．５％；对脑缺血经长期再灌流引起的海马ＣＡ２、ＣＡ３、ＣＡ４继发性神经无死亡也有明显的对抗作用。脑缺血短期（１０ｄ）再灌流后，大鼠表现为明显的学习障碍，潜伏期延长，但经多次训练后，大鼠在原平台象限泳距比其它非平台象限都显著长，表明尚有良好的空间记忆能力；脑缺血经长期再灌流后，其空间学习障碍加重、记忆能力也受到严重影响。而用药组缺血大鼠无论短期或长期再灌流后，均保存了良好的空间学习、记忆能力。表明脑缺血经长期再灌流后，海马的形态和学习、记忆能力比短期再灌时将进一步受损害，而小檗碱不但对短期再灌流有保护作用，对长期再灌流的进一步损害也有明显的?     

脑缺血再灌流过程中沙土鼠脑组织和血浆SOD、MDA含量的变

复制沙土鼠实验性脑缺血再灌流模型,测定了在缺血及再灌流不同阶段血清及脑组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性和脂质过氧化反应最终产物（ＭＤＡ）的含量变化,结果发现单纯缺血组与再灌流各组脑组织ＭＤＡ的含量均高于正常对照组,且再灌流１ｈ、６ｈ组的ＭＤＡ含量明显高于单纯缺血组（Ｐ＜０．０５）,并有随再灌时间延长不断升高的趋势,但三个再灌流组之间比较无明显差异。单纯缺血组与再灌流各组比较脑组织ＳＯＤ的活性均较正常对照组降低,以再灌１ｈ、６ｈ最为明显,与单纯缺血组比较Ｐ＜０．０５。实验各组与正常对照组比较血浆ＳＯＤ的活性无显著差异。表明单纯缺血和再灌流后均发生了脂质过氧化反应,并认为自由基引起的损伤,在缺血后再灌流中比单纯缺血更为严重。     

全脑暂时性缺血诱导原癌基因蛋白（FOS）在大鼠海马结构表达的特征

用免疫组化方法，对大鼠暂时性全脑缺血诱导的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白（Ｆｏｓ）在海马表达的分布，强度和时间过程等特征进行了观察。结果表明：缺血４０ｍｉｎ再循环后２ｈ，首先在海马齿伏回转折部的颗粒细胞和下托诱导出Ｆｏｓ表达，５－８ｈ达到高峰，８ｈ后锐减并逐步消失。ＣＡ４和ＣＡ３区的Ｆｏｓ表达在缺血再循环后３ｈ出现，５ｈ达到高峰，持续至２４ｈ消失。而在ＣＡ２和ＣＡ１区，Ｆｏｓ表达最弱，最晚（５ｈ才出现 ）     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节，其表达变化与神经元对缺血的敏感性相关     

脑缺血再灌注后脑梗塞周围区生长相关蛋白—GAP43表达的变化及外源性神经生

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后生长相关蛋白－４３（ＧＡＰ－４３）表达的变化规律及外源性神经生长因子（ＮＧＦ）的影响。方法：成年健康雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７２只,随机分为假手术组、自然恢复组、人工脑脊液组和ＮＧＦ治疗组。采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注（ＭＣＡＯ）动物模型,应用免疫组织化学方法观察脑缺血再灌注后ＧＡＰ－４３的表达。结果：⑴脑缺血再灌注６ｈ后,缺血周围区ＧＡＰ－４３表达逐渐增高,第７天达高峰,以后逐渐降低,第２１天仍有表达。⑵应用外源性ＮＧＦ后,ＧＡＰ－４３表达较对照组有所增高,但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：提示中枢神经系统损伤后,神经元具有再生和修复的可塑性,外源性ＮＧＦ对ＧＡＰ－４３的调节有特进一步研究。     

白介素-1βmRNA在缺血侧大脑半球不同区域表达的比较

目的：比较缺血侧大脑半球尾壳核、视前区和顶叶皮质白介素－１βｍＲＮＡ表达的差异,探讨脑不同区域对缺血敏感性的病理机制。方法：运用原位杂交技术对３０只ＳＤ大鼠进行了研究。结果：缺血侧大脑半球尾壳核、视前区和顶叶皮质微血管内皮细胞和单核／巨噬细胞显示白介素－１βｍＲＮＡ的强杂交信号,尾壳核杂交信号较视前区和顶叶皮质出现早而强。顶叶皮质的白介素－１βｍＲＮＡ阳性信号的高峰也明显迟于尾壳核。结论：白介素－     

反义Gαq/11亚基ODNs对平滑肌细胞DNA合成和PC蛋白表达的影响

目的：探讨Ｇｑ蛋白介导血管活性多肽对ｖＳＭＣＤＮＡ合成及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白表达的影响。方法：用硫代修饰的Ｇαｑ／１１亚基反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ），以６μｍｏｌ／Ｌ的浓度加入含１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＴ－１刺激无血清ＤＭＥＭ培养基中体外培养ｖＳＭＣ。用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ｖＳＭＣＤＮＡ合成、免疫细胞化学技术检测ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白表达。结果：Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ可明显抑制ｖＳＭＣＤＮＡ的合成，在１２ｈ，２４ｈ时抑制率分别为８４２％和８５３％；Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ亦明显降低ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白的表达。而相同浓度的正义Ｇαｑ／１１ＯＤＮｓ只呈现少量抑制作用。结论：本实验提示Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能进一步应用于由血管活性多肽刺激引起的ｖＳＭＣ增生性疾病如经皮冠脉腔内血管成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的防治的研究     

冠心病人血浆可溶性细胞粘附分子和白细胞CD18表达的动态变化

探讨细胞粘附分子动态变化与冠心病发病的关系。方法采用酶联免疫吸附法,检测９０例冠心病人外周血白细胞ＣＤ１８表达、血浆可溶性细胞间粘分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）和可溶性血管细胞间粘附分子－１（ｓＶＣＡＭ－１）浓度的动态变化。结果冠心病人白细胞ＣＤ１８表达、ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＭＡ－１浓度均明显增高,与对照组比较有极显著差异性（ｔ＝７．６９２－１１．４５８,Ｐ〈０．００１）,ｓＩＣＡＭ－１和ｓＶＣＡＭ     

硫酸镁对大鼠脑缺血再灌流损伤的保护作用

近年来关于Ｍｇ2 +的基础及临床试验研究对其治疗价值意见不一[1] 。本实验采用大鼠局灶性脑缺血再灌流模型 ,对脑缺血 2ｈ再灌流 3ｈ大鼠给予ＭｇＳＯ4 治疗 ,通过测定ＮＯ、ＭＤＡ及脑含水量变化 ,来探讨Ｍｇ2 +剂对脑缺血再灌流损伤的保护作用。1　材料和方法1 1　动物及模型制备 :实验用ＳＤ大鼠 40只 ,体重 2 70ｇ～30 0ｇ ,雌雄不限。采用大鼠大脑中动脉尼龙单线栓塞造成局灶性脑缺血再灌流模型。1 2　分组 :将大鼠随机分成假手术组 (10只 )、模型组 (15只 )、治疗组 (15只 )。模型组为缺血 2ｈ再灌流 3ｈ ;治疗组为缺血 2ｈ再灌流开…     

MCP-1 mcAb和Losartan拮抗Ang Ⅱ介导的VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白－１单克隆抗体（ＭＣＰ－１－ｍｅＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ 拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性，为防治动脉硬化提供一定的理论依据。方法采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测 ＶＳＭＣｓ的迁移效应；以 ＭＴＴ法、~３Ｈ－ＴａＲ掺入法、~３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应。将培养ＶＳＭＣｓ分为 ５组； ２％胎牛血清（ ２％ＦＣＳ）组、 ＡｕｇⅡ组（其浓度为 １０－１０～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）、Ｌｏｓａｒｔａｎ组（其浓度为 １０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、ＭＣＰ－ｌｍｃＡｂ组（终浓度为 １０μｇ／ｍｌ）和阳性对照组（含５％的酵母多糖活化血清）。结果（１） ＡｕｇⅡ具有剂量依赖性的促进 ＶＳＭＣｓ的增殖与迁移效应；（２） ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或 Ｌｏｓａｒ－ｔａｎ能有效地拮抗ＡｕｇⅡ介导的ＶＳＭＣｓ增殖与迁移效应。结论 ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或Ｌｏｓａｒｔａｎ对动脉硬化性疾病可能具有较大的应用前景。