荔枝核多糖脱蛋白工艺考察

目的:优选荔枝核多糖的脱蛋白工艺。方法:以多糖保留率和脱蛋白率为综合评价指标,选取酶用量、酶解时间、酶解pH,酶解温度为影响因素,采用正交试验优选木瓜蛋白酶法对荔枝核多糖的脱蛋白工艺;以多糖保留率和脱蛋白率为指标,比较木瓜蛋白酶法、沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法、酶-Sevag联合法、酶-三氯乙酸联合法和三氯乙酸-Sevag联合法6种方法对荔枝核多糖的脱蛋白效果。结果:木瓜蛋白酶法脱蛋白最佳工艺条件为酶用量4%,酶解时间1 h,pH 6,酶解温度45℃,脱蛋白率70.2%,多糖保留率82.9%;酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳,在酶法处理的基础上,Sevag试剂处理2次,脱蛋白率高达91.45%,多糖保留率71.42%。结论:不同脱蛋白法对荔枝核的脱蛋白效果有明显差异,酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳,可推广于大生产使用。     

天麻多糖提取工艺优化

目的摸索天麻多糖(GPS)水提和试验预处理工艺条件。方法采用正交实验研究了温度、物料比、时间对天麻多糖提取工艺的影响;对比了两种不同的试验预处理(超声波法和微波法)在天麻多糖纯化工艺中的应用。结果各因子影响GPS提取率的重要程度依次为浸提温度、浸提时间、料水比。水提最佳工艺为物料比1∶40,浸提温度120℃,浸提时间3 h。微波处理效果明显优于超声波,8 min即可。结论该方法科学、简便,为天麻多糖提取纯化的工业化提供理论依据。     

荔枝核多糖脱蛋白工艺的研究

[摘要] 目的：优化荔枝核多糖的脱蛋白工艺。方法：采用木瓜蛋白酶法、沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法、酶-Sevag联合法、酶-三氯乙酸联合法和三氯乙酸-Sevag联合法等六种方法。对荔枝核多糖脱蛋白进行工艺研究。以多糖保留率和脱蛋白率为指标，比较六种方法的脱蛋白效果。结果：酶法条件为酶用量4%、反应时间1h、pH值为6，反应温度45℃，Sevag试剂处理3次后，蛋白去除率高达91.45%，多糖保留率为71.42%，结论：不同脱蛋白法对荔枝核的脱蛋白效果有明显差异，酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳。     

金银花多糖脱蛋白方法的研究

目的 优选金银花多糖除蛋白工艺.方法 以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,选用了3种方法:Sevag法、酶法和酶-Sevag法对金银花多糖提取物进行脱蛋白处理.结果 Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为85.72%、73.28%、84.50%,多糖损失率分别为56.57%、31.22%、29.35%.结论 酶-Sevag法是金银花多糖除蛋白有效,可行方法.     

正交实验设计优选荠菜多糖的提取工艺研究

目的 研究荠菜多糖的提取工艺条件.方法 以荠菜多糖的提取率为考察指标,以水为提取剂,采用单因素和正交实验设计考察了浸提温度、料液比、浸提时间、超声提取时间和提取次数等因素对荠菜多糖提取率的影响.结果 荠菜多糖的最适宜提取工艺条件是:热水浸提温度为70 ℃,料液比(原料粉质量g∶蒸馏水体积ml)为1∶20,热水浸提时间为3 h,然后超声提取30 min,提取3次,此时荠菜多糖的提取率为2.64%.所得粗多糖经Sevag法脱蛋白处理后,其UV扫描图中260～280 nm处的吸收峰明显减小,说明该法可以较好的脱除产品中的核酸、蛋白质.结论 该实验为荠菜多糖的提取、纯化提供了一定的理论依据.     

四君子汤复方多糖超声提取及脱蛋白工艺优化

目的 :优化四君子汤复方多糖的超声提取及脱蛋白工艺。方法 :以提取温度、提取时间、提取次数为3个因素,分别设计3个水平进行正交试验,优化四君子汤复方多糖的超声提取工艺;比较了Sevag法和Sevag-酶法纯化多糖的效果,并进行了单因素考察。结果:超声提取最佳工艺为80℃提取3次,每次提取30 min。Sevag-酶法脱蛋白效果较好,最佳工艺为胰蛋白酶添加量为1%,37℃水浴,酶解3 h,Sevag试剂处理3次。结论:确定了四君子汤复方多糖超声法提取及脱蛋白的最佳工艺条件,为其进一步的分离和活性研究打下基础。     

麻黄多糖中蛋白含量测定及脱蛋白方法的比较

目的：建立麻黄多糖中蛋白的含量测定方法,比较不同脱蛋白方法的蛋白脱除效果。方法：水提醇沉提取麻黄多糖,Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果：麻黄多糖脱蛋白前的蛋白含量为26.30%,Sevag法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白后的蛋白含量分别为15.00%,6.80%和1.70%;三种方法的蛋白脱除率分别为42.97%,74.14%和93.54%。结论：木瓜蛋白酶-Sevag法的脱蛋白效果较好,考马斯亮蓝G-250染色法操作简便,准确性好,不失为多糖中蛋白含量测定的一种好方法。     

板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究

目的 研究板蓝根水溶性多糖的提取纯化工艺条件.方法 通过正交实验,考察液料比、提取时间、提取温度、醇沉时间、醇液比对多糖得率的影响.结果 液料比是影响提取工艺的主要因素,最佳工艺条件为:液料比30:1,提取温度90℃,提取时间6 h.三氯乙酸法脱蛋白,葡聚糖凝胶柱层析纯化分离.结论 板蓝根多糖得率25.63%,多糖含量76.42%.纯化后的板蓝根多糖为分子大小均一的单一组分多糖,不含核酸和蛋白质.     

云南天然钝顶螺旋藻片多糖提取工艺的正交实验优化与脱色脱蛋白方法研究

目的 研究云南钝顶螺旋藻片中多糖的提取与纯化工艺,并筛选出云南钝顶螺旋藻多糖脱色、脱蛋白的最佳方法.方法 正交实验设计优选出提取云南钝顶螺旋藻片中多糖的方法,以提取多糖物质多糖损失率、蛋白质去除率为测定指标,分别考察不同实验方法对多糖脱蛋白、脱色的影响.结果 云南钝顶螺旋藻片多糖的最佳提取工艺为:水提温度为80℃,水提时间2 h,固液比1:15,在此条件下多糖提取率为2.18%,水提温度和固液比是影响多糖得率的主要因素.三氯乙酸脱蛋白法为云南钝顶螺旋藻片多糖脱蛋白的最佳方法,活性炭脱色法对云南钝顶螺旋藻多糖片的脱色效果优于过氧化氢脱色法.结论 云南钝顶螺旋藻片粗多糖的纯化,脱色与脱蛋白方法的优化为进一步研究云南钝顶螺旋藻片的生物活性提供了基础.     

黄芪多糖的脱蛋白工艺考察

目的:优选黄芪多糖的脱蛋白工艺,提高黄芪多糖的纯度,为该有效部位的后续药理研究奠定基础。方法:采用水提醇沉法提取黄芪多糖,以黄芪多糖的含量和蛋白质的脱除率为考察指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察酶解时间、酶底比、酶解液p H和酶解温度对黄芪多糖脱蛋白工艺的影响,利用酶-Sevage法除蛋白。结果:最佳脱蛋白工艺为酶底比2.0%,p H 5.0,50℃水浴酶解24 h;在该工艺条件下,蛋白脱除率87.80%,黄芪多糖质量分数83.47%。结论:优选的脱蛋白工艺条件稳定可行,酶-Sevage法可显著提高黄芪多糖的纯度。     

天麻提取物的纯化工艺研究

目的:研究并建立天麻提取物的纯化工艺。方法:采用大孔吸附树脂与醇溶液调pH沉淀法联用技术对天麻提取物进行纯化。结果:经过工艺优选后,天麻提取物的出膏率为2.33%,其中天麻素的含量为23.50%,天麻总苷的含量为33.52%。结论:该工艺较传统醇沉工艺大大提高提取物天麻素的含量,且工艺稳定、可靠。     

昭通天麻的原植物调查与鉴定

目的　掌握天麻的原植物特征和分布 ,指导昭通天麻药材的种植。方法　通过产地调查、标本采集和分类鉴定。结果　证实昭通天麻的原植物有乌天麻GastrodiaelstaBl.f.glauca .黄天麻GastrodiaelstaBl.f.flavida .红天麻GastrodiaelstaBl.f.elata .绿天麻GastrodiaelstaBl.f .viridis.4个变型 ,分布于全市 11个县、区。结论　可作为昭通天麻药材GAP种植过程中种植区域选择和品种选育的主要依据     

生态因子与古今天麻产区的关系

目的研究天麻分布与生态因子之间的关系。方法分析温度、湿度、海拔及植被等对天麻分布的影响。结果天麻的分布对生态因子敏感,天麻自然分布区基本位于年平均最低地面温度-4℃线与年平均地温20℃线之间,主产区多位于年平均水汽压的14~16 hPa线之间;历代天麻产区的变迁与气候变迁有密切关系。结论天麻的分布与主产区的形成是生态因子综合作用于天麻和蜜环菌的结果。     

贵州野生天麻遗传多样性的AFLP指纹分析

目的 研究野生天麻的遗传多样性,为合理利用野生天麻种质资源、为天麻的进一步系统选育研究提供一定的理论依据.方法 利用AFLP技术,采用8对M+3和P+3引物组合对23份贵州野生天麻品种进行了总基因组DNA水平上的多态性检测,用NTSYSpc-2.10s 软件的UPGMA 方法 对检测结果 进行聚类.结果 共获得552条可统计的条带,其中396条呈多态性,多态性带百分率约72%.UPGMA聚类可以将贵州不同产地的野生天麻很好地区分开来.结论 该实验揭示了贵州野生天麻种质丰富的遗传多样性,聚类分析结果 表明多数来源地相同的天麻种质表现出较为密切的亲缘关系.     

天麻对中枢神经系统影响的基础研究进展

概述了天麻对中枢神经系统的影响,探讨了其部分作用机理,为更深入地研究天麻及其在临床上的应用提供理论依据。天麻是我国民间用于治疗癫痫、中风等疾病的一种常用药。     

贵州天麻遗传多态性的ISSR初步分析

目的：构建贵州天麻ISSR指纹图谱，分析彼此间的遗传关系。方法：采用ISSR分子标记技术对贵州省境内的23个野生和栽培天麻居群的样品进行了初步研究，从24个ISSR引物中筛选出4个有效引物，在供试的23个样品中共检测到32个位点，其中29个表现出多态性，占总带数的90．63％，平均每个引物扩增的DNA带数为8条。天麻的多态位点百分率（PPB）在80％和100％之间。用NTSYSpc，vet．2．02软件进行UFGMA聚类分析。结果：23个居群的相似性系数在0．13—1．00之间，同一变型的天麻样品并不严格聚为一类，不同变型天麻样品之间的遗传变异较大。结论：地理分布和生长环境的差异以及人为的选择是导致天麻形成丰富的遗传多态性的一个重要的原因。     

RP-HPLC测定天麻中天麻素的含量

目的 建立RP-HPLC测定天麻中天麻素含量的分析方法。方法 优化药材的提取及色谱的分析方法得分离良好的色谱图,外标法定量。色谱柱:Hypersil ODS色谱柱(4.6×250 mm);流动相:甲醇-0.1％冰醋酸水溶液(5:95);检测波长:270 nm。结果 色谱图中12个峰均可用其进行准确定量,其中天麻素含量测定的线性范围为0.60~2.41μg(r=0.999 9),平均加样回收率为97.85％,RSD=1.17％(n=5)。结论 本方法简便,准确,重现性好,可用于天麻中天麻素的含量测定,同时也可用于其它水溶性成分的定量。     

The antidepressant effect of Gastrodia elata Bl. on the forced-swimming test in rats

Depression is a common psychiatric disorder with a high morbidity and mortality rate. The pharmacotherapy used in clinic today is not suitable for all patients and causes certain side-effects. Thus, looking for alternative treatments with antidepressant effect and minimal side-effect is important. Gastrodia elata Bl. is a famous Chinese traditional medicine used for centuries. The aim of this study is to test the antidepressant effect of Gastrodia elata Bl. extract (GE) using forced-swimming test (FST). Sprague-Dawley rats were assigned to control, GE, and fluoxetine groups, treated with 10 ml/kg bw (body weight) water, 1 g/kg bw of GE, and 15 mg/kg bw of fluoxetine, respectively. Those samples were administered by gavage to rats 23.5, 4.5 and 1 hour prior to the test session of FST. After FST, the animals were sacrificed and their brains were collected for monoamines analysis. The results indicated that the duration of immobility was significantly decreased in GE group compared to the control (p < 0.05). The concentration of serotonin (5-HT), 5-hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA), and the ratio of 5-HIAA/5-HT in frontal cortex, amygdala, and hippocampus were not significantly different between GE and the control groups. However, administration of GE significantly increased the dopamine (DA) concentration (p < 0.05) and decreased the concentration of 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) (p < 0.01) and DA turnover (p < 0.05) in striatum compared to the control. The results of this study show that Gastrodia elata Bl. extract modulates the turnover of DA in rats, and thus probably possesses antidepressant effect in rats.     

云南昭通不同产地天麻质控成分的含量测定

目的以天麻的质控成分天麻素(gastrodin,GAS)及对羟基苯甲醇(p-hydroxybenzyl alcohol,HBA)含量为指标对云南昭通不同产地的天麻进行考察,以确定其最佳产地。方法选取昭通境内彝良小草坝、镇雄盐源、威信水田3个产地的乌天麻,用95%乙醇进行回流提取,计算其提取率;采用HPLC分析方法测定天麻醇提取物中质控成分GAS及HBA的含量,进行天麻最佳产地的初步评价。结果彝良小草坝、镇雄盐源、威信水田的天麻醇提取物的提取率分别为:17.9、9.2、10.5%,所含质控成分的总量(GAS+HBA)分别为:0.8119、0.2478、0.2022%。结论通过分析,云南昭通境内的彝良小草坝产地的天麻醇提取物的提取率及质控成分总量均为三者中最高,可认为该地为天麻道地药材的最佳产地之一。     

天麻的现代鉴别新技术

综述了鉴别天麻真伪的现代分析方法，为中药天麻的鉴别提供了参考依据，并具有一定的指导意义。